关键词： 水痘   疫苗   学生   儿童   流行病学  

摘要： 目的 分析2008—2022年天津市宝坻区水痘发病的流行病学特征，为制定水痘防控策略提供科学依据。方法 采用描述性流行病学方法，对2008—2022年天津市宝坻区水痘资料进行流行病学分析。结果 2008—2022年天津市宝坻区共报告水痘病例2 694例，年均发病率为20.69/10万，各年份发病率差异有统计学意义（χ2=1083.463,P <0.001）。发病高峰为4～6月（828例，30.73%）和11月～次年1月（1 057例，39.24%）。男性（1 552例，57.61%）多于女性（1 142例，42.39%）(χ2=28.689,P <0.001)；发病年龄以20岁以下人群为主（2205例，81.85%），各年龄组累计发病率差异有统计学意义（趋势χ2=3871.247,P <0.001）；职业以学生、散居儿童和幼托儿童为主（2200例，81.66%）。结论 2008—2022年天津市宝坻区水痘发病的高发人群为儿童与青少年，发病呈现明显的季节性，学校是水痘暴发疫情的主要场所，应进一步加强水痘疫情监测与防控工作。

关键词： 新型冠状病毒   危险因素   再次感染   线上调查  

摘要： 目的:本研究采取线上问卷调查的形式,对2022年12月之后新冠感染及再次感染的现况及流行病学特征进行调查分析,对新冠首次感染和再次感染的发病特征差异进行比较,探索可能导致再次感染的危险因素。为了解新冠感染流行规律,更好地制定新冠感染防控措施提供数据支持。 方法:于2023年1月10日-2023年2月10日和2023年6月20日-2023年7月31日,通过问卷星各开展一次新冠感染和再次感染的线上调查研究,通过线上发布问卷收集数据,研究不同疫情流行阶段新冠感染和再次感染的流行病学特征,探索可能的危险因素。主要调查内容包括:年龄、性别、职业、文化程度等基本信息;新冠病毒疫苗接种情况以及基础疾病情况;是否感染新冠、感染日期、诊断方法,感染时的常见症状、药物使用情况等感染以及既往感染的情况;平时喝酒和锻炼的情况,日常口罩防护和消毒情况等内容。采用Excel整理数据、SPSS 25.0分析数据,对上述调查资料进行统计分析,分析新冠感染及再次感染的流行病学特征,及分析可能的危险因素。运用χ2检验进行单因素分析,采用Logistic回归对感染风险、症状持续时间的影响因素进行单因素和多因素分析,P≤0.05视为差异有统计学意义。 结果:1.第一次线上调查研究共收集到8564份有效问卷,其中有5588人报告发生了新冠感染,感染率为65.25%,有2391人（27.92%）自述未感染新冠,585人（6.83%）自述不详。只有2人报告发生2次新冠感染,新冠再次感染率为0.036%（2/5588）。此次调查的调查对象大多在2022年12月份发生新冠感染。以5588名新冠感染者为病例组,2391名未感染者为对照组进行危险因素分析,多因素Logistic分析结果显示,医疗相关职业人员、年龄>45岁、女性、有基础疾病是感染新冠的危险因素。