关键词： 炎症性肠病   活动性   全身炎症反应指数   纤维蛋白原/前白蛋白   纤维蛋白原/白蛋白  

摘要： 目的:本文旨在探究全身炎症反应指数（Systemic inflammatory response index,SIRI）、纤维蛋白原/前白蛋白比值（Fibrinogen to prealbumin,FPR）和纤维蛋白原/白蛋白比值（Fibrinogen to albumin,FAR）水平在克罗恩病（Crohn’disease,CD）和溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）患者中的变化情况。探究SIRI、FPR和FAR与CD和UC疾病活动情况的相关性,探究三种新型炎症反应参数对于评估处于活动期的CD和UC患者的应用价值。 方法:回顾性收集2019年2月至2022年2月东南大学附属中大医院消化内科确诊和随诊治疗的炎症性肠病（Inflammatory bowel disease,IBD）患者726名,包含CD患者636名和UC患者90名。选取同期胃肠镜和病理结果无异常的健康体检者110名。收集年龄和性别在内的基本资料及血细胞分析、纤溶功能、肝功能、红细胞沉降率（Erythrocyte sedimentation rate,ESR）和超敏反应C蛋白（C-Reactive Protein,CRP）在内的实验室检验结果。计算SIRI（中性粒细胞计数×单核细胞计数/淋巴细胞计数）、FPR（纤维蛋白原/前白蛋白）和FAR（纤维蛋白原/白蛋白）新型衍生指标结果。比较各指标在IBD亚组患者和健康体检者间及各IBD亚组患者活动期和缓解期间的差异,分析SIRI、FPR、FAR、ESR和CRP各参数与CD临床疾病活动度评分、UC临床和镜下疾病活动度评分间的相关性。二元Logistic回归生成各指标的联合预测模型,通过受试者工作特征曲线（Receiver operating characteristic,ROC）分析各参数和联合预测模型对处于临床活动期CD患者和处于临床及镜下活动期UC患者的评估效能。 结果:1、与健康对照组相比,CD和UC患者的SIRI、FPR和FAR水平呈现明显升高态势（P<0.001）。 2、与对应的缓解期患者相比,处于临床活动状态的CD和UC患者及处于镜下活动状态的UC患者的SIRI、FPR、FAR、ESR和CRP水平呈现明显升高态势（P<0.001）。3、SIRI、FPR、FAR、ESR、CRP在与CDAI评分、改良Mayo评分、UCEIS评分的Spearman相关分析中呈正相关,对应的rs分别为0.349、0.532、0.526、0.527、0.491（CDAI,P<0.001）,0.540、0.754、0.734、0.622、0.742（改良Mayo,P<0.001）,0.529、0.696、0.690、0.604、0.704（UCEIS,P<0.001）。 4、受试者工作特征曲线分析中,SIRI对于判定处于临床活动状态的CD或UC患者和处于镜下活动状态的UC患者具有一定的价值,对应的AUROC分别为0.848、0.727、0.730（P≤0.001）,与之相对的SIRI最佳截断值为1.25×10～9/L（敏感性:84.2%,特异性:76.7%）、0.68×10～9/L（敏感性:87.5%,特异性:50.0%）、1.45×10～9/L（敏感性:45.2%,特异性:92.9%）。FPR对于判定处于临床活动状态的CD或UC患者和处于镜下活动状态的UC患者具有良好的价值,对应的AUROC分别为0.937、0.879、0.877（P<0.001）,与之相对的FPR最佳截断值为19.45（敏感性:88.4%,特异性:86.9%）、14.34（敏感性:81.3%,特异性:84.6%）、14.34（敏感性82.3%,特异性:82.1%）。FAR对于判定处于临床活动状态的CD或UC患者和处于镜下活动状态的UC患者具有良好的价值,对应的AUROC分别为0.930、0.871、0.879（P<0.001）,与之相对的FAR最佳截断值为0.10（敏感性:85.3%,特异性:87.6%）、0.08（敏感性:79.7%,特异性:84.6%）、0.08（敏感性:80.6%,特异性:82.1%）。SIRI、FPR、FAR、ESR和CRP组成联合预测模型评价CD临床活动情况的AUROC高达0.979（敏感性:92.6%,特异性:92.8%）,FPR和CRP组成联合预测模型评价UC患者临床活动情况的AUROC等于0.891（敏感性:79.7%,特异性:84.6%）,SIRI、FAR和ESR组成联合预测模型评价UC镜下活动情况的AUROC等于0.912（敏感性:93.5%,特异性:75%）,联合模型的诊断效能均高于单项指标。 结论:基于入院常规实验室检验结果的衍生指标SIRI、FPR和FAR是相对无创的评估CD和UC患者是否处于活

