关键词： 颅内动脉瘤   Hunt-Hess分级   全身免疫炎症指数   蛛网膜下腔出血  

摘要： 背景:颅内动脉瘤(intracranial aneurysm,IA)是颅内动脉由于各种原因导致血管壁结构发生改变而逐渐扩张膨出形成的病理性改变,动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aneurysmal subarachnoid hemorrhage,aSAH)是由于IA破裂后血液流入蛛网膜下腔而引发的疾病。目前,IA的发病机制尚未完全明确,但大多数学者均认为炎症反应在IA发生发展的过程中具有重要的作用。全身免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)作为一种新型的反应机体炎症状态的指数,将中性粒细胞、血小板和淋巴细胞三种临床上易于获取的指标结合在一起,成为近年来探究的热点。本文以临床诊断为IA的患者为研究对象,使用Hunt-Hess分级初步评判患者病情,并计算出SII。探讨SII是否和aSAH患者Hunt-Hess分级相关,从而进一步评估SII联合Hunt-Hess分级对IA临床状态以及aSAH病情严重程度的判断价值。目的:统计并计算IA患者外周血SII,分析SII与Hunt-Hess分级之间的相关性,从而进一步评估SII联合Hunt-Hess分级对IA临床状态以及aSAH病情严重程度的判断价值。方法:收集并分析于2021年1月-2021年12月期间于吉林大学第一医院神经血管病外科确诊为IA的18周岁及其以上的患者的各项资料。根据纳入标准和排除标准,共纳入187例患者进行分析,IA患者病情严重程度使用Hunt-Hess分级进行初步评判,并根据IA破裂与否将纳入患者分为aSAH组(n=164)和未破裂IA组(n=23)。患者入院2小时内抽取静脉血检测血常规,应用中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值以及血小板绝对值计算出SII。使用SPSS24.0软件进行统计学分析。两组组间数据差异采用非参数检验进行分析,中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值以及血小板绝对值与Hunt-Hess分级的相关性,以及SII与Hunt-Hess分级的相关性采用Spearman相关分析进行分析。结果:通过分析发现,未破裂IA组与aSAH组基本资料在统计学上无明显的差异。比较两组中性粒细胞、淋巴细胞与血小板绝对值可发现,与未破裂IA组相比,aSAH组的中性粒细胞绝对值以及血小板绝对值明显升高[3.63(3.15,4,18)×10～9/L Vs.8.50(4.80,11.08)×10～9/L,P=0.000/201.52(158.00,267.00)×10～9/L Vs.228.61(194.00,260.75)×10～9/L,P<0.05],淋巴细胞绝对值明显降低[2.01(1.62,2.15)×10～9/L Vs.1.47(0.85,1.91)×10～9/L,P<0.05]。中性粒细胞及血小板绝对值与Hunt-Hess分级为显著的正性相关(r=0.581,P=0.000/r=0.170,P<0.05),淋巴细胞绝对值与Hunt-Hess分级为显著的负性相关(r=-0.230,P<0.05)。与Hunt-Hess〇级相比较,Hunt-HessⅠ-Ⅴ级患者的SII均显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05);Hunt-HessⅠ级与Ⅱ级患者之间的SII无统计学上的差异(P=0.91),与Ⅰ级患者的SII相比,Ⅲ-Ⅴ级患者的SII显著增高(P<0.05);与Hunt-HessⅡ级相比较,Hunt-HessⅢ-Ⅴ级患者的SII均明显增高(P<0.05);与Hunt-HessⅢ级相比较,Hunt-HessⅣ-Ⅴ级患者的SII均明显增高(P<0.05);与Hunt-HessⅣ级相比,Hunt-HessⅤ级患者的SII明显增高(P<0.05)。通过对IA患者SII和Hunt-Hess分级进行相关性分析发现,SII与Hunt-Hess分级具有正性相关的关系(r=0.420,P=0.000)。结论:(1)与未破裂IA组相比,aSAH组患者的SII显著增加,提示SII可能与IA的临床状态具有显著的相关性。(2)中性粒细胞绝对值、血小板绝对值与IA患者Hunt-Hess分级呈正性相关,淋巴细胞绝对值与IA患者Hunt-Hess分级呈负性相关。提示中性粒细胞绝对值、血小板绝对值及淋巴细胞绝对值均可用来预测IA患者病情的严重程度。(3)SII和IA患者的Hunt-Hess分级呈正性相关,使用Hunt-Hess分级联合SII评估IA患者病情可能更加准确。

