关键词： 脓毒症   连续性血液净化   炎症状态   免疫应答   红细胞糖代谢  

摘要： 目的:分析连续性血液净化对多发伤并发脓毒症患者炎症状态、免疫应答、红细胞糖代谢的影响。方法:78例多发伤并发脓毒症患者随机分为观察组及对照组各39例,对照组患者接受常规治疗,观察组患者接受连续性血液净化治疗,对比两组患者的治疗后炎症状态、免疫应答、红细胞糖代谢等指标差异。结果:观察组患者的治疗后血清炎症因子hs-CRP、TNF-α、PCT、sTREM-1、HBP含量均显著低于对照组患者;血清Th1细胞因子IL-2、IFN-γ含量低于对照组患者,Th2细胞因子IL-4、IL-10含量高于对照组患者;红细胞液中PFK、EGSH含量高于对照组患者,G-6PD、AR、ELPO含量低于对照组患者;外周血CD11a、CD54、CD106、CD49d荧光强度均显著低于对照组患者。结论:连续性血液净化可显著降低多发伤并发脓毒症患者全身炎症反应,促使患者免疫功能及红细胞代谢恢复正常。

关键词： 中性粒细胞   全身性炎症反应综合征   Toll样受体9   表面Toll样受体9   免疫调节性ODN  

摘要： 中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils,PMNs）是炎症反应的第一道防线,不同亚型中性粒细胞在炎症应答中的作用不尽相同。近年发现的sTLR9+中性粒细胞（sTLR9+PMNs）在炎症应答中的作用尚不十分清楚。本文以腹腔注射TLR9激动剂Cp G ODN诱导D-Gal N预致敏BALB/c小鼠建立致死性休克全身炎症性反应模型,观察模型小鼠腹腔灌洗细胞（PLCs）中的sTLR9+PMNs比例及应答情况,给小鼠回输炎症不同时期的PLCs或腹腔注射能影响TLR9转运的抑制性脱氧寡核苷酸CCT ODN,观察模型小鼠的生存期及对sTLR9+PMNs的影响。结果发现:PMNs是模型小鼠PLCs中的主要细胞,其中10%左右为sTLR9+PMNs;给模型小鼠回输炎症早期富含PMNs的PLCs可挽救小鼠的生命,这种PMNs中sTLR9+PMNs高表达sTLR9;CCT ODN腹腔注射可挽救模型小鼠的生命,这与其能上调模型小鼠PLCs中sTLR9+PMNs sTLR9的表达水平有关。综上,早期趋化到炎症局部的sTLR9+PMNs对于致死性炎症应答起保护作用,调控sTLR9+PMNs可能成为治疗全身炎症应答综合征的一种新思路。

