关键词： 乙型肝炎病毒   预后   慢加急性肝功能衰竭   全身免疫炎症指数  

摘要： 目的:探讨全身免疫炎症指数(SII)对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者预后的评估价值。方法:回顾性分析2016年1月至2021年8月复旦大学附属华山医院诊治的HBV-ACLF患者的年龄、性别、并发症、入院后实验室检查结果和SII、终末期肝病模型(MELD)评分、MELD-Na评分和蔡尔德-皮尤改良评分(CTP评分)等临床资料。根据随访90 d时患者疾病转归分为生存组和死亡组。统计学分析采用配对样本t检验、曼-惠特尼U检验和χ^(2)检验。采用Pearson相关分析SII与HBV-ACLF预后预测模型的相关性。采用受试者操作特征曲线下面积(AUC)分析SII、MELD评分、MELD-Na评分和CTP评分对HBV-ACLF患者预后预测的临床效能,计算SII预测HBV-ACLF预后的最佳截断值,采用Kaplan-Meier法进行生存分析。结果:共纳入140例HBV-ACLF患者,生存组88例,其中男65例,女23例,年龄为(47.69±11.96)岁;死亡组52例,其中男40例,女12例,年龄为(52.73±12.22)岁。死亡组年龄、天冬氨酸转氨酶、总胆红素、血肌酐、国际标准化比值、中性粒细胞计数/淋巴细胞计数比值、单核细胞计数/淋巴细胞计数比值、SII、MELD评分、MELD-Na评分、CTP评分和感染率高于生存组,死亡组白蛋白、淋巴细胞计数、血小板计数、预后营养指数低于生存组,差异均有统计学意义(t=-2.39,Z=-2.84,t=-4.81,Z=-2.15,Z=-4.91,Z=-3.47,Z=-3.36,Z=-3.83,Z=-4.69,Z=-4.56,Z=-6.31,χ^(2)=24.96,t=3.06,t=3.03,Z=-7.57,t=4.12,均P<0.05)。SII与CTP评分(r=0.2727,P=0.001)、MELD评分(r=0.3658,P<0.001)和MELD-Na评分(r=0.3811,P<0.001)均呈正相关。SII的AUC最大,为0.80,MELD评分为0.76,MELD-Na评分为0.74,CTP评分为0.73。SII的最佳截断值为447.49,SII≥447.49患者的90 d生存率[38.60%(22/57)]低于SII<447.49患者[79.52%(66/83)],两组间差异有统计学意义(χ^(2)=23.80,P<0.001)。结论:SII可用于评估HBV-ACLF患者病情严重程度和预后,SII≥447.49提示预后不佳。

关键词： 连续性   血液净化   糖尿病肾病   临床疗效   血清脂肪因子   免疫炎症反应  

摘要： 目的 探讨连续性血液净化对糖尿病肾病患者的临床疗效及对血清脂肪因子与免疫炎症反应的影响。方法 纳入2021年1月—2022年9月东营市东营区中心医院收治的糖尿病肾病患者44例为研究对象,随机均分为观察组与对照组,均采用离心式血浆分离结合血浆吸附方法,观察组采用连续性血液净化,对照组采用间断性血液净化。比较两组患者的治疗效果。结果 治疗前,两组各项肾功能指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组患者的血清总蛋白、白蛋白、血红蛋白量、CO_(2)结合力均高于对照组,且血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、血清β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)、血钾水平、24 h尿蛋白量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者的血糖指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组各项均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 连续性血液净化治疗对糖尿病肾病疗效显著。

关键词： 维持性血液透析   微炎症   肾功能   高通量  

摘要： 目的分析对比不同血液透析模式对纠正维持性透析患者微炎症状态的疗效。方法选取2018年3月—2020年1月于昆明市第一人民医院行维持性血液净化治疗的慢性肾脏病5期患者60例,按照随机表法分为高通组和低通组,各30例。高通组患者采用高通量血液透析,低通组患者采用低通量血液透析,观察比较两组患者治疗前、治疗6个月、12个月、18个月的超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。比较两组治疗18个月后的两组残余肾功能、血钙、磷、甲状旁腺激素水平。结果高通组患者治疗18个月的血IL-6[(13.98±4.63)mmol/L]、TNF-α[(21.76±8.44)mmol/L]、血磷[(1.38±0.32)mmol/L]、iPTH[(302±116)pg/mL]水平明显低于低通组,差异有统计学意义(t=8.539、15.866、2.598、3.403,P<0.05);高通组患者的残余肾功能(1.09±0.35)mL/min明显优于低通组,差异有统计学意义(t=3.981,P<0.05)。结论高通量血液透析能纠正终末期肾脏病患者体内的微炎症状态,改善患者的残余肾功能,可促进血磷、PTH的清除,具有一定的治疗优势。

