关键词： 维生素D   Treg细胞   哮喘   β-catenin通路   免疫炎症反应  

摘要： 目的:本课题探讨维生素D与Treg细胞在哮喘发病中的作用及其相关性;并在细胞水平阐明维生素D通过β-catenin通路调控Treg细胞免疫炎症反应的潜在分子机制。方法:1、收集2021年1月至2022年4月于山西医科大学第二医院就诊的哮喘急性发作期病患58例为实验组,均达到纳入标准,同期在本院采集健康体检者33例为对照组。收集每位研究对象的空腹血标本离心收集血清,并且收集外周血单个核细胞。应用酶联免疫吸附实验测定血清25（OH）D3含量;流式细胞术检测Treg细胞比例;RT-q PCR检测Treg细胞表面特异性标志物Foxp3 m RNA表达水平;流式多因子检测技术测定血清炎症因子IL-10、IL-17表达水平。2、体外实验:小鼠胸腺Treg细胞体外培养,分别设置空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+1,25（OH）2D3组以及TGF-β1+ICG-001组。除了空白对照组,每孔给予TGF-β1剂量为2 ng/ml,1,25（OH）2D3干预剂量为1μmol/l,ICG-001干预剂量为5μmol/l,剂量选择根据课题组前期研究结果采纳应用。采用Western Blot分析Treg细胞特异性标记物、正调控蛋白Foxp3的表达水平;采用RT-q PCR分析Foxp3m RNA、IL-10 m RNA、IL-35 m RNA水平;采用Co IP实验分析各组β-catenin/TCF和β-catenin/Foxo1转录复合物水平;通过双荧光素酶报告基因实验测定Foxo1转录因子对下游Foxp3启动子的转录活性。结果:1、本研究纳入的所有研究对象各组间的性别、年龄均无显著差异（P>0.05）。ELISA检测结果表明哮喘急性发作期患者血清25（OH）D3水平显著低于健康体检者（P<0.05）。流式细胞仪检测结果表明哮喘急性发作期患者Treg细胞比例低于健康体检者（P<0.001）。RT-q PCR结果表明哮喘患者Treg细胞特异性标志物Foxp3的表达水平降低（P<0.05）。流式多因子检测技术结果表明哮喘急性发作期患者血清抗炎因子IL-10表达水平显著降低,促炎因子IL-17表达水平显著升高,哮喘急性发作期患者相比健康体检者IL-17/IL-10比值显著异常（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示抗炎因子IL-10的表达水平与Treg细胞数量比例之间存在显著正相关关系（r=0.5388,P<0.01）;促炎因子IL-17的表达水平与Treg细胞比例之间无明显相关性（r=-0.1264,P>0.05）。哮喘急性发作期患者血清25（OH）D3水平与IL-17/IL-10比值之间存在负相关关系（r=-0.3987,P<0.01）,与Treg细胞两者呈正相关关系（r=0.4110,P<0.01）。2、细胞生物学实验结果:Western Blot结果显示TGF-β1组、1,25（OH）2D3和ICG-001干预处理组与对照组的检测结果比较,Foxp3蛋白表达均上调（P<0.05）。与TGF-β1诱导组相比,1,25（OH）2D3和ICG-001干预处理组Foxp3蛋白表达上调更加显著（P<0.01）。1,25（OH）2D3同ICG-001干预处理组组间比较,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。RT-q PCR结果显示TGF-β1处理细胞后,Foxp3、IL-10、IL-35的表达水平有所上调,1,25（OH）2D3或ICG-001干预处理后,Foxp3、IL-10、IL-35的表达水平显著上调（P<0.05）。1,25（OH）2D3同ICG-001干预处理组比较,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。Co IP结果显示TGF-β1诱导组与对照组相比,β-catenin/Foxo1结合水平升高（P<0.05）,但由于TGF-β1强大的促纤维化作用,使得β-catenin/TCF仍保持紧密结合。与TGF-β1诱导组相比,1,25（OH）2D3和ICG-001干预处理组β-catenin/TCF结合水平明显下降,β-catenin/Foxo1结合水平显著增加（P<0.05）,并表明TCF、Foxo1二者竞争与β-catenin的结合,因而形成不同的转录复合物对下游靶基因进行调控。1,25（OH）2D3和ICG-001干预处理组组间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。此外采用TF ratio指标（β-catenin/TCF转录复合物versusβ-catenin/Foxo1转录复合物）分析各组转录复合物水平的差异,结果显示TF ratio指标变化趋势与Treg细胞特异性标志物Foxp3表达水平相反,说明Treg细胞的增殖活化与TF ratio水平降低密切相关。双荧光素酶报告基因实验的结果表明和对照组相比,TGF-β1诱导增强