关键词： CKD   炎症因子   Klotho   硫酸吲哚酚   RIG-I   NF-κB  

摘要： 研究背景及意义:慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)发病率、住院率和死亡率逐年升高,已成为全球关注的焦点。随着CKD的逐渐进展,除了累及肾脏,还可以累及其它器官,并最终发展为终末期肾病(End stage renal disease,ESRD)。因此,延缓CKD的进展,并寻找新的治疗靶点变得尤为重要。炎症在CKD的发生及进展中发挥着重要作用。多项临床研究表明,与健康人群相比,CKD患者血清炎症因子如C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平显著增高。Vaziri等证实,CKD患者及CKD动物模型的结肠上皮屏障结构破坏,肠道菌群紊乱,并因此导致全身性炎症和尿毒症症状加重。已有研究证实,CKD患者血清中升高的炎症因子会抑制血管扩张(通过抑制一氧化氮合成)及刺激血管收缩,减少肾血流量。炎症还能诱导细胞因子的释放和增加粘附分子的产生,以此促进T细胞粘附及巨噬细胞迁徙进入肾间质,并进一步促进致纤维化因子大量释放,促进肾纤维化,因此加快CKD的进展。新近研究证实,炎症与CKD及ESRD的重要并发症—心血管疾病密切相关,炎症因子可导致心肌损伤、左心室肥厚及动脉粥样硬化等病变。由此可见,炎症因子参与CKD及其并发症的发生、发展,抑制炎症状态则能有效防止CKD进展。Klotho在肾脏抗炎和肾损伤修护中发挥着重要作用。Klotho主要表达于肾小管上皮细胞,小鼠该基因沉默后会出现多器官功能障碍和寿命缩短的现象。Klotho缺陷小鼠模型其表征与尿毒症患者极为相似,并且伴随有血管内皮受损、矿物质代谢紊乱及心血管疾病等,腹腔注射Klotho蛋白后,上述症状出现缓解,提示CKD与肾脏Klotho分泌不足有关。分泌型Klotho蛋白可以作为一种激素样物质进入血液循环中发挥细胞保护作用。我们和其他学者的研究均发现,CKD患者的e GFR与血清Klotho蛋白水平呈正相关关系。既往研究表明,随着CKD进展,肾小管上皮细胞中Klotho表达逐渐降低。在缺血灌注性损伤诱导的AKI小鼠模型中发现,随着肾功能进行恶化,血清炎症水平不断升高的同时,Klotho水平不断下降。在糖尿病小鼠模型中Klotho表达下降可导致血清炎症水平增高。在衰老细胞炎症状态研究中发现,Klotho可以抑制衰老脐静脉内皮细胞RIG-I/NF-κB信号通路的激活以及IL-6和IL-8的释放。以上结果说明,Klotho与细胞、器官和机体的炎症反应密切相关,但截至目前,Klotho与CKD系统性炎症之间的直接相关性并不明确,Klotho是否在CKD系统性炎症中扮演重要角色及其可能的影响机制仍缺乏深入探讨。CKD患者体内炎症水平升高的机制较为复杂,而尿毒症毒素在其中发挥着非常重要的作用,特别是以硫酸吲哚酚(Indoxyl sulfate,IS)为代表的蛋白结合毒素,因为与血浆白蛋白结合而不能被普通透析清除,长时间存在于机体内并造成严重的不良影响。既往研究表明,血清IS水平升高的同时伴随着TNF-α,IL-6等炎症因子增加,单核细胞在受IS刺激后会分泌更多的炎症因子,提示IS是介导CKD炎症反应的重要诱因。综上,我们推测,在CKD发展进程中,肾脏Klotho表达下降以及循环中的Klotho减少或许和CKD患者的炎症状态有着密切关联,并影响着CKD及其并发症的发生、发展,但截至目前CKD患者血清中Klotho与炎症因子水平的相关性评价以及Klotho是否可以直接抑制循环中单核细胞炎症因子释放尚缺乏系统研究。为此,我们拟采用酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测CKD患者血清中Klotho水平及炎症因子水平,以明确CKD患者中Klotho水平和炎症因子之间的关系;并通过体外研究探讨Klotho抑制IS诱导单核细胞炎症因子释放的作用和机制,为CKD及其并发症的发生和发展寻找新的防治靶点。研究方法:一、在体研究:1.临床研究:收集CKD2-5期286例非透析患者的血清样本,使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Klotho水平及炎症因子CRP、IL-6、TNF-α水平,高效液相色谱法检测IS水平。对炎症因子(CRP、IL-6、TNF-α)、Klotho水平及IS进行单因素方差分析;炎症因子与e GFR、Klotho、IS相关性采用等级相关(Spearman)分析;偏相关分析(控制白蛋白与血磷)炎症因子与Klotho的相关性。2.人体样本:选取健康志愿者和CKD5期非透析患者各5人,采集其晨起空腹外周静脉血,静置离心后取血清样本,提取单核细胞(释放炎症因子的单核-巨

