关键词： 维持性血液透析   微炎症状态   全身炎症反应指数   全身免疫炎症指数   中医证候  

摘要： 目的 本课题通过研究维持性血液透析(Maintenance hemodialysis,MHD)患者微炎症状态与全身炎症反应指数(Systemic inflammatory response index,SIRI)、全身免疫炎症指数(Systemic immune-inflammation index,SII)及中医证候的相关性,拟为早期识别MHD患者微炎症状态及中医药辨证施治提供客观化依据。 方法 本课题为横断面研究,收集成都中医药大学附属医院血液透析中心符合纳排标准的MHD患者。根据血清超敏C反应蛋白水平,将MHD患者分为微炎症组和对照组。收集患者基本信息、实验室指标(WBC、N、L、M、PLT、hs-CRP、Hb、Alb、UA、Ca、P、TC、TG、HDL、LDL、PTH)及中医四诊资料,分析基线资料,通过组间比较、单因素相关性分析,明确SIRI、SII与MHD患者微炎症状态及其中医证侯的相关性,绘制ROC曲线,比较SIRI、SII与NLR、PL R、MLR对MHD患者微炎症状态的诊断效能。 结果 1.本研究共纳入106例MHD患者,其中微炎症组有60例(56%),对照组有46例(44%)。 2.微炎症组与对照组的透析龄、WBC、N、L、M、NLR、PLR、MLR、SIRI、SII、hs-CRP水平组间差异具有统计学意义(P<0.05)。SIRI、SII与超敏C反应蛋白水平均呈正相关关系(P<0.001)。ROC曲线下面积比较:SIRI>MLR>NLR>SII>PLR>0.5,SIRI敏感度为80%,特异性为80.4%;SII的敏感度为48.3%,特异性为44%。 3.合并有微炎症状态的MHD患者正虚证以阴虚证+阳虚证为主,SIRI水平在各证型间差异有统计学意义(P<0.05),阴虚证+阳虚证的SIRI水平更高。标实证以血瘀证为主,SIRI、SII水平在各证型间差异有统计学意义(P<0.05),血瘀证的SII、SIRI水平高于非血瘀证。 结论 ***、SII可以反映MHD患者体内的微炎症状态。SIRI对MHD患者微炎症状态具有更好的诊断效能,且优于NLR、SII、PLR、MLR。 2.合并有微炎症状态的MHD患者本虚证以阴虚证+阳虚证为主;标实以血瘀证为主,且血瘀证SIRI、SII水平高于非血瘀证。