关键词： 冠状动脉疾病   冠状动脉钙化   系统免疫炎症指数   系统炎症反应指数  

摘要： 目的:系统免疫炎症指数(Systemic immune inflammation index,SII)和系统炎症反应指数(Systemic inflammation response index,SIRI)是两种新的全身炎症指数,是心血管疾病的重要预测因子。冠状动脉钙化是冠状动脉疾病(Coronary artery disease,CAD)的独立危险因素。我们主要探讨SII和SIRI与冠状动脉钙化(Coronary artery calcification,CAC)之间的关系。 方法:本研究采用回顾性研究,我们分析了2021年1月至2022年6月在重庆医科大学附属第二医院心血管内科住院并进行了冠状动脉血管成像(Coronary computed tomography angiography,CCTA)检查的651名患者。我们收集了651名患者的人口统计学特征(性别、年龄),血管危险因素及疾病史(吸烟、高血压、糖尿病),实验室变量(血常规、肝功、肾功、电解质、血脂)。使用CCTA来确定冠状动脉钙化的存在及冠状动脉钙化积分并根据钙化积分进行冠脉钙化分层。多变量logistic回归模型评价冠状动脉钙化的独立危险因素,建立受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线评价SIRI对冠状动脉钙化的诊断价值。 结果:本研究中,总共651名患者,其中333(51.2%)名不存在冠状动脉钙化;318(48.8%)名患者存在冠状动脉钙化,其中181名患者冠状动脉钙化积分在1-100之间,96名患者冠状动脉钙化积分在101-400之间,41名患者冠状动脉钙化积分大于400。本研究发现冠状动脉钙化组患者的SII和SIRI均高于非冠状动脉钙化组患者(P<0.05)。但是SIRI在冠状动脉钙化各组间无统计学差异(P>0.05),SII在轻度冠状动脉钙化组及重度冠状动脉钙化组的数值大于中度冠状动脉钙化组有统计学意义(P<0.05)。单变量logistic回归模型分析表明,SII与冠状动脉钙化显著相关(OR,1.002;95%CI,1.001-1.003;P<0.001),SIRI与冠状动脉钙化显著相关(OR,7.445;95%CI,4.679-11.878;P<0.001)。排除混杂因素后多变量logistic回归模型分析显示高龄、高血压、糖尿病、低高密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白a、SIRI是冠状动脉钙化的独立危险因素(P<0.05)。使用该比率建立预测模型,ROC曲线下面积为0.708(P<0.001,95%CI:0.672-0.743),诊断界值为0.763,相应的敏感度和特异度分别为77.67%和50.75%。表明SIRI具有较高的诊断效率。 结论:本研究结果显示冠状动脉钙化组的SII和SIRI均高于非冠状动脉钙化组。但是,SIRI而非SII是冠状动脉钙化的独立危险因素,具有良好的诊断效果。但并非SIRI代表的炎症越严重,冠状动脉钙化越严重。

