关键词:
微小RNA-194
脂质沉积
炎症反应
非酒精性脂肪性肝病
摘要:
目的研究microRNA-194(miR-194)缓解高脂环境下肝细胞脂质代谢及炎症反应的分子机制。方法以低脂饲料(low-fat diet,LFD)及高脂饲料(high-fat diet,HFD)喂养构建对照组及脂肪肝小鼠模型,HE染色、油红染色观察建模情况。qPCR检测二组小鼠肝组织中miR-194、促脂质合成因子SCD1、ACC、促炎因子TNF-α、IL-6表达水平。棕榈酸(palmitic acid,PA)刺激肝细胞株LO2,过表达miR-194后qPCR检测人肝细胞系LO2细胞内SCD1、ACC、TNF-α、IL-6表达水平,油红染色检测LO2细胞内脂质沉积情况,免疫荧光检测LO2细胞内TNF-α变化。结果脂肪肝小鼠模型构建成功。与LFD组小鼠相比,HFD组小鼠miR-194表达明显降低[LFD:1.000±0.147 vs HFD:0.634±0.116,(t=3.478,P=0.025)]。SCD1、ACC1表达明显升高[SCD1 LFD:1.000±0.287 vs HFD:1.658±0.216,(t=4.802,P=0.009);ACC LFD:1.000±0.252 vs HFD:1.851±0.245,(t=4.194,P=0.015)],TNF-α、IL-6表达明显升高[TNF-αLFD:1.000±0.172 vs HFD:1.952±0.147,(t=7.288,P=0.002);IL-6 LFD:1.000±0.207 vs HFD:1.452±0.108,(t=3.242,P=0.029)]。在高脂环境下,过表达miR-194后,qPCR结果显示LO2细胞内SCD1、ACC表达明显下降[SCD1 miR-NC:1.000±0.149 vs miR-194:0.625±0.112,(t=3.340,P=0.029);ACC miR-NC:1.000±0.204 vs miR-194:0.572±0.124,(t=3.105,P=0.038)],TNF-α、IL-6表达明显减少[TNF-αmiR-NC:1.000±0.149 vs miR-194:0.563±0.059,(t=4.723,P=0.009);IL-6 miR-NC:1.000±0.156 vs miR-194:0.685±0.112,(t=2.853,P=0.048)]。油红染色显示LO2细胞内脂质沉积明显减少,免疫荧光结果显示细胞内TNF-α表达明显下[miR-NC:1.000±0.124 vs miR-194:0.655±0.152,(t=3.020,P=0.039)],炎症反应明显减轻。结论miR-194可以延缓肝细胞内脂质沉积,减轻高脂处理诱导的炎症反应,延缓脂肪肝的进展,这可能成为治疗非酒精性脂肪性肝病的新靶点。