关键词： 口腔中性粒细胞   外周血中性粒细胞   趋化   吞噬   中性粒细胞胞外诱捕网  

摘要： 目的:比较口腔中性粒细胞(oPMN)和外周血中性粒细胞(cPMN)免疫炎症反应的差异,探讨oPMN维持牙周健康的作用。方法:常规密度梯度离心法分离获得健康人外周静脉血来源的cPMN,离心过滤法分离获得健康人口腔含漱液来源的oPMN。采用1μg/mL牙龈卟啉单胞菌(***)脂多糖(LPS)刺激,并以大肠杆菌(***)LPS作为阳性对照,流式细胞术检测凋亡水平变化;Transwell实验比较白介素(IL)-8刺激前后两种细胞趋化能力的差异;ELISA检测IL-1β、IL-8和IL-10表达水平变化;流式细胞术检测两种细胞对***或***的吞噬作用;免疫荧光实验观察中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的形成,Sytox Green法对胞外DNA进行定量;Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶1/2(MEK1/2)、细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和核转录因子-κB(NF-κB)P65磷酸化水平的变化。结果:两种LPS刺激后,与cPMN相比,oPMN凋亡增多(P<0.05)。IL-8刺激后,两种细胞趋化能力未见明显差异(P>0.05)。两种LPS刺激后,oPMN较cPMN的IL-1β、IL-8和IL-10表达水平更高(P<0.01)。oPMN吞噬***和***的能力强于cPMN(P<0.05),形成的NETs更多,胞外DNA水平、MEK1/2、ERK1/2和NF-κB P65磷酸化水平均较cPMN更高(P<0.05)。结论:oPMN可能是具有过度活跃表型的中性粒细胞,其吞噬、分泌细胞因子和形成NETs的能力较cPMN增强,可能与其MEK1/2、ERK1/2和NF-κB磷酸化水平增高有关。

关键词： 哌拉西林   miR-127-5p   重症肺炎   炎症因子   核转录因子(NF)-κB信号通路  

摘要： 目的探讨哌拉西林对重症肺炎大鼠炎症因子的影响及分子机制。方法用肺炎克雷伯菌构建重症肺炎大鼠模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组(50 mg/kg哌拉西林)、中剂量组(100 mg/kg哌拉西林)、高剂量组(200 mg/kg哌拉西林)、anti-miR-con+模型组、anti-miR-127-5p+模型组、anti-miR-con+高剂量组、anti-miR-127-5p+高剂量组。酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β水平;髓过氧化物酶(MPO)活性测定试剂盒检测MPO活性;Western印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、p-p65蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-127-5p表达水平。结果重症肺炎大鼠模型中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平升高,MPO活性升高,MMP2、MMP9、p-p65蛋白的相对表达水平升高,miR-127-5p相对表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同剂量哌拉西林处理后,重症肺炎大鼠中IL-6、TNF-α、IL-1β水平降低,MPO活性降低,MMP2、MMP9、p-p65蛋白的相对表达水平降低,miR-127-5p相对表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染miR-127-5p抑制载体质粒后,重症肺炎大鼠中IL-6、TNF-α、IL-1β水平升高,MPO活性升高,MMP2、MMP9、p-p65蛋白的相对表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。抑制miR-127-5p表达逆转了哌拉西林对重症肺炎大鼠模型组炎症因子和MMP2、MMP9、p-p65的蛋白表达的影响。结论哌拉西林可降低重症肺炎大鼠炎症因子水平,其可能与上调miR-127-5p表达及抑制NF-κB信号通路有关。