关键词： 系统性红斑狼疮   MRL/lpr狼疮小鼠   miR-181d   MAPK8   MAPK  

摘要： 目的:探讨miR-181d靶向MAPK8调控MAPK通路在MRL/lpr狼疮小鼠肾脏炎症中的机制,阐明miR-181d在系统性红斑狼疮中的作用。 方法:购买10周龄MRL/lpr雌性狼疮小鼠18只和C57BL/6小鼠6只,在整个实验过程中,所有动物保持在一个稳定的条件下:温度（23±2℃）,湿度（55±5%）,12小时明暗规律循环。饲养至在MRL/lpr小鼠11周龄时,随机将小鼠分为AAV-NC组、AAV-miR-181d mimic组和AAV-miR-181d inhibitor组各6只,将1×1011vg AAV腺病毒介导的miR-181d抑制剂（AAV-miR-181d inhibitor）、miR-181d过表达剂（AAV-miR-181d mimic）或其阴性对照（AAV-NC）经尾静脉注射于小鼠体内,C57BL/6小鼠作为Normal组注射等量的生理盐水（n=6）。当小鼠16周龄时,处死小鼠,采集小鼠血液和肾脏组织。实验设置:HE染色、Masson染色和免疫组化（IHC）检测MRL/lpr狼疮小鼠肾脏的病理变化;ELISA检测IL-6、IL-1β和TNF-α的表达;流式细胞术检测MRL/lpr狼疮小鼠血液中细胞的凋亡分化和淋巴细胞亚群的分型情况;RT-qPCR检测MRL/lpr狼疮小鼠肾脏组织中miR-181d和MAPK8的表达;Western blot检测MAPK、p38、p-p38、JNK、p-JNK、p44/42和p-p44/42的表达和磷酸化水平。 结果:病理结果显示,过表达miR-181d可以改善MRL/lpr狼疮小鼠肾脏的炎症反应,并减缓了MRL/lpr小鼠肾脏组织的纤维化水平;ELISA检测MRL/lpr狼疮小鼠血清中炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达,结果发现IL-6和TNF-α的分泌可以被miR-181d所抑制,而IL-1β的浓度变化没有差异;流式细胞学结果提示,miR-181d的过表达可以抑制Th17细胞的分化,而抑制miR-181d的表达可以促进Th17细胞的分化;用RT-qPCR法检测MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中MAPK8 mRNA表达水平,结果显示相对于对照组NC,miR-181d mimic组中MAPK8的表达显著下调,而miR-181d inhibitor组MAPK8表达显著上调;Western blot结果显示,miR-181d可以调控MAPK8信号通路中p38、p-p38、JNK、p-JNK、p44/42和p-p44/42磷酸化。 结论:miR-181d通过靶向结合MAPK8,进而调控MAPK信号通路中JNK、p38和p44/42的磷酸化水平,从而抑制了Th17细胞的分化,降低了促炎性细胞因子的表达活性,并抑制了MRL/lpr狼疮小鼠肾脏的炎症发展。

关键词： 输尿管软镜钬激光碎石术   泌尿系结石   全身炎症反应综合征   危险因素   预测模型  

摘要： 目的:探讨输尿管软镜钬激光碎石术后全身炎症反应综合征（Systemic Inflammatory Response Syndrome,SIRS）的危险因素并建立预测模型。运用Logistic多因素回归分析筛选出接受输尿管软镜钬激光碎石术的上尿路结石患者术后发生SIRS的独立危险因素,为医护人员提供客观依据,最后构建预测模型及数据可视化处理,评估患者术后发生SIRS的概率,为医护评估和病情观察提供积极的指导,降低输尿管软镜钬激光碎石术后SIRS发生率。方法:本研究采用回顾性资料建立预测模型的研究设计。收集分析2021年1月至2021年12月在河南大学淮河医院泌尿外科行输尿管软镜钬激光碎石术的患者临床病例资料,符合纳入标准的患者共225例,根据术后有无发生SIRS分为两组,发生SIRS的患者共18例和未发生SIRS的患者共207例。根据国内外研究及我院临床经验,本研究纳入以下与输尿管软镜钬激光碎石术后发生SIRS有紧密关系的因素,包括年龄、性别、既往泌尿系手术史、饮酒史、吸烟史、体重指数（Body Mass Index,BMI）、糖尿病、手术时间、结石最大直径、结石数量、结石位置、结石负荷、尿白细胞、尿亚硝酸盐、术前中段尿培养、术前血小板计数、术前嗜酸性粒细胞计数17个相关危险因素。运用SPSS25.0统计学软件,首先单因素logistic回归分析上述所有因素,以P<0.1为标准,并结合文献记录和临床经验对变量进行初步筛选,筛选出与输尿管软镜钬激光碎石术后发生SIRS有统计学意义的变量。其次,采用多因素logistic回归分析上述有统计学意义的变量,得出输尿管软镜钬激光碎石术后发生SIRS的独立危险因素,P<0.05表示差异有统计学意义,将结果代入方程建立预测模型并构建列线图。最后构建受试者工作特征曲线、校准曲线、决策分析曲线对列线图模型进行验证,评价其临床应用价值。结果:经过单因素Logistic回归分析得出:年龄、性别、糖尿病、结石最大直径、结石C T值、手术时间（min）、术前中段尿培养阳性均与输尿管软镜钬激光碎石术后发生SI RS密切相关（P<0.1）。多因素分析Logistic回归分析得出:性别（OR=5.474,95%CI:1.383-21.672,P=0.015）,糖尿病（OR=7.882,95%CI:1.752-35.457,P=0.007）,结石最大直径（OR=1.207,95%CI:1.004-1.452,P=0.045）,术前中段尿培养（OR=6.027,95%CI:1.546-23.497,P=0.01）,术前血小板计数（×109/L）(OR=1.009,95%CI:1.001-1.017,P=0.021)等指标均为输尿管软镜钬激光碎石术后发生SIRS的独立危险因素（P<0.05）。本研究所构建的预测模型为Logit（P）=﹣12.388+1.700X1+2.065X2+0.188X3+1.796X4+0.009X5。其中,X1为性别（女性）,X2为糖尿病（有）,X3为结石最大直径,X4为术前中段尿培养（细菌、阳性）,X5为术前血小板计数。最后,对预测模型进行评估:受试者工作特征曲线下面积为0.911。Hosmer-Lemeshow检验该模型成立,且预测效能较好（P>0.05）。决策分析曲线说明该模型具有良好的应用价值。结论:性别（女性）、糖尿病（有）、结石最大直径、术前中段尿培养（细菌、阳性）、术前血小板计数是输尿管软镜钬激光碎石术后发生SIRS的独立危险因素。基于上述5项指标构建的预测模型并数据可视化处理,能够在一定程度上为医护人员对存在高危因素的患者做好充分的术前准备提供指导。在临床工作中,对于拟行输尿管软镜钬激光碎石术并伴有上述危险因素的患者,术前做好充分的准备,术后做到早发现、早处理,降低输尿管软镜钬激光碎石术后SIRS发生率,防止SIRS发生后进一步发生更严重的并发症。

