关键词： 隐孢子虫   感染率   单细胞测序技术   三代测序   比较基因组学  

摘要： 隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)己经成为全世界重要的新发人兽共患病之一,被认为是仅次于轮状病毒感染,引起儿童腹泻和死亡的第二大病因,也是犊牛腹泻性肠道疾病的主要病因。寄生于奶牛的隐孢子虫主要有4种,分别为微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)、牛隐孢子虫(***)、芮氏隐孢子虫(***)和安氏隐孢子虫(***)。不同物种感染奶牛的部位,年龄段以及引起的临床症状存在差异,当前对中国不同地区奶牛源隐孢子虫的研究中,大多只针对隐孢子虫的单个基因位点或多位点进行序列分析,对隐孢子虫不同物种全基因组水平上的比较分析较少。本研究重点对中国部分地区奶牛源隐孢子虫进行分子流行病学调查并通过全基因组测序与比较基因组学分析,从基因组层次了解奶牛源隐孢子虫不同物种之间的差异。为此,本研究开展了以下研究: (1)我们在数据库中检索了2000-2023年发表的关于全球奶牛***流行病学调查的文章。利用随机效应模型估计了奶牛***感染率。为探究异质性的潜在来源,对提取的数据进行敏感性分析、亚组分析和meta回归分析。并研究了以下潜在的异质性来源:地区(亚洲与其他地区相比)、采样时间(比较2011年之前和2011年之后收集的研究)、年龄(与其他年龄组相比,断奶前)、有无腹泻(腹泻与非腹泻相比)、检测方法(显微镜检测与PCR扩增进行比较)。最终定量分析共纳入了来自30个国家的86篇文献。奶牛中***的全球患病率为4.7%(95%置信区间:3.3-4.2%,2,554/54,627)。其中,欧洲奶牛中***患病率最高,为8.8%(961/10,944)。单因素meta回归分析表明,牛的年龄(P=0.002)和收集年份(P=0.025)可能是异质性的来源。本系统评价表明,全球奶牛的***感染水平较低,但感染的地理分布很广。***主要感染奶牛胃部,感染后奶牛无明显临床症状,但被认为是产奶量减少的原因。所以奶牛的亚临床隐孢子虫感染很容易被忽视,导致含有卵囊的粪便未被安全处理,造成健康奶牛感染安氏隐孢子虫,甚至造成奶牛饲养员隐孢子虫感染。因此,预防隐孢子虫在无症状奶牛中的传播不应被忽视。 (2)为了解中国部分地区奶牛隐孢子虫流行情况,本研究在2022年8月至2023年8月,对黑龙江省大庆市(909份)、河北省邢台市(479份)、宁夏银川市(708份)、宁夏中卫市(674份)4个地区的规模化奶牛养殖场采集奶牛新鲜粪便样品共2769份。对粪便样品进行全基因组DNA提取并基于隐孢子虫SSU r RNA基因进行PCR扩增,并利用gp60基因和MLST对阳性样品进行亚型鉴定。结果表明,奶牛隐孢子虫总感染率为4.9%(135/2,769)。在被调查的15个奶牛场中,均检测出隐孢子虫感染,感染率在1.9%-9.4%(P=0.001,95%CI:0.065-0.552)。共鉴定出4种隐孢子虫,分别是***(78个)、***(22个)、***(12个)和***(23个)。所有***阳性样品均在gp60位点成功扩增,仅鉴定出一个亚型家族IId,其中包括三个已知亚型IId A15G1(n=44)、IId A19G1(n=5)和IId A20G1(n=20),以及一个新亚型IId A24G2(n=9)。其中,IId A24G2亚型在中国奶牛中首次报道。基于4个MLST位点(MS1,MS2,MS3,MS16),对***阳性样品进行基因分型。在4个位点成功分型了23个***分离株,形成2个MLST亚型:A4A4A4A1(n=16)、A1A4A4A1(n=7)。4种隐孢子虫的鉴定凸显了该病原体在所调查地区的多样性。新亚型IId A24G2的发现提示,在隐孢子虫进化过程中,不同亚型之间可能发生了基因重组,从而产生了可能对公共卫生产生影响的新亚型。 (3)为了得到中国部分地区奶牛源隐孢子虫三代单细胞全基因组序列,对135个隐孢子虫阳性粪便样品进行卵囊纯化。使用显微操作仪对纯化后的卵囊进行挑选,并进行单细胞全基因组扩增(WGA)。WGA产物经Ampure XP磁珠纯化并检测其浓度和纯度,合格样品建库及上机三代测序,最终对下机数据进行质控、全基因组拼接以及注释。共135份阳性粪便样品,成功纯化出17份隐孢子虫卵囊。我们对挑选后的单卵囊样品进行了全基因组扩增,并使用0.8%琼脂糖凝胶脉冲电泳检测WGA产物,以确定扩增是否成功。通过使用Nano Drop One检测产物浓度,经纯化后的WGA产物浓度在658.2 ng/μL-881.1 ng/μL之间。根