关键词： Pyrin   炎症小体   去磷酸化   细胞焦亡   Gasdermin E   化疗药物  

摘要： Pyrin蛋白由MEFV基因编码,其点突变是引起一种分布于地中海沿岸地区的自身炎症性疾病家族性地中海热(familiar mediterranean fever, FMF)的原因。Pyrin蛋白可作为炎症小体中的重要分子,通过间接识别由病原微生物毒力因子修饰并失活的Rho GTPases引起炎症小体的激活。与天然免疫其他模式识别受体不同,Pyrin蛋白通过间接识别微生物毒力因子对自身蛋白的修饰而非直接识别病原微生物固有分子从而激活下游免疫反应。然而,Pyrin炎症小体激活的具体机制至今尚不明确。本研究主要利用蛋白质免疫印迹、蛋白质免疫共沉淀等手段,证明在免疫细胞中,Pyrin蛋白存在磷酸化修饰,其205位与241位丝氨酸的磷酸化修饰介导Pyrin蛋白与14-3-3蛋白的结合,使Pyrin蛋白维持在活性抑制状态。通过制备特异性识别两磷酸化位点的单克隆抗体,证实205、241位丝氨酸在细胞受到病原微生物刺激时共同发生去磷酸化反应。利用诱导表达系统,证明Pyrin蛋白的位点特异性去磷酸化是Pyrin炎症小体激活的原因。同时,本研究发现家族性地中海热的有效治疗性药物秋水仙素可抑制Pyrin炎症小体的激活。秋水仙素并不能抑制细胞受到病原微生物毒力因子刺激时Pyrin蛋白的去磷酸化反应,而是通过抑制激活后的Pyrin蛋白招募下游ASC蛋白从而阻碍炎症小体的激活。综上,本文第一部分工作证明Pyrin蛋白的位点特异性磷酸化修饰与正常的微管蛋白动力学平衡是Pyrin炎症小体激活的重要控制元件。细胞焦亡(pyroptosis)属于细胞炎症性坏死的一种,在机体抵抗病原微生物感染以及许多疾病的发病中发挥重要作用。细胞焦亡的直接原因是GasderminD(GSDMD)蛋白被通过炎症小体激活的Caspase-1或直接结合细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)而活化的Caspase-4/5/11切割,使GSDMD释放蛋白质N端活性部分在细胞膜上聚合形成通透性孔道所致。Gasdermin蛋白家族成员多含有膜通透N端结构域,但其生物学功能依然处于未知状态。本文通过细胞成像、蛋白质免疫印迹及流式细胞仪分析等手段,证明Gasdermin家族成员Gasdermin E(GSDME)可以被活化的Caspase-3切割激活,并以类似于GSDMD导致细胞焦亡的方式引起细胞的炎症性坏死。化疗药物处理无GSDME表达的Jurkat细胞可使细胞发生细胞凋亡,而处理高表达GSDME的SH-SY5Y细胞系与人角质化原代细胞可通过活化Caspase-3引起GSDME介导的细胞焦亡,用药物抑制Caspase-3活性或降低GSDME的表达量均能抑制细胞焦亡的发生。动物实验结果表明,Gsdme基因敲除可有效保护小鼠免受DNA损伤化疗药物造成的肺部与小肠组织的损伤。综上所述,本文第二部分工作证明Caspase-3可通过切割激活GSDME引起GSDME介导的细胞炎症性坏死,而细胞中GSDME表达与否成为在Caspase-3激活后,决定细胞死亡方式的重要指标。