关键词： 慢性肾脏病   肾性贫血   罗沙司他铁缺乏   炎症状态  

摘要： 肾性贫血是慢性肾脏病(choronic kidney disease,CKD)一种常见且严重的并发症。目前2期和3期试验的结果表明,罗沙司他(Roxadustat)在临床工作中其有效性及耐受性均有良好的表现。一方面,罗沙司他可以通过短暂诱导缺氧诱导因子(Hypoxia Inducible Factor,HIF)通路激活,增加内源性促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)接近生理水平范围来治疗肾性贫血。另一方面,罗沙司他还可以通过降低血清铁调素和增加肠道铁吸收来改善铁代谢,有利于改善机体功能性缺铁和绝对缺铁状态。因此,罗沙司他的发现将彻底改变肾性贫血的治疗策略。这篇综述中,我们集成这些新的发现,以为临床工作提供便捷,为肾性贫血患者制定精确化、标准化、个体化、疗效与安全并存的改善贫血的治疗模式。

关键词： 输尿管结石   软镜碎石术   全身炎症反应   单核细胞人类白细胞DR抗原   可溶性髓样细胞触发受体-1  

摘要： 目的 研究输尿管结石患者在输尿管软镜碎石术(RIRS)后发生全身炎症反应患者体内早期单核细胞人类白细胞DR抗原(mHLA-DR)、可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)的表达及其发生全身炎症反应的危险因素。方法 回顾性分析2020年1月至2022年1月石家庄市第三医院收治140例输尿管结石患者的临床资料,根据患者RIRS术后是否发生全身炎症反应,分为发生组(16例)与未发生组(124例)。收集患者一般资料,包括性别、年龄、体重指数、有无高血压、有无糖尿病、有无结石手术史、美国麻醉师协会(ASA)分级、手术时间、术后有无结石残留、mHLA-DR水平、sTREM-1水平、术前有无DJ管留置,通过受试者工作特征(ROC)分析mHLA-DR、sTREM-1预测术后发生全身炎症反应的价值,通过多因素Logistic回归分析明确输尿管结石患者术后发生全身炎症性反应的危险因素。结果 发生组中糖尿病、术后结石残留患者比率及手术时间、mHLA-DR、sTREM-1水平分别为43.75%、37.50%、(79.95±22.24) min、(0.79±0.28)%、(607.64±170.34) pg/mL,显著高于未发生组[17.74%、16.13%、(69.13±19.51) min、(0.79±0.28)%、(172.48±44.25) pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。经ROC分析证实手术时间、mHLA-DR、sTREM-1能够用于术后发生全身炎症反应的预测,曲线下面积为0.672、0.700、0.712,均有较好预测价值(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析证实,糖尿病、手术时间≥79 min、术后有结石残留、mHLA-DR≥0.535%、sTREM-1≥332.110 pg/mL是输尿管结石患者术后发生全身炎症反应的危险因素(P<0.05)。结论 输尿管结石RIRS术后全身炎症反应患者mHLA-DR、sTREM-1水平表达呈升高状态,对mHLA-DR、sTREM-1水平进行测定可以判断术后是否会发生全身炎症反应。糖尿病、手术时间≥79 min、术后有结石残留、mHLA-DR≥0.535%、sTREM-1≥332.110 pg/mL与输尿管结石患者术后发生全身炎症反应有紧密关系,对于这些患者需要密切关注。