关键词： 非肌层浸润性膀胱癌   肿瘤微环境   全身炎症指标物   SII   RFS  

摘要： 【背景】膀胱癌（Bladder Cancer,BC）是全球范围内第十大最常见的恶性肿瘤类型。膀胱癌根据肿瘤对肌层组织的侵犯程度可分为非肌层浸润性膀胱癌（Non-muscular invasive bladder cancer,NMIBC）和肌层浸润性膀胱癌（Muscular invasive bladder cancer,MIBC）。在临床上,大多数的膀胱癌类型表现为NMIBC,大约占总数的75%。对于NMIBC而言,首选经尿道膀胱肿瘤电切术（Transurethral resection of bladder tumor,TURBT）,术后进行常规的膀胱灌注。但患者术后复发率仍较高,并有部分患者进展为MIBC。因此,寻找出可靠、有效的生物标记物,用来作为NMIBC结局的预测指标物,以指导临床决策和患者咨询尤为重要。近期很多研究表明,肿瘤微环境（Tumor microenvironment,TME）与全身炎症反应存在一定的关系,并且靠着价格低廉、易于获得等优点,全身炎症指标物在众多预测指标中脱颖而出。【目的】探讨全身炎症指标物在NMIBC患者预后的价值【方法】选取2017年1月1日至2021年12月31日期间,在广州医科大学附属第二医院泌尿外科确诊为NMIBC并接受TURBT手术治疗的患者,根据纳入和排除标准最后纳入77例患者,最终随访时间截止为2023年1月。首先查阅病历系统收集患者相关临床资料,包括性别、年龄、身高（cm）、体重（kg）、身体质量指数（BMI,kg/m2）、吸烟情况、高血压情况、肿瘤的大小、肿瘤的数量、肿瘤的T分期以及肿瘤的病理分级。然后通过绘制受试者工作特征（receiver operating characterist,ROC）曲线,分别计算NLR、PLR、LMR和SII的曲线下面积（area under curve,AUC）,根据约登（Youden）指数最大值,选择最佳截断值,并根据最佳截断值对患者分别进行分组。其次采用Kaplan-Meier生存法绘制各临床因素无复发生存曲线,各组间差异比较采Log-rank检验;分别比较SII、NLR、PLR和LMR高、低水平组的无复发生存率（Relapse-free survival,RFS）的差异。最后根据Cox单因素及多因素分析SII、NLR、PLR和LMR是否是RFS的独立危险因素,P<0.05被认为具有统计学意义。【结果】1.本研究共纳入77例NMIBC患者,患者年龄中位数为68岁,平均年龄为66.36（53.16～79.56）岁,中位随访时间24个月,其中有22例患者在随访期间肿瘤复发。根据ROC曲线结果可得,SII、NLR、PLR、LMR的截断值分别为499.08、2.38、117.2、3.12,而各个指标ROC曲线下面积分别为0.730、0.734、0.618、0.674。2.对患者临床资料和病理特征与各全身炎症指标进行分析发现:高血压病史（P=0.004）、肿瘤大小（P=0.014）、肿瘤数量（P=0.001）、T分期（P=0.001）及危险度分组（P=0.036）在SII分组间分布上具有统计学差异;高血压病史（P=0.003）、肿瘤数量（P=0.002）、T分期（P<0.001）及病理学分级（P=0.035）在NLR分组间分布上具有统计学差异;肿瘤数量（P=0.021）和T分期（P=0.039）在PLR分组间分布上具有统计学差异;高血压病史（P=0.008）、肿瘤数量（P=0.001）及T分期（P=0.006）在LMR分组间分布上具有统计学差异。3.根据患者术后预后情况分为复发组（n=22）和未复发组（n=55）,分别将两组NMIBC患者的SII、NLR、PLR及LMR进行Mann Whitney U检验发现:不同预后患者的SII（P=0.001）、NLR（P=0.008）、LMR（P=0.049）差异有统计学意义;而不同预后患者的PLR未发现统计学差异（P=0.18）。4.将NMIBC患者预后情况与其临床资料及。病理特征进行Log-Rank检验发现:SII（P<0.001）、NLR（P=0.003）、肿瘤大小（P=0.001）、肿瘤数量（P=0.004）、T分期（P<0.001）、病理分级（P=0.001）和危险度分组（P=0.006）与患者术后RFS存在相关性,而PLR、LMR、性别、年龄、BMI、吸烟史以及高血压病史与患者术后RFS相关性无统计学意义。5.根据单因素分析表示,肿瘤大小（HR=4.328,P=0.001）、肿瘤数量（HR=2.644,P=0.027）、T分期（HR=6.429,P<0.001）、病理分级（HR=5.087,P=0.001）、危险度分组（HR=3.649,P=0.001）、SII（HR=5.275,P<0.00