摘要： 肾脏损伤(血、尿成分异常或影像学、病理学检查异常)≥3个月, 有或无肾小球滤过率(GFR)异常;GFR<60 ml/(min·1.73 m2)≥3个月, 有或无肾脏损伤证据。二者满足其一即可诊断。

关键词： 学龄前儿童   睡眠障碍   OSAHS   多组学   诊断生物标记物  

摘要： 目的:1、通过问卷调查了解乌鲁木齐市学龄前儿童睡眠障碍的流行情况及影响因素。2、基于代谢组学和蛋白组学技术分析学龄前阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）、单纯鼾症（PS）以及无夜间打鼾症状健康儿童（HC）的血浆样本,旨在筛选出学龄前OSAHS儿童的诊断生物标记物,并为从蛋白和代谢水平探索疾病发病机制研究提供线索。方法:1、为了解乌鲁木齐市学龄前儿童睡眠障碍的流行情况及影响因素。本研究采用分层随机整群抽样法,在2022年3月至2023年3月间,从乌鲁木齐市7个区和1县中各随机抽取2所幼儿园,幼儿园3-6岁儿童为调查对象,对其家长行儿童睡眠习惯问卷调查。2、为从代谢水平筛选出学龄前OSAHS儿童的诊断生物标记物及为探索发病机制研究提供线索。本研究于2023年3月-9月间在新疆医科大学第一附属医院收集在乌鲁木齐市居住1年以上的学龄前OSAHS儿童90例、PS儿童45例及HC儿童45例血浆样本。采用LC-MS/MS技术对样本行非靶向代谢组学分析,筛选出差异代谢物,并行KEGG富集分析以探索OSAHS涉及的主要代谢通路。通过随机森林分析筛选出组间差异最显著的代谢物,采用随机和盲法验证筛选出的代谢物,并通过ROC曲线评估其准确性。利用Cytoscape构建差异代谢物调控网络图,以分析不同代谢物间的相关性。3、为从蛋白水平筛选出学龄前OSAHS儿童的诊断生物标记物及为探索发病机制研究提供线索。在第二部分样本中选取10例OSAHS和10例HC血浆样本,采用DIA定量蛋白质组学技术行蛋白组学分析,筛选出差异蛋白。通过Pearson相关性分析对差异蛋白与差异代谢物（第二部分）行关联分析,筛选出存在显著相关性的差异蛋白作为候选蛋白。通过ELISA验证候选蛋白在90例OSAHS和45例HC血浆中的浓度。利用Logistic回归方程建立诊断标志物模型,并通过ROC曲线评估其准确性。为了解差异蛋白和差异代谢物共同参与的主要信号通路,将所有差异蛋白和差异代谢物行KEGG富集分析。结果:1、乌鲁木齐市学龄前儿童睡眠障碍发生率为14.23%（378/2656）。不同性别、年龄、民族间睡眠障碍发生率差异无统计学意义（P>0.05）。睡眠障碍症状发生率前5位依次为:肢体动作44.35%、打鼾19.35%、磨牙18.41%、梦呓17.02%、出汗13.06%。肢体动作、尿床、呼吸暂停和磨牙在不同民族间发生率差异有统计学意义（P<0.05）。尿床、出汗、磨牙在不同年龄段儿童中发生率差异有统计学意义（P<0.05）。3岁儿童尿床和出汗发生率高于其他年龄段,而磨牙发生率低于其他年龄段。睡眠障碍的影响因素包括从不愿意表露情绪（OR=2.737,95%CI 1.465～5.113）、管教严厉教育方式（OR=2.715,95%CI 1.739～4.240）、家庭年度总收入低（OR=2.363,95%CI1.524～3.665）、每天户外活动时间<1小时（OR=2.174,95%CI 1.332～3.548）、夜间睡前吃东西（OR=2.086,95%CI 1.615～2.695）、母孕期及产后情绪低落（OR=1.719,95%CI 1.321～2.238）等。乌鲁木齐市学龄前儿童睡眠不足发生率为20.63%（548/2656）。不同性别间发生率差异无统计学意义（P>0.05）,而不同民族和年龄间发生率差异具有统计学意义（P<0.05）,发生率最低的是3岁儿童,维吾尔族儿童发生率最高（P<0.05）。睡眠不足的影响因素包括维吾尔族（OR=2.7,95%CI1.422～5.124）、年龄（OR=1.625,95%CI 1.477～1.788）、每天户外活动时间<1小时（OR=1.522,95%CI 1.051～2.203）、母亲孕期及产后情绪低落（OR=1.314,95%CI 1.054～1.638）、BMI（OR=1.033,95%CI 1.001～1.066）等。2、通过代谢组学分析发现OSAHS与PSC间存在153种差异代谢物,OSAHS与HC间存在244种差异代谢物,其中85种差异代谢物在两组间重叠存在。对重叠存在的差异代谢物行KEGG富集分析共鉴定到44条代谢通路,根据P值由小到大排序前三名分别是丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢通路;乙醛酸盐和二羧酸盐代谢通路;醛固酮合成和分泌通路,以上通路相关代谢物在OSAHS、HC和PSC间差异有统计学意义（P<0.05）。通过随机森林分析筛选,盲法测定受试者构成的验证队列验证,ROC曲线评估,筛选出5种代谢物具有较高的诊断价值（AUC:0.862～1;敏感性:73.3%100%;特异性:83.3%100%;f1-score>0.85）,包括谷氨酰胺、L-谷氨酸、生物素、N-（6-氯苯并噻唑-2-基）-4-（三氟甲基）苯甲酰胺)、2

