关键词： NLRP3炎症小体   硫氧还蛋白相互作用蛋白   非酒精性脂肪性肝病   Kupffer细胞  

摘要： 第一部分：Kupffer细胞及IL-1β与患者NAFLD进展的关系目的：比较单纯性脂肪肝(NAFL)与脂肪性肝炎(NASH)患者的临床血清学指标及组织病理学结果,初步探讨Kupffer细胞(KCs)及IL-1β与NASH发生的关系。方法：根据NAFLD纳入及排除标准,收集高度怀疑或术前影像学诊断为NAFLD患者的肝脏标本,首先制作石蜡切片进行HE染色,通过NAFLD活动度评分标准将患者分为正常组、NAFL组及NASH组,其次比较各组患者血清转氨酶、甘油三酯、游离脂肪酸(FFA)及IL-1β的水平,最后通过F4/80免疫组化及天狼星红染色法,观察各组肝组织中KCs的聚集情况及胶原纤维的增生情况。结果：(1)本次共收集8例肝脏标本,经NAS评分诊断NASH3例,NAFL3例,正常肝脏2例。(2)正常组及NAFL组患者血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯、FFA水平均在正常范围内,血清IL-1β低于检测下限。NASH组患者血清ALT、AST及甘油三脂均在正常参考值范围,FFA及IL-1p水平高于正常组及NAFL组(P<0.05)。(3) NAFL及NASH肝组织F4/80表达阳性细胞(KCs)较正常肝脏组织明显增多,在肝细胞脂肪变的区域KCs聚集较多；天狼星红染色结果显示NASH组肝组织胶原纤维增生程度较NAFL及正常肝脏组无明显增加。结论：血清FFA、KCs及促炎因子IL-1β可能参与人体NAFL向NASH的发展。第二部分：抑制TXNIP与NLRP3基因的表达对Kupffer细胞中NLRP3炎症小体信号通路的影响目的：观察敲除小鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)基因与NLRP3基因对FFA激活NLRP3炎症小体及促进促炎因子IL-1p分泌的影响,探讨FFA激活NLRP3炎症小体的具体机制。方法：取野生型(WT) C57BL/6小鼠、NLRP3-/-小鼠及TXNIP-/-小鼠,采用肝脏在体PBS灌注,离体胶原酶消化、梯度离心联合选择性贴壁法分离各组小鼠KCs, F4/80免疫荧光染色及流式细胞技术鉴定KCs的纯度,吞墨实验判断KCs的吞噬功能,光镜下动态观察KCs随时间的形态变化。将分离培养48 h的KCs以2-3×106密度接种于T25细胞培养瓶及激光共聚焦培养皿中,并随机分为2组：①FFA组(FFA Group):给予浓度为0.3 mM的棕榈酸(Palmitic acid, PA)刺激；②对照组(CONGroup):不给予任何刺激。于处理后8h收获细胞。光镜及透射电镜观察KCs的形态变化,荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测TXNE、NLRP3、ASC及Caspase-1 mRNA表达变化,Western blotting检测TXND、 NLRP3、ASC及Caspase-1蛋白表达水平,激光共聚焦检测TXNIP、 NLRP3及Caspase-1的表达情况,ELISA法测定KCs培养上清液中IL-1β水平。结果：(1)免疫荧光染色可见KCs细胞膜高表达F4/80分子,提取的KCs纯度大于90%,吞墨实验可见KCs吞噬大量碳素颗粒。(2)FFA组与CON组KCs光镜下形态无明显差异,透射电镜下可见FFA组KCs吞噬大量脂滴。(3)WT小鼠FFA组与CON组***及Caspase-1的mRNA表达量无显著性差异(P>0.05),FFA组NLRP3的mRNA表达水平略高于CON组(P<0.05),NLRP3-/-小鼠FFA组TXNIP、ASC及Caspase-1的mRNA表达量高于CON组(P<0.05),TXNTP-/-小鼠FFA组NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA表达量较CON组显著增高(P<0.01)。(4)WT小鼠FFA组TXNIP、NLRP3、ASC及Caspase-1的蛋白表达量较CON组明显增高(P<0.05),NLRP3-/-小鼠FFA组TXNIP、ASC及Caspase-1的蛋白表达量与CON组相比无显著性差异(P>0.05),TXNIP-/-小鼠FFA组NLRP3、ASC及Caspase-1的蛋白表达量较CON组显著增高(P<0.05)。(5)激光共聚焦结果示WT小鼠FFA组KCs中TXNIP、NLRP3及Caspase-1的荧光强度较CON组明显增高,TXNIP-/-.小鼠FFA组NLRP3及Caspase-1的荧光强度较CON组亦明显升高,NLRP3-/-小鼠FFA组TXNIP及Caspase-1的荧光强度较CON组仅轻度升高。(6)WT及TXNIP-/-小鼠FFA组细胞培养上清液中IL-1β的水平较CON组明显增高(P<0.05),NLRP3-/-小鼠FFA组IL-1β的水平较CON组仅轻度增高,两组比较无明显差异(P>0.05)。结论:FFA可激活WT及TX