关键词： 颅内远端动脉瘤   蛛网膜下腔出血   手术治疗   全身免疫炎症指数   预后  

摘要： 背景:颅内远端动脉瘤(Peripheral intracranial aneurysm,PIA)指Willis环以远的动脉瘤,发病率较低,在颅内动脉瘤(Intracranial aneurysm,IA)的占比为1%～9%。PIA常规手术方式有外科夹闭手术和微创介入手术两种,目前对这两种手术方法褒贬不一。外科手术夹闭的技术难题在于动脉瘤位置较深、部分囊小但颈宽或梭形,术中视野狭小、操作空间局限、有时很难保留载瘤动脉等。介入栓塞术相比于开颅夹闭手术,其侵袭性更低,患者术中出血不多,操作时间不长,手术指征范围更广。国外有研究显示,介入栓塞术的动脉瘤复发率比开颅夹闭术略高,但两者对比不存在统计学上的显著性差异。当前针对IA,哪种手术方式治疗最优,尚没有准确的定论。全身免疫炎症指数(Systemic immune-inflammation index,SII)对患者炎症严重的程度以及免疫情况反应较佳,在癌性和非癌性病情上有预测价值,已经越来越多的被证明可以用于预测脑血管病的相关预后,不过,是否能预测蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)的相关研究较少。本文探讨颅内动脉瘤夹闭术与介入手术的治疗效果,并分析SII对于动脉瘤性蛛网膜下腔出血(Aneurysmal subarachnoid hemorrhage,a SAH)患者预后的预测价值。目的:研究比较开颅夹闭手术与微创介入手术治疗PIA的安全性及预后效果,同时分析SII对a SAH患者预后的预测价值。方法:回顾性分析吉林大学白求恩第一医院神经外科2019年04月至2022年11月收治的92例PIA患者的临床资料。根据PIA是否破裂出血分为破裂组患者65例和未破裂组患者27例;根据手术方式不同分为开颅夹闭手术组(以下简称夹闭组)26例,微创介入手术组(以下简称介入组)66例(其中密网支架1例,弹簧圈栓塞25例,支架辅助弹簧圈栓塞35例,使用onyx胶闭塞动脉瘤及载瘤动脉5例)。整理以上患者的一般资料、手术方式、并发症情况及预后情况等,研究比较夹闭组与介入组治疗PIA的安全性与预后情况。同时整理其中65例SAH患者的SII及出院6个月时的预后情况,SII可以用中性粒细胞计数(×10～9/L)×血小板细胞计数(×10～9/L)/淋巴细胞计数(×10～9/L)得出具体计算值。改良Rankin量表(m RS)评价患者的预后情况,将患者分为两组,一组为低m RS组(<3),提示预后良好;一组为高m RS组(≥3),提示预后不良。采用受试者工作特征(Receiver Operating Characteristic,ROC)曲线评价SII预测患者预后的能力,并确定最佳截断点。结果:夹闭组与介入组患者一般资料无显著性差异(P>0.05),具有可比性。其中夹闭组共26例,前循环患者15例,后循环11例;介入组共66例,前循环32例,后循环34例,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者手术成功率均为100%,术中动脉瘤破裂事件均未发生。在介入组中,有7例患者出现并发症,占介入组患者的10.61%。在夹闭组中,共10例患者出现并发症,占夹闭组患者的38.46%,差异有统计学意义(P<0.05)。7例并发症中,有2例血管痉挛,术中及术后使用尼莫同治疗,好转后出院;2例患者出现脑积水症状:1例患者术后脑积水,行脑室外引流术,后因后颅窝脑组织肿胀,行去骨瓣减压术,另1例患者为出院后出现脑积水症状,入地方医院行脑室外引流术;1例患者出现右侧鼻出血,膨胀海绵止血后好转。夹闭组中4例患者有言语不清,左侧肢体活动不良的表现;4例患者出现脑血管痉挛;2例患者出现脑积水。对两组患者出院6个月时进行随访,夹闭组无复发病例,介入组有3例复发,差异无统计学意义(P>0.05);m RS评分差异无统计学意义(P>0.05)。出院6个月后预后不良者SII显著升高,SII取值为1646.89时被认为是最优截断值,预测不良预后的曲线下面积(Area under the curve,AUC)为0.726(95%CI为0.551-0.901,P<0.05),敏感性与特异性分别为90.9%和57.1%。结论:无论是开颅夹闭手术还是微创介入手术,均是PIA有效的治疗方法,但手术并发症上,微创介入发生率更低。SII作为一种新型的炎症标志物,可以反映局部免疫和全身炎症反应的平衡状态,高SII组提示患者预后不良,对SAH患者预后具有预测价值。