关键词： 高通量血液透析   常规血液透析   终末期肾病   心功能   微炎症  

摘要： 目的：探讨终末期肾病患者采取高通量血液透析治疗对其心功能、肾功能、微炎症及营养状态的影响。方法：选取本院2020年6月至2021年11月收诊的66例终末期肾病患者为研究对象，根据红白小球抽签的方法分为观察组与对照组，各33例。对照组患者采取常规血液透析治疗，观察组患者实施高通量血液透析治疗，比较两组患者治疗前后肾功能指标、心肌损伤标志物测定值、微炎症状态及营养状态变化。结果：治疗后观察组患者血肌酐、尿素氮水平低于对照组，内生肌酐清除率高于对照组，组间比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗后观察组患者心肌损伤标志物测定值均低于对照组，组间比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗后观察组患者微炎症测定指标均低于对照组，组间比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗后观察组患者营养状态指标均高于对照组，组间比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：终末期肾病患者采取高通量血液透析治疗，能够有效改善其肾功能，减少心肌损伤及微炎症，同时可保障营养状态，倡导运用推广。

关键词： 肥胖   痰湿   温胆汤   细胞自噬   炎症  

摘要： 【目的】从理论的角度探讨细胞自噬与肥胖炎症状态之间的内在机制,阐明肥胖发生的关键病机,探索细胞自噬与痰湿困脾的关联,对调控细胞自噬作用于肥胖痰湿证炎症状态的可能机制进行探讨;并通过实验研究观察温胆汤对高脂饮食诱导的肥胖痰湿证大鼠肾周脂肪组织的炎症细胞因子和自噬活性标志物表达的影响,探讨温胆汤干预肥胖痰湿证炎症状态与细胞自噬的内在关联,借以从细胞自噬的角度来阐明温胆汤干预肥胖痰湿证的科学内涵。【方法】1理论研究通过中国知网（CNKI）、中国生物医学（Sino Med）、万方（Wanfang Database）、美国国家生物技术信息中心（NBCI）等文献数据库平台,从细胞自噬的角度对肥胖痰湿证炎症状态形成机制的中西医相关文献进行检索、整理和分析。一是以现代医学为基础,明确细胞自噬与肥胖炎症状态的内在关联;二是以中医文献为基础,阐释痰湿困脾是肥胖发生的关键病机;三是从中医痰湿困脾与现代医学细胞自噬对肥胖炎症状态影响的比较,明确通过调控细胞自噬是干预肥胖痰湿证炎症状态的重要途径。2实验研究（1）高脂饮食造模:将100只雄性SD大鼠随机分为模型制作组（简称造模组）70只和正常对照组30只,造模组用高脂饮食喂养,正常对照组用基础饲料喂养,连续6周,参照相关文献建立肥胖大鼠痰湿证模型。（2）温胆汤干预:成功建立肥胖痰湿证模型后,根据肥胖模型标准,按体质量排序,遴选出16只大鼠,按照随机分配原则,将其随机分成2组,分别为温胆汤干预组（简称药物组）和模型对照组（简称模型组）,并将前期正常对照组大鼠设为空白组,每组8只,均采用基础饲料喂养。药物组按剂量15 g·kg-1灌胃,模型组和空白组均采用等量蒸馏水进行灌胃,1次/天,自由饮水,干预时间为6周。（3）样本取材及指标检测:温胆汤干预完成后,对大鼠进行样本取材,将大鼠固定在鼠夹板上,逐层开腹,分离出腹主动脉,采用5 m L含EDTA采血管取血（约3 m L）,放置于4℃的环境下,待提取上液清后用于检测血脂水平。取3组大鼠的肾周脂肪组织,剪成米粒大小后置于1.5 m L离心管,放置在-20℃环境下保存,分别用于后续提取检测促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-β）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达水平,和自噬活性标志物B细胞淋巴瘤2结合蛋白-1（Beclin-1）、微管相关蛋白轻链（LC3）的信使核糖核酸（m RNA）与蛋白表达水平。另在同一部位取3组大鼠的肾周脂肪组织,剪碎成米粒大小,放置在电镜专用戊二醛固定液中保存,用于后续透射电镜观察脂肪细胞超微结构与自噬状态变化。然后分别计算出大鼠的肥胖率和Lee’s指数（肥胖指数）,采用全自动生化分析仪检测大鼠血清总胆固醇（TG）、甘油三酯（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠肾周脂肪组织促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-β和MCP-1的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）方法检测肾周脂肪组织自噬基因Beclin-1、LC3m RNA表达水平;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾周脂肪组织自噬基因Beclin-1、LC3蛋白表达;采用透射电镜观察肾周脂肪细胞超微结构与自噬状态的变化情况。（4）数据分析及统计:采用SPSS 21.00软件对采集到和整理好的相关数据进行统计分析。【结果】1理论研究（1）肥胖是脂质代谢异常诱发的慢性炎症状态,细胞自噬可以调控脂质代谢异常和炎症的发展,而细胞自噬异常可加剧肥胖慢性炎症状态的发展,故而认为细胞自噬在肥胖脂肪组织炎症状态中发挥着重要作用。（2）肥胖主要是痰湿困脾作用的结果,生理上细胞自噬与中医脾胃密切关联,病理上细胞自噬异常与痰湿困脾机制相似,故而提出肥胖痰湿证的形成与细胞自噬异常有关。2实验研究（1）高脂饮食造模结果:肥胖痰湿证大鼠模型在高脂饮食的喂养下成功建立,造模组大鼠肥胖率为23.36%（20%以上）,Lee's指数也显著升高,两组之间的体重和Lee's指数的比较均具有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。（2）温胆汤干预结果:与模型组相比较,药物组的大鼠肥胖率下降十分明显,体重和Lee's指数均下降明显（P<0.01或P<0.05）,血TC、TG、LDL-C水平也明显降低（P<0.01）,HDL-C水平明显增高（P<0.01）,肾周脂肪组织促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1的表达水平显著下降（P<0.01）,肾周脂肪细胞自噬基因Beclin-1、LC3的m RNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.01）,自噬体减少;与空白组相比较,模型组的大鼠体重显著升高（P<0.01）,血TC、