5588名新冠感染者中,新冠感染的症状持续时间为1周及以内的有60.13%、1-2周的有18.31%、2-3周的有16.91%、4周及以上的有4.02%;有35人（0.63%）为无症状感染。调查对象感染时最常出现的症状有:发热（81.23%）,干咳（41.59%）,乏力（38.28%）。有68%的新冠感染者在感染后使用药物,使用最多的3种为:布洛芬类（34.90%）、莲花清瘟（27.92%）和对乙酰氨基酚类（14.16%）。将新冠感染症状持续时间分为1周及以内组和1周以上组,使用χ2和Logistic回归进行危险因素分析,多因素分析结果显示,医疗相关职业人员、老年人、女性、有基础疾病、感染期间发热是新冠感染症状持续时间的危险因素。对不同年龄组与新冠感染的症状持续时间及具体症状之间进行对比分析可发现,老年人在感染新冠时的症状普遍较多且症状的持续时间也较长,即老年人在新冠感染之后的重症风险更大。2.第二次线上调查研究共收集到3305份有效问卷,有2787人报告感染了新冠,有518人（15.67%）自述未感染新冠,新冠感染率为84.33%。新冠的再次感染率为23.72%（521/2196）,发生二次感染的调查对象均于2022年9月-2023年1月首次感染新冠并于2023年2月-7月发生再次感染。此次调查的新冠感染高峰时间在2023年5月。2787名新冠感染者中有2196名调查对象于2022年9月-2023年1月感染新冠,有1133名调查对象于2023年2月-7月感染新冠,分析结果显示,两次感染的调查对象在新冠感染后的症状和症状持续时间上有差异（P<0.001）,2023年2月-7月发生新冠感染的调查对象症状持续时间比2022年9月-2023年1月感染的时间短,且感染时发生相应症状的概率降低。对521名发生新冠再次感染和1675名未发生再次感染的调查对象进行对比分析,多因素分析结果显示,年龄>45岁、非医疗相关职业人员、疫苗接种和物品消毒是新冠再次感染的保护因素。对比521名调查对象新冠首次感染与再次感染的症状持续时间,Spearman等级相关检验结果显示,新冠首次感染的症状持续时间与再次感染的症状持续时间之间存在低度正相关（r=0.413,P<0.001）。对新冠首次感染和再次感染的常见临床症状进行对比分析结果发现,再次感染时发热（P<0.001）、咽干咽痛（P=0.018）、乏力（P=0.001）、肌肉关节酸痛全身疼痛（P<0.001）、干咳（P=0.001）、咳痰（P<0.001）、头晕头痛（P=0.004）、寒战（P<0.001）、味觉减退（P<0.001）、嗅觉减退（P<0.001）、胸闷（P=0.038）症状的发生较首次感染时减少。再次感染时药物使用频次也较首次感染时降低。 结论:自2022年12月之后,大部分人发生了新冠感染的情况,新冠再次感染的发生率也有升高。新冠感染的危险因素包括从事医疗相关职业、女性和老年人