关键词： 全身炎症总指数   比值   SYNTAX评分   主要不良心血管事件   冠心病  

摘要： 研究背景冠状动脉粥样硬化性心脏病,是常见的心血管疾病之一。冠心病的病理基础是动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS),而研究发现动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病。单一的炎症细胞,如单核细胞、淋巴细胞等,在动脉粥样硬化中的作用已经有许多研究。近年来学者们积极探索联合多种炎症细胞作为综合指标来评估机体的炎症状态。其中中性粒细胞淋巴细胞比值、血小板淋巴细胞比值等在心血管疾病方面已有众多研究。全身炎症总指数(The Aggregate Index of Systemic Inflammation,AISI)是最近提出的一种综合指标,在冠心病领域未见研究。故此本研究设计了回顾性研究探讨其与冠心病的关系及临床应用价值。研究目的本研究旨在探讨AISI是否在冠心病和非冠心病人群中存在差异,AISI是否为冠心病的独立危险因素,以及其与冠心病的严重程度及预后是否存在相关关系。研究方法本研究为回顾性研究,纳入1165例于2017年8月至2022年4月在南方医院、中山人民医院、广州市第一人民医院首次行冠状动脉造影的患者,分为非冠心病组(n=275),冠心病组(n=890),对冠心病组进行随访,分析两组间基线特征及AISI的差异。以中位数分为高低AISI组,探讨AISI与冠心病的严重程度、临床稳定性及预后的关系。研究结果***为冠心病的独立危险因素(P<0.001);2.绘制ROC曲线示AISI诊断冠心病的曲线下面积为0.686(95%CI 0.649-0.723),最佳截断值为234.2,灵敏度为78.7%,特异度为48.7%;诊断急性冠脉综合征的曲线下面积为0.700(95%CI 0.669-0.731),最佳截断值为387.67,灵敏度为54%,特异度为77.1%;3.高AISI为冠心病临床不稳定的危险因素,高AISI组发生急性冠脉综合征的比例更高,具有统计学意义(P<0.001);***与冠心病患者的Syntax评分呈正相关,r值=0.22(P<0.001);5.绘制ROC曲线示AISI预测Syntax评分中高危组的曲线下面积为0.581(95%CI0.541-0.621),最佳截断值为361.07,灵敏度为62.9%,特异度为53.2%;***为冠心病患者发生主要不良心血管事件的独立危险因素(P<0.001);7.绘制ROC曲线示AISI预测主要不良心血管事件的曲线下面积为0.569(95%CI 0.519-0.618),最佳截断值为589.42,灵敏度为40.9%,特异度为71.7%(P<0.05)。结论1.与非冠心病患者比,冠心病患者的AISI水平升高;***为冠心病的独立危险因素,与冠心病的严重程度、临床稳定性相关;***为冠心病患者发生MACE的独立危险因素,其水平越高发生主要不良心血管事件的风险越大。