关键词： 尿毒清颗粒   甲泼尼龙片   肾病综合征   血流动力学   免疫炎症反应   氧化应激   转移生长因子-β1  

摘要： 目的 分析尿毒清颗粒联合甲泼尼龙治疗肾病综合征的临床疗效。方法 选取2018年2月—2021年11月天津市第五中心医院收治的200例肾病综合征患者,按随机数字表法将入选患者分为对照组和治疗组,每组各100例。对照组晨起顿服甲泼尼龙片,0.8 mg/kg。治疗组在对照组基础上口服尿毒清颗粒,5 g/次,3次/d,温开水冲服。两组疗程均为8周。观察两组的临床疗效,比较治疗前后两组肾功能相关指标[白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)],肾血流动力学参数[收缩期峰值流速(Vs)、阻力指数(RI)],血清白细胞介素(IL)-6、IL-9、补体C3、丙二醛(MDA)和转移生长因子-β1(TGF-β1)水平。结果 治疗后,治疗组总有效率为91.00%,显著高于对照组的81.00%(P<0.05)。治疗后,两组血清ALB水均显著高于治疗前,血清BUN、Cr水平和24 h UP均显著低于治疗前(P<0.05);且治疗组改善更显著(P<0.05)。相比治疗前,治疗后两组肾叶间动脉Vs均显著提高,RI和PI均显著降低(P<0.05);且治疗组改善更显著(P<0.05)。治疗后,两组血清IL-6、IL-9、MDA和TGF-β1水平均较治疗前显著下降,血清补体C3水平均较治疗前显著上升(P<0.05);且均以治疗组改善更显著(P<0.05)。结论 尿毒清颗粒联合甲泼尼龙对肾病综合征具有确切疗效,能安全有效地改善患者肾功能及肾血流动力学,减轻机体免疫炎症反应和氧化应激,抑制肾脏纤维化。

关键词： 糖尿病   动脉内皮细胞   T辅助细胞   调节性T细胞   炎症反应   凋亡  

摘要： 目的:探究T辅助细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)介导炎症反应对糖尿病(DM)大鼠动脉内皮细胞凋亡影响机制。方法:腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠DM模型,将DM大鼠分为DM组和治疗组(n=12),另取12只健康大鼠作为对照组。比较各组大鼠的血糖、主动脉损伤情况、血清IL-6、TNF-α和动脉内皮细胞中凋亡标志蛋白Caspase3和Bcl-2水平。并通过流式细胞术检测外周血中Th17/Treg水平。结果:建模后大鼠血糖均高于16.7 mmol/L,干预后治疗组的空腹血糖水平显著低于DM组(P<0.05)。DM组的主动脉血管壁厚度(54.47±2.61)μm、血清IL-6(19.24±2.21)pg/mg和TNF-α(39.46±3.56)pg/mg水平、动脉内皮细胞中Caspase3 mRNA和Bcl-2 mRNA和蛋白表达量、Th17水平(2.72±0.38)%和Th17/Treg比例(1.23±0.19)显著高于对照组,Treg水平(2.21±0.38)%显著低于对照组(P<0.05)。治疗组动脉壁厚度(46.82±2.72)μm、IL-6(13.86±1.87 pg/mg、TNF-α(22.35±3.04)pg/mg、Caspase3 mRNA和Bcl-2 mRNA和蛋白表达量、Th17水平(1.50±0.20)%和Th17/Treg比例(0.46±0.07)显著低于DM组,Treg(3.26±0.52)%水平显著高于DM组(P<0.05)。结论:Th17/Treg免疫细胞介导炎症反应可能参与了DM引起的动脉内皮细胞凋亡。