关键词： 超声   肌肉骨骼畸形   早期筛查   流行病学   治疗  

摘要： 目的:通过回顾区域性普遍筛查前与普遍筛查后孕产期常见先天性骨骼肌肉常见畸形(Congenital Musculoskeletal Abnormality,CMA),即发育性髋关节发育不良(Developmental Dysplasia of the Hip,DDH)、先天性马蹄内翻足(Congenital Clubfoot,CCF)、先天性肌性斜颈(Congenital Muscular Torticollis,CMT)诊疗数据,探讨DDDH,CCF,CMT筛查时机、早期诊断方法、治疗方案的选择。强调早期筛查的重要性,总结筛查和诊治流程,为上述三类疾病早期规范化诊疗提供参考。 方法:对2018年1月至2023年12月内蒙古医科大学第二附属医院与呼和浩特市城区三家联盟医院DDH、CCF、CMT患儿医疗数据进行回顾性分析,分为区域性普遍筛查前阶段(2018年1月至2020年12月)与区域性普遍筛查阶段(2021年1月至2023年12月),普遍性筛查阶段对全部建档孕妇进行普遍性筛查,收集孕15周-1.5岁通过超声检查与体格检查诊断为DDH、CCF、CMT阳性患儿。对DDH术后临床效果,采用Mc Kay标准评定,对于6个月以后的DDH患儿用Severin评定。CCF患儿治疗前后采用Dimeglio法评估。CMT根据Cheng等人对CMT的临床治疗效果评估。对比分析普遍筛查前后区域内人口出生率、DDH,CCF,CMT发病情况,诊断时间与治疗时间变化趋势、治疗方式变化情况(保守治疗率与手术治疗率)与诊疗效果,医疗花费情况。 结果:本研究共收集1276例DDH、CCF、CMT患儿,脱落56例,最终1220纳入研究,其中普遍筛查前阶段453例(82例DDH、89例CCF、282例CMT),普遍性筛查阶段767例(385例DDH、122例CCF、260例CMT)。(1)2018年至2020年区域内人口出生数量为56490人,2021年至2023年区域内人口出生数量为44483人。(2)区域内DDH发病率为0.5%,CCF发病率为0.2%,CMT发病率为0.5%。(3)2021年1月至2023年12月区域性普遍筛查阶段,DDH、CCF、CMT平均确诊时间分别为6周、2周、3周,相较2018年1月至2020年12月区域性普遍筛查前阶段确诊时间整体前移,确诊时间分别前移6周、2周、2周,差异有统计学意义(P<0.05);2021年1月至2023年12月区域性普遍筛查阶段DDH、CCF、CMT开始治疗时间平均为7.2周、2.6周、3.9周,相较2018年1月至2020年12月区域性普遍筛查前阶段确诊时间整体前移,初始治疗时间分别前移6.1周、1.9周、1.9周,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)2018年至2023年内手术治疗的DDH逐年呈下降趋势,而保守治疗总体呈逐年上升。2018年至2020年区域性普遍筛查前阶段DDH手术治疗率为35%,保守治疗率为65%。2021年至2023年区域性普遍筛查阶段DDH手术治疗率为28%,保守治疗率为72%。2018年至2023年内手术治疗的CCF逐年呈下降趋势,而保守治疗总体呈逐年上升。2018年至2020年区域性普遍筛查前阶段CCF手术治疗率为15%,保守治疗率为85%。2021年至2023年区域性普遍筛查阶段CCF手术治疗率为10%,保守治疗率为90%。2018年至2020年区域性普遍筛查前阶段CMT手术治疗率为32%,保守治疗率为68%。2021年至2023年区域性普遍筛查阶段CMT手术治疗率为23%,保守治疗率为77%。(5)根据年份分组的CCF患儿治疗前Dimeglio评分随分型等级增加而增加,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);根据年份分组的CCF患儿治疗后Dimeglio评分在不同分型间同样有差别,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);各年份分组间,两种治疗方式下,除外柔软型,其余三种Dimeglio分型患儿治疗后Dimeglio评分较治疗前均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)2018年至2020年DDH、CCF、CMT保守治疗的平均费用分别为1.23万元、0.75万元、0.25万元;2021年至2023年DDH、CCF、CMT保守治疗的平均费用分别为1.13万元、0.55万元、0.18万元。2018年至2020年DDH、CCF、CMT手术治疗的平均费用分别为3.52万元、1.89万元、1.39万元;2021年至2023年DDH、CCF、CMT手术治疗的平均费用分别为2.78万元、1.38万元、1.05万元。 结论:1.早期筛查,前移了DDH、CCF、CMT诊断时间,超声技术的发展使得部分CCF在孕期即可诊断,DDH与CMT通过体格检查和超声检查在生后6周内可确

