关键词： 心肌缺血再灌注损伤   脾切除   细胞重建   中性粒细胞   高血糖   动物模型  

摘要： 第一部分内容：脾脏在小鼠急性心肌缺血再灌注损伤机制中的作用\n 研究目的：免疫炎症反应在急性心肌缺血再灌注损伤过程中发挥重要作用。近来研究发现，脾脏参与心肌梗死后损伤修复及心室重塑过程，但其是否参与急性心肌缺血再灌注损伤目前并不清楚。本部分研究内容拟在小鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型中探讨脾脏是否在急性心肌缺血再灌注损伤中发挥作用。\n 研究内容及方法：利用C57BL6野生型（WT）小鼠分别进行10分钟、20分钟、30分钟、40分钟或50分钟心肌缺血结合60分钟再灌注以构建在体心肌缺血再灌注损伤模型。各缺血时间小鼠分为脾切除组及脾切除假手术组。急性脾切除处理组小鼠在心肌缺血前30分钟切除脾脏。将脾脏分离成脾免疫细胞单细胞悬液，使用台盼蓝染色法判定脾免疫细胞活性。将5×106活脾免疫细胞静脉注入脾切除小鼠以重建脾免疫细胞。分别在20分钟及40分钟心肌缺血组小鼠建立脾切除后脾免疫细胞重建模型。TTC&蓝双染色法检测心肌梗死面积。\n 研究结果：TTC染色结果显示：脾切除显著减小40分钟（对照49.6±1.4% vs脾切除35.7±1.9%，p<0.05）及50分钟（对照：56.4±1.3% vs脾切除：42.6±1.9%, p<0.05）心肌缺血组小鼠再灌注后心肌梗死面积，而对10分钟（对照：0.54±0.36% vs脾切除0.62±0.38%, p=NS）、20分钟（对照：7.25±1.3% vs脾切除：7.0±1.6%，p=NS）及30分钟（对照：34.85±3.2% vs脾切除：29.4±5.2%，p=NS）缺血组再灌注后心肌梗死面积无显著影响。重建脾切除小鼠的脾免疫细胞后可以显著增加40分钟心肌缺血组小鼠再灌注后心肌梗死面积（脾切除：35.7±1.9% vs脾切除+脾细胞重建50.8±0.9%，p<0.05），而对20分钟组心肌缺血组小鼠心肌梗死面积无显著影响（脾切除：7.25±1.3% vs脾细胞重建：7.6±0.9%，p=NS）。\n 结论：脾脏在较严重（小鼠模型中缺血时间≥40分钟）心肌缺血再灌注损伤过程中发挥重要作用。\n 第二部分内容：HMGB1-RAGE通路构成心脏-脾轴参与心肌缺血再灌注损伤过程，增加再灌注后心肌梗死面积\n 研究目的：组织损伤后可以释放“危险信号相关分子”，其中HMGB1被证实在心肌缺血再灌注损伤过程中具有重要作用。其可以通过与RAGE受体结合激活免疫炎症反应促进组织损伤。在第一部分实验结果的基础上我们提出假设：较长时间心肌缺血将导致心肌组织释放更多HMGB1并通过RAGE受体激活脾脏免疫细胞，从而加重心肌再灌注损伤。本部分内容拟在小鼠心肌缺血再灌注损伤模型中进一步证实上述假设。\n 研究内容及方法：使用C57BL6小鼠及RAGE基因敲除（Knockout，KO）小鼠建立心肌缺血再灌注损伤模型，所有小鼠再灌注时间均为60分钟。根据第一部分实验结果，我们选取20分钟心肌缺血组小鼠作为低损伤对照进行本部分研究。急性脾切除处理组小鼠在心肌缺血前30分钟切除脾脏。将脾脏分离成脾免疫细胞单细胞悬液，使用台盼蓝染色法判定脾免疫细胞活性。将5×106活脾免疫细胞静脉注入脾切除小鼠以重建脾免疫细胞。部分小鼠于心肌缺血后10分钟或40分钟时取心肌标本获得缺血心肌组织匀浆（Ischemichearthomogenate, IHH）。BCA蛋白浓度测定法用于检测缺血心肌组织匀浆浓度。缺血心肌组织匀浆处理组小鼠于再灌注前5分钟静脉注射10μg/g缺血心肌组织匀浆。TTC&蓝双染色法检测心肌梗死面积。免疫沉淀法用于分离缺血心肌组织匀浆中的HMGB1蛋白。Western-Blot法检测HMGB1表达水平。\n 研究结果：与对照组及10-IHH处理组相比，40-IHH显著增加20分钟心肌缺血小鼠再灌注损伤后心肌梗死面积（10-IHH：9.9±1.5% vs40-IHH：33.3±2.5%， p<0.05）。40分钟心肌缺血后心肌组织匀浆中 HMGB1表达水平均显著高于20分钟缺血心肌组织。而使用免疫沉淀技术分离匀浆组织中HMGB1蛋白可以消除40-IHH增加心肌梗死面积作用（40-IHHHMGB1+：30.1±2.37% vs40-IHHHMGB1-：10.1±3.4%，p<0.05）。40-IHH对 RAGEKO小鼠心肌梗死面积无显著影响（对照：7.6±1.0% vs40-IHH：8.4±1.3%，p=NS）。急性脾切除可以阻断40-IHH增加心肌梗死面积作用（40-IHH：33.3±2.5% vs脾切除+40-IHH：9.8±1.7%， p<0.05）。利用野生型小鼠作为供体重建脾切除小鼠的脾免疫细胞后可恢复40-IHH