关键词： 蛋白质组学   免疫炎症反应   桥本甲状腺炎   清肝散结消瘿方  

摘要： 目的和意义:桥本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT)是最常见的甲状腺疾病之一,发病机制复杂,目前缺乏公认有效的病因治疗,中医药治疗HT具有一定优势。因此,本研究通过临床研究观察清肝散结消瘿方治疗HT的临床疗效及安全性;通过蛋白质组学分析探讨清肝散结消瘿方治疗HT的潜在作用机制;通过对差异蛋白的验证,探讨清肝散结消瘿方治疗HT的潜在作用靶点,为中医药治疗HT提供科学内涵。方法:1临床研究采用非随机对照试验方法,从北京中医药大学东直门医院和北京中医药大学孙思邈医院甲状腺病科招募符合条件的HT患者入组,根据患者意愿按照1:1进行分组,对照组给予限碘饮食,中药组给予清肝散结消瘿方颗粒剂口服联合限碘饮食,总疗程为4周。在治疗前后分别检测患者血清TPOAb滴度、TGAb滴度、TSH水平、甲状腺功能、血常规和肝肾功,同时采用超声测量并计算甲状腺体积,采用ThyPRO-39量表评估患者生活质量变化,采用中医证候积分量表评估患者中医证候改善情况。2从临床研究的中药组和对照组中各随机选取5例患者,选取患者治疗前后的血清样本,采用TMT标记的蛋白质组学技术对血清蛋白质进行鉴定和定量分析,筛选清肝散结消瘿方治疗前后的血清差异蛋白,通过生物信息学分析进行蛋白质功能和通路注释、富集分析以及蛋白质相互作用分析。3从蛋白质组学研究结果中选取与HT发病机制相关的差异蛋白,从临床研究的中药组和对照组中各随机选取22例患者,选取患者治疗前后的血清样本,通过ELISA检测中药组和对照组治疗前后血清候选蛋白的表达水平,对蛋白质组学结果进行初步验证,并为后续研究指明方向。结果:1临床研究共纳入109例HT患者,其中中药组54例,女/男为46/8,平均年龄为38.50(31.75,51.00)岁;对照组 55 例,女/男为 52/3,平均年龄为 37.00(29.25,50.75)岁,两组性别、年龄、BMI、病程等均无明显统计学差异(P>0.05)。疗效比较:中药组患者治疗后血清TPOAb滴度显著下降,下降率平均值为9.24%(P=0.003<0.01),而对照组治疗后稍有上升,上升率平均值为3.99%(P=0.235>0.05);中药组患者治疗后血清TGAb下降约3.77%(中位值),而对照组治疗后上升约0.72%(中位值),两组治疗前后均无显著统计学意义(P>0.05);中药组患者治疗后较治疗前甲状腺右叶、左叶和峡部体积分别下降约 3.05%、4.16%、0.94%(P=0.009、0.001、0.034<0.05),对照组治疗后甲状腺左叶体积增大(P=0.043),右叶和峡部体积分别下降约1.48%、0.00%(P=0.280、0.584);生活质量方面,中药组患者治疗后甲状腺肿、疲劳、认知、焦虑、抑郁、情绪波动和整体生活质量评分均较治疗前显著改善(P<0.05),对照组患者各症状均无显著变化(P>0.05);中医证候方面,中药组治疗后显著下降,下降率约14.58%(P=0.022<0.05),对照组无明显改善;中药组和对照组患者治疗前后TSH水平均无显著变化(P>0.05),甲功、血常规、肝肾功均在正常参考值范围内。2蛋白质组学研究共鉴定蛋白质653个,通过筛选得到与清肝散结消瘿方疗效相关的潜在差异蛋白58个,其中上调蛋白14个、下调蛋白44个。通过GO蛋白质功能注释发现候选差异蛋白主要参与炎症反应、免疫反应、细胞和组织结构形成、细胞间信号传导、氧化应激、细胞凋亡和物质代谢等生物学过程。通过KEGG通路分析发现差异蛋白主要参与IL-17信号通路、中性粒细胞外诱捕网、细胞凋亡途径等与HT密切相关的发病机制。蛋白质互作分析发现载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)、血清淀粉样蛋白 A(serum amyloid A protein,SAA)、血清淀粉样蛋白 P 组分(serum amyloid P-component,APCS 或 SAP)、蛋白质 S100-A9(protein S100-A9,S100A9)等差异蛋白可能是发挥生物学功能的核心蛋白,待进一步实验验证。3从蛋白质组学研究结果中共筛选出与HT发病机制相关的差异蛋白共7个,包括S100A9、SAA、SAP、APOE、CNNM2、DMKN、LRG-1,均与免疫炎症反应密切相关。ELISA检测结果显示,中药组患者治疗后血清S100A9、SAA、SAP、APOE、CNNM2、DMKN、LRG-1水平均显著下调(P<0.05),平均下降率分别为9.61%、10.28%、13.76%、12.78%、4.55%、8.37%、5.82%;而对照组治疗后血清各候选蛋白水平均无显著变化(P>0.05),ELISA检测结果与蛋白组学一致。结论:1清肝散结消瘿方可以有效降低桥本甲状