关键词： 高效抗逆转录病毒治疗   免疫重建炎症反应综合征   细胞因子   活化T细胞核转录因子  

摘要： 目的：研究艾滋病患者接受高效抗反转录病毒治疗后发生免疫重建炎症反应综合征(IRIS)的患者在抗病毒启动前后细胞因子的变化规律,初步探索重要细胞因子在IRIS发生中的作用；进一步发掘NFAT的重要下游靶基因产物对IRIS发生发展的影响,为临床HAART过程中常见的IRIS的诊治提供依据。 方法：(1)通过对IRIS患者外周血单核细胞全基因芯片表达谱的研究,筛选出IRIS患者主要的差异表达基因,初步确定IRIS患者免疫变化的主要免疫细胞类型和主要信号通路；(2)通过动态检测IRIS患者外周血重要细胞因子和免疫分子IL4、IL6、 IFNy、 IL10、 IL18、 IL12p40、 MCP-1、 IL8、 IL17A在抗病毒治疗前和治疗过程中的变化,总结和发现IRIS发生发展中的特异性免疫分子的变化规律；(3)用荧光定量RT-PCR法对IRIS患者外周血CD3+T细胞中NFATl、 NFAT2、 NFAT4及其重要靶基因IL6、 IL8、 TNFa、 ILlβ、 IL1O、 IL2、 IL18的表达进行研究,初步探索NFAT及其靶基因在IRIS中的表达变化。 结果：研究的艾滋病患者HAART中发生免疫重建炎症反应综合征的时间为31天,其中IRIS患者在抗病毒治疗前IL4、IL12p40、 IL18的浓度明显高于对照组(non-IRIS)(P＜0.05);抗病毒治疗1月时,IRIS患者血浆中IL4、 IL6、 IFN-γ、 IL12p40、IL18、MCP-1较non-IRIS升高,两组间有统计学差异(P<0.05)；IRIS患者在发生免疫重建炎症反应综合征时血浆中的IL6、IL4、ILO、IL12p40较治疗前升高,但差异无显著性(P>0.05)；IRIS患者在抗病毒治疗1月时CD3+T细胞的NFAT1、IL6、IL8、TNFα基因表达量增加,以NFAT1最为明显,non-IRIS组中的NFAT4、NFAT2、NFAT1、IL1β、IL6、IL8、IL10IL2、IL18在抗病毒治疗后基因表达均不同程度降低；抗病毒治疗前IRIS组中CD3+T细胞的NFAT1、IL6、IL8低于non-IRIS组；抗病毒治疗1月后,IRIS组的NFAT1、NFAT2、NFAT4、IL6、 IL8、 TNFα、IL1β、IL10、IL2、IL18的表达量均高于non-IRIS组。 结论：(1)研究提示艾滋病患者HAART前血浆中增高的IL4、IL12p40、IL18可预测抗病毒治疗后IRIS发生的风险；(2)细胞因子IL4、IL6、IFNγ、IL12p40、IL18、 MCP-1可能促进IRIS的发生；(3)HAART后CD3+T细胞中NFAT1表达增加,可能促进了细胞因子IL6、IL8、TNFα的表达,促使AIDS患者发生IRIS。

