关键词:
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌
耐药性
多位点序列分型
wzi测序
摘要:
目的探讨临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌(CRKP)的耐药性及分子流行病学。方法收集2019—2020年分离的CRKP菌株,利用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏分析,利用PCR技术检测耐药基因(KPC、NDM、SHV、TEM、IMP、OXA-48、VIM)、毒力基因(fimH、mrkD、entB、magA、rmpA、rmpA2)、荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K54、K57)及7对管家基因(rpoB、gapA、mdh、pgi、phoE、infB、tonB)确定多位点序列分型(MLST),同时进行wzi基因测序。结果47株CRKP来源科室主要为新生儿重症监护室19株(40.43%),儿童重症监护室11株(23.40%),呼吸与危重症3株(6.38%);分离CRKP标本类型包括痰液26例(55.32%)、静脉血9例(19.15%)、呼吸道导管尖端3例(6.38%)等。药敏实验结果显示,47株CRKP对亚胺培南耐药率达100.00%,美罗培南耐药率为89.36%,头孢菌素类抗生素耐药率达87.23%~97.87%,哌拉西林耐药率为93.62%;bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(NDM)耐药基因检出率较高,依次为80.85%、70.21%和61.70%,bla_(KPC)耐药基因检出率为27.66%,bla_(OXA-48)耐药基因检出率为31.91%,blaIMP耐药基因检出率为19.15%,bla_(VIM)未检出耐药基因;毒力基因检测显示,fimH检出率最高,为93.62%,其次依次为entB(78.72%)、rmpA2(12.77%)、magA(8.51%)、rmpA(6.3%),12.77%的菌株同时检出携带3种及以上毒力基因;K分型显示共有7株被明确分型,其中6株CRKP为K57型(12.77%),1株为K1型(2.13%),其余菌株无明确荚膜血清型。wzi测序结果显示,47株CRKP(100.00%)均有已知wzi等位基因,其中46株(97.87%)具有已知12种K型,包括wzi100-K10(40.43%)、wzi209-K47(17.02%)、wzi206-K57(12.77%)、wzi64-K64(6.38%)、wzi141-K25(4.26%)、wzi1-K1(2.13%)、wzi19-K19(2.13%)、wzi84-K28(2.13%)、wzi155-K35(2.13%)、wzi38-K38(2.13%)、wzi45-K45(2.13%)、wzi162-K122(2.13%),仅1株为wzi509,无对应荚膜血清型。与K分型法相比,两组检出率差异具有统计学意义(P<0.001)。MLST分型共检出9种ST型,其中以ST76型(ST76-K10)和ST11型(ST11-K47、ST11-K64、ST11-K25)为主,另有2株无准确ST分型,其等位基因gapA、infB、mdh、pgi、phoE、rpoB、tonB编号依次为2、1、1、1、9、1、112和16、24、46、27、153、22、252。结论多型CRKP的传播具有潜在局部扩大的可能性,需进一步加强对耐药菌株监测。