关键词： 禽多杀性巴氏杆菌   PM0222蛋白   生物学特性   信号通路   促炎症细胞因子  

摘要： 禽多杀性巴氏杆菌是巴氏杆菌科巴氏杆菌属的主要代表菌,可引起家禽的禽巴氏杆菌病(禽霍乱),主要以禽的急性死亡和出血性败血症为特征。禽霍乱在全球范围内对禽类危害严重,且造成重大的经济损失。禽多杀性巴氏杆菌的毒力因子主要包括荚膜、脂多糖、外膜蛋白、菌毛和鞭毛、毒素蛋白、唾液酸酶和铁调蛋白等,与禽多杀性巴氏杆菌的透明质酸的合成、血清杀菌活性、细胞黏附及致病性等生物学特性密切相关。前期本实验室通过全基因测序分析发现禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48-1菌株存在一个溶原性噬菌体基因簇,编码55个蛋白(44.8 kb,Pmorf0179～Pmorf0233),且基因簇内Pmorf0181、Pmorf0186和Pmorf0194基因缺失株致病性明显减弱。Pmorf0222基因位于溶原性噬菌体基因簇内编码PM0222蛋白,其为噬菌体非结构蛋白、属于SPFH超家族Hfl K/C样蛋白,且PM0222蛋白生物学特性和致炎症的分子机制至今为止尚未解析。本论文利用Ng Ago同源重组技术构建Pmorf0222基因缺失突变株,进行动物致病性实验、定殖能力、细胞黏附能力、透明质酸合成和血清中补体介导杀菌活性等生物学特性研究;利用RNA-Seq技术和生物信息学技术分析缺失突变株与亲本菌株的差异表达基因,以鉴定PM0222蛋白参与的生物过程。通过原核表达纯化重组PM0222蛋白,进行炎症信号通路诱导宿主细胞产生天然免疫反应的研究,以确定致宿主炎症反应的分子机制,为禽多杀性巴氏杆菌的致病机制提供依据,并为禽霍乱的防控奠定基础。 为了分析禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48-1菌株PM0222蛋白的生物学特性,利用Ng Ago同源重组技术构建了Pmorf0222基因缺失突变株C48-ΔPmorf0222,并构建互补质粒p AL99-Pmorf0222电转至缺失突变株以构建回复突变株。动物致病实验表明C48-ΔPmorf0222缺失突变株相对于C48-1亲本菌株对小鼠的致病性明显减弱,在小鼠肝脏和脾脏的定殖能力下降了3.35倍和2.39倍,对DF-1和HD11细胞的黏附能力下降了8.11倍和6.48倍。PM0222蛋白促进了禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48-1菌株透明质酸的合成、抑制了生物被膜的形成以及血清中补体介导的杀菌活性。 RNA-Seq和生物信息学分析结果表明,C48-ΔPmorf0222缺失突变株相对于禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48-1亲本菌株,共筛选出314个显著差异表达基因,包括174个上调表达基因、140个下调表达基因。随机筛选13个显著差异表达基因进行实时荧光定量PCR并与RNA-Seq进行验证,两者结果一致。利用生物信息学分析,这些显著差异表达基因被富集在多杀性巴氏杆菌透明质酸的合成、生物被膜的形成以及铁代谢等相关途径,其中C48-ΔPmorf0222缺失突变株透明质酸的合成以及生物被膜的形成与体外检测结果相符。 为了进一步研究禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48-1菌株PM0222蛋白的致炎症分子机制,原核表达、纯化可溶性重组PM0222蛋白,进一步实验证明:PM0222蛋白可由多杀性巴氏杆菌的外膜囊泡(OMVs)分泌至细胞外。此外,重组PM0222蛋白可通过激活巨噬细胞中TLR1/2-NF-κB和TLR1/2-ERK/p38 MAPK信号通路并活化炎症小体,进一步诱导TNF-α和IL-1β促炎症细胞因子的释放。 本研究成功构建了Pmorf0222缺失突变株和回复突变株,C48-ΔPmorf0222缺失突变株对小鼠的致病性明显减弱。阐明了PM0222蛋白的生物学特性,其参与了禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48-1菌株透明质酸的合成、生物被膜的形成以及血清中补体介导的杀菌活性。RNA-Seq和生物信息学分析表明缺失突变株和亲本菌株之间的显著差异表达基因被富集在禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48-1菌株透明质酸的合成、生物被膜的形成以及铁代谢等相关途径。重组PM0222蛋白通过TLR1/2-NF-κB/MAPK炎症信号通路诱导宿主细胞产生天然免疫反应。本研究为禽多杀性巴氏杆菌分子致病机制提供了思路,也为禽霍乱的防控提供新的策略。