关键词： 植物提取物复合制剂   奶牛乳腺上皮细胞   炎症反应   转录组  

摘要： 本试验旨在研究植物提取物复合制剂对脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)炎症模型免疫、抗氧化功能和转录组的影响,以揭示植物提取物复合制剂缓解BMEC炎症反应的分子机制。试验选用第3代贴壁生长BMEC,随机分为5组,每组8个重复,每个重复1个培养孔。对照组BMEC不添加LPS和植物提取物复合制剂,采用基础培养基培养10 h;LPS组BMEC添加10μg/mL LPS作用6 h后,采用基础培养基培养4 h;试验组BMEC加入10μg/mL LPS作用6 h后,分别加入30(WELPS30组)、50(WELPS50组)及70μg/mL(WELPS70组)的植物提取物复合制剂,采用基础培养基培养4 h。测定各组免疫及抗氧化相关指标,并选择LPS组和WELPS30组进行转录组测序及分析。结果表明:1)LPS组BMEC相对增殖率显著低于对照组(P<0.05),WELPS30组BMEC相对增殖率显著高于LPS组(P<0.05),且WELPS30组、WELPS50组和WELPS70组BMEC中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-8(IL-8)含量显著低于LPS组(P<0.05)。2)LPS组BMEC中丙二醛(MDA)含量和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)活性显著高于对照组(P<0.05),WELPS30组、WELPS50组和WELPS70组BMEC中MDA含量和iNOS活性显著低于LPS组(P<0.05),WELPS30组BMEC中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化能力(T-AOC)显著高于LPS组(P<0.05)。3)转录组测序结果表明,共有369个差异表达基因。GO富集分析显示,差异表达基因主要参与调节白细胞介素-17(IL-17)生成、白细胞介导的细胞毒素作用、T细胞增殖等生物学过程。KEGG富集分析显示,差异表达基因主要集中在以NOD样受体(NLR)信号通路和IL-17信号通路为主的免疫相关信号通路。4)以介数中心性为指标进行网络分析,发现Toll样受体2(TLR2)、趋化因子10(CXCL10)和集落刺激因子2(CSF2)等10个基因在植物提取物复合制剂调控的差异表达免疫基因中起到关键连接性作用。由此可见,植物提取物复合制剂可以提高BMEC抗氧化功能,缓解BMEC炎症反应,其分子机制是植物提取物复合制剂通过调节IL-17信号通路和NLR信号通路缓解BMEC的炎症反应,TLR2、CXCL10和CSF2等10个基因在差异表达免疫基因中起到关键性的连接作用。

关键词： 岩白菜素   小胶质细胞   脂多糖   一氧化氮诱导合酶   精氨酸1   炎症反应  

摘要： 目的探讨岩白菜素对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症反应模型的影响以及其机制是否与调控小胶质细胞M1/M2表型极化相关。方法BV2小胶质细胞分为对照组、LPS组、LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组,LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组分别加入10μmol/L、100μmol/L的岩白菜素预处理2 h后与LPS组一起加入LPS刺激诱导炎症反应模型,对照组正常培养不做任何处理。各组置于倒置显微镜下观察细胞形态变化,Western blotting法检测细胞M1型小胶质细胞分泌型标志物一氧化氮诱导合酶(iNOS)、M2型小胶质细胞分泌型标志物精氨酸1(Arg-1)蛋白表达。结果对照组细胞呈梭形,胞体小,有较少的分支形成;LPS组细胞胞体变大,细胞分支增多,呈阿米巴样;LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组细胞形态均较LPS组有改善,胞体变圆,分支减少。细胞iNOS蛋白表达对照组、LPS+高剂量岩白菜素组、LPS+低剂量岩白菜素组>LPS组;细胞Arg-1蛋白表达LPS组>iNOS蛋白表达对照组、LPS+高剂量岩白菜素组、LPS+低剂量岩白菜素组(P均<0.05)。结论岩白菜素可抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应,该作用可能通过促进小胶质细胞向M2表型极化实现。

关键词： 慢性应激   抑郁症   神经胶质细胞   免疫炎症反应   微生物-肠-脑轴  

摘要： 抑郁症是影响范围广、人数多的精神/心境障碍,其经典致病机制假说包括HPA(hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis)轴功能异常、单胺类和神经可塑性缺陷等。要充分阐明抑郁症多种致病因素,及不同病因之间复杂的相互作用关系,仍需更加深入的研究。慢性应激是抑郁症主要临床诱因,利用此动物模型可充分揭示发病过程中复杂的病理机制及其变化趋势,且利于将转化医学研究结果快速有效地向临床转化,对疾病预防和治疗有重要意义。目前现有相关综述主要围绕经典的HPA轴异常、单胺类和神经可塑性缺陷、大脑神经元结构功能、中枢神经递质和因子及其受体等方面异常展开。本文综述了近年抑郁症研究热点和新发现,包括基因变异和表观遗传修饰、神经胶质细胞(星形胶质细胞和小胶质细胞)结构功能异常、线粒体功能障碍、机体系统水平异常(氧化应激、免疫炎症反应和微生物-肠-脑轴),旨在系统呈现慢性应激诱导动物抑郁样行为机制研究进展,为后续有针对性地深入研究致病机制,及其临床预防和治疗提供新思路。