关键词： 非肌层浸润性膀胱肿瘤   复发   膀胱肿瘤电切术   全身免疫炎症指数  

摘要： 目的:探讨分析术前全身免疫炎症指数（SII）对于非肌层浸润性膀胱肿瘤（NMIBC）术后复发的相关关系。方法:收集2018年1月至2020年12月期间于青海医院泌尿外科住院并行经尿道膀胱肿瘤电切术的NMIBC患者124例。根据患者术前的外周血计数计算出SII、NLR、PLR值,利用ROC曲线计算SII、NLR、PLR的最佳分界值,根据三者的最佳分界值将三者分为两组,采用卡方检验比较两组的患者之间的病理特征的相关性,利用K-M法和Log-rankx绘制并检验出患者的无复发生存曲线,利用COX回归生存分析患者复发的单因素及多因素。结果:1.绘画出SII、NLR、PLR的ROC曲线,确定SII、NLR、PLR的最佳分界值分别为528.8、2.70、152.8。SII、NLR、PLR的曲线下面积（AUC）分别为0.695、0.641、0.631。根据三者的最佳分界值将三者分为两组。***、NLR、PLR高低两组患者的病理特征分析:膀胱癌患者术前SII的水平高低与病人的肿瘤单多发（χ=14.557,P<0.001）,肿瘤的组织学级别（χ=7.271,P=0.007）、高血压（χ=9.603,P=0.002）差异显著。而SII的水平高低与患者的年龄、吸烟史、糖尿病、饮酒史、肿瘤大小、肿瘤的T分期等方面,无明显差异（P>0.05）。膀胱癌患者术前NLR的水平高低与病人的年龄（χ=7.486,P=0.006）、肿瘤单多发（χ=8.163,P=0.004）、高血压病史（χ=10.237,P=0.001）差异显著,而NLR的水平高低与患者的肿瘤大小、吸烟史、糖尿病、肿瘤的T分期、组织学级别等方面,无明显差异（P>0.05）。膀胱癌患者术前PLR的水平高低与病人的吸烟史（χ=4.835,P=0.028）、高血压（χ=7.415,P=0.006）有明显相关。而PLR的水平高低与患者的年龄、糖尿病、饮酒史、肿瘤的大小、肿瘤的T分期、肿瘤的组织学级别、肿瘤的数量等方面,无明显差异（P>0.05）。3.总的1、2、3年的肿瘤无复发生存率（RFS）分别为:98%、78%、72%。SII高低两组患者差异存在明显的统计学意义（χ=22.574 P<0.001）。NLR高低两组患者差异存在明显的统计学意义（χ=7.499P=0.006）。PLR高低两组患者差异存在明显的统计学意义（χ=7.257P=0.007）。4.肿瘤复发的单因素分析结果显示:分化级别（P=0.001）、肿瘤大小（P=0.016）、术后是否行灌注治疗的（P=0.024）、是否多发（P<0.001）、SII（P<0.001）、NLR（P=0.009）、PLR（P=0.0110）与肿瘤的无复发生存期有关,多因素分析显示:膀胱肿瘤的数量（HR=2.599,95%CI 1.216～5.557,P=0.014）,肿瘤的组织学级别（HR=2.922,95%CI 1.273～6.711,P=0.011）,术前SII水平的高低（HR=2.173,95%CI 1.028～4.596,P=0.042）均是膀胱肿瘤复发的独立危险因素。术后行灌注治疗（HR=0.384,95%CI 0.188～0.785,P=0.009）是膀胱肿瘤无复发生存期的保护性因素。结论:术前高水平的SII与非肌层浸润性膀胱肿瘤的组织学级别、肿瘤的数量正相关。术前高水平的SII对非肌层浸润性膀胱肿瘤的无复发生存期具有一定意义,是非肌层浸润性膀胱肿瘤复发的独立危险因素,且预测效能优于NLR、PLR。