关键词： 炎症反应   肿瘤微环境   预后标志物   免疫治疗   皮肤黑色素瘤  

摘要： 目的:皮肤黑色素瘤（skin cutaneous melanoma,SKCM）是从黑色素细胞发展而来的最具侵袭性和危险性的皮肤癌。其在原位早期阶段可治愈,但转移后治疗难度大。SKCM作为具有免疫原性的肿瘤之一,极有可能对免疫疗法产生良好的反应。了解黑色素瘤细胞与免疫系统之间的相互作用,以及肿瘤微环境中不断发生的变化,对于开发新的抗肿瘤疗法至关重要。炎症反应参与调控肿瘤微环境,进而影响肿瘤的进展和转移。然而肿瘤的恶性进展也与遗传物质改变的积累有关,会导致肿瘤相关抗原的表达,从而激活抗肿瘤免疫反应。肿瘤微环境中炎症细胞的活性以及炎症调节因子的类型都会影响其在促肿瘤作用和抗肿瘤作用之间的平衡。因此本文旨在鉴定SKCM中炎症相关预后标志物,并对肿瘤微环境内相关的免疫细胞和炎症因子深入研究,为SKCM诊治提供提供参考。研究方法:1.在本研究中,我们使用LASSO算法开发SKCM患者预后模型,并计算相应的IRPscore评分。基于中位值将SKCM患者分为高IRPscore组和低IRPscore组,用以表征个体炎症反应模式。2.利用单、多因素回归分析的方式,将其他临床参数纳入分析,证实IRPscore独立预测SKCM患者预后的能力。结合IRPscore,通过列线图量化不同的临床参数,探究IRPscore辅助预测SKCM患者临床预后的意义。3.从癌症基因组图谱网站（TCGA,http://***/）下载获得SKCM患者基因的体细胞突变谱进行分析,采用GISTIC2.0算法计算拷贝数变异情况,探究不同组间差异。4.整合Drugbank多种药物数据库,进一步系统评估了SKCM患者IRPscore与免疫治疗、放疗、化疗和靶向治疗等几种治疗的预测疗效之间的关系。结果:***-Meier生存曲线显示,随着IRPscore的增加,SKCM患者的生存预后越差。2.单、多因素回归分析显示,SKCM患者的IRPscore越高,临床病理参数T分期越晚,分级越高。IRPscore可作为危险性因素,独立预测SKCM患者临床预后。相比于其他年龄等参数,结合IRPscore构建出的列线图能够更好的预测临床生存状况。3.相比于高IRPscore组,低IRPscore组SKCM患者呈现出更高的肿瘤突变负荷、微卫星不稳定性,表明低IRPscore组可能具有更高的免疫原性,进一步激发抗肿瘤免疫反应。低IRPscore组抗原递呈分子表达高,相应免疫通路富集,呈现出更强的抗肿瘤免疫应答。4.低IRPscore组SKCM患者呈现出了更高的CD8+T,DC,NK等免疫细胞浸润水平,同时抗原递呈分子及其通路呈现出明显富集,提示其潜在的抗肿瘤免疫反应。5.在SKCM患者中,IRPscore与免疫调节剂、炎症因子和癌症免疫周期呈负相关关系。在SKCM中,低IRPscore可能形成炎症的肿瘤微环境,提示免疫学上的“热”肿瘤。6.低IRPscore组免疫检查点显著高表达,提示该组SKCM患者可能受益于免疫检查点阻断疗法。相比于高IRPscore组,低IRPscore组T细胞炎症评分更高,肿瘤免疫功能障碍和排斥更低,表明该组患者较少存在免疫逃逸和排斥现象,对免疫治疗反应更灵敏。7.高IRPscore组SKCM患者表现出RB1、ERBB2、FANCC、DNA复制通路高突变率,说明该组可能更适合于放、化疗。结论:我们构建并验证了一种新的量化炎症反应预后指标IRPscore,它可以预测SKCM的临床结果和肿瘤微环境的炎症特征。同时,IRPscore也可用于预测SKCM患者对多种治疗方案的临床反应。