关键词： miR-136-5p   急性脊髓损伤   炎症   A20  

摘要： 星形胶质细胞在神经系统中广泛存在,并与神经元以及其他胶质细胞共同构成中枢神经系统。星形胶质细胞除填充以及营养神经元的作用外,亦在神经系统的发育以及修复中也占有一席之地。急性脊髓损伤(ASCI)发生后,除直接暴力所带来的原发性损伤外,多数患者在数天内将发生继发性脊髓损伤(SSCI)。原发性损伤是外力直接作用所带来的直接性物理伤害,同其他意外伤害一样无直接有效的方法可以针对损伤进行治疗;继发性脊髓损伤是直接性损伤发生后,一段时间之内因为身体免疫系统对损伤组织激活,所导致的以细胞炎性反应损伤,并最终导致直接损伤部位的加重以及范围扩大。现有的资料表明,急性脊髓损伤中,最终要的病理生理变化是因为炎性因子所导致的细胞自我凋亡,这也是急性脊髓损伤中组织损伤较原发性损伤扩大并加重的重要机制。趋化因子(chemotactic factor)是一类具有促炎和迁移作用的小分子物质。通常在炎症反应中作为免疫细胞的化学诱导物,引导免疫细胞到达炎性反应区域发挥吞噬作用。趋化因子及其受体在中枢神经系统中广泛表达,对于干细胞的迁移、轴突的生长和神经传导的调节有重要作用。例如SCI后给予XCL-10封闭抗体进行治疗可以显著降低炎症反应,增强功能的恢复、组织和神经元轴突再生。如,有研究发现,外周神经损伤后,CXCL-12(又称MIP-2)可以通过促进中枢神经系统髓鞘的生成以及神经突的生长,增强SCI后轴突再生和重建。微小RNA(Micro-RNA或mi RNA)是一类小型非编码RNA分子,可通过碱基互补配对与靶基因的3'非翻译区(3'-ntranslated region,3'-UTR)结合而进而调控编码基因的表达。大量研究表明,mi RNAs可广泛参与肿瘤形成、免疫性疾病等几乎多种疾病的病理过程。mi R-136为mi RNA家族成员之一,在以往研究中发现,mi R-136在非小细胞癌中较其他组织表达量出现上调,上调程度与肿瘤的恶性程度及是否容易发生转移密切相关。另有研究指出mi R-136可通过下调通道蛋白Smad2和Smad3抑制肺腺癌细胞的转移与侵袭,并通过下调星形胶质细胞抑制胶质瘤细胞的凋亡。A20通常也被称为TNF-α诱导蛋白3(TNFAIP3)或锌指蛋白3,可以在内皮细胞受到TNF-α刺激后产生。A20的保护作用在天然免疫、继发性免疫中均表现出明显效果,部分研究也指出A20具有抑制B细胞肿瘤的发生。另外,A20是终止激活后的NF-κB关键蛋白,并由一些受体如TNF受体、Toll样受体、核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2的等调节。敲除A20的大鼠体内IKK活性会病态增加使NF-κB信号通路不受控制,最终因多器官炎症反应衰竭以及组织损伤而死亡。作为一种调控蛋白,A20缺失也会导致TLR信号传导的异常并加重机体自身炎症反应的程度。本实验研究白介素17(IL-17)刺激大鼠脊髓星形胶质细胞产生炎性因子,以及A20蛋白的变化;沉默大鼠星形胶质细胞中mi R-136-5p基因的表达,IL-17诱导的大鼠星形胶质细胞炎症反应中A20蛋白变化。为急性脊髓损伤的临床治疗提供理论依据和新方法。目的:探讨A20炎症抑制蛋白在炎症因子IL-17诱导大鼠星形胶质细胞炎症反应中于mi R-136-5p被抑制前后的产量变化。方法:(1)体外分离以及培养大鼠星形胶质细胞;(2)使用不同浓度的IL-17(10、20、50、100、200ng/ml)对获得的大鼠星形胶质细胞刺激12h;(3)使用上一步中获知的最适浓度,刺激不同时间点(3h、6h、12h、24h和48h)的大鼠星形胶质细胞;(4)通过q PCR以及ELISA的方法分别检测IL-17刺激之后大鼠星形胶质细胞炎症因子(IL-6、TNF-α、MIP-2、MCP-1、MCP-5)的改变情况。(5)对星形胶质细胞进行最适浓度、最适时间的刺激,并通过q PCR以及WB方法分别测量其A20的m RNA以及蛋白表达水平。(6)沉默大鼠星形胶质细胞mi R-136-5p的基因表达;然后予IL-17刺激并q PCR测定mi R-136-5p基因水平表达,WB方法检测大鼠星形胶质细胞的A20蛋白表达水平。结果:实验组大鼠星形胶质细胞受IL-17刺激后,A20蛋白在6h时表达量显著减少(p<0.05),至12h时至峰值,但是与6h相比变化无统计学差异;IL-17诱导下,与空白对照组(blank)以及阴性转染组(control)比较,mi R-136-5p基因沉默组中A20的表达量显著性的增加。结论:大鼠星形胶质细胞A20的表达量相关炎症因子变化在峰值的表达量上出现了负相关性,A20炎症负调控蛋白在大鼠星形胶质细胞炎症发挥调控作用。沉默大鼠星形胶质细胞mi R-136-5p的表达之后再次进行IL-17刺激,表明mi R-136-5p与A20之间存在着