关键词： 地中海贫血   基因型   Hb Bart's胎儿水肿综合征   胎儿发育异常  

摘要： 研究背景 地中海贫血是常见的遗传血液疾病之一,也是全球公共卫生问题之一。地中海贫血的临床表现轻重不一,其中中重度贫血对胎儿、母体危害较大。目前主要通过输血及祛铁治疗维持中重度地中海贫血患者的生命。这不仅给患者造成痛苦,还给家庭、社会造成负担。因此,预防中重型地中海贫血是防控该疾病的主要策略。随着人口迁移的影响,地中海贫血在各个地区的流行病学特征正在悄然发生变化。对此,实时更新各地区的地中海贫血基因型构成比及完善基因型谱,有助于为当地制定更具有针对性的防控措施。随着时代技术的不断发展,地中海贫血治疗方法的研究报道逐渐增多,但主要以中重型β-地中海贫血为主,而对于重型α-地中海贫血的报道较少。因此本研究也通过转录组测序分析进一步研究重型α-地中海贫血发育异常的发育机制,为未来探索其治疗方法提供数据基础。 方法 1.本研究选取了2017年1月1日至2022年9月30日期间在清远市人民医院门诊就诊或住院的7410例疑似地中海贫血携带者作为研究对象,对其进行地中海贫血基因检测、血红蛋白电泳及血细胞分析检查,并对可疑对象进行罕见地中海贫血基因检测。通过统计分析,分析清远市地区人群地中海贫血基因型类型、构成比及分布特点;阐明地中海贫血基因型及表现型的相关性;统计清远市罕见地中海贫血基因型类型。 2.本课题主要以5例巴氏水肿胎及3例正常胎儿为研究对象,采集血液样本进行转录组测序分析,分析巴氏水肿胎与正常胎儿之间的差异基因表达,最终得到差异基因;然后通过对差异基因进行生物学分析,进一步深入探讨巴氏水肿胎发育异常的发病机制;最终结合差异基因的相对表达量及差异倍数,我们选择了四个关键基因进行验证。本研究采用q RT-PCR技术从收集的5个巴氏水肿胎和6个正常胎儿的血液标本中提取RNA验证,以此验证测序数据的准确性。 结果 1.本次研究通过对清远市7410例外周血进行地贫基因检测,共检出携带地贫基因的有3593例,总检出率为48.48%,其中α地贫、β地贫及α合并β地贫的检出率分别为39.69%、12.66%及2.20%。清远市α-地贫中共检出常见基因类型有20种,主要为--SEA/αα（70.01%）、-α3.7/αα（13.33%）及-α4.2/αα（6.18%）;β-地中海贫血中共检出常见的基因类型有16种,主要为β41-42M/βN（43.07%）、β654M/βN（27.29%）和β-28M/βN（12.05%）;α合并β-地中海贫血中共检出常见的基因类型有34种,主要为--SEA/αα合并β41-42M/βN（29.45%）,--SEA/αα合并β654M/βN（12.27%）及β-28M/βN（12.05%）;罕见地贫基因检测共10例,其中α地贫3例,β-地贫6例及α合并β-地贫1例。 2.通过对巴氏水肿胎及正常胎儿的转录组测序数据进行差异性表达分析,可以得到共2243个差异表达基因,其中有1369个上调基因和874个下调基因,排名靠前的有HBQ1、HBM、SP6、LINC00570及HSP90AA2P5等。通过GO分析,研究发现差异基因主要存在于血红蛋白复合体、MHCII类蛋白复合物、细胞质膜等细胞组分;主要参与了气体输送、相关免疫应答等生物过程;主要催化了抗原结合、过氧化物酶活性等的分子功能。通过KEGG分析显示,有601个差异基因分布于332个通路中主要富集于内吞作用、造血细胞谱系、细胞黏附分子、抗原处理和呈递等相关通路。结合GSEA分析,我们发现这些差异基因主要富集于组织和器官发育、氧化磷酸化、同种异体移植排斥、造血和干扰素反应等通路。 结论 1.在清远地区,α地贫基因突变率明显高于β地贫基因的突变;清远市各地区的地贫基因型基本一致,其中α地贫基因突变主要以大片段缺失为主,而β地贫基因突变主要以点突变为主,这符合中国南方地区地贫基因突变的特点。同时,清远地贫人群的临床表现与地贫基因型明显相关,这为清远地区产前诊断及遗传咨询提供了实验依据。 2.本研究通过转录组测序分析及生物学分析,巴氏水肿胎存在多种差异基因的表达。通过查阅文献,这些关键差异基因的表达可能参与了胎儿生长发育的过程,其表达异常可能会导致智力发育迟缓、肢体发育异常、隐睾、小阴茎及心房间隔缺损等胎儿发育异常。本研究完善巴氏水肿胎血液样本的转录组谱,为进一步探讨巴氏水肿胎发育异常的发病机制提供依据。