关键词： 血液透析   全身炎症反应指数   心血管事件   全因死亡  

摘要： 目的：　　心血管疾病（cardiovasculardisease，CVD）是血液透析（Hemodialysis，HD）患者主要死亡原因。现有研究表明，微炎症是终末期肾病（End-stagerenaldisease，ESRD）患者普遍存在的状态，同时是造成ESRD患者心血管事件及死亡的重要原因。一种基于中性粒细胞、单核细胞与淋巴细胞比值的新型炎症指标--全身炎症反应指数（Systemicinflammationresponseindex，SIRI）,被证明与微炎症以及多种疾病预后相关。目前尚未有相关研究证实SIRI与HD患者心血管事件及全因死亡的关系。本文旨在探索SIRI与HD患者心血管事件及全因死亡的预后关系。　　方法：　　选取截至2019年1月1日于东莞东华医院血液净化中心规律血液透析的患者，随访至2021年12月31日，或达研究终点（心血管事件及全因死亡），或转肾移植，或转腹膜透析，或转其它血液透析中心。采用东莞东华医院病历系统及检验系统收集患者临床相关数据。根据SIRI中位数1.51水平将患者分为低SIRI组和高SIRI组，比较两组患者的基线特征。Spearman双变量分析SIRI与各研究因素的相关性。Kaplan-Meier生存曲线进行生存分析。单因素及多因素Cox风险比例模型分析HD患者心血管疾病及全因死亡的危险因素。绘制ROC（Receiveropratingcharacteristiccure）曲线比较SIRI、单核细胞与淋巴细胞比值（Monocyte-to-lymphocyteratio，MLR）、中性粒细胞与淋巴细胞比值（Neutrophil-to-lymphocyteratio，NLR）对患者心血管事件及全因死亡的预测价值。双侧统计学标准P值＜0.05有统计学意义。　　结果：　　1.两组间的性别、白细胞计数、血小板计数、中心粒细胞计数、单核细胞计数、血清铁、C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）、MLR、NLR的差异均有统计学意义。　　***与白细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数、CRP等指标呈正相关，而与淋巴细胞计数、血清铁、白蛋白呈负相关关系。　　3.高SIRI组心血管事件发生率及全因死亡率明显高于低SIRI组。　　4.高SIRI水平是HD患者心血管事件及全因死亡的独立危险因素。　　***在心血管事件及全因死亡的ROC曲线下面积与MLR、NLR相当。　　结论：　　高SIRI水平与HD患者心血管事件及全因死亡风险增加有关，是HD患者心血管事件及全因死亡的独立危险因素。