关键词： 左卡尼汀   维持性血液透析   炎症   营养  

摘要： 目的观察左卡尼汀对维持性血液透析(MHD)患者营养指标及炎症状态的影响。方法 2010年10月-2011年10月选择透析中心透析龄>6个月的MHD患者62例,随机分为治疗组32例和对照组30例。两组常规治疗相同,治疗组于每次透析结束后给予静脉注射左卡尼汀1 g,治疗3个月,治疗前后测定血红蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等指标并进行评价,观察并记录临床症状改变情况。结果治疗后,治疗组与对照组的Alb、Hb、TG、HDL-C和hs-CRP、透析低血压、肌痉挛、乏力、纳差比较,差异均有统计学意义(P<0.05),TC、LDL-C比较均无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗前后Alb、Hb、纳差比较差异均有统计学意义(P<0.05);TC、TG、LDL-C、HDL-C、hs-CRP、透析低血压、肌痉挛和乏力比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗前后Alb、Hb、TG、HDL-C、hs-CRP、透析低血压、肌痉挛、乏力和纳差比较,差异均有统计学意义(P<0.05);TC、LDL-C比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论左卡尼汀可明显改善患者的营养状态、微炎症状态及生活质量。

关键词： 炎症   高脂   足细胞   胆固醇转运   内质网应激   细胞凋亡  

摘要： 该研究观察了炎症状态下高脂介导的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在足细胞损伤中的作用,并探讨了胞内胆固醇转运蛋白C型1类尼曼-匹克蛋(Niemann-pick C1protein,NPC1)介导脂质紊乱致ERS的分子机制。将足细胞分为对照组、高脂组(low-density lipoprotein,LDL)、高脂+炎症因子组(LDL+IL-1β)、衣霉素干预组(TM)、4-苯基丁酸(4-PBA)干预组、辛伐他汀干预组(Statin)。流式细胞术检测足细胞凋亡,油红O染色检测足细胞胞内脂质沉积,荧光定量PCR检测NPC1、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)和活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)m RNA水平;荧光免疫技术分析GRP78的表达。结果表明,在高脂基础上,随炎症因子浓度增大和处理时间延长,足细胞的凋亡率明显上升。胞内脂质沉积以及GRP78、PERK、ATF6、NPC1 m RNA的表达在高脂加炎症因子组明显上升。与高脂加炎症因子组比较,小剂量衣霉素预处理和4-PBA能降低细胞凋亡比例,降低GRP78、PERK和ATF6 m RNA的表达,且4-PBA明显减弱GRP78荧光表达。辛伐他汀和4-PBA可以降低胞内脂质沉积和NPC1 m RNA的表达。以上结果说明,炎症状态下脂质可能通过NPC1过度转运到内质网并诱发ERS引起足细胞损伤,缓解内质网应激和降低胞内脂质沉积能减轻足细胞损伤。