关键词： 结直肠癌手术   老年   围手术期   肠内营养   免疫增强型   胃肠功能   免疫功能  

摘要： 目的探讨围手术期增强免疫型肠内营养对限期手术老年结直肠癌患者支持后营养状态、炎症反应、胃肠功能及预后影响。方法选取医院限期手术老年结直肠癌患者70例作为研究对象,随机将患者分为对照组和观察组各35例,对照组给予围手术期常规肠内营养支持,观察组给予围手术期增强免疫型肠内营养支持,观察支持前和支持后7d营养状态、机体炎性反应机及胃肠道功能恢复情况,对比两组临床结局。结果观察组支持后7d TP、PA、ALB、TF、L/M分别为(73.05±3.51)g/L、(316.42±9.40)mg/L、(41.27±2.97)g/L、(2.80±0.34)g/L、(0.04±0.02)均显著高于对照组,具有统计学意义(P<0.05);观察组支持后CD3、CD4、CD4/CD8、lg A、lg M分别为(74.69±6.78)%、(46.62±5.07)%、(1.71±0.46)、(3.85±1.57)g/L、(1.20±0.38)g/L均显著高于对照组,具有统计学意义(P<0.05);观察组支持后CRP、IL-6、TNF-α分别为(6.68±0.46)mg/L、(407.64±43.29)ng/L、(109.67±12.6)ng/L均显著低于对照组,具有统计学意义(P<0.05);观察组肠道通气时间和住院时间分别为(2.06±0.41)d、(7.47±1.69)d显著短于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论围手术期增强免疫型肠内营养支持能够改善老年结直肠癌限期手术患者的营养状态,降低机体炎性反应。

关键词： 透析治疗   终末期肾病   炎症状态   临床意义  

摘要： 目的 探究不同透析方式对肾病患者镜下微炎症状态改变的临床意义。方法 将2013年3月-2014年3月我院收治的40例维持性透析治疗的患者，根据透析方式和时长进行分为4组，比较各组治疗前后的炎症指标。结果 进行维持性血液透析的A、C组平均CRP浓度显著高于行维持性腹膜透析的B、D组(P<0.05);CRP浓度与透析龄时长无关(P>0.05)。镜下观察各组治疗后细胞炎症状态均减轻。结论 不同透析方式可能对终末期肾病患者的微炎症状态有一定影响，而透析龄长则无显著影响。

关键词： NOD样受体   Toll样受体   新生儿   抗感染免疫应答   炎症反应  

摘要： 目的：　　比较新生儿和成人NOD样受体（NOD1和NOD2）、Toll样受体（TLR4）、CD14表达水平及介导炎症反应能力的差异，探讨新生儿模式识别受体的功能特点及其与感染的关系。　　方法：　　收集早产儿外周血38例、足月儿外周血42例和成人外周血34例：(1)分离单个核细胞，通过Real-time PCR测定NOD1、NOD2、TLR4、CD14的基因水平;(2)采用Spearman相关性分析，探讨新生儿NLRs与TLR4及CD14表达水平的关系;（3）采用NOD1（Tri-DAP）、NOD2（MDP）、TLR4（LPS）激动剂分别刺激早产儿、足月儿和成人外周血4h，收集上清，检测炎症因子TNF-?和IL-6的表达水平。　　结果：　　1.足月儿和早产儿NOD1的基因水平均低于成人，早产儿NOD2的基因水平也低于成人，差异具有统计学意义，但足月儿NOD2的水平与成人无显著差异;足月儿和早产儿TLR4以及CD14的基因水平明显低于成人;足月儿NOD1、NOD2、TLR4的水平高于早产儿，但无统计学意义。　　2.新生儿NOD1的表达水平与TLR4和CD14的水平存在正相关，即NOD1表达水平较低时，TLR4和CD14表达低下;但是NOD2的水平与TLR4和CD14之间无相关性。　　***-DAP和MDP分别刺激后，早产儿、足月儿上清中TNF-α和IL-6的水平均明显低于成人，差异有统计学意义;LPS刺激后，早产儿、足月儿上清中TNF-α的水平低于成人，但IL-6的水平无显著差异。　　结论：　　1.新生儿体内NLRs和TLRs的表达水平均低于成人，提示新生儿抗感染免疫应答能力存在缺陷。　　2.新生儿NOD1表达水平低下时，TLR4和CD14也同样表达较低，其表达水平存在相关性，表明围产期新生儿可能存在多种模式识别受体发育不全。　　3.经NLRs和TLRs激动剂刺激后，新生儿产生炎症因子的水平也明显低于成人,提示新生儿NLRs和TLRs不能针对病原体及时启动炎症反应，这可能是导致新生儿易发感染的重要原因。