关键词： NLRP3炎症小体   USP5   MARCH7   自噬-溶酶体途径   去泛素化酶  

摘要： 研究表明,核苷酸结合寡聚结构样蛋白3(NLR family pyrin domain containing 3,NLRP3)炎症小体(Inflammasome)介导的炎症可在糖尿病、神经退行性疾病和心血管疾病等各种高度流行的人类疾病中加重,因此需要严格控制其激活。尽管NLRP3炎症小体信号参与了多种疾病的病理过程,但目前对其信号转导机制的生化和分子基础还知之甚少。蛋白质翻译后修饰(Post-translational modifications,PTMs)尤其是泛素化修饰(Ubiquitination)是调节炎症小体激活的关键分子开关,但目前关于泛素化修饰的研究较少,且其在炎症小体激活调控中的具体机制仍不明确。近年来,人们越来越清楚地认识到泛素系统在NLRP3炎症小体激活进程中的重要作用。蛋白质泛素化的动态平衡主要依靠E3泛素连接酶(E3 ubiquitinligase)及去泛素化酶(Deubiquitinases,DUBs)来实现。E3泛素连接酶可将泛素转移至底物蛋白,而DUBs可以从底物蛋白中切割泛素链,并处理泛素前体,以维持蛋白表达的动态平衡。E3泛素连接酶可通过蛋白酶体或自噬-溶酶体途径调控NLRP3的表达,与此同时,虽然已经报道了一些DUBs可以通过蛋白酶体途径调控NLRP3的表达,但DUBs是否可以通过自噬-溶酶体途径调控NLRP3的表达,仍鲜有报道。本研究中,我们通过筛选发现了 DUBs成员USP5(Ubiquitin specific peptidase 5)具有明确的溶酶体定位,鉴于NLRP3在炎症小体激活后可转移至自噬体和溶酶体,我们推测USP5可能参与NLRP3的自噬降解。为探讨USP5是否参与到NLRP3炎症小体通路的激活,我们首先使用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)及白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)刺激小鼠腹腔巨噬细胞(Peritoneal macrophages,PMs),结果显示,在LPS及IL-1β刺激后,USP5的mRNA及蛋白表达被明显诱导。NLRP3炎症小体主要由NLRP3,凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis associated speck-likeproteincontaining a CARD,ASC)及半胱氨酸氨基转移酶-1(Caspase-1)组成,其激活可分为两个阶段,第一阶段核因子-kappaB(NF-κB)通路被激活并释放肿瘤坏死因子α(Tumornecrosis factor,TNFα)及白细胞介素 6(Interleukin-6,IL-6);第二阶段前体IL-1β被切割,并释放成熟的IL-1β。为进一步明确USP5在该通路中的功能,我们合成了Usp5的小干扰RNA,并用各种炎症小体激活剂刺激PMs,检测TNFα,IL-6及IL-1β的分泌。结果表明,Usp5敲低后,加入黑色素瘤缺乏因子2(Absent in melanoma 2,AIM2)及包含 CARD 结构域的 NLR 家族成员蛋白 4(NLR-family CARD-containing protein 4,NLRC4)炎症小体激活剂刺激后,TNFα,IL-6及IL-1β的分泌均没有明显变化;而加入NLRP3炎症小体激活剂刺激后,TNFα及IL-6的分泌量虽无明显变化,IL-1β的分泌量却明显升高。以上结果说明,敲低Usp5可特异性促进NLRP3炎症小体第二阶段的激活。为探究USP5的靶分子,我们进行了免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)及免疫荧光(Immunofluorescence)实验,结果表明USP5仅与NLRP3有特异性的结合及共定位。为寻找两者相互作用的结构域,我们构建了一系列截断体质粒,并检测到USP5的USP结构域与NLRP3的PYD结构域有明显的结合作用。紧接着,我们检测了USP5对NLRP3蛋白稳定性的影响。首先,外源过表达及慢病毒感染实验均证明USP5可特异性降解NLRP3蛋白,而对ASC,Caspase-1,NLRC4及AIM2蛋白的表达无明显影响。此外,我们在小鼠PMs中转染了Usp5的小干扰RNA,结果表明,Usp5敲低后,内源NLRP3蛋白的表达明显升高。综上结果表明,USP5可靶向NLRP3并促进其降解。为进一步探究USP5通过何种途径降解NLRP3,我们分别使用了蛋白酶体途径及自噬-溶酶体途径的抑制剂处理细胞。结果表明,只有自噬抑制剂才能拯救USP5对NLRP3的降解。此外,ATG5是经典自噬途径的关键基因,在ATG5敲除的HEK293T细胞中,USP5对NLRP3的降解也受到明显抑制。同时,我们发现炎症小体激活后,在自噬体和溶酶体中均检测到了 NLRP3和USP5的共定位。综上结果,USP5通

关键词： 银屑病   炎症反应   全身免疫炎症指数   临床分型  

摘要： 背景:　　银屑病是一种慢性多系统炎症性皮肤病，累及世界上大约1-3%的人口。全球患病率约为0.09%-11.43%，亚洲国家为0.23%-0.47%，欧洲和美国可达2.3%-3.2%。临床上，银屑病主要分为红皮病型银屑病、寻常型银屑病和脓疱型银屑病，较少见的变异型包括：反向银屑病、滴状银屑病和环状银屑病。皮肤的红斑、增厚和脱屑是其主要特点。银屑病的病因复杂且受遗传易感性、免疫和环境因素（包括感染、压力和创伤）的强烈介导。其发病机制与先天免疫、T细胞和角质形成细胞之间的异常作用密切相关。银屑病的治疗在很大程度上受疾病严重程度、位置及相关合并症的影响。其的治疗通常包括局部和全身疗法，例如局部外用皮质类固醇、钙调磷酸酶抑制剂、角质剥脱剂、维生素D类似物和靶向光疗。尽管治疗的方法有所改善，但患者的预后仍然较差。近年来，全身免疫炎症指数(SystemicImmune-InflammationIndex,SII，血小板计数×中性粒细胞计数/淋巴细胞计数)被提出可以作为多种系统性炎症性疾病严重程度和预后的生物学标志物。虽然已有SII在银屑病中的研究，但尚无研究表明它与各个类型的银屑病之间存在关联。　　目的：　　本研究旨在探讨全身免疫炎症指数与银屑病临床特征之间的联系，从而评估它对各银屑病亚型的严重程度和疾病进展的关系。　　方法：　　本研究回顾分析了2020年1月至2022年8月于吉林大学第一医院诊治的85例银屑病患者，其中确诊为寻常型银屑病35例，脓疱型银屑病26例，红皮病型银屑病24例。详细记录其病史及一般临床资料，收集并计算所有患者的全血细胞计数(completebloodcounts,CBC)、C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)、免疫球蛋白E(immunoglobulinE,IgE)、总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇、中性粒细胞对淋巴细胞比率(neutrophil-lymphocyte-ratio,NLR)以及SII等。全部资料使用SPSS和GraphPad软件包进行数据分析。　　结果：　　本研究的85例银屑病患者中男性占56.47%，女性占43.53%。其中7.6%的患者病程不到10年，而42.4%的患者病程超过10年。寻常型银屑病最常见(41.2%)，其次是脓疱型银屑病(30.6%)以及红皮病型银屑病(28.2%)。SII在脓疱型银屑病患者中明显高于其他类型(P＜0.0001)且与高血压显著相关。与寻常型银屑病相比，CRP在脓疱型银屑病患者和红皮病型银屑病患者中均明显升高（均P＜0.001），而脓疱型银屑病患者则观察到更多的白细胞。　　结论：　　脓疱型银屑病的SII数值显著高于其他银屑病亚型，且高血压是唯一具有明显更高SII数值的合并症。提示SII可作为一个新型的炎症参数，并在银屑病的风险分层中具有潜在作用。