关键词： 肥胖   痰湿证   温胆汤   自噬   慢性炎症   PI3K-Akt-mTOR信号通路   分子机制  

摘要： 目的观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠糖脂代谢、腹周脂肪细胞超微结构与自噬状态变化、自噬活性标志物、炎症细胞因子以及磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K-Akt-mTOR)信号通路关键分子mRNA和蛋白表达的影响,探讨肥胖痰湿证炎症状态形成的物质基础以及温胆汤干预肥胖痰湿证炎症状态的分子机制。方法(1)动物造模:将126只大鼠随机分成2组(造模组110只和空白组16只),空白组采用基础饲料喂养,造模组采用高脂饲料喂养,共8周,制作肥胖痰湿证动物模型。(2)分组及给药:造模成功后,视体质量情况,按顺序淘汰体质量过轻者,遴选出48只肥胖大鼠,并随机分成模型(MC)组、雷帕霉素(RAPA)组、奥利司他(ORLI)组、温胆汤低剂量(WDD-L)组、温胆汤中剂量(WDD-M)组、温胆汤高剂量(WDD-H)组,每组8只;另在空白组大鼠中随机选取8只设为正常(NC)组。RAPA 组、ORLI 组、WDD 低、中、高剂量组分别按 2 mg/kg、32.40mg/kg、4.45 g/kg、8.90 g/kg、17.80 g/kg剂量(以生药量计算)进行灌胃,MC组和NC组则均给予等量蒸馏水进行灌胃,每天1次,共6周。(3)样本取材和指标检测:麻醉处理前12 h禁食不禁水,麻醉后进行样本取材,检测并计算大鼠体质量、Lee's指数、脂体比和肥胖率。根据试剂盒要求采用全自动生化分析仪检测大鼠血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及空腹血糖(FBG)水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测空腹胰岛素(FINS),并计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用透射电镜下观察腹周脂肪细胞超微结构与自噬状态的变化;采用免疫组织化学二步法检测腹周脂肪细胞自噬活性标志物B细胞淋巴瘤2结合蛋白-1(Beclin1)、p62、Unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)、自噬相关基因5(Atg5)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ/Ⅱ的表达水平;采用ELISA检测腹周脂肪细胞促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术检测腹周脂肪细胞PI3K-Akt-mTOR信号通路关键分子Ⅰ类磷脂酰肌醇-3-激酶(class Ⅰ-PI3K)、磷脂酰肌醇-3-磷酸(PIP3)、Akt、mTORC1、ULK1、结节性硬化复合体1/2(TSC1/2)mRNA的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测腹周脂肪细胞PI3K-Akt-mTOR 信号通路关键分子 classⅠ-PI3K、PIP3、磷酸化 Akt 蛋白(p-Akt)、Akt、磷酸化 mTOR 蛋白 1(p-mTORC1)、mTORC1、磷酸化 ULK1 蛋白(p-ULK1)、ULK1、TSC1、TSC2蛋白的表达。(4)统计学处理与分析:采用SPSS22.00对实验数据进行统计分析,数据资料用 表示。服从正态分布时,两组数据比较,采用两独立样本T检验,多组数据比较,采用单因素方差分析,方差齐时,各组间采用LSD法,方差不齐性时,各组间采用Tamhane's T2检验,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果(1)造模结果:高脂饲料喂养成功制作了肥胖痰湿证大鼠模型,造模组大鼠肥胖率>20%,且与空白组比较,造模组体质量和Lee's指数显著升高(P<0.01),有形体肥胖、活动度下降、皮肤无光泽及蓬松、对外界反应能力下降、食欲减退、饮水量减少、便溏等痰湿证表现。(2)药物干预结果:与NC组比较,MC组大鼠有肥胖痰湿证表现,体质量、Lee's指数、脂体比、血脂、FBG、FINS和HOMA-IR水平、腹周脂肪细胞自噬活性标志物蛋白表达、促炎细胞因子水平均不同程度改变(P<0.05,P<0.01),信号通路关键分子classⅠ-PI3K、Akt mRNA和信号通路关键分子classⅠ-PI3K、PIP3、p-Akt、Akt、p-mTORC1、mTORC1、p-ULK1、TSC1、TSC2 蛋白表达均显著下降(P<0.01),但 PIP3、mTORC1、ULK1、TSC1/2 mRNA 以及 ULK1 蛋白表达则呈显著升高(P<0.01)。与MC组比较,各用药组大鼠肥胖痰湿证表现均显著改善,体质量、脂体比、血脂(除WDD-L组外)、FBG(除WDD-L组外)、FINS(除RAPA组外)及HOMA-IR(除WDD-L组外)水平、腹周脂肪细胞自噬活性标志物蛋白表达、促炎细胞因子水平均呈不同程度改善(P<0.05,P<0.01),信号通路关键分子classⅠ-PI3K、Akt mRNA 和信号通路关键分子 c