关键词： 抑郁障碍   生命质量   流行病学调查   山东省  

摘要： 目的:通过横断面研究,对比分析山东省抑郁障碍患者与正常对照人群生命质量的特点。通过5年跟踪随访研究,探究抑郁障碍患者、高危人群及低危人群生命质量的变化及其与诊断变更之间的关系,并对相关危险因素进行探讨,构建影响生命质量的危险因素模型。 方法:依托2015年山东省精神障碍流行病学调查数据库,在具有符合匹配条件的对照组的情况下,按照1:1:1配对原则筛选并建立研究组832例、高危组807名、低危组819名,三组在2015年均完成匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)、简易生命质量问卷、一般健康问卷(GHQ-12)、简易应对方式问卷(SCSQ)的评定,同时使用一般资料调查问卷对其临床资料及一般信息资料进行搜集。通过5年跟踪随访,除去失访(391例)、死亡(108例)、拒绝参与(19例)、其他精神障碍诊断(4例)或问卷未完成(35例)者后,2020年实际完成521例研究组、654名高危组、726名低危组的调查。三组被调查者均通过入户调查使用中文版的《DSM-Ⅳ轴Ⅰ障碍用临床定式检查》(SCID-I/P)进行再诊断,并完成GHQ-12、简易生命质量问卷、PSQI、SCSQ、儿童期创伤问卷(CTQ)、社会支持评定量表(SSRS)、整体疼痛评估量表(GPS)、蒙特利尔认知评估量表(Mo CA)的评估及一般信息资料、临床资料的搜集。资料搜集后,进行原始的资料的审核,利用Epidata创建数据库,对数据库进行清理后,使用SPSS 25.0、Mplus和Amos统计软件进行了统计学的分析,进行描述性分析、卡方检验、独立样本t检验、配对t检验和方差分析,并运用交叉滞后分析、回归分析和结构方程模型来探讨各类危险因素与生命质量之间的关系,构建危险因素模型。 结果:1.2015年,三组生命质量总分分别为:研究组(63.02±9.94)<高危组(72.45±9.10)<低危组(76.54±8.44),(F=471.312,P=0.000)。在2020年,三组生命质量总分分别为:研究组(69.09±11.72)<高危组(74.34±10.51)<低危组(76.29±9.44),(F=72.932,P=0.000)。5年前后纵向比较分析发现,研究组在生命质量总分及各条目评分上均为2020年得分高于2015年(P<0.05),高危组在生命质量总分及身体状况、精神心理状况、经济状况与家人关系方面为2020年得分显著高于2015年(P<0.05)。 2.2020年521例研究组中有379例(72.7%)缓解组,142例(27.3%)未缓解组。在2015年,缓解组的生命质量总分及精神心理状况得分高于未缓解组(P<0.05);在2020年,缓解组的生命质量总分及各条目评分均高于未缓解组(P<0.05)。5年间纵向比较发现,缓解组的生命质量总分及各条目评分均为2020年显著高于2015年(P<0.05),未缓解组仅在工作状况评分方面为2020年得分显著低于2015年(P<0.05)。 3.在2020年,1380例高危组及低危组中共有新发病组69例(5%),未发病组1311例(95%)。在2015年,新发病组的生命质量总分及各条目评分均低于未发病组;在2020年,新发病组的生命质量总分及各条目评分均显著低于未发病组(P<0.01)。纵向研究发现,与2015年相比,2020年新发病组在整体生命质量以及身体健康、心理状态、经济状况、工作状况方面均有显著降低(P<0.01);未发病组的生命质量总分及精神心理状况、与家人关系评分均为2020年显著高于2015年(P<0.01)。 4.2020年全部研究对象的生命质量与一般资料的相关分析提示:年龄(18～39)岁、技术/管理人员、高中及以上文化程度、已婚/再婚/同居、非独居、城市居民的生命质量总分最高(P<0.05)。交叉滞后分析显示:抑郁障碍诊断、GHQ得分、PSQI得分及应对倾向与同年的生命质量总分显著相关(P<0.01),抑郁障碍诊断、PSQI得分负向预测生命质量总分(P<0.05),应对方式倾向正向预测生命质量总分(P<0.01);生命质量总分负向预测抑郁障碍诊断、PSQI得分(P<0.01),正向预测应对方式倾向(P<0.01)。通过对全部人群生命质量的影响因素进行多元逐步回归分析发现:2015年GHQ总分、2015年PSQI总分以及2015年患抑郁障碍诊断与2015年生命质量总分为负相关,2015年应对倾向与2015年生命质量总分为正相关(P<0.01);2020年GHQ总分、2020年PSQI总分、2020年患抑郁障碍诊断、CTQ总分以及GPS总分与2020年生命质量总分为负相关(P<0.01),2020年应对倾向、SSRS总分、2015年生命质量总分与2020年生命质量总分为正相关(P<0.01)。 5.对全部