关键词： 电针   预处理   脓毒症   全身炎症   肺损伤   RNA-seq  

摘要： 目的: 本研究旨在探究电针预处理抗脓毒症炎性反应和对靶器官的保护作用,在电针预处理双侧足三里穴位改善LPS诱导的脓毒症小鼠效应平台基础上,通过RNA-seq技术筛选出电针预处理起效的关键基因,阐明电针预处理抑制脓毒症炎症反应,起到器官保护作用的机制。 方法: 1.电针预处理提高脓毒症小鼠生存率及抑制炎症反应的效应研究 实验一电针预处理不同天数对脓毒症小鼠生存率的影响 将C57BL/6J健康雄性小鼠随机分为空白对照(NC)组、模型(M)组、模型电针1天(M+EA1)组、模型电针3天(M+EA3)组、模型电针7天(M+EA7)组,每组15只。模型组造模时间在第7天的15分钟后。模型电针组分别在电针预处理双侧足三里穴的第1、3、7天的15分钟后造模,预处理方法为造模前取足三里穴行电针,连续波,10Hz,强度5,1次/天,15分钟/次;造模方法为腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)(24 mg/kg)获得脓毒症小鼠模型,NC组腹腔注射等量的PBS溶液。在注射LPS后即刻起,记录各组小鼠的死亡时间,计算生存率和小鼠脓毒症评分(Murine sepsis score,MSS)。 实验二电针预处理抗脓毒症小鼠过度炎症反应的效应研究 将小鼠随机分为NC组、正常鼠电针7天(NC+EA7)组、M组、M+EA7组,每组6只。在电针足三里穴第7天的15分钟后,腹腔注射LPS,其余组处理方法同前。造模6小时后取小鼠眼球血,进行血常规检测,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清炎症因子白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的蛋白含量。 2.电针预处理抑制LPS诱导的脓毒症小鼠肺部炎症及损伤的效应研究 将小鼠随机分为NC组、NC+EA7组、M组、M+EA7组,每组9只。电针预处理方法同前所述。分别于造模6、24小时后,取肺组织,采用RT-q PCR检测IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-10、IL-4编码基因的转录表达水平。通过苏木素-伊红染色(Hematoxylin and eosin staining,HE)观察各组小鼠肺组织的病理变化。 3.电针预处理抑制脓毒症小鼠肺组织炎症的转录组测序的研究 将小鼠随机分为NC组、NC+EA7组、M组、M+EA7组,每组15只。电针预处理方法同前所述。造模6小时后,取肺组织器官,采用转录组测序(RNA-seq)技术,并将组间差异基因进行现代生物信息学分析,获得组间表达差异基因(pvalue<0.05,|log2Fold Change|>0),比较组合包括M vs NC组、NC+EA7 vs NC组、M+EA7 vs M组。通过火山图、Venn、KEGG、GO和GSEA富集分析技术分析电针预处理防治脓毒症的主要生物学过程、关键信号通路、关键基因。 ***1介导电针预处理抗脓毒症肺过度炎性反应的机制研究 实验一电针预处理对脓毒症小鼠肺组织STAT1表达的影响 将小鼠随机分为NC组、NC+EA7组、M组、M+EA7组,每组6只。电针预处理7天后取肺组织,采用RT-q PCR和蛋白质印迹法(Western Blot,WB)分别检测各组小鼠肺组织中STAT1和具有转录调控活性的p-STAT1的表达变化。 实验二调控STAT1对电针预处理抗脓毒症肺过度炎性反应影响的研究 将小鼠随机分为M+Solvent组、M+2-NP组(STAT1的增强剂2-NP,5 mg/kg)、M+EA7+Solvent组、M+EA7+2-NP组,每组9只。M+2-NP组、M+EA7+2-NP组在电针前根据小鼠体重采用腹腔注射2-NP,隔天一次,第7天电针15分钟后通过腹腔注射LPS诱导脓毒症模型。M+Solvent组、M+EA7+Solvent组注射同等剂量的溶剂,其余方法同前。分别于造模后6、24小时后取肺组织,采用RT-q PCR、WB以及ELISA技术分别检测STAT1的编码基因表达、p-STAT1蛋白表达及血清炎症因子TNF-α和IL-6的表达水平。通过HE染色观察肺组织病理损伤情况。 结果: 1.电针预处理提高脓毒症小鼠生存率,降低MSS评分及抑制炎症因子的表达 MSS评分结果显示,在LPS造模后,EA1、EA3、EA7组小鼠与M组小鼠相比均可显著降低MSS评分。通过统计电针预处理对LPS诱导脓毒症小鼠的7天内的生存率,结果显示,M组小鼠死亡10只,存活5只,存活率为33.3%,M+EA1组小鼠死亡8只,存活7只,存活率为46.7%,M+EA3组小鼠死亡7只,存活8只,存活率为53.3%,M+EA7组小鼠死亡4只,存活11只,存活率为73