关键词： 急性冠脉综合征   动脉粥样硬化   CD4+T细胞   共刺激分子   炎症因子   围手术期心肌损伤   免疫炎症反应   CD4+CD28nullT细胞   心肌肌钙蛋白I  

摘要： 目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血CD4+T细胞分布水平的变化和临床意义。方法入选2015年7月至2016年11月于我院心血管内科住院的临床高度怀疑冠心病患者219例,所有患者均接受冠状动脉造影,依据冠脉造影结果、2014年ACC/AHA稳定性冠心病和NSTE-ACS及2013年ACCF/AHA STEMI诊治指南将其分为3组:非狭窄性冠心病组(对照组,63例)、稳定性冠心病(SCAD)组(55例)和ACS组(101例)。采用流式细胞术测定患者外周血CD4+T细胞中CD4+CD28null T细胞、CD4+CD134+T细胞及CD4+CD137+T细胞分布的变化。采用免疫比浊法测定血清C反应蛋白(CRP),ELISA法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的水平。结果(1)ACS患者外周血CD4+CD28null T细胞的分布比例显著高于对照组[(7.78±0.38)%vs(2.40±0.24)%,P<0.05]和SCAD组[(7.78±0.38)%vs(2.32±0.24)%,P<0.05],SCAD组与对照组间差异无统计学意义。(2)ACS患者的血清CRP和TNF-α水平均显著高于对照组[(11.72±0.57)mg/L vs(3.78±0.12)mg/L,P<0.05;(331.98±4.00)pg/m L vs(272.67±5.60)pg/m L,P<0.05]和SCAD组[(11.72±0.57)mg/L vs(5.04±0.22)mg/L,P<0.05;(331.98±4.00)pg/m L vs(296.84±7.67)pg/m L,P<0.05]。但是,ACS患者的血清TRAIL水平显著低于对照组[(437.41±7.84)pg/m L vs(611.43±13.11)pg/m L,P<0.05]和SCAD组[(437.41±7.84)pg/m L vs(567.65±16.01)pg/m L,P<0.05]。(3)患者外周血CD4+CD28null T细胞分布比例与血清CRP、TNF-α水平间均呈正相关(r=0.657,P<0.05;r=0.381,P<0.05),而与血清TRAIL水平间呈负相关(r=-0.467,P<0.05)。(4)ACS患者外周血CD4+CD134+T细胞分布水平高于对照组[(62.77±1.12)%vs(46.36±1.85)%,P<0.05]和SCAD组[(62.77±1.12)%vs(53.48±1.32)%,P<0.05],SCAD组患者CD4+CD134+T细胞分布水平亦高于对照组。(5)ACS患者外周血CD4+CD137+T细胞分布水平高于对照组[(22.21±0.92)%vs(14.67±1.02)%,P<0.05]和SCAD组[(22.21±0.92)%vs(14.49±0.89)%,P<0.05]。(6)ACS患者外周血CD4+CD28null T细胞比例与CD134(r=0.209,P<0.05)和CD137(r=0.241,P<0.05)共刺激分子的表达呈正相关。结论ACS患者外周血中CD4+CD28null T细胞、CD4+CD134+T细胞及CD4+CD137+T细胞的分布水平较冠脉血管正常和SCAD患者显著增多,且CD4+CD28null T细胞比例与CD134和CD137共刺激分子及血清CRP、TNF-α水平呈正相关,而与血清TRAIL水平呈负相关。目的探讨PCI患者外周血CD4+CD28nullT细胞的分布水平与PCI术后发生围手术期心肌损伤(PMI)间的关系。方法入选2015年7月至2016年11月于我院心血管内科住院的临床高度怀疑冠心病患者174例,所有患者均接受冠状动脉造影,依据冠脉造影结果、2014年ACC/AHA稳定性冠心病和NSTE-ACS诊治指南将其分为非狭窄性冠心病组(对照组,63例)和冠心病组(111例)。冠心病组患者均为首次接受PCI。根据2012年ESC/ACCF/AHA/WHF第3次全球心肌梗死定义的指南,将PCI患者分为发生PMI组(32例)和未发生PMI组(79例)。采用免疫荧光法测定血清c Tn I水平和流式细胞术测定外周血CD4+CD28null T细胞的分布比例。结果(1)冠心病组患者外周血CD4+CD28null T细胞的分布比例高于对照组[(5.30±0.40)%vs(2.40±0.24)%],差异有统计学意义(P<0.05)。(2)冠心病患者外周血CD4+CD28null T细胞分布比例与PCI术前c Tn I水平没有相关性(r=0.072,P=0.455),但与术后c Tn I水平间呈正相关(r=0.275,P=0.004)。(3)PCI术后PMI发生率为28.