关键词： 脑出血   免疫炎症反应   西尼莫德(Siponimod)   免疫调节   脑损伤程度   神经功能  

摘要： 背景与目的 脑出血（Intracerebral hemorrhage,ICH）作为全球第二大卒中类型,具有高致残率与高死亡率的特点。免疫炎症反应在急性ICH后的继发性脑损伤过程中起着至关重要的作用。近年来,免疫炎症反应相关分子靶点的调控在脑卒中的治疗中得到了越来越多的关注,且鞘氨醇1-磷酸受体（Sphingosine 1-phosphate receptor,S1PR）调节剂的免疫调节作用被认为是一种很有前景的卒中治疗策略。然而,S1PR调节剂在脑出血治疗中的详细机制和潜在的转化价值仍有待进一步探索。本研究旨在研究新一代半衰期短,安全性更好的选择性S1PR1/5调节剂Siponimod（BAF-312）对急性脑出血小鼠出血脑部的细胞和分子免疫炎症反应、脑损伤严重程度及远期神经功能的影响,拟为减轻ICH后继发性损伤的治疗提供新的思路与理论支持。 方法 将92只10-12周龄、体重约22-26g的无特定病原体（SPF）级雄性C57BL/6小鼠依照随机数字表法随机分成以下4组:假手术+溶剂对照组（Sham+Vehicle组）、假手术+Siponimod治疗组（Sham+Siponimod组）、脑出血+溶剂对照组（ICH+Vehicle组）与脑出血+Siponimod治疗组（ICH+Siponimod组）。Siponimod治疗组于术后30min、24h、48h给予Siponimod 1mg/kg腹腔注射,溶剂对照组于术后相同时间点给予等体积的0.9%生理盐水和2.5%DMSO腹腔注射。脑出血术后36h通过Western blot检测各组小鼠血肿周围脑组织Th1型炎症因子白介素-1β（Interleukin 1β,IL-1β）、干扰素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）、受激活调节正常T细胞表达和分泌因子（Regulated upon activation,normal T cells expressed and secreted,RANTES）及淋巴细胞趋化因子（Chemokine ligand 1 of the X-C motif,XCL1）和高迁移率族蛋白-1（High mobility group box1 protein,HMGB1）的相对表达水平;术后72h通过LFB/CV染色评估脑出血小鼠急性期脑损伤体积和脑肿胀的严重程度;术后72h通过免疫荧光检测各组小鼠出血急性期血肿周围中性粒细胞、T淋巴细胞与NK细胞的浸润聚集情况,以及小胶质细胞/巨噬细胞、星形胶质细胞、T淋巴细胞与其他免疫细胞的活化情况;术后72h通过干湿重法测量脑出血小鼠的脑组织含水量;术后28d通过LFB/CV染色评估脑出血小鼠远期脑白质损伤、残余病灶体积及脑萎缩情况;术后1、3、7、14、28d记录各组小鼠的肛温和体重变化并通过改良的NDS评分和转角实验评估各组小鼠的行为学改变。 结果 ***显著降低了脑出血急性期的脑损伤程度与脑组织含水量,但对脑肿胀程度无影响。与ICH+Vehicle组相比,脑出血后72h ICH+Siponimod组小鼠的脑损伤体积、同侧脑组织含水量显著降低（均有P<0.05）,但两组小鼠的脑肿胀程度的比较无统计学意义（P>0.05）。 ***抑制了脑出血小鼠血肿周围中性粒细胞、淋巴细胞的浸润和神经元的变性程度,降低了活化的淋巴细胞的数量,但对自然杀伤细胞、小胶质细胞/巨噬细胞、星形胶质细胞及CD3-免疫细胞的活化没有影响。与ICH+Vehicle组相比,脑出血后72 h ICH+Siponimod组小鼠血肿周围的中性粒细胞、淋巴细胞、FJB阳性细胞及活化的淋巴细胞的计数显著降低（均有P<0.05）,但两组小鼠血肿周围的自然杀伤细胞、小胶质细胞/巨噬细胞、星形胶质细胞及CD3-免疫细胞的活化数量的比较无统计学意义（均有P>0.05）。 ***显著降低了脑出血急性期Th1型炎症因子的表达。脑出血术后36h,ICH+Siponimod组小鼠血肿周围Th1型炎症因子IFN-γ、XCL1及IL-1β的表达较ICH+Vehicle组明显降低,差异有统计学意义（均有P<0.05）;但两组急性脑出血小鼠血肿周围HMGB1与RANTES的表达水平无显著差异（均有P>0.05）。 ***降低了脑出血小鼠的脑白质损伤、残余病灶体积和脑萎缩程度。与ICH+Vehicle组相比,脑出血术后28d ICH+Siponimod组小鼠脑部的脑白质损伤、残余病灶体积和脑萎缩程度显著减轻（均有P<0.05）。 ***改善了脑出血小鼠的远期神经功能。脑出血后,ICH+Vehicle组和ICH+Siponimod组小鼠均出现不同程度的神经功能缺损症状。与ICH+Vehicle组相比,脑