关键词： 全身炎症反应指数   直肠癌   新辅助放化疗   疗效及预后  

摘要： 目的:本论文旨在研究全身炎症反应指数(Systemic Inflammation Response Index,SIRI)对局部进展期直肠癌患者接受新辅助放化疗后的肿瘤退缩反应以及生存结局的预测作用。 方法:本研究收集了2015年4月至2020年8月期间在河北医科大学第四医院接受了术前新辅助放化疗和根治性手术治疗的局部进展期直肠癌患者共207例。经过筛选和排除后对剩余的198例患者的临床资料进行统计分析。通过独立样本t检验、卡方检验或Fisher精确检验比较影响新辅助放化疗疗效的因素。受试者工作特征曲线用来评估各个指标的效能并寻找最佳诊断临界值。单因素和多因素COX回归分析用来筛选影响预后的预测因子,最后构建列线图模型预测患者的生存。 结果: 1.以术后肿瘤退缩分级为依据分组后发现,良好反应组和较差反应组在癌胚抗原(Carcinoembryonic Antigen,CEA)、中性粒细胞与淋巴细胞比率(Neutrophil-to-Lymphocyte Ratio,NLR)、全身免疫炎症指数(S ystemic Immune-inflammation Index,SII)、SIRI四个指标之间存在差异。 2.受试者工作特征曲线分析后的结果表明NLR、SII、SIRI三个指标对新辅助放化疗的疗效有一定的预测价值。 3.在单因素和多因素COX回归分析后,只有SIRI是总生存期(over all survival,OS)和无病生存期(disease-free survival,DFS)的独立预测因素。并且在Kaplan-Meier生存曲线中,低SIRI组的OS(P=0.003)及DFS(P=0.001)都明显优于高SIRI组。 4.基于SIRI的列线图模型可以用来预测患者的5年OS和DFS。 结论: 1、术前全身炎症反应指数(SIRI)可以预测局部进展期直肠癌患者对新辅助放化疗的反应性,并且是OS和DFS的独立预测因子。 2、SIRI>2.53的患者往往与较差的新辅助放化疗反应有关,同时还预示着较差的OS和DFS。基于SIRI建立的列线图模型可以有效预测OS和DFS。因此,术前评估患者的SIRI的水平有一定的指导意义。