关键词： 抗菌肽   马盖宁Ⅱ   肠出血性大肠杆菌(EHEC)   肠道炎症   肠道菌群  

摘要： O157:H7是一种肠出血性大肠杆菌(enterohaemorrhagic Escherichia coli, EHEC)菌株，作为食源性病原体可导致畜禽与人类(Homo sapiens)患病。马盖宁(magainins)是具有抗菌和抗肿瘤特性的阳离子肽，对革兰氏阴性和阳性菌具有抗菌活性。本研究旨在明确蛙(Xenopus laevis)源抗菌肽MagaininⅡ对EHEC O157:H7攻毒小鼠(Mus musculus)的肠道炎症及微生物区系的影响。以体重接近的C57/BL6雄性小鼠40只为受试对象，随机分为4组(每组10只)：CK组，O157组，MagⅡ组，O157+MagⅡ组。在相同基础日粮条件下，分别在1、5和9 d对O157组和O157+MagⅡ组以0.1 mL O157菌液(浓度为106CFU/mL)灌胃，CK组和MagⅡ组灌胃相同体积的PBS溶液；1 h后，MagⅡ组和O157+MagⅡ组按照5 mg/kg体重，于腹腔注射0.25 mL MagaininⅡ溶液，CK组和O157组注射相应体积的无菌生理盐水；10 d后安乐处死全部受试小鼠，采集相应组织样本进行检测。结果表明，MagaininⅡ单独处理对小鼠血清炎性细胞因子浓度和空肠炎性细胞因子、屏障功能相关基因表达均无影响；EHEC O157:H7处理导致小鼠空肠白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)基因表达水平及血清IL-1β、IL-6、TNF-α浓度显著升高(P<0.05)，血清IL-10水平显著降低(P<0.05)，空肠紧密连接蛋白claudin-1、黏蛋白-1(mucin-1, MUC-1)、MUC-2的表达水平显著降低(P<0.05);MagaininⅡ处理可显著改善EHEC O157:H7导致的IL-1β、IL-6、TNF-α、claudin-1、MUC-1、MUC-2基因表达及血清IL-1β、IL-6、IL-10浓度的异常(P<0.05)。另外，本研究通过16S rDNA测序来分析MagaininⅡ干预引起的肠道微生物变化。测序结果显示，在属水平上，O157组中普氏菌属(Prevotella)和拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度显著升高(P<0.05),O157+MagⅡ组拟杆菌属相对丰度降低(P<0.05)，即EHEC O157:H7攻毒后与炎症发展相关的普氏菌属和拟杆菌属丰度显著增加，MagaininⅡ处理使不利菌属拟杆菌属丰度显著下降，提示MagaininⅡ可维持肠道屏障和缓解炎症水平，从而在EHEC O157:H7诱导的小鼠肠道损伤中发挥保护作用，肠道群菌的变化可能是MagaininⅡ保护肠道损伤的相关因素。综上所述，MagaininⅡ可作为潜在药物用于治疗EHEC O157:H7引起的肠道疾病。