关键词： 甲状腺癌   术前声带麻痹   流行病学   喉镜检查  

摘要： 背景：　　随着超声成像技术的快速进步以及人们对健康检查意识的加强，甲状腺疾病的检出率逐渐升高。甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤，近年许多研究显示其发病率呈不断上升的趋势，2022年中国恶性肿瘤疾病负担数据显示甲状腺癌发病率位列所有恶性肿瘤第3位，居女性肿瘤第3位，中年群体为主要发病人群。甲状腺恶性肿瘤按病理主要分为四类，最常见的组织学类型为甲状腺乳头状癌，约占甲状腺癌的 80%-85%。而良性甲状腺疾病包括单纯性或结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、桥本甲状腺炎、甲状腺功能亢进和甲状腺功能减退等。甲状腺疾病导致声带麻痹（vocal cord paralysis ，VCP）的机制是多方面的，在恶性疾病中，VCP可能是由恶性肿瘤细胞直接侵袭或压迫喉返神经引起，而在良性病变中，可能是由于炎症或压迫、牵拉神经引起。　　术前纤维喉镜检查可以评估双侧声带活动情况，诊断有无声带麻痹。在不同的研究中，术前VCP在甲状腺恶性疾病和良性疾病中的患病率具有极大差异。术前VCP以前被认为是恶性肿瘤的重要标志，但一些研究报道良性病变患者也出现了VCP。而大多数已发表的研究均为小样本研究，且极少数患者会出现术前声音嘶哑的症状。近年来研究术前VCP分布趋势的相关文章很少，支持选择性而非常规术前喉镜检查的证据水平较弱。因此，术前VCP在恶性肿瘤和良性疾病中的发生率有待进一步研究。　　在过去的十年里，随着甲状腺疾病的日益流行，甲状腺切除术的治疗效果也一直在提高。甲状腺切除术主要手术方式包括甲状腺部分切除术和甲状腺全部（近全）切除术，在甲状腺切除术中，在完全切除所有甲状腺肿瘤的前提下，外科医生应重点关注声带功能和喉返神经的完整性。　　本研究的目的是研究与甲状腺疾病相关的术前声带麻痹的临床意义和VCP在恶性病变和良性病变中的发生率，以及相对应的甲状腺癌的病理特征。此外，本研究还调查了伴有术前声带麻痹的甲状腺疾病的流行病学变化。　　方法：　　回顾性分析2007年1月至2018年12月在浙江省肿瘤医院因各种疾病接受甲状腺手术治疗方案的20008例患者，根据术前喉镜检查筛选出136例伴有术前声带麻痹的患者。详细记录患者的临床特征，包括性别、年龄、体重指数、癌症家族史、诊断年份、术前声音嘶哑的症状和持续时间、甲状腺超声、颈部超声和胸部计算机断层扫描的成像数据，以及术后病理结果等。记录并分析各病理类别中VCP的发病率和不同年份中VCP的分布，计算观察年份中甲状腺乳头状癌和甲状腺乳头状微小癌的百分比，以探讨术前VCP发病率逐渐降低的原因。此外记录术中喉返神经的状态且收集患者术后治疗情况，观察术中发现的RLN侵犯患者在术后的声音功能恢复情况。　　结果：　　研究发现，2007年术前VCP的发生率为1.53%（9/590），到2018年已降至0.42%（12/2845）（Plt;0.05），而从2007年至2018年，乳头状癌的发病率由30.34%逐渐增加到82%（P＜0.01）。在136例术前VCP患者中，114例为甲状腺恶性肿瘤（83.82%），22例为良性甲状腺疾病（16.18%），恶性疾病和良性疾病术前VCP的发生率分别为0.98%（114/11646）和0.26%（22/8362）（P＜0.05）。术前伴有VCP的甲状腺乳头状微小癌仅有13例（0.06%，13/20008）。恶性肿瘤伴有术前VCP患者的声音嘶哑发生率为67.54%（77/114），良性甲状腺疾病的声音嘶哑的发生率为63.64%（14/22），差异无统计学意义。良性病变的术中RLN切除率为13.64%（3/22），恶性病变为69.30%（70/101）（P＜0.05）。在恶性肿瘤中，发生于左侧和右侧的VCP的比例均为0.49%（P＞0.05）;在良性疾病中，其比例分别为0.14%和0.12%（Pgt;0.05）。相较于其他病理类型，低分化和未分化甲状腺癌的术前VCP发生率最高（22%，Plt;0.05）。在所有甲状腺恶性肿瘤中，甲状腺乳头状癌的VCP发生率最低（0.75%）。　　结论 ：　　随着甲状腺乳头状癌在甲状腺恶性肿瘤中的比例增加，术前声带麻痹的发生率逐渐降低。良性病变和恶性病变的患者均可出现声音症状，因此术前声音嘶哑并不一定意味着恶性肿瘤，不能被认为是恶性肿瘤的良好预测指标。甲状腺乳头状微小癌的术前VCP发生率较低，可进行选择性喉镜检查，而不是常规的术前喉镜检查。此外恶性病变术前发生VCP的概率明显高于良性病变，故术前伴有VCP的甲状腺肿瘤多提示为恶性肿瘤，术中神经的牺牲率较高，如果术中RLN没有肿瘤侵袭的迹象，则应保留RLN，为术后神经功能恢复提供机会。