关键词： CD36   ERK信号通路   LPS   炎症因子   自噬  

摘要： 目的:革兰阴性菌内毒素—脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）是其细胞壁结构组分,当细菌死亡裂解时游离出来发挥毒性作用。CD36作为一种模式识别受体（pattern recognition receptor,PRR）可介导细胞识别LPS等多种抗原,由于其特殊的跨膜结构,还具有介导信号通路和调节细胞功能等作用;CD36的泛素化能快速调节其在细胞膜上的含量并影响其自身功能,因此藉用CD36泛素化位点的突变可考察泛素化对其功能的影响。巨噬细胞（macrophage）是机体重要的免疫细胞,也是炎症反应的主要参与者。LPS能有效地诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6等炎症因子,亦可诱导细胞自噬等反应参与抗感染免疫。CD36作为一种重要的PRR,在巨噬细胞中亦有丰富的表达,而对其在LPS诱导的巨噬细胞自噬和炎症因子分泌中的影响及分子机制研究甚少;CD36泛素化对其介导的信号通路和细胞功能有何影响尚待研究。野生型中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cell,CHO）无CD36的天然表达,同时该细胞还具有高扩增和表达特点,因此本课题第一部分以LPS与稳定转染空质粒、野生型cd36基因和泛素化位点突变cd36基因的CHO细胞（CHO/Vector、CHO/CD36 WT和CHO/CD36 K/A）共作用,探讨CD36及其泛素化对LPS诱导的丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen activated protein kinase,MAPK）信号通路和自噬的影响。第二部分首先利用si RNA和ERK抑制剂干预手段处理鼠源巨噬细胞RAW264.7,通过建立LPS与不同条件预处理的巨噬细胞RAW264.7共作用为细胞模型,研究巨噬细胞中CD36对LPS诱导的自噬和炎症因子分泌的影响及分子机制,为阐明CD36对LPS诱导的自噬和炎症因子分泌的影响及分子机制提供理论和实验依据。方法:一、CD36及其泛素化对MAPK信号通路及自噬的影响***与CHO细胞共作用适宜浓度和时间的确定本实验分别以0、5、10、20、50、100、200、500、1000 ng/ml LPS与CHO/CD36WT细胞共作用相同时间后收集细胞;进而将100 ng/ml LPS与CHO/CD36 WT细胞分别共作用0、10、30、60、120、240 min后收集细胞。采用蛋白质印迹技术（western blot,WB）检测上述所收集细胞中ERK磷酸化水平,以确定LPS与CHO细胞共作用适宜的浓度和时间。***36及其泛素化对MAPK信号通路的影响MAPK信号通路参与细胞中多种生理病理过程并发挥着重要作用。在MAPK家族中细胞外调节蛋白激酶（Extracellular regulated protein kinase,ERK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）和p38是研究最广泛和最重要的蛋白激酶,其磷酸化水平高低决定了其活性程度。实验分别设置LPS与CHO/Vector、CHO/CD36 WT和CHO/CD36 K/A细胞共作用的组份及相应的未加LPS作用的阴性对照组,共6组。根据上述实验确定的LPS工作条件,以100 ng/ml LPS作用细胞2 h后,WB检测ERK、JNK和p38磷酸化水平,即ERK、JNK和p38的活性。***36及其泛素化对LPS诱导自噬的影响蛋白激酶C（protein kinases C,PKC）在自噬过程中的作用具有保守性,且甘油二酯（diacylglycerol,DAG）与其亚基上的C1位点结合直接影响其功能发挥;GFP-PKC-C1质粒表达的蛋白以弥散形式存在细胞中,与DAG结合后会以点状聚集物的形式存在,因此结合了DAG的GFP-PKC-C1表达蛋白形成的绿色点状聚集物可显示细胞中DAG的情况。将带有红色荧光的RFP-LC3质粒和带有绿色荧光的GFP-PKC-C1质粒共同导入CHO/Vector、CHO/CD36 WT和CHO/CD36 K/A细胞中,并设置LPS作用组和LPS未作用的阴性对照组,LPS与细胞共作用2 h后,用共聚焦激光扫描显微镜（confocol laser scanning microscope,CLSM）观察各组细胞中自噬体和DAG的共定位情况。二、巨噬细胞CD36对LPS诱导的自噬和炎症因子的影响及分子机制研究***与RAW264.7细胞共作用浓度和时间的确定以含有0、5、10、20、50、100、500、1000 ng/ml LPS的培养液作用RAW264.7细胞相同时间后收集细胞;再分别收集100 ng/ml LPS与RAW264.7细胞共作用0、0.5、1、2、4、8、16、24 h的细胞,WB检测自噬标志蛋白:微管相关蛋