关键词： 新生儿Fc受体(FcRn)   BCG   YBX1   细胞自噬   炎症损伤  

摘要： 背景:结核病(Tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,***)感染引起的传染性疾病。作为***的宿主细胞和靶细胞,巨噬细胞被感染后会发生自噬和炎性反应等生物学过程。其中炎性反应有助于机体免疫机制的激活,而过度的炎性反应则会造成细胞和组织损伤;同时,巨噬细胞通过自噬能杀灭入侵的结核分枝杆菌,在二者的相互作用过程中,***也会通过多种机制抑制自噬的发生从而逃避杀伤。***与宿主的相互作用受到多种因子调控,其机制十分复杂。新生儿Fc受体(The Neonatal Fc receptor,FcRn)作为FcγRs家族的一员,在巨噬细胞、上皮细胞、内皮细胞和树突细胞等多种细胞中均有表达,其主要功能是将母体中的IgG传递给胎儿。近年来研究发现,FcRn能够通过多种机制调控免疫进程,在人类近端小管(HK-2)细胞中,FcRn会通过与自噬相关蛋白Rab7相互作用影响FcRn在细胞中的循环,进而调控细胞自噬的发生。然而在结核分枝杆菌感染巨噬细胞过程中,FcRn对巨噬细胞自噬的调控作用及其机制尚不明晰。基于以上背景,本研究开展了如下研究内容:目的与方法:为了探究FcRn对BCG诱导的小鼠肺脏炎症损伤和细胞自噬的调控作用及分子机制,利用了以下试验方法:1.收集健康人群和结核病患者外周血,并构建结核分枝杆菌疫苗株BCG(Bacillus Calmette-Guérin)气道灌注C57BL/6J小鼠感染模型,检测***感染前后结核病患者外周血、小鼠肺组织和血清中FcRn的表达差异;进而构建FcRn--小鼠并利用BCG感染,通过HE染色、细胞学检测方法、ELISA和平板涂布等方法评价小鼠肺组织的炎性损伤、免疫细胞分布、炎性因子表达和菌载量变化等情况,从体内水平阐明FcRn对BCG诱导的小鼠肺损伤的调控作用。2.构建RAW264.7和BMDM巨噬细胞BCG感染模型,并设计合成相关小干扰RNA。利用qRT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光等技术探究FcRn对BCG诱导巨噬细胞自噬的影响,从体外水平探讨FcRn对BCG诱导巨噬细胞自噬的调控作用;进而利用FcRn--小鼠,结合BCG感染,通过免疫组化、透射电镜和Western blot等技术,从体内水平阐明FcRn对小鼠肺组织自噬的调控作用。3.利用雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)来确定FcRn对细胞自噬的调控是否依赖于mTOR途径;通过蛋白质谱技术筛选BCG感染后巨噬细胞中可能与FcRn互作的靶蛋白,进而利用免疫共沉淀和免疫荧光等技术明确二者的相互作用关系;随后设计FcRn互作位点突变质粒,利用免疫共沉淀、免疫荧光和Western blot等技术明确FcRn与靶蛋白的相互作用位点和免疫调控功能,从而阐明FcRn调控BCG诱导巨噬细胞自噬的分子机制。结果:1.与健康人相比,结核病患者外周血FcRn表达水平显著升高(p<0.01);在小鼠模型中的研究发现,BCG感染可显著上调C57BL/6J小鼠肺组织和血清中FcRn的表达(p<0.01),且呈时间依赖性;敲除FcRn后,BCG感染的小鼠肺组织出现肿大、炎性浸润、组织液渗出等现像,肺部菌载量增多,血清中促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的表达显著上调(p<0.01),而抑炎因子IL-4、IL-10和TGF-β的表达显著下调(p<0.01);2.体外结果表明:BCG感染后,FcRn在RAW264.7和BMDM巨噬细胞中高表达;BCG感染后敲低/敲除FcRn能够降低RAW264.7/BMDM细胞中自噬相关蛋白ULK1、Atg5、Atg7、Atg12和LC3Ⅱ的表达,抑制细胞中自噬体和自噬溶酶体的积累;体内结果表明:敲除FcRn会抑制BCG感染的C57BL/6J小鼠肺组织中自噬体和自噬溶酶体的积累,降低自噬相关因子ULK1、Beclin1、Atg5、Atg7、Atg12和LC3Ⅱ的表达;3.在BCG感染巨噬细胞过程中,RAPA处理后,敲减FcRn无法降低自噬相关因子ULK1、Atg12、Beclin1和LC3的表达;4.通过IP技术富集BCG感染后RAW264.7细胞中FcRn及其互作蛋白,经蛋白质谱分析与文献调研,确定了YBX1为后续研究对象;随后本研究利用免疫共沉淀和免疫荧光技术,从内源(RAW264.7细胞)和外源(293T细胞)两个水平,明确了FcRn与YBX1存在相互作用关系,且FcRn与YBX1的相互作用会促进YBX1的入核表达;随后构建FcRn的胞质尾区敲除质粒FcRnCT-,免疫共沉淀及免疫荧光试验表明,FcRnCT-未能与YBX1发生互作,且抑制了YBX1从细胞质向细胞核的转位。***感染后,YBX1在RAW264.7细胞中高表达;敲减YBX1会促