关键词： 认知障碍   社会孤立   认知分域   炎症因子   流行病学  

摘要： 背景:随着人口老龄化进程加快，年龄依赖性重大脑疾病痴呆成为全球公共卫生领域的重要挑战之一。社会孤立被定义为个体在社会关系中的客观隔离状态，可能与老年人的认知功能下降有关，会增加痴呆的发生，基于我国社区老年人群社会孤立流行病学资料欠缺，其与认知障碍之间的关联性还不清楚。目前提出的社会孤立影响老年人认知功能的可能机制包括:“认知储备”理论、压力缓冲理论以及社会孤立作为一种社会应激因子的应激理论，通过激活应激反应(例如，下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(Hypothalamic-pituitary-adrenal，HPA轴))增强炎症反应，进而对认知功能产生影响。国外已经有研究证明社会孤立会增强炎症反应，而炎症可能与认知功能之间具有关联性，但免疫、炎症反应如何以及是否介导社会孤立与认知功能之间的关联，目前仍然不明确。　　目的:本研究针对中国65岁及以上的非痴呆人群，开展流行病学调查，探究以下问题:1.中国社区非痴呆老年人的社会孤立的流行情况;2.社会孤立与总体认知功能及各个认知分域之间是否存在关联;3.社会孤立是否会通过免疫、炎症因子影响认知功能。　　方法:本研究采用本人亲自参与构建的湖北老年记忆队列(Hubei Memory and Aging Cohort Study,HMACS)基线调查(2018-2023年)的数据，其内容涵盖了老年人的基本状况、个人背景及家庭情况、生理健康、心理健康、生活方式、日常生活能力、认知功能评估等多个方面，截止2023年12月，共有10306名参与者完成HMACS的基线调查。本研究通过构建社会孤立指数(Social isolation index,SII)来定义社会孤立，包括婚姻状况、在世的子女数、健在的兄弟姐妹、邻居之间的关系、居住状况、关系密切的好友数量、参与社交活动的频率。SII为0-15分，SII≤5分被认为有社会孤立。(1)首先对社会孤立的流行情况进行探究;(2)采用多因素线性回归模型分析SII与总体认知功能及各个认知功能分域之间的关联性。(3)然后根据老年人的姓名、身份证号等信息对社区卫生服务中心在老年人免费体检时录入电子信息表中的体检的结果与HMACS基线调查的数据进行匹配，获得老年人的免疫、炎症因子的数据，采用多因素线性回归模型分析SII与免疫炎症指标、免疫炎症指标与总体认知功能和各个认知功能分域之间的关联性以及社会孤立是否会通过免疫炎症反应对认知功能产生影响。　　结果:(1)基于来自HMACS的7460名研究对象，本研究发现在中国非痴呆老年人群的平均SII得分为9.53(2.68)分，其中男性的平均SII得分为9.38(2.67)分，女性的平均SII得分为9.66(2.68)分。总体中有8.0％的参与者存在社会孤立，年龄越高、受教育年限越低以及居住在农村的参与者更有可能存在社会孤立的情况(P＜0.001)。虽然和女性相比，男性更易存在社会孤立的情况(8.5％vs 7.5％)，但男女性之间社会孤立流行情况的差异不具有统计学意义(x2=2.413,P=0.120)。　　(2)SII 与 MoCA-B 得分(β=0.140,95％CI:0.101～0.180,P＜0.001)、标准化总体认知功能得分(β=0.010,95％CI:0.004～0.017,P=0.002)、标准化记忆功能得分(β=0.011,95％CI:0.000～0.022,P=0.045)、标准化语言功能得分(β=0.023,95％CI:0.012～0.033,P＜0.001)、标准化执行功能得分(β=0.005,95％CI:0.002～0.008,P＜0.001)和标准化注意力得分(β=0.024,95％CI:0.014～0.033,P＜0.001)之间存在正向关联性，SII 越高，认知功能越好，即较高程度的社会孤立与较差的认知功能之间存在关联性。　　(3)SII 与 GLB 含量(β=-0.106,95％CI:-0.181～-0.032,P=0.005)、GR％与 MoCA-B 得分(P=-0.017，95％CI:-0.033～-0.001,P=0.038)、GLB含量与总体认知功能得分(β=-0.006,95％CI:-0.012～-0.000,P=0.036)、GLB 含量与注意力得分(β=-0.018,95％CI:-0.027～-0.009,P＜0.001)之间存在负向关联性，社会孤立可以通过影响血液中GLB的含量进而对总体认知功能和注意力产生影响，GLB在SII与认知功能的关联性中存在部分中介效应。　　结论:(1)在中国65岁及以上的非痴呆人群中，年龄越高、受教育年限越低以及居住在农村的参与者更有可能存在社会孤立的情况;虽然和女性相比，男性更易存在社会孤立的情况(8.5％vs 7.5％)，但男女性之间社会孤立流行情况