关键词： 血脑屏障   神经炎症   全身炎症   中药  

摘要： 血脑屏障是介于血液和大脑之间的高度调节界面，对于维持大脑稳态、保护神经元至关重要。血脑屏障功能障碍与多种中枢神经疾病相关，尤其是神经退行性疾病，而神经炎症是许多神经退行性疾病的共有现象，其与血脑屏障有着复杂的调节关系，从而影响疾病的发展。不仅是神经炎症，血脑屏障同时也向大脑发出全身炎症的信号，二者相互影响。维护血脑屏障完整性、降低通透性一直是治疗神经退行性疾病的重要靶点，如阿尔茨海默病，越来越多的研究发现中药对此发挥良好作用。因此，本文将首先回顾血脑屏障的结构和功能，其次分别从神经炎症和全身炎症探讨炎症与血脑屏障的互作关系，最后阐述中药保护血脑屏障的机制信号通路。

关键词： CD16+单核细胞   普拉德-威利综合征   高炎症状态   单细胞转录组分析  

摘要： 研究背景　　普拉德-威利综合征(Prader-Willisyndrome,PWS),俗称小胖威利综合征是一种罕见、复杂的多系统综合征，发病率约为1/10000至1/30000,并于1956年首次由Prader等报道。从遗传学上讲，PWS是一种印记基因病，由父系染色体15q11-q13区域的5-6Mb基因表达缺失引起。该区域基因表达缺失主要通过以下三种机制:父源性15q11-q13区域的缺失(65-75％)、母源性单亲二体(20-30％)或印记缺陷(1-3％)。该综合征表现出广泛的临床特征，包括低肌张力、发育迟缓、认知障碍、精神异常、睡眠呼吸障碍和肥胖等。　　慢性炎症是指一种低级别持续性的非感染性炎症状态，其主要特征是免疫细胞的异常激活。系统性慢性炎症导致的慢性炎症相关的疾病，例如心血管疾病、2型糖尿病(type2diabetesmellitus，T2DM)、精神性疾病等，已被认为是当今世界上最重要的死亡原因。多项研究表明PWS与匹配相同的身体质量指数(bodymassindex,BMI)人群相比，患炎症相关疾病的风险增加，这也是PWS患者最常见的死因之一。AliceClerc的研究指出，与一般人群相比，PWS成年人中有20％患有T2DM，而一般人群的患病率为5-7％。最近，日本和韩国的研究团队发现，50％的PWS患者在18岁之前就发展为T2DM。多种精神相关的疾病也在PWS普遍存在，临床研究发现PWS患者中超过20％的被明确诊断为重度抑郁症，16％至32％的患者经历过精神分裂发作。此外，有研究显示PWS患动脉粥样硬化的风险增加，且年轻化。　　部分研究发现PWS与匹配相同的BMI人群相比，循环中炎症标志物浓度增加，如白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-iβ(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)和C-反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)。