关键词： 重症感染   五味消毒饮加减   热毒内陷证   免疫功能   炎症反应  

摘要： 目的:观察五味消毒饮加减治疗热毒内陷证重症感染的疗效及对患者炎症反应、免疫功能的影响。方法:选取120例热毒内陷证重症感染患者,按随机数字表法分为对照组和观察组各60例。对照组采用对症治疗和常规抗感染治疗,观察组在对照组基础上加用五味消毒饮加减治疗,疗程均为2周。观察并比较2组治疗前后急性生理学及慢性健康状况(APACHEⅡ)评分,序贯器官衰竭(SOFA)评分,CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)及白细胞计数(WBC)水平。结果:治疗前,2组APACHEⅡ、SOFA评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组APACHEⅡ、SOFA评分均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗前,2组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。治疗前,2组CRP、PCT、WBC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组CRP、PCT、WBC水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。结论:五味消毒饮加减联合对症治疗和常规抗感染治疗能够显著改善热毒内陷证重症感染患者的免疫功能,有效缓解炎症反应,提高抗感染疗效。

关键词： 心血管疾病   全身免疫炎症指数   炎症生物标志物  

摘要： 炎症与心血管疾病密切相关。全身免疫炎症指数(SII)是一种新型的炎症标志物,综合了中性粒细胞、淋巴细胞及血小板等,可以更全面地反映全身炎症和局部免疫的平衡状况。近年来研究发现,SII与心血管疾病的发生、发展及预后密切相关。该文就SII与心血管疾病相关性的研究进展作一综述。

关键词： m^(6)A甲基化修饰   甲基化相关酶   畜禽   生长发育   脂肪代谢   免疫炎症反应  

摘要： m^(6)A甲基化修饰是RNA修饰中最为普遍的一种,主要通过甲基化相关酶的可逆调节而影响RNA的代谢,如RNA运输、可变剪切、翻译及稳定性。通过对m^(6)A甲基化修饰的分布特征、检测方法优缺点、种类及在畜禽生长发育、生殖、脂肪代谢、炎症反应中的调节作用的综述,为m^(6)A甲基化修饰在畜禽各性状中的研究提供新的见解和思路。

关键词： α7烟碱型乙酰胆碱受体   巨噬细胞   极化   炎症   黄芪桂枝五物汤   小鼠  

摘要： 目的探讨黄芪桂枝五物汤调节M1/M2巨噬细胞极化的机制。方法U937细胞经脂多糖诱导为M1巨噬细胞,建立α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)沉默和激动模型,实验分为对照组、10%含药血清组、siRNA阴性对照(NC)10%含药血清组、siRNAα7nAchR10%含药血清组和α7nAchR激动剂GTS-21组。免疫荧光检测M1、M2型巨噬细胞数量,定量反转录PCR检测M1、M2型巨噬细胞标志基因mRNA表达水平,酶联免疫吸附测定检测M1型巨噬细胞产生的促炎因子和M2型巨噬细胞产生的抗炎因子水平,蛋白质印迹法检测巨噬细胞α7nAchR表达。结果与对照组相比,10%含药血清组M1型巨噬细胞数量减少(P<0.01),M2型巨噬细胞数量增加(P<0.01);M1型巨噬细胞基因黏附蛋白白细胞整合素(Cd11c)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达均降低(P<0.01),M2型巨噬细胞基因精氨酸酶1(Arg1)、甘露糖受体1(CD206)表达均升高(P<0.01);M1型巨噬细胞产生的促炎因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量减少(P<0.01),M2型巨噬细胞产生的抗炎因子IL-10和转化生长因子-β(TGF-β)含量升高(P<0.01);10%含药血清组、siRNA NC 10%含药血清组、GTS-21组α7nAchR表达均增加(P<0.01)。与siRNAα7nAchR 10%含药血清组比较,siRNA NC 10%含药血清组、GTS-21组M1型巨噬细胞数量减少(P<0.01),M2型巨噬细胞数量增加(P<0.01);siRNA NC 10%含药血清组Cd11c、iNOS表达降低(P<0.01),Arg1表达升高(P<0.01);siRNA NC 10%含药血清组IL-1β、IL-6含量减少(P<0.01),IL-10、TGF-β含量升高(P<0.01);siRNA NC 10%含药血清组、GTS-21组α7nAchR表达均增加(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪桂枝五物汤可能通过激动α7nAchR促使M1/M2型巨噬细胞极化,改善炎症反应。

关键词： 血小板   感染   免疫反应   炎症反应  

摘要： 血小板是具有生物活性的无核细胞碎片,由骨髓中成熟的巨核细胞胞质裂解脱落产生。血小板通过黏附、释放、聚集、收缩和吸附等功能维持血管内皮完整并发挥生理性止血作用。除上述功能外,血小板在机体免疫反应及炎症反应过程中也发挥重要作用,可参与脓毒症、自身免疫性疾病等多种疾病的发生发展。本文对血小板在免疫和炎症反应中的作用机制进行综述。