关键词： 叶黄素   神经炎症   氧化应激   Akt   Nrf2  

摘要： 随着世界人口老龄化问题的日益突出,如阿尔兹海默症（Alzheimer's disease,AD）、帕金森症（Parkinson's disease,PD）等与衰老紧密相关的神经退行性疾病（Neurodegenerative disease）正在严重威胁着老年人健康。因此,研究神经退行性疾病的干预策略对于维护人类健康具有重要意义。其中膳食补充具有神经营养和保护功能的食品功能因子已经成为干预神经退行性疾病的一种新型研究方向。叶黄素（Lutein）是一种存在于深色果蔬中的含氧类胡萝卜素,是神经系统中含量最高的类胡萝卜素,对于神经系统发育和维持正常功能都具有重要意义。已有报道证明叶黄素具有良好的神经保护作用,如补充适宜剂量的叶黄素可以显著改善老年性黄斑变性和老年人认知下降,但是目前仍缺乏对叶黄素神经保护作用及分子机制的深入研究。近年来大量研究揭示了神经退行性疾病的各种发病机制,为干预神经退行性疾病提供了潜在靶点,其中神经炎症和氧化应激诱导的神经细胞损伤是神经退行性疾病发病过程中关键因素。目前叶黄素对神经炎症和氧化应激诱导的神经细胞损伤的保护作用尚未报道。因此,本研究将探索叶黄素对神经炎症和氧化应激诱导的神经细胞损伤的保护作用及分子机制,以期为叶黄素作为一种新型神经保护功能因子干预神经退行性疾病的应用奠定理论基础。研究内容具体如下:（1）叶黄素对炎症诱导的神经细胞损伤的保护作用及分子机制研究采用叶黄素预处理神经细胞来干预脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的神经细胞炎症损伤。研究表明,叶黄素可以显著改善LPS诱导的神经细胞损伤;同时叶黄素能够显著抑制LPS诱导的神经细胞中炎症因子水平,如一氧化氮（Nitric oxide,NO）,肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor,TNF-α）,白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）等;并且叶黄素能够抑制诱导型一氧化氮合酶（inducible NOS,i NOS）和环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）等炎症相关酶的表达;进一步研究表明,叶黄素通过抑制炎症相关信号通路如p38、JNK、Akt调节的炎症相关核转录因子NF-κB的核迁移,从而抑制炎症反应,这可能是叶黄素抑制LPS诱导的炎症反应的分子机制之一。（2）叶黄素通过调控Akt信号通路的神经保护作用及分子机制研究研究证明叶黄素能够时间依赖性的激活Akt信号通路,进而磷酸化天冬酰胺内肽酶（Asparagine endopeptidase,AEP）,抑制AEP激活并减少AEP诱导的Tau和α-synuclein神经毒性作用。因此激活Akt信号通路是一种重要的神经保护作用机制。鉴于叶黄素能够激活Akt信号通路,因此提示叶黄素具有通过激活Akt信号通路而抑制AEP毒性的潜在神经保护作用。（3）叶黄素改善氧化应激诱导的神经细胞损伤的分子机制研究研究表明叶黄素能够显著降低神经细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平,抑制氧化应激。进一步研究显示,在MPP+、Tau和α-synuclein诱导的氧化应激损伤神经细胞模型中,通过激活Akt信号通路能够抑制氧化应激诱导的AEP神经毒性作用,显著改善神经细胞损伤。因此激活Akt信号通路是抑制氧化应激诱导神经细胞损伤的关键分子机制。鉴于之前研究已经证明叶黄素能够激活Akt信号通路,所以提示叶黄素具有通过激活Akt信号通路而抑制氧化应激诱导的神经细胞损伤的潜在保护作用。（4）叶黄素通过Nrf2调控神经细胞氧化还原平衡的分子机制研究研究表明在损伤神经细胞中,叶黄素预处理通过激活ERK1/2引起神经细胞抗氧化系统相关核转录因子Nrf2向细胞核转移,增加神经细胞内抗氧化系统相关酶和蛋白表达,一方面促进NAD（P）H:醌氧化还原酶（NQO1）和血红素氧化酶（HO-1）等二相酶表达,另一方面上调谷胱甘肽（GSH）含量,恢复谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）活性,从而提高神经细胞内抗氧化能力,清除过量活性氧,恢复神经细胞内氧化还原平衡,抑制氧化应激损伤神经细胞。综上所述,本研究揭示叶黄素具有抑制神经炎症和氧化应激诱导的神经细胞损伤的神经保护作用,并进一步阐明了其作用的分子机制,研究表明叶黄素具有干预神经退行性疾病的巨大潜力。因此本研究为叶黄素开发成为一种新型神经保护功能因子来干预神经退行性疾病的应用奠定了理论依据。