上述细胞因子如IL-1β和TNF在介导T2DM、心血管疾病和精神障碍的发展中起到核心作用。另有研究发现PWS患者血清中IL-1β和白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)水平与PWS多种精神症状严重程度相关。PWS患者外周循环中炎症标志物与特定的免疫细胞活化标志物水平相关。有专家提出在PWS患者中，外周免疫系统激活，可能参与外周循环中细胞因子水平增加，引起全身性炎症，似乎在这些PWS炎症相关疾病的发展中起着关键的作用，这促使了我们将注意力转向PWS外周免疫细胞的变化。　　然而，由于外周免疫细胞具有明显的异质性且功能复杂，导致PWS中外周免疫细胞的详细特征尚不清楚。单细胞RNA测序(single-cellRNAsequencing,scRNA-seq)提供了一种无偏见、综合全面的方法，可根据细胞个体的转录组特征来定义细胞类型和状态，并被广泛用于揭示免疫细胞的异质性和多样性，寻找疾病相关的细胞亚群。在本研究中，我们不仅利用高通量方法对PWS患者免疫系统进行多个血清炎症标志物检测和研究，还首次利用scRNA-seq技术构建PWS患者外周免疫细胞图谱，寻找PWS关键致病性亚群，并通过质谱流式单细胞蛋白组学(masscytometry,CyTOF)进一步验证，为之后PWS患者免疫研究及免疫相关靶向治疗提供理论支持。　　研究目的　　1.利用高通量多因子检测明确PWS血清细胞因子变化。　　2.探索血清细胞因子与PWS免疫细胞的相关性。　　3.利用scRNA-seq构建PWS外周免疫细胞图谱，明确PWS外周免疫细胞特征及其在PWS高炎症状态的作用。　　4.深度剖析与PWS密切相关细胞亚群在疾病中的作用，以期寻找致病的细胞亚群以及致病分子、通路。　　5.探索PWS外周免疫的改变与15q11-q13区域基因关系，并进一步利用公共数据库挖掘PWS相关的单基因与炎症的关系。　　研究方法(技术路线见图1)　　(一)研究对象　　本研究包括PWS患者和健康个体，所有研究对象均在山东第一医科大学附属山东省立医院通过义诊方式于2019-2021年招募。本研究得到了山东省立医院伦理委员会的批准。所有研究对象均获得父母或法定监护人的书面知情同意。PWS的诊断由基因检测证实，且所有受试者均未服用任何药物。所有受试者均无癌症、自身免疫性疾病、糖尿病、感染或类固醇使用史。记录所有研究对象年龄、性别、身高、体重和诊疗等信息，并对PWS患者进行甲基化敏感的多重连接探针扩增技术(methylationsensitivemultiplexligationdependentprobeamplification,MS-MLPA)检测。所有受试者在晚上12时后禁食，次日上午8-10点采集空腹血。　　(二)多组学检测与

