关键词:
益肺健脾方
急性肺损伤
免疫炎症反应
信号传导转录激活因子1/干扰素调节因子3(STAT1/IRF3)信号通路
摘要:
目的:观察益肺健脾方对脂多糖(LPS)诱导的肺炎模型大鼠信号传导转录激活因子1(STAT1)/干扰素调节因子3(IRF3)信号通路的影响,探讨益肺健脾方改善肺部免疫炎症反应的机制。方法:将60只雄性SPF级SD大鼠,随机抽取10只为正常组,余50只气管滴注脂多糖建立大鼠肺炎模型,成功后再随机分为模型组、地塞米松组(0.5 mg·kg^(-1))、益肺健脾方高、中、低(12、6、3 mg·kg^(-1))剂量组,每组10只,每天给药1次,正常组和模型组予等体积生理盐水,14 d后,流式细胞术检测全血淋巴细胞分类,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)及肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肺组织病理改变并评分,计算脾脏、胸腺重量及肺湿干重比(W/D),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织信号STAT1、IRF3、IL-6、干扰素-α(IFN-α)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织STAT1、IRF3、IL-6、IFN-α蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠外周血B淋巴细胞比例显著升高,NK细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)降低(P<0.05,P<0.01),血清IgG、IgA含量降低,IgM含量显著升高(P<0.01),BALF中TNF-α、IL-6、IL-8含量显著升高,IL-10含量显著降低(P<0.01),肺组织损伤明显,胸腺、脾脏质量显著增加,W/D值升高(P<0.01),肺组织STAT1、IRF3、IFN-α、IL-6 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,益肺健脾方各组大鼠外周血B淋巴细胞比例显著降低,NK细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)升高(P<0.05,P<0.01),血清IgG、IgA含量明显升高,IgM含量明显下降(P<0.05,P<0.01),BALF中TNF-α、IL-6、IL-8表达显著降低,IL-10表达显著升高(P<0.01),肺组织损伤程度减轻,胸腺、脾脏质量显著减轻,W/D值显著降低(P<0.01),肺组织STAT1、IRF3、IFN-α、IL-6 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论:益肺健脾方可减轻脂多糖诱导的肺炎大鼠肺组织损伤,改善肺部免疫炎症反应,其机制可能与抑制STAT1/IRF3信号通路激活有关。