关键词： 体外循环   全身炎症   免疫学   KP  

摘要： 术后认知功能障碍（POCD）是心肺转流术（CPB）后一种严重的并发症,可导致人格改变,记忆丧失,学习能力下降以及其他中枢神经系统功能障碍。近年来,尽管围术期脑保护的措施已不断改善,但心脏手术后认知功能障碍的发生率仍然很高（短期发生率33%83%,长期发生率20%60%）。尽管对POCD的发病已有大量的基础和临床研究,但其确切的发病机制和复杂程度并不十分清楚。许多研究表明犬尿氨酸代谢通路（KP）和认知功能是密切相关的。一些报道还指出犬尿氨酸代谢通路中的物质在生理条件下处于动态平衡状态,当一些代谢产物如犬尿酸、喹啉酸（QUIN）失衡时会影响中枢神经系统,并且对认知功能的影响较为显著。进一步研究指出炎症介质可以作用于引起疾病的KP的关键酶。心肺旁路的患者发生的严重炎症反应,会引发与认知功能的变化密切相关的代谢途径。综上所述,我们总结炎症诱导犬尿氨酸代谢（KYN）通路紊乱可能在CPB手术后POCD的发生发挥重要作用。

关键词： 衰弱   炎症状态   炎症因子   C反应蛋白   白细胞介素-6   降钙素原  

摘要： 衰弱是指老年人以年龄相关的生理系统储备功能下降为特征,从而导致机体易损性增加,以及抗应激能力减退的一种非特异性状态。其核心要素是老年人的生理储备功能下降,自我平衡被破坏,外界较小的刺激即可引起的一系列临床事件发生。衰弱不仅可以使老人的抗应激能力减退,还使老人发生失能、功能下降、住院和死亡的风险增加,还导致老年人对长期照护的需求以及医疗费用的增加。如果早期识别衰弱并给予相应的处理,可减少失能的发生、降低照护机构的入住率和降低医疗及社会的花费,衰弱前期可被逆转至健康状态,一些衰弱状态也可被逆转至衰弱前期状态,所以,认识老年衰弱机制为衰弱的早期识别及其治疗提供依据至关重要。然而,有关衰弱发生的机制并不是非常明确,研究证实以炎症因子水平增高为特点的炎症状态与衰弱的病理生理机制密切相关,这种炎症状态直接或间接地对老年人的各组织各系统产生危害,其中,C反应蛋白(CRP)及白细胞介素-6(IL-6)是研究较多的与衰弱相关的两种炎症因子,大量研究证实衰弱的发生与IL-6及CRP的升高有关。然而,IL-6及CRP不是衰弱的特异性炎症因子,它们还在发生感染、心血管疾病、代谢紊乱、共病、肿瘤、肝功能下降等情况时发生改变,尤其是感染时,会显著影响血清中IL-6及CRP的水平。血清降钙素原(PCT)由于在细菌感染时较IL-6及CRP有更高的特异性及灵敏度,是临床医生判断患者是否感染、指导抗生素使用疗程、判断患者预后的一种重要的感染标记物,衰弱老人更易发生感染,然而目前还没有有关PCT及衰弱相关性的研究。目的本研究首次探索住院老年人血清PCT水平是否与衰弱存在相关性,考虑到PCT为感染性疾病常用生物学标记物,将住院老人分为感染组与非感染组进一步进行亚组分析,探讨在不同疾病类型情况下PCT与衰弱之间的关系。