关键词： 内镜黏膜下剥离术   早期胃癌   非治愈性切除   全身免疫炎症指数  

摘要： 目的:近年来内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)已逐渐代替外科手术,成为早期胃癌(early gastric cancer,EGC)的标准治疗方法,但目前仍有近10%-30%的患者在ESD术后因被评估为非治愈性切除(non-curative resection,NCR)而面临追加胃切除术的可能。对于NCR的提前预测,无疑会在改善EGC患者预后及生存质量上提供巨大收益,全身炎症反应标志物,如中性粒细胞/淋巴细胞比率(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、全身炎症反应指数(systemic inflammation response index,SIRI)以及血小板/淋巴细胞比率(platelet to lymphocyte ratio,PLR),全身免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)等,已被证明在预测胃癌患者的总生存期(overall survival,OS)方面具有较高价值。本研究旨在探索并比较SII等全身炎症反应标志物对EGC患者ESD术后NCR的预测价值。方法:我们回顾型分析了于2013年—2021年于青岛大学附属医院消化内科行ESD的326名EGC患者的临床病理资料。计算患者的术前炎症指标,采用受试者工作(receiver operating curve,ROC)曲线比较SII与其他炎症指标对NCR的预测价值,使用Youden指数计算出SII等指标的最佳截断值,并分析SII与EGC患者临床病理特征的相关性。后将患者根据NCR与否分组,比较两组之间临床病理特征差异,将存在统计学差异的变量纳入二元Logistic分析以确定NCR的独立危险因素。后使用独立危险因素构建诺莫图,并通过ROC曲线、校准曲线、一致性指数等评估该模型的区分度与准确性,评价该模型对NCR的预测价值。结果:SII的最佳截断值为414.87,SII升高与肿瘤体积大、黏膜下浸润、住院费用高、e Cura分级高、非治愈性切除风险高有关。ROC分析显示SII的AUC值大于其他指标,提示SII更能有效的预测NCR。相对于NCR患者,非NCR的患者SII、PLR、NLR、SIRI值相对更高,肿瘤发生于胃上1/3部、肿瘤>3cm、低分化癌病理类型、黏膜下层浸润、溃疡存在、住院费用高等情况更易出现,将以上变量纳入多因素分析,提示SII(OR=2.707,P=0.001)、PLR(OR=2.302,P=0.024)、NLR(OR=3.169,P=0.035)、SIRI(OR=3.787,P=0.004)、肿瘤大小>3cm(OR=2.055,P<0.001)、胃上1/3部位肿瘤(OR=16.393,P<0.001)、病理为低分化癌(OR=29.754,P<0.001)、合并溃疡(OR=4.814,P=0.001)、黏膜下侵犯(OR=51.017,P<0.001)是影响NCR的独立危险因素。将以上变量结合起来,构建出预测NCR的诺莫图。诺莫图的验证包括区分度检验和校正,经验证后该模型具备良好的准确性与区分度。利用该诺莫图绘制预测NCR的ROC曲线,所得曲线的AUC(95%CI)为0.858,提示该诺莫图相较于单一炎症指标,对EGC患者的NCR具有较好的预测价值。结论:1、SII相对于SIRI、PLR、NLR等指标,对EGC患者ESD术后NCR有更高的预测价值;2、PLR、NLR、SIRI、溃疡、分化程度、肿瘤大小、肿瘤部位是ESD术后的EGC患者NCR的独立危险因素;3、运用SII等危险因素构建的诺莫图,经验证后表现出对NCR优秀的预测效能,可以作为ESD术后NCR的可靠、有效的预测模型。