关键词： 全身炎症反应综合征   免疫调节   血必净注射液  

摘要： 目的:观察血必净注射液对重症监护病房(ICU)全身炎症反应综合征(SIRS)患者免疫功能的影响。方法:将2013年1月至2013年12月入住贵州省人民医院重症监护病房的SIRS患者经过初步筛查,选择符合本研究标准的患者,并且根据自愿原则并最终配合完成本实验的56名SIRS患者,按照随机原则,将其分为对照组(C组)和血必净治疗组(T组)。对照组实行常规治疗基础上加用0.9%氯化钠注射液150ml,每日两次,血必净治疗组在常规治疗基础上联合使用血必净注射液50ml+0.9氯化钠注射液100ml,每日2次;观察两组患者治疗前、治疗后4d、治疗后7d的血清中的炎性介质IL-6、TNF-α,以及免疫指标Ig G、Ig M、Ig A、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及CD14+人类白细胞相容性抗原DR(HLA-DR)水平动态变化,并同时观察相应时间点患者的APACHII评分,心率、白细胞、体温、呼吸的变化以及MODS的发生率。本实验采用双盲法,即给药者及观察检测者分开,观察者及检测者不知道分组状况及给药情况。结果:对照组与血必净组两组患者治疗前基础状态的各项指标如年龄、性别、疾病种类、APACHII评分、生命体征及免疫状态均无明显统计学差异(P>0.05);两组治疗4d后、7d后,血必净组较对照组IL-6、TNF-ɑ、Ig G、Ig M、Ig A、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及CD14+HLA-DR水平,明显改善,均有统计学意义(P<0.05)。治疗组APACHII评分,心率、白细胞、体温、呼吸的变化亦较C组改善(P<0.05),两组MODS的发生率无统计学意义(P>0.05)。结论:血必净注射液能减少全身炎症反应综合征患者炎性因子的水平,改善患者的细胞免疫、体液免疫功能状况以及全身状况。

关键词： 免疫蛋白酶体   神经炎症   脑缺血   RNA干扰免疫蛋白酶体  

摘要： 目的观察RNA干扰免疫蛋白酶体亚基低分子重量蛋白2(LMP2)对大鼠脑缺血再灌注后神经炎症反应的影响。方法线栓法制作SD大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO)模型,脑缺血1 h再灌注72 h。SD大鼠按照体重随机分为假手术组、实验组和对照组,每组10只。实验组和对照组分别在MCAO术前1 h,立体定位脑内注射慢病毒载体LMP2-shRNA及阴性对照shRNA液体。用Western blot法分析LMP2、LMP7、磷酸化核因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达,用ELISA法测定脑组织白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度。结果局灶性脑缺血再灌注后,梗死灶周边的皮层和纹状体区LMP2、NF-κB、IL-1β和TNF-α蛋白表达上调,注射慢病毒LMP2-shRNA载体可显著下调这些蛋白产生,减少脑梗死体积,且未见明显的药物不良反应。结论RNA干扰LMP2表达,可显著下调脑缺血后神经炎症反应,发挥神经保护作用。