关键词： 托伐普坦   脂多糖   特异质药物型肝损伤   胆汁淤积   药物代谢  

摘要： 目的:近年来,有关托伐普坦(TVP)肝毒性等不良反应事件引起临床的广泛关注,但确切发病机制尚不明确。因此,本研究分别从动物和细胞水平上探讨炎症状态下TLR4介导托伐普坦致特异质药物型肝损伤的作用以及肝损伤机制,为同类药物诱导肝毒性的机制提供研究思路和理论依据。 方法:(1)构建脂多糖(LPS)与托伐普坦共处理小鼠模型,考察造模后血浆生化指标和肝组织病理切片的变化,并通过UPLC-MS/MS方法检测肝脏、胆汁和血浆中17种胆汁酸含量的变化以及考察炎症对小鼠体内托伐普坦药动学和组织分布的影响。(2)收集小鼠给药后的血浆、尿液和粪便,考察炎症状态对小鼠体内托伐普坦主要代谢途径和代谢产物的影响;运用网络药理学筛选出托伐普坦及其代谢物与药物性肝损伤(DILI)的核心靶点并进行通路富集分析,预测托伐普坦致特异质药物型肝损伤的潜在作用机制。(3)通过CCK8法和q PCR法筛选出最佳造模浓度,构建LPSTVP共处理小鼠原代肝细胞模型,通过ALT/AST试验进行模型验证;进一步通过q PCR和Western blot法检测小鼠原代肝细胞和肝组织中炎症调控通路、托伐普坦主要代谢酶以及胆汁酸调控通路中相关基因和蛋白表达水平,以研究脂多糖诱导炎症状态下TLR4介导托伐普坦致特异质药物型肝损伤的潜在作用机制。 结果:(1)体内研究通过行为学观察、生化指标及病理切片分析发现,TLR4敲除型(TLR4-KO)小鼠相对于野生型(WT)小鼠,LPS+TVP组显著减轻了各生化指标的升高以及对肝细胞未造成明显损伤;胆汁酸检测及药代动力学研究发现,敲除TLR4不仅可显著缓解脂多糖诱导的炎症状态下托伐普坦引起的肝内胆汁酸浓度的升高及胆汁和血浆中胆汁酸浓度的降低,而且能显著提高小鼠体内托伐普坦的血药浓度以及降低各组织特别是肝组织中托伐普坦的浓度。(2)首次从小鼠口服托伐普坦后的血浆、尿液和粪便样品中鉴定出47种代谢物,其中血浆26种,尿液36种、粪便39种,主要包括羟基化、羧化、水解、葡萄糖醛酸化、乙酰化、甲基化等代谢反应。而炎症对托伐普坦在小鼠体内的代谢有明显抑制作用,减少了血浆、尿液和粪便中代谢物的种类;运用网络药理学预测发现托伐普坦可能通过调控细胞生长、胆汁分泌、炎症反应以及相关免疫反应来诱导肝损伤。(3)本研究筛选出LPS(100 ng/m L)联合TVP(6.25、12.5、25μM)构建小鼠原代肝细胞肝损伤模型,敲除TLR4可减轻联用组肝细胞培养上清液中ALT和AST指标的升高。对其机制进一步研究发现,脂多糖与托伐普坦联用增加了原代肝细胞和肝组织中炎症级联通路(My D88、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6)的表达,此外还抑制了托伐普坦主要代谢酶Cyp3a11、胆汁酸主要转运体Ntcp、Bsep、Mrp2、核受体Fxr以及提高了胆汁酸合成酶Cyp7a1的基因和蛋白水平,而敲除TLR4可减轻这些基因和蛋白水平的变化。 结论:本文通过构建LPS-TVP共处理体内外模型发现,在脂多糖诱导的炎症状态下,托伐普坦可通过TLR4信号级联通路激活下游NF-κB释放炎症因子,影响FXR介导的胆汁酸合成与转运进而导致肝损伤。而敲除TLR4可显著性减轻肝内胆汁酸的淤积,对托伐普坦诱导的肝损伤起到一定的保护作用。