同时也验证血清CRP及IL-6水平是否均与衰弱相关,为下一步干预性研究提供依据。材料与方法研究纳入四川大学华西医院老年医学中心2016-2017年的住院患者435名,调查人员对每位患者采取面对面的问卷调查,完成衰弱评估,根据frail量表的得分将老人分为非衰弱(包括健壮及衰弱前期)及衰弱组。同时收集四川大学华西医院住院患者信息系统(简称为his系统)的相关信息。内容包括住院号、一般情况、住院时间、1月前是否入院、入院1周前是否使用抗炎药物、入院时呼吸系统症状及肺部体征、胸部ct或x光检查、血液检查、出院诊断、住院期间抗生素使用情况、死亡等。il-6及pct均采用电化学发光免疫分析法(eclia),crp水平测量采用颗粒增强免疫比浊检测法,所有炎症因子的测量均由四川大学华西医院医学检验中心完成。最后整理数据,对3种炎症因子与衰弱之间进行多因素回归分析。结果本研究共纳入435名住院患者,其中衰弱组160例,非衰弱组275例,衰弱发生率达36.78%;衰弱组3种血清炎症因子(crp、il-6及pct)均较非衰弱组高,差异有统计学意义(p=0.001;p<0.001;<0.001);进一步的多因素回归分析显示,仅pct水平与衰弱存在相关性,其结果为:or=2.678;95%ci:1.347-5.323;p=0.005。进一步进行感染组与非感染组亚组分析后显示:感染组中3种炎症因子校正可能因素后,与衰弱没有明显相关性;非感染组患者il-6及pct水平与衰弱有相关性,其结果为il-6:or=2.223;95%ci:1.141-4.332;p=0.019;pct:or=6.035;95%ci:2.039-17.866;p=0.001,校正社会人口学资料及生活方式特点后,il-6及pct水平与衰弱均仍具有相关性(il-6:or=2.223;95%ci:1.063-4.650;p=0.034;pct:or=6.208;95%ci:1.993-19.336;p=0.002);然而校正血液检查结果后,crp及il-6均与衰弱无相关性,pct仍与衰弱具有相关性(or=5.244;95%ci:1.622-16.947;p=0.006)。研究还发现社区获得性肺炎组炎症因子水平高于非感染组,无论是否感染,发生院内死亡的患者入院当时pct水平较高,且pct水平对预测是否发生院内死亡有一定的价值(auc0.719,95%ci为0.642-0.795)。结论住院患者衰弱患病率较高;在因社区获得性肺炎(cap)入院的住院患者中,crp、il-6、pct水平尚不能用于判断cap患者是否存在衰弱,在因非感染性疾病入院的住院患者中,血清PCT水平较CRP及IL-6水平对衰弱的判断更有价值;感染患者炎症因子水平较非感染患者的炎症因子水平高;无论是否感染,发生院内死亡的患者入院当时PCT水平较高,且PCT水平对发生院内死亡有一定的预测价值。