关键词： 脑创伤   炎症反应   免疫抑制  

摘要： 脑创伤(traumatic brain injury,TBI)后血脑屏障(blood brain barrier,BBB)受损,脑内固有免疫细胞(小胶质细胞、星型胶质细胞等)和外周来源免疫细胞(巨噬/单核细胞、T细胞、中性粒细胞等)均参与到脑组织的炎症反应中,释放多种炎症因子、活性氧、化学诱导物,造成脑组织损伤,同时引发机体对免疫细胞的产生和功能的抑制性调节,即免疫抑制。本文就TBI后脑内炎症反应和外周免疫抑制方面的研究作一综述,旨在进一步了解其病理生理改变,为临床治疗提供理论依据。

关键词： 肠内免疫营养   直肠癌   免疫功能   炎症反应   并发症  

摘要： 目的探讨早期肠内免疫营养对经腹会阴联合直肠癌根治术后患者免疫功能、炎症反应的影响。方法将112例行经腹会阴联合直肠癌根治术的患者随机分为两组,观察组(56例)术后24 h开始使用免疫型肠内营养制剂瑞能;对照组(56例)术后使用常规的肠内营养制剂能全力。所有患者均于术前和术后第1、8天分别检测免疫指标和炎症反应指标:1CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、NK细胞、IgA、IgG、IgM;2CRP、TNF-α、PGE。观察术后人工肛门首次排气和排便时间、会阴部伤口愈合时间、并发症发生率及平均住院时间。结果术前与术后第1天,两组免疫指标与炎症反应指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后第8天,观察组患者CD3、CD4、CD4/CD8、NK、Ig G、CRP、TNF-α及PGE水平,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后人工肛门首次排气和排便时间、会阴部伤口愈合时间及平均住院时间均早于对照组(P<0.05);两组术后并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论经腹会阴直肠癌根治术后患者早期应用肠内免疫营养能改善机体免疫功能,抑制炎性反应,促进患者术后早期康复。

关键词： 胆囊切除术   腹腔镜   炎症反应   氧化应激   细胞免疫功能  

摘要： 目的：探索腹腔镜胆囊切除术对机体炎症反应、氧化应激以及细胞免疫功能的影响。方法：收集2014年1月～2015年1月陕西省镇安县医院外科临床拟行胆囊切除术的116例患者为受试对象，并采用单盲、随机法将其分为两组，各有58例。其中对照组患者行开腹胆囊切除术（OC），观察组患者行腹腔镜腹胆囊切除术（LC），检测患者术前和术后炎性反应、氧化应激及细胞免疫功能各项指标的变化情况。结果：观察组患者术后24h血清炎性因子IL-6（26．34±5．27）ng／L、TNF-α（2．65±0．42）μg／L、CRP（20．46±3．58）mg／L均较术前明显升高（P〈0．05），但各指标水平均显著低于对照组（P〈0．05）。观察组患者术后24h时SOD（121．61±9．47）U／mL、GSH-Px活性（2．79±0．26）U／mL、MDA含量（0．74±0．10）U与术前比较无明显变化（P〉0．05），但与对照组术后各项指标比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。观察组患者术后24h时CD3^＋（49．32±4．68）％、CD4^＋（36．28±4．12）％、CD8-（20．48±2．65）％及CD4^＋／CD8^＋比值（1．17±0．24）均较术前明显降低（P〈0．05），且与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：腹腔镜胆囊切除术与开腹胆囊切除术比较对患者机体炎症反应、氧化应激及细胞免疫功能的影响较小，更加有利于患者的术后恢复，值得临床推广、应用。