关键词： Nesfatin-1   肥胖   炎症反应   miRNA  

摘要： 目的:研究发现Nesfatin-1能够改善肥胖,在此过程中除了抑食和改善脂代谢外其他作用机制还少有研究。研究发现肥胖实质上是一种慢性炎症反应状态,而这种状态是引发各种代谢综合征的主要原因。为了探索Nesfatin-1对肥胖大鼠慢性炎症状态的作用及其机理,本研究通过建立肥胖大鼠模型,观察Nesfatin-1调整大鼠体内炎症因子的水平,并分析Nesfatin-1对炎症相关miRNA表达水平的影响,探究Nesfatin-1在肥胖炎症过程中的作用机制。方法:建立肥胖大鼠模型后,将大鼠随机分为5组:空白对照组、生理盐水组、Nesfatin-1低剂量组、Nesfatin-1中剂量组和Nesfatin-1高剂量组。各组大鼠每日通过尾静脉注射生理盐水和不同浓度的Nesfatin-1 5周,在此期间对大鼠的体重和摄食量进行记录。之后取大鼠肝脏和脂肪组织,称取肝脏重量并做病理切片观察大鼠肝脏和脂肪组织形态变化。用Elisa法检测大鼠血清中TNF-α和IL-10的表达水平,对Nesfatin-1改善肥胖大鼠炎症反应进行评估。用荧光定量PCR法(q PCR)检测大鼠肝脏中与炎症相关微核糖核酸(Micro-ribonucleacid,miRNAs,miR)的表达情况,分析Nesfatin-1对与改善大鼠炎症反应的miRNA机制。结果:(1)Nesfatin-1能够一定程度的改善肥胖大鼠的体重、摄食量和肝脏重量。根据大鼠体重增长的结果可发现,Nesfatin-1高剂量组效果更好,与生理盐水组相比具有显著差异(p<0.05);根据大鼠摄食量结果得出,Nesfatin-1低剂量组在抑制摄食方面要更好;根据肝脏重量的比较可得,Nesfatin-1三个剂量组与生理盐水组不具有显著性差异。(2)HE染色结果可以发现,与生理盐水组相比,Nesfatin-1三个剂量组均可改善脂肪组织肿胀的情况以及降低肝脏组织中的脂肪变性。(3)Elisa结果显示,与生理盐水组相比,Nesfatin-1三个剂量组都能降低大鼠血清TNF-α的表达以及提升IL-10的表达且具有显著差异性(p<0.05),但三个剂量组之间没有显著差异性。(4)q PCR的结果可以发现,与生理盐水组相比,Nesfatin-1三个剂量组都能降低miR155的表达量和升高miR146a的表达量,且具有显著差异性(p<0.05)。结论:(1)Nesfatin-1能够改善抑制肥胖大鼠的摄食量,减轻体重和肝脏重量。(2)Nesfatin-1能够缓解肥胖大鼠体内的炎症反应。(3)Nesfatin-1能够通过升高miR-155和降低mi-146a的表达水平,来调控炎症情况。由此说明,Nesfatin-1在肥胖状态的炎症过程中发挥了一定的调节作用,将在治疗代谢性疾病方面具有潜在应用。