关键词： 免疫炎症反应   MST4基因   泛素连接酶   磷酸化调控   巨噬细胞  

摘要： 脊椎动物在进化的过程中产生了两种免疫系统（固有性免疫系统和获得性免疫系统），固有性免疫系统构成了人体抵御外界病原体感染的第一道防线。其中Toll样受体(TLRs)是一类重要的病原体模式识别受体(PRR)，通过识别病原体相关的分子模式(PAMP)，大多数的Toll样受体(TLRs)会激活中间信号分子TRAF6。TRAF6的活化会促进NF-κB转录因子的激活和炎症细胞因子的产生。因此，TLR通过TRAF6所介导的免疫炎症反应的正确调控对机体抵抗病原体入侵以及自身稳态的维持具有重要的意义。　　MST4是GCKⅢ激酶家族的成员，已有的研究证据表明MST4在免疫相关的组织中高表达，如胸腺，淋巴细胞以及周边血细胞等。而在固有性免疫反应过程中，我们发现在细菌感染刺激的情况下MST4的转录水平和表达水平都会出现剧烈的波动，而同时MST4能够抑制TLR4所介导的免疫炎症反应。进而发现MST4能够直接和TRAF6相互作用并通过磷酸化TRAF6的第463和486位的苏氨酸来抑制TRAF6自身的寡聚以及自身的泛素化修饰。Traf6-/-的MEF细胞中过表达的TRAF6突变体(T463A/T486A)在LPS刺激下能够促进细胞因子的产生，但这种促进作用不受MST4的抑制。在败血症休克刺激的条件下，MST4水平被敲低的小鼠会表现出炎症反应的加剧以及存活率的下降;然而在Traf6杂合（Traf6+/-）的小鼠中，上述因MST4水平的敲低而导致的机体损伤会被减弱，这说明MST4通过TRAF6发挥抑制免疫炎症反应的作用。进而发现当小鼠的巨噬细胞被敲除后，在LPS刺激情况下，MST4水平被敲低的小鼠不再会表现出炎症反应的加剧以及存活率的下降。综上所述，本论文的研究揭示了MST4通过TRAF6的磷酸化来调控免疫炎症反应的新机制，并且突出了MST4对免疫炎症反应的抑制作用主要是通过巨噬细胞来实现的。

关键词： 组胺H4受体   LAD2细胞   炎症因子   信号通路   免疫炎症反应  

摘要： 目的：组胺H4受体是近年来新发现的组胺受体，主要表达于免疫器官及免疫细胞上。研究表明，组胺H4受体参与多种免疫性疾病的免疫炎症反应并介导角质形成细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等的炎症反应。肥大细胞膜表面有H4受体的分布，也是组胺的效应细胞。本实验研究组胺H4受体对人肥大细胞系LAD2细胞表达炎症因子IL-8、TNF-α的影响及其活化的信号通路，以初步探讨H4受体通过肥大细胞参与免疫炎症反应的分子生物学机制。　　方法：1、人肥大细胞系LAD2细胞的培养;2、通过组胺H4受体激动剂Clobenpropit刺激肥大细胞脱颗粒及细胞因子IL-8、TNF-α分泌，观察组胺H4受体激活对LAD2细胞生物学功能的影响;3、探讨组胺H4受体的激活对Calcium-钙调磷酸酶-NFAT、PI3K-Akt、MAPKs（JNK、P38及Erk）、NF-κB信号通路的影响。　　结果：1、用组胺H4受体激动剂Clobenpropit刺激人肥大细胞LAD2，不能引起LAD2细胞脱颗粒，但引起LAD2细胞释放IL-8和TNF-α;2、组胺H4受体激动剂Clobenpropit刺激人肥大细胞LAD2，能引起钙动员，Erk、P38、JNK磷酸化，NFAT、NF-κB活化，但对Akt磷酸化没有影响;3、PI3K抑制剂Wortmannin、Erk抑制剂PD98059、钙调磷酸酶抑制剂Cyclosporin A能明显抑制Clobenpropit刺激LAD2细胞引起的IL-8和TNF-α释放，与此相反，P38抑制剂SB20385能明显促进Clobenpropit刺激LAD2细胞分泌IL-8和TNF-α，JNK抑制剂SP600125级NF-κB抑制剂Bay11-7821对Clobenpropit刺激引起LAD2细胞释放IL-8和TNF-α没有影响。　　结论：组胺H4受体激动剂没有引起LAD2细胞脱颗粒，但引起LAD2细胞炎症因子IL-8及TNF-α的释放，说明该受体可能与过敏反应的迟发相有关。组胺H4受体激动剂可以刺激LAD2细胞钙动员，并引起ERK、JNK、NFAT的活化，加入相应的抑制剂后炎症因子释放减少，说明其在人肥大细胞分泌炎症因子的通路与Calcium-钙调磷酸酶-NFAT及MAPKs（JNK、P38及Erk）信号通路途径相关。组胺H4受体激动剂能引起LAD2细胞P38活化，然而加入相应的抑制剂后炎症因子释放增加，说明P38信号通路对组胺H4受体信号传导有负调控作用。组胺H4受体激动剂能引起LAD2细胞NF-κB活化，然而加入相应的抑制剂后炎症因子释放无明显变化，提示NF-κB信号通路可能参与组胺H4受体激活引起的其它炎症反应。