关键词： 慢性冠脉综合征   糖尿病   冠脉病变程度   全身免疫炎症指数   病理相关性  

摘要： 【目的】　　本研究通过探讨慢性冠脉综合征合并糖尿病患者全身免疫炎症指数（systemicimmune-inflammationindex，SII）与冠脉病变严重程度的关系，了解其预测价值，为慢性冠脉综合征合并糖尿病患者的防治及管理提供一定的理论依据。　　【方法】　　本研究为单中心、回顾性研究，连续纳入2021年7月1日至2022年7月31日至广东医科大学附属医院住院治疗并行冠状动脉造影(coronaryangiography，CAG)的917例患者，根据CAG结果及是否合并糖尿病分为以下四组：A组（慢性冠脉综合征合并糖尿病组225例）、B组（单纯慢性冠脉综合征组239例）、C组（单纯糖尿病组203例）、D组（非慢性冠脉综合征非糖尿病组250例），所有入选病例均记录一般临床资料、实验室指标及CAG结果。并依据其CAG结果，在A、B两组中计算Gensini评分，并根据Gensini评分将A组中进一步分为重度冠状动脉狭窄组和轻度冠状动脉狭窄。使用SPSS25.0和GraphPadPrism8.0软件包对数据进行统计分析，P＜0.05差异有统计学意义。　　【结果】　　1.各组炎症指标比较，慢性冠脉综合征合并糖尿病组SII水平高于其余三组（P＜0.05）。　　2.慢性冠脉综合征合并糖尿病组与单纯慢性冠脉综合征组比较，基线资料可比（P＞0.05），两组Gensini评分慢性冠脉综合征合并糖合并尿病组＞单纯慢性冠脉综合征，对于病变支数来说，慢性冠脉综合征合并糖尿病组三支病变所占比例高于单纯慢性冠脉综合征组（32.9%vs.17.6%），单纯慢性冠脉综合征组以单支病变为主（占51.5%）。对于反映心功能的指标，慢性冠脉综合征组合并糖尿病组的NT-proBNP中位数最高，LVEF中位数最低（P＜0.05）。　　3.运用Spearman相关分析评估慢性冠脉综合征合并糖尿病组及慢性冠脉综合征组SII水平与Gensini评分之间的相关性，结果表明两组的SII的水平均与Gensini评分呈正相关，其r值分别为0.503、0.375(P＜0.001）。　　4.多因素logistic回归分析发现，男性（OR：2.029;95%可信区间（CI）：1.007-4.090;P=0.048）、eGFR（OR：0.964;95%CI：0.934-0.995;P=0.024）、SII（OR：1.007;95%CI：1.005-1.009;P＜0.001）具有统计学意义。　　5.根据受试者工作特征（receiveroperatingcharacteristic，ROC）曲线得知，SII预测慢性冠脉综合征合并糖尿病的ROC曲线下面积（AUC）为0.803[95%CI（0.763，0.844）]，当SII=461.23×109/L，其预测能力最强，敏感度和特异度分别为76.4%和68.0%（P＜0.001）。且与本研究的其他炎症指标相比，SII预测慢性冠脉综合征合并糖尿病的ROC曲线下面积最大。SII预测慢性冠脉综合征的ROC曲线下面积（AUC）为0.811[95%CI（0.774，0.848）]，当SII=428.10×109/L，其预测能力最高，敏感度和特异度分别为67.4%和78.4%（P＜0.001）。且与本研究的其他炎症指标相比，SII预测慢性冠脉综合征的ROC曲线下面积最大。　　6.根据Gensini评分将慢性冠脉综合征合并糖尿病患者进一步分为重度冠脉狭窄组(A1组，Gensini评分≥30分;n=104)和轻度冠脉狭窄组(A2组，Gensini评分＜30分;n=121)。基线资料可比（P＞0.05）。运用Spearman相关分析评估A1组中SII与Gensini评分的相关性，结果显示，该组中SII与Gensini评分呈正相关（r=0.503，P＜0.001）。绘制ROC曲线得知，SII预测慢性冠脉综合征合并糖尿病重度冠脉病变的ROC曲线下面积（AUC）为0.900[95%CI（0.865，0.936）]，当SII=548.15×109/L，其预测能力最高，敏感度和特异度分别为65.9%和74.8%（P＜0.001）。且与本研究的其他炎症指标相比，SII预测慢性冠脉综合征合并糖尿病重度冠脉病变的ROC曲线下面积最大。　　【结论】　　1.慢性冠脉综合征合并糖尿病患者SII值高于单纯慢性冠脉综合征组、单纯糖尿病组和非慢性冠脉综合征非糖尿病组;2.慢性冠脉综合征合并糖尿病组比单纯慢性冠脉综合征冠脉病变更重、心功能更差;3.慢性冠脉综合征合并糖尿病患者、单纯慢性冠脉综合征患者的SII值均与Gensini评分呈正相关，提示SII值有可能成为评估慢性冠脉综合征合并糖尿病、慢性冠脉综合征患者冠脉狭窄程度的简易临床指标;4.男性、高SII水平及低eGFR水平是慢性冠脉综合征合并