关键词： 乳腺癌   厚朴酚   视黄醛X受体a配体   炎症通路   分子机制  

摘要： 在乳腺肿瘤微环境中，巨噬细胞分泌的肿瘤坏死因子α炎症因子(Tumornecrosis factor, TNFα)激活肿瘤细胞生存和凋亡通路。而在一些恶性肿瘤中，TNFα激活的NF-κB和JNK信号通路能够调控抗凋亡蛋白表达。最终，抗凋亡蛋白抑制TNFα的细胞凋亡作用。\n 在不同生理条件下，孤儿核受体Nur77发挥多种生物学功能。在细胞核内，Nur77转录的多种靶基因，既能调控细胞生存，又能调控细胞凋亡。在细胞质中，Nur77也可以通过与Bcl-2蛋白结合，促进细胞凋亡。本研究课题证明:在乳腺癌中，TNFα主要诱导Nur77在细胞核内表达，核内表达的Nur77促进了乳腺癌细胞的生存与增殖。\n 在激活的炎症通路中，TNFα诱导截断型视黄酸Ⅹ受体α(truncated RetinoidⅩReceptor，tRⅩRα)与TRAF2的相互作用，这一相互作用进一步促进炎症进程。基于这种炎症模型，筛选通过有效抑制tRⅩRα与TRAF2相互作用治疗炎症的靶向视黄酸Ⅹ受体先导化合物。最终，我们确定和厚朴酚作为本课题机制研究的先导化合物。细胞实验及临床数据表明和厚朴酚具有抑制肿瘤生长的能力，但其治疗肿瘤的具体机制还有待进一步解释。本课题研究发现和厚朴酚通过抑制TNFα诱导的TRAF2与RIP1相互作用，进一步抑制下游信号通路，以及Nur77孤儿核受体的蛋白表达水平。和厚朴酚通过改变生存和凋亡通路的平衡，使TNFα从调控生存作用转换为调控凋亡作用。\n 我们进一步发现视黄酸Ⅹ受体的不同类型配体能对TNFα信号通路激活，截断视黄醇Ⅹ受体α结合TRAF2，下游靶基因Nur77表达水平以及蛋白稳定性的相反调控作用。这些结果表明不同类型配体引起视黄醇Ⅹ受体构象的不同变化，不同构象的视黄醇Ⅹ受体在炎症性乳腺癌的治疗中发挥不同功能，这为靶向视黄醇Ⅹ受体药物开发提供重要理论基础。

关键词： 运动训练   肥胖   状态   炎症   脂肪组织   相关疾病   有效防治  

摘要： 在肥胖的过程中伴随着脂肪组织慢性低度炎症状态,很可能是肥胖成为高危因素的根本原因。明确运动训练对其作用,可为运动有效防治肥胖相关疾病提供一定的理论依据。

关键词： ω-3鱼油脂肪酸   重症哮喘   免疫   炎症反应  

摘要： 目的探讨ω-3鱼油脂肪酸对成人重症哮喘机体免疫功能及炎症反应的影响。方法选择2012年7月~2015年3月收治的重症支气管哮喘患者76例,分为两组,各38例,对照组实施对症支持处理,观察组在对照组基础上使用鱼油,比较两组患者治疗前后TNF-α、IL-1、IL-6、CRP水平变化情况、治疗前后免疫指标中CD3^+、CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+变化情况及血气分析结果。结果治疗后观察组TNF-α、IL-1、IL-6、CRP低于治疗前及治疗后对照组(P<0.05),治疗后观察组CD3^+、CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+水平高于治疗前及治疗后对照组(P<0.05),治疗后观察组p H高于治疗前及治疗后对照组(P<0.05),PCO2低于治疗前及治疗后对照组(P<0.05),PO2高于治疗前及治疗后对照组(P<0.05)。结论ω-3鱼油脂肪酸能有效降低重症哮喘急性发作患者炎症反应,改善血气结果及通气功能,有利于患者症状缓解。

关键词： 程序性细胞坏死   激酶   炎症反应   RIP3   MLKL  

摘要： 越来越多的研究表明,细胞坏死是一种受到精密调控的"新型"程序性细胞死亡方式。当细胞凋亡不能正常发生而细胞必须死亡时,坏死作为凋亡的"替补"方式被激活。程序性细胞坏死主要由肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)家族以及Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)家族启动,并通过和受体蛋白互作的两个蛋白激酶RIP1(receptor interacting protein kinase 1)和RIP3(receptor interacting protein kinase 3)传递死亡信号,募集并磷酸化MLKL(mixed lineage kinase domain-like protein),而MLKL作为细胞死亡的执行者最终会导致坏死的发生。坏死的细胞会向周围释放其内容物,这些内容物作为DAMPs(damage-associated molecular pattern molecules)可刺激周围细胞发生炎症反应,激活机体免疫应答。该文以TNF-α诱导的细胞坏死途径为出发点,着重阐述程序性细胞坏死的分子机制及其在炎症中的作用,并回顾和展望了其在临床诊疗中的可能性。