关键词： 亚硝酸盐   食物中毒   流行病学调查   防锈液   虹吸作用  

摘要： 目的对一起因企业自来水受污染导致食源性亚硝酸盐中毒事件的原因进行调查和分析，探讨预防控制措施，防范类似事件的再次发生。方法通过现场流行病学调查、卫生学调查及实验室检测等方法追溯中毒原因，分析可能的污染环节。结果共搜索到病例9名，临床症状以口唇紫绀（100.00%）、乏力（66.67%）、恶心（55.56%）为主。流行病学曲线显示为点源暴露模式，首末病例发病时间间隔50min，平均潜伏期20min。患者呕吐物、剩余食物和自来水中均检出不同浓度的亚硝酸盐。患者呕吐物亚硝酸盐浓度与舒张压值存在负相关关系(rs=0.798，P＜0.05)。所有患者经特异性治疗后，症状得到明显缓解。结论本次事件是酸洗池内含高浓度亚硝酸盐的防锈液在虹吸作用下返流入自来水管道后，通过食用被污染自来水加工后的食物导致的亚硝酸盐中毒，因此企业生产用水应与生活用水分路设置，关键位置安装止回阀，避免类似中毒事件的发生。

关键词： 心血管疾病危险因素   高尿酸血症   流行病学   单中心  

摘要： 目的济南市成人高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)流行病学特征及影响因素研究。方法选择2019年1—5月在济南市XX医院健康管理中心健康查体者作为研究对象。测定SBP、DBP、BMI、TC、TG、LDL-C、HDL-C、FPG、SUA,以及高血压、空腹血糖异常、血脂异常、超重/肥胖及HUA发生率。多因素Logistic回归分析HUA发生的危险因素。结果共入选健康体检者22569名,其中男13309名,女9260名。HUA人群发病率为14.8%,男性明显高于女性(20.66%vs 6.8%);HUA组BMI、TC、TG、LDL-C、SBP、DBP、FPG、SUA均显著高于Non-HUA组(P<0.001),而HDL-C显著低于Non-HUA组(P<0.001)。HUA组高血压、血脂异常检出率、超重/肥胖均显著高于Non-HUA组(分别为41.2%vs 28.5%;70.3%vs 45.3%;82.2%vs 53.4%;P均<0.001)。男性HUA组高血压、血脂异常检出率、超重/肥胖均显著高于Non-HUA组(分别为42.0%vs 35.4%;71.9%vs 51.9%;85.6%vs 66.7%;P均<0.001),空腹血糖异常检出率低于Non-HUA组(5.9%vs 9.1%,P<0.001)。而女性HUA组高血压、空腹血糖异常、血脂异常检出率、超重/肥胖均显著高于Non-HUA组(分别为37.9%vs.19.9%;10.8%vs.3.7%;63.5%vs.37.4%;67.1%vs 37.0%;P<0.001)。总人群,以及男女性人群中,超重/肥胖、高血压、血脂升高均是HUA发生的危险因素(P<0.001);而女性空腹血糖异常也是HUA的危险因素(P<0.001)。结论HUA总人群发病率为14.8%,男性明显高于女性。HUA组BMI、TC、TG、LDL-C、SBP、DBP、FPG、SUA显著高于Non-HUA组,HDL-C显著低于Non-HUA组。总人群及男性HUA组高血压、血脂异常检出率、超重/肥胖均显著高于Non-HUA组。女性空腹血糖异常也显著高于Non-HUA组。总人群及男性高血压、血脂异常、超重/肥胖均为HUA发生的危险因素;女性空腹血糖异常也是HUA发生的危险因素。