关键词： 中医药   糖尿病肾病   CiteSpace   微炎症   Meta分析  

摘要： 研究背景糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是糖尿病常见的慢性微血管并发症之一,也是引起世界范围内终末期肾病流行、导致糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者死亡的主要原因之一。根据国际糖尿病联盟2021年(international diabetic federation,IDF)发表的第10版地图,全球糖尿病患病人数将持续增加,而我国糖尿病患病人数目前位居世界第一,每8个成年人中就有1个DM患者,高达1.16亿。糖尿病患病人数的增加,势必会导致糖尿病肾病人数的增加,据统计,在2009年-2013年我国社区2型糖尿病患者合并肾病病变的人数以高达40%,给社会和普通家庭带来了严重的经济负担。糖尿病肾病病程较长,在治疗上,由于发病机制未明,因而缺乏有效治疗手段。西医治疗前期以控制血糖、血压、血脂等基础治疗为主,病情发展至后期,需选择替代治疗(肾脏透析、肾脏移植等)。近年来,研究发现炎症在DN病情进展中发挥着重要作用,相关炎症因子也成为诊断评估DN的潜在生物标记物,因这种炎症极轻微,因而称之为“微炎症”,抗炎治疗目前已成为治疗糖尿病肾病的新思路、新方法。中医药在调节免疫、抗炎、改善临床症状、延缓病程等方面具有一定潜力,近几年在治疗DN上引起了诸多关注。对比常规治疗,中药或中西医结合疗法在减少尿蛋白、保护肾功能、改善炎症状态方面,效果显著,值得我们深入挖掘、发现和整理。研究目的本研究旨在通过文献计量学的方法对中医药改善DN微炎症状态的中文文献进行分析,以了解该领域的研究现况及热点,探索未来发展趋势,并用系统评价的方式对中医药治疗DN微炎症的疗效和安全性进行评价,以期为科研工作者及临床医务人员提供客观依据。研究方法本研究分两部分进行。第一部分是中医药改善DN微炎症状态相关文献计量学分析。具体方法:数据来源:检索中国知网(CNKI)有关中医药治疗糖尿病肾病微炎症状态的研究,检索时间为建库至2022年12月,文献类型及发表刊物不限制。应用文献计量学方法,分别分析中医药改善DN微炎症状态相关文献的年度发表情况、文献期刊分布情况、基金资助情况等。采用Citespace 6.1.R2对发文作者、机构信息进行共现分析,对关键词进行聚类分析、突现分析。第二部分通过meta分析对中医药改善DN微炎症状态疗效及安全性进行系统评价。具体方法:检索文献数据库:中文数据库:中国知网(CNKI)、万方、维普(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)等;外文数据库:PubMed、Cochrane library、Embase、Web of Science 等。检索时间:建库至 2022 年 12 月。研究设计类型:中药治疗糖尿病肾病微炎症状态的临床随机对照试验(RCT),无论是否详细描述盲法和随机分配隐藏方法。研究对象:符合糖尿病肾病诊断及Mogensen诊断分期标准的DNⅢ期及以上,临床未进行透析治疗。干预措施:对照组为DN常规基础治疗。试验组在对照组的基础上予中药口服治疗(包括中成药、中药提取物、中药复方等),干预周期不得少于8周。结局指标:(1)主要结局指标:超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);(2)次要结局指标:血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白排泄率(UAER)、24小时尿蛋白定量(UTP)、空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、不良反应。根据检索策略检索出文献,文献数据筛选:(1)将所筛选的文献题录导入Endnote软件,利用软件的去除重复功能排除重复文献。(2)由2名研究人员根据纳入和排除标准,独立筛选文献,通过阅读题目和摘要进行初筛,排除与本研究无关的文献(包括研究对象、干预措施、干预周期等),将符合的文献进行阅读全文,排除与本研究无关的文献(包括研究类型、干预措施、结局指标等),如有不确定或分歧,则由第三方进行仲裁,确定最后纳入文献。(3)由2名研究人员进行独立提取数据,交叉审核,如有不确定或分歧,则由第三方进行仲裁,决定结果。文献质量评价:(1)参考JADAD量表对文献进行评分。(2)采用Cochrane偏倚风险评估表,从随机方法、分配隐藏、盲法、失访、发表偏倚对纳入文献进行质量评价,绘制风险偏倚评估表。文献数据分析:采用软件RevMan5.4进行数据统计分析。研究结果第一部分:本次纳入285篇文献,从年发文量来看,发文量在2005-2013年间数量偏少,但随后稳步上升,虽然2020年有所减少,但我国中医药防治糖尿病肾病相关领域研究正处上升阶段,预计未来发文量会持续增加。从研究者和研究机构知识图谱分析来看,发文量最大的为杨丽霞、向少伟,其次是万毅刚、华川、刘静、于博睿、刘铜华、刘颖,同时各团队内的合作也十