关键词： 金葡菌   创伤   脓毒症   多器官功能衰竭   免疫   铁死亡   GPX4  

摘要： 目的: 脓毒症(Sepsis)是创伤常见的严重并发症,而金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)导致的脓毒症具有高的死亡率,但其作用机制仍不清楚。本研究拟探索金葡菌感染的创伤患者与脓毒症和多器官功能衰竭(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)发病率之间的关系及其作用机制,为临床上脓毒症的早期诊断和针对性的免疫靶向治疗提供新策略和依据。 方法: 1.从“创伤患者生物样本资源库与临床研究数据库”中获得1574例创伤患者,分析脓毒症患者的分布一般特征。研究不同类型病原菌感染患者的脓毒症发生率与死亡情况。 2.构建金葡菌感染脓毒症小鼠模型,观察小鼠重要脏器损伤与炎症免疫反应情况。利用液态悬浮芯片技术对脓毒症模型小鼠外周血进行炎症因子的高通量检测,观察炎症因子的变化情况。并探索IL-6单克隆抗体在脓毒症小鼠中的靶向治疗作用,观察其对脓毒症小鼠的生存曲线和体重的影响。流式技术分析T淋巴细胞上的共刺激分子CD28在金葡菌诱导的脓毒症小鼠外周血中的表达变化。对CD3+CD28+的T细胞进行蛋白组学分析,观察差异蛋白的表达水平变化。 3.为了验证蛋白组学的结果,基于GEO数据集和体内实验探索了铁死亡在脓毒症多器官损伤中的作用。从GEO数据库下载4个脓毒症数据集[包括2个训练数据集(GSE26378和GSE26440)和2个验证数据集(GSE11755和GSE11281)]进行分析,并采用GO和KEGG通路富集分析进行功能注释。然后,构建蛋白-蛋白互作网络(PPI)和聚类分析,获得hub-铁死亡相关基因(hub-FRG)并使用ROC技术分析其诊断效能。通过一致性聚类分析获得脓毒症亚群,并研究hub-FRG与免疫调控之间的关系。 最后,利用脓毒症动物模型,检测小鼠外周血重要器官生化酶学及病理组织染色,通过West blot和免疫荧光实验验证hub-FRG在重要器官中的表达,以及使用ATP实验检测了重要器官中线粒体的功能。 结果: 1.根据临床数据分析发现金葡菌感染的患者较其他G+菌感染患者更易发展为脓毒症。金葡菌诱导的脓毒症较其他脓毒症的死亡率显著增高。金葡菌诱导的脓毒症患者所发生的多器官功能衰竭主要表现在肺脏(81.25%),肝脏(68.75%)和肾脏(37.5%)。 2.通过建立不同类型的脓毒症小鼠模型,观察发现金葡菌诱导的脓毒症小鼠的肺、肝和肾重要器官损伤较大肠杆菌组和LPS组脓毒症小鼠明显加重;炎症因子检测显示:与对照组(大肠杆菌组和LPS组脓毒症小鼠)比较,金葡菌诱导的脓毒症小鼠外周血中IL-6表达水平显著升高;IL-6单克隆抗体在不同脓毒症模型小鼠中的靶向治疗结果显示:IL-6单克隆抗体可以有效的分别提高金葡菌、大肠杆菌和LPS所诱导的脓毒症小鼠的生存时间,并可增加其体重。流式技术分析显示:CD3+的T淋巴细胞上的共刺激分子CD28在金葡菌诱导的脓毒症小鼠外周血中的表达升高显著;CD3+CD28+的T细胞蛋白组学结果分析显示:共有127个关键差异表达蛋白,Cytohubba软件计算出排名前10的重要关键差异表达蛋白(Key-DEPs),即:Gpx1、Hsp90b1、Gpx4、Hspa5、Ywhab、Atp2a2、P4hb、Glud1、Ywhag和Got2。此外,通过Cytoscape Clue GO观察Key-DEPs的生物学过程和KEGG分析,发现这些差异表达蛋白主要富集在铁死亡、谷胱甘肽代谢、溶酶体和内质网蛋白质加工等的生物调控过程。 ***数据集验证上述蛋白组学结果展示:在GSE26378和GSE26440数据集中共获得63个差异表达铁死亡相关基因(DE-FRGs)。GO和KEGG分析发现DE-FRGs显著富集在铁死亡、线粒体、自噬体和氧化还原酶活性。蛋白-蛋白互作网络发现3个重要模块(MCODE),并与差异表达线粒体功能相关基因(DE-MFRGs)交集获得4个Core-FRGs(FTH1、GPX4、ACSL1和ACSL6)。然后,通过验证集(GSE11755和GSE11281)筛选出Hub-FRG(GPX4),这些结果与蛋白组学分析一致。随后,ROC分析显示,GPX4在脓毒症的诊断中是一个具有良好应用价值的生物标志物。另外,无监督聚类分析获得4个铁死亡表达差异的亚型(Cluster),并对Cluster1(sepsis)和Cluster2(control)进行免疫细胞浸润和免疫检查点研究发现,与Cluster2相比,Cluster1中的免疫细胞群表达水平有7种显著上调,10种明显下调。且免疫检查点基因表达水平有2个显著上调(CD274 and HAVCR2)和1个显著下调(TIGIT)。Pearson相关性分析显示GPX4与免疫细胞中Neutr