关键词:
急性胰腺炎
早期肠内营养
炎症反应
肠道损伤
NF-κB通路
摘要:
目的探究早期肠内营养干预对急性胰腺炎大鼠全身炎症和肠道损伤的影响及其作用机制。方法构建大鼠急性胰腺炎模型,并将大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、营养支持12 h组、营养支持24 h组、营养支持48 h组、营养支持48 h组+PMA组,每组10只大鼠。各组大鼠均进行造模,假手术组大鼠开腹后,轻轻翻动大鼠胰腺后关腹。其中假手术组和模型组注入等量的生理盐水;营养支持12 h组、24 h组、48 h组分别给予肠内营养支持12、24和48 h;营养支持48 h组+PMA组,在建模后腹腔注射5 mg/kg的NF-kB信号通路激活剂佛波酯(PMA),并给予营养支持48 h。使用全自动生化仪检测各组大鼠血清中脂肪酶、淀粉酶及肌酐的含量;使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测血清白介素-6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)和D-乳酸含量;使用比色法检测二胺氧化酶(DAO)含量;苏木精-伊红染色法(HE染色)检测各组大鼠肠黏膜组织病理变化;蛋白质印迹(Western blot)检测各组大鼠胰腺组织NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果 (1)假手术组、模型组、营养支持12 h组、24 h组、48 h组脂肪酶、淀粉酶、肌酐分别为[(4.37±0.61)、(12.021±1.00)、(8.77±0.62)、(6.88±0.63)、(5.20±0.41)U/ml,(1674.03±172.24)、(4356.30±229.38)、(3676.11±382.43)、(2990.06±251.93)、(1919.75±179.40)U/L,(32.12±3.37)、(91.73±9.76)、(72.38±6.83)、(53.72±5.98)、(41.82±4.00)U/L]。与假手术组比较,模型组大鼠血清脂肪酶、淀粉酶及肌酐含量均显著增加;与模型组比较,营养支持12、24、48 h后,脂肪酶、淀粉酶及肌酐含量均显著降低,且呈时间依赖(P<0.05)。(2)假手术组、模型组、营养支持12 h组、24 h组、48 h组IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-10分别为[(40.26±3.93)、(123.34±13.19)、(108.97±12.70)、(77.36±6.75)、(49.18±4.97)pg/ml,(77.53±9.95)、(316.36±23.76)、(254.79±13.96)、(177.92±17.20)、(119.19±13.17)pg/ml,(62.94±5.39)、(353.16±28.03)、(275.87±22.11)、(198.78±24.33)、(94.60±9.41)pg/ml,(41.21±4.29)、(6.92±1.01)、(10.76±0.66)、(21.24±1.64)、(35.33±1.69)pg/ml]。与假手术组比较,模型组大鼠血清炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α含量均显著上升,而IL-10含量显著下降;与模型组比较,营养支持12、24、48 h后IL-6、IL-1β、TNF-α含量均显著下降,而IL-10含量显著升高,且呈时间性依赖(P<0.05)。(3)假手术组、模型组、营养支持12 h组、24 h组、48 h组肠道组织病理学评分、DAO、D-乳酸分别为[(0.00±0.00)、(4.20±0.60)、(3.00±0.45)、(1.90±0.54)、(1.30±0.64)分,(4.92±0.42)、(14.95±1.20)、(11.87±1.13)、(9.02±0.53)、(6.30±0.59)U/L,(2.39±0.22)、(6.92±0.46)、(5.21±0.28)、(3.64±0.39)、(2.95±0.15)nmol/ml]。与假手术组比较,模型组大鼠肠道组织病理学评分、DAO和D-乳酸水平均显著增加;与模型组比较,营养支持12、24及48 h后肠道组织病理学评分、DAO和D-乳酸水平均显著降低(P<0.05)。(4)假手术组、模型组、营养支持12 h组、24 h组、48 h组NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达分别为[(0.23±0.03)、(0.94±0.10)、(0.75±0.06)、(0.62±0.06)、(0.41±0.06),(1.06±0.12)、(0.25±0.04)、(0.47±0.03)、(0.62±0.08)、(0.85±0.08)]。与假手术组比较,模型组大鼠胰腺组织NF-κB p65蛋白水平显著上升,而p-IκBα蛋白显著降低;与模型组比较,营养支持12、24及48 h后NF-κB p65蛋白水平显著降低,而p-IκBα蛋白显著回升(P<0.05)。(5)营养支持48 h组、营养支