关键词： NLRP3炎症小体   寡聚化   TRIM50   泛素化   蛋白翻译后修饰  

摘要： 研究目的炎症是一系列由微生物感染和组织损伤引发的机体防御反应。炎症反应在生物体内就像一把双刃剑,一方面,炎症反应可以清除体内病原体和受到损伤的细胞;另一方面,炎症反应的失调会引起组织和细胞的病变,诱发炎症性疾病甚至导致机体死亡。NOD样受体家族蛋白3(NOD-like receptor family protein 3,NLRP3)炎症小体通过识别各种不同的病原相关分子模式或组织损伤相关分子模式进而参与机体的各种炎症反应,在病原体感染、自身炎症性疾病、神经退行性疾病和Ⅱ型糖尿病等多种疾病中发挥重要的作用。然而,调控NLRP3炎症小体活化的分子机制尚未完全阐明,NLRP3的翻译后修饰对其活化的影响还有待进一步研究。阐明NLRP3炎症小体的分子机制对探究治疗NLRP3炎症小体相关疾病的新方法具有重要意义。三基序蛋白(Tripartite motif protein,TRIM)家族成员是一系列具有广泛生物活性的蛋白,大多数TRIM家族成员是E3泛素连接酶,它们通过诱导靶蛋白的泛素化修饰而发挥生物效应。TRIM50是一个新发现的TRIM家族成员,目前的研究表明它是典型的E3泛素连接酶。然而,TRIM50在天然免疫中的功能仍未可知。在本研究中,我们发现,TRIM50通过其RING结构域与NLRP3直接相互作用,导致RING型泛素连接酶活性减弱,并进一步诱导NLRP3寡聚化以及NLRP3炎症小体的活化。该研究为彻底阐明NLRP3炎症小体的调控机制提供了新的理论基础,同时为通过靶向TRIM50进行相关疾病的干预提供了潜在的治疗策略。研究方法通过免疫共沉淀和免疫荧光检测TRIM50和NLRP3的相互作用,进一步构建TRIM50和NLRP3结构域缺失的突变体分析TRIM50和NLRP3相互作用的结构域。通过应用Trim50特异性小干扰RNA构建Trim50基因干扰的细胞模型,并进一步构建Trim50基因敲除小鼠。用Western blot、酶联免疫吸附分析(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)等方法探究Trim50调控NLRP3炎症小体的作用效应。在细胞过表达模型中,通过免疫共沉淀和Western blot等研究TRIM50调控NLRP3炎症小体活化的分子机制。通过Trim50基因敲除小鼠的胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)进行TRIM50系列载体外源性转染的回补实验,验证TRIM50正向调控NLRP3炎症小体活化的分子机制。用Trim50基因敲除小鼠构建NLRP3相关的炎症模型,检测TRIM50对NLRP3炎症小体相关疾病的调控。研究结果***50直接与NLRP3相互作用。在HEK293T细胞以及小鼠腹腔巨噬细胞中,通过免疫共沉淀分别验证TRIM50和NLRP3的相互作用。体外蛋白表达体系进一步证明TRIM50和NLRP3能够在体外直接结合。免疫共沉淀和免疫荧光的结果显示,在NLRP3炎症小体的活化过程中,TRIM50结合NLRP3的能力显著增强。构建一系列TRIM50与NLRP3的结构域缺失突变体,免疫共沉淀检测TRIM50与NLRP3结合的结构域,结果显示TRIM50的RING结构域与NLRP3的NACHT741区域直接相互作用。2 TRIM50通过上调NLRP3的蛋白水平正向调控NLRP3炎症小体的活化。构建Trim50敲低的细胞模型并检测NLRP3炎症小体的活化。Western blot以及ELISA结果显示,敲低Trim50后NLRP3的蛋白表达以及NLRP3炎症小体的活化均显著下调。进一步构建Trim50基因敲除小鼠,通过对小鼠腹腔巨噬细胞和骨髓来源的巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)进行 Western blot 以及 ELISA 实验,进一步验证TRIM50对NLRP3炎症小体活化的正向调控效应。***50下调NLRP3的泛素化并增强NLRP3蛋白的稳定性。在HEK293T细胞和小鼠BMDM细胞中通过免疫沉淀检测NLRP3的泛素化,结果显示TRIM50显著降低了 NLRP3的泛素化。用放线菌酮(cycloheximide,CHX)抑制蛋白的从头合成,Western blot的结果显示,TRIM50显著增强NLRP3蛋白的稳定性。免疫共沉淀结果进一步证实TRIM50的RING结构域直接介导TRIM50和NLRP3的结合,及其对NLRP3炎症小体活化的调控。***50直接诱导NLRP3蛋白的寡聚化进而促进NLRP3炎症小体的活化。应用Western blot检测HEK293T细胞、小鼠腹腔巨噬细胞以及BMDM细胞中NLRP3的寡聚化,结果显示TRIM50显著增强了 NLRP