关键词： 蒙古族   汉族   胃癌   炎症   住院时间  

摘要： 目的:探讨蒙古族与汉族胃癌患者围手术期全身炎症反应及早期恢复的差异,以及影响其术后住院时间的相关因素。方法:回顾性收集2017年1月至2021年1月在赤峰市医院肿瘤外科经手术病理诊断为进展期胃癌患者,均行胃癌D2切除术治疗,根据入排标准筛选出入组患者的病例资料120例。观察指标:（1）性别、年龄、体重指数（Body Mass Index,BMI）、吸烟史、饮酒史;（2）术后病理TNM（Tumor Node Metastasis classification）分期、分化程度（高/中/低）、手术方式及术后并发症;（3）术前（Preoperative,Pre）、术后第1天（Postoperative day 1,POD1）、术后第3天（Postoperative day 3,POD3）及术后第7天（Postoperative day 7,POD7）的中性粒细胞-淋巴细胞比率（Neutrophil to Lymphocyte Ratio,NLR）、血小板-淋巴细胞比率（Platelet to Lymphocyte Ratio,PLR）、淋巴细胞-单核巨噬细胞比率（lymphocyte to monocyte ratio,LMR）及血小板计数×中性粒细胞计数/淋巴细胞计数（systemic immune inflammation index,SII）;（4）术后第1天（POD1）、第2天（Postoperative day2,POD2）、第3天（POD3）疼痛视觉模拟评分（Visual Analogue Scale,VAS评分）及术后住院时间。结果:（1）一般资料结果对比中,蒙古族组与汉族组的吸烟史及饮酒史存在显著差异（χ2=4.628,P=0.031;χ2=5.790,P=0.016）;蒙古族组与汉族组相比具有较高的体重指数（BMI）(26.14±5.80 vs 23.71±5.25,t=-2.402,P=0.018);蒙古族患者术后第1、2、3天的疼痛视觉模拟评分（VAS评分）均较汉族组低（3.74±1.33 vs 4.30±1.24,t=2.388,P=0.019;3.33±1.03 vs 3.92±1.14,t=2.950,P=0.004;2.44±0.86 vs 2.98±1.05,t=3.046,P=0.003）;蒙古族组患者较汉族组住院时间较短（13.64±1.75 vs 15.58±5.40,t=2.732,P=0.008）;两组在性别、年龄、TNM分期、分化程度、手术方式及术后总并发症对比未见统计学差异（P>0.05）。（2）蒙古族组与汉族组的各项炎性反应相关指标的对比结果:两组患者术前NLR、PLR、LMR及SII对比无明显差异（P>0.05）,而POD1及POD3的NLR、PLR、LMR及SII对比均存在统计学差异（P<0.05）,术后第7天NLR及SII均存在统计学差异（9.07±3.01 vs 10.33±2.37,t=2.506,P=0.014;742.76±209.40 vs 816.65±171.77,t=2.124,P=0.036）,而PLR及LMR对比无差异（P>0.05）。（3）两组患者住院时间结果存在显著差异,为进一步验证两组患者存在差异的相关变量与住院时间的关系,对所有患者一般资料包括民族、体重指数（BMI）、吸烟史、饮酒史及术后3天的VAS评分与术后住院时间,分别纳入Logistic多因素回归分析后结果显示:民族、吸烟史及术后第3天的疼痛评分是术后住院时间延长的独立危险因素（P<0.05）,蒙古族患者相对于汉族患者住院时间延长的风险明显减少（OR=0.367,95%CI:0.142～0.950）,而吸烟患者相对于不吸烟患者,住院时间延长的风险显著增加（OR=2.500,95%CI:1.003～6.228）,患者术后第3天的VAS评分每增加一个单位,住院时间延长的风险增加1.775倍（OR=1.775,95%CI:1.114～2.827）。（4）患者住院时间与术后NLR、PLR、LMR及SII的单因素分析结果显示,正常出院及延迟出院两组患者除POD1-PLR、POD7-PLR、POD7-LMR及POD7-SII外其他变量均具有统计学意义（P<0.05）。将所有单因素分析中具有统计学差异的炎性反应标记物纳入logistic多因素回归分析,结果显示术后第3天NLR、LMR、SII均具有统计学意义（OR=1.627,95%CI:1.079～2.454;OR=0.035,95%CI:0.005～0.255;OR=1.009,95%CI:1.003～1.014）,其中术后第3天NLR的风险系数最高,POD3-NLR每升高1个单位,住院时间延长的风险增加1.627倍。进一步绘制POD3-NLR的ROC曲线,

关键词： 抑郁障碍   免疫炎症   应对方式   社会支持   述情障碍  

摘要： 目的:1.探讨抑郁障碍与心理社会因素及免疫炎症反应间的关系;2.探索社会心理因素与免疫炎症的关系。方法:本次研究采用病例对照研究,严格按照下述入组标准、排除标准筛选病例:抑郁障碍组:共纳入30例未经治疗的抑郁障碍患者,24项汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分≥8。所有入组患者均于清晨空腹时抽取肘静脉血,使用流式细胞技术检测CD4+T淋巴细胞中Th17、Treg细胞亚群的绝对细胞计数和百分比,使用流式微球捕获芯片技术(CBA)检测血清细胞因子水平,同时收集患者的一般人口学资料、简易应对方式问卷(SCSQ)、社会支持评定量表(SSRS)、多伦多述情障碍量表(TAS-20)。健康对照组:与抑郁障碍组同时段纳入30例健康人,在性别、年龄、职业、文化程度上与抑郁障碍组相匹配,HAMD评分<8分,无严重躯体疾病,两系三代无精神疾病家族史,用同样的方法检测血清中Th17、Treg细胞亚群的绝对细胞计数和百分比、细胞因子,与抑郁障碍组相对照。结果:1.量表的比较:抑郁障碍患者在SCSQ总分和积极应对平均分维度,轻度组高于中度组与重度组,差异有统计学意义(P<0.05)。在对支持的利用度维度,轻度组高于重度组,差异有统计学意义。在F1(DIF)维度和F2(DDF)维度,中度组得分小于重度组,差异有统计学意义。HAMD评分与SCSQ总分、对支持的利用度因子分呈显著负相关(r=-0.453,-0.520,P<0.05),与TAS-20中F2因子分(DDF)呈显著正相关(r=0.428,P<0.05)。***17细胞、Treg细胞水平及Th17/Treg比值的比较及细胞因子比较:相较于健康对照组,抑郁障碍组在Th17细胞百分比、Treg细胞绝对计数和百分比、Th17/Treg比值方面存在差异,差异有统计学意义(P<0.05),其中HAMD评分与Th17细胞绝对计数及百分比、Th17/Treg比值呈正相关(r=0.397,0.305,0.479,P<0.05),与Treg细胞绝对计数及百分比呈负相关(r=-0.334,-0.554,P<0.05)。抑郁障碍组与健康对照组的血清IL-6与IL-10水平存在统计学差异(P<0.05),HAMD评分与IL-10、IL-17呈正相关(r=0.271,0.392,P均<0.05),多因素线性回归分析提示IL-10、IL-17对评分有显著影响。3.社会心理因素与免疫炎症指标相关性分析细胞因子的比较:抑郁障碍患者消极应对能够增加IL-6水平,而社会支持能够降低IL-6水平。述情障碍的F2(DDF)因子与Treg细胞的绝对计数下降有关。结论:1.抑郁障碍患者的抑郁程度与应对方式、社会支持、述情障碍有关,提示改变抑郁障碍患者的应对方式、增加社会支持、改善情绪识别及表达等方式可能对抑郁障碍患者的治疗有积极意义。2.抑郁障碍患者血清中IL-6、IL-10、IL-17水平、Th17细胞绝对计数、百分比、Th17/Treg比值升高,Treg细胞绝对计数、百分比降低,且IL-10是抑郁障碍的保护因素,IL-17是其危险因素,提示免疫炎症反应可能在抑郁障碍的发病中扮演着重要的角色。3.心理社会因素与机体的免疫炎症水平相关,二者在抑郁障碍的发病中可能起协同作用。

关键词： 孤独症谱系障碍   肠道免疫反应   chd8   胃肠功能紊乱   肠漏  

摘要： 孤独症谱系障碍（ASD）是一种神经发育障碍性疾病,在过去的几十年里,ASD的发病率急剧上升。近年来,虽然进行了大量的研究,但对ASD的病因和病理机制仍知之甚少,尚无针对核心症状的药物和治疗方法。ASD具有很强的遗传性,已经发现了大量的风险基因,还有许多非遗传因素,如环境、代谢和免疫等。肠道是整合这些遗传和非遗传因素的重要场所,但肠道如何在ASD的病因和病理中发挥作用,尚待深入研究。越来越多的证据表明,孤独症患者中胃肠道功能紊乱频发,并且胃肠道功能紊乱的严重程度与孤独症症状的严重程度显著相关。为了弄清肠道如何整合遗传和非遗传因素而参与ASD的病因和病理,我们利用斑马鱼孤独症模型,研究风险基因在肠道中的作用。CHD8是近年发现的ASD高风险基因,携带该基因突变的患者中半数以上有严重的胃肠道问题。在本研究中,我们发现chd8缺陷影响肠道的早期发育,并且肠道中氧自由基过度累积。通过实时观察转基因标记的免疫细胞以及组织化学染色等,发现在chd8缺陷体的胚胎肠道中,大量巨噬细胞和中性粒细胞聚集,并有免疫细胞侵润进入肠上皮,表明在早期肠道内发生异常免疫炎症反应。为探究chd8缺陷导致肠道炎症反应的机制,我们检测chd8缺陷体的肠道,发现存在渗漏现象,并且肠屏障功能相关基因表达异常。用消炎药处理chd8缺陷体能部分地缓解肠道炎症,但并未改善肠漏。以上结果表明chd8缺陷可能通过影响肠发育导致肠屏障破坏,进而导致肠道免疫炎症反应。这些发现为孤独症中肠道炎症的诊疗提供了线索,也为进一步研究肠脑轴奠定实验基础。