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒   流行病学调查   干扰素   变异   疫苗  

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引发的全球性病毒性传染病,此病特点在于母猪会出现严重的流产症状,同时各年龄段的猪都会表现出呼吸障碍,给全世界养猪业带来的损失仅次于非洲猪瘟。PRRSV是一种RNA病毒,极易发生变异和重组,疫苗研究速度远远比不上病毒变异速度,导致疫苗对不同变异毒株之间产生的抗体交叉保护力较弱,不能对猪只提供全面的、足够的免疫保护力,且弱毒疫苗存在毒力返强的风险,这大大增加了我国对PRRS的防控难度。干扰素(Interferon,IFN)是一类具有种属特异性的细胞因子,具有抑制病毒、免疫调节和抑制肿瘤功能。因此,对我国PRRSV进行监测和监控,分析其流行情况和遗传变异情况,筛选安全有效的疫苗候选株是如今防控该病的关键环节。本研究采集河南省18地市在2022-2023年间疑似感染PRRSV的临床病料样品,进行PRRSV分子流行病学调查并根据ORF5测序结果选择有特殊变异的毒株进行病毒分离鉴定,在蛋白水平上分析分离株诱导IFN信号通路相关蛋白能力,拟从中筛选出能为PRRSV疫苗研发提供可能的流行毒株,并对分离株进行全基因组测序分析,了解其重组信息,为我国对PRRS的防控提供基础数据和理论支持。具体研究内容如下: 1、2022-2023年河南省PRRSV分子流行病学调查 2022-2023年在河南18个地市采集1171份临床病料样品,采用RT-PCR进行PRRSV筛查,并统计不同季节和地区感染情况,结果共检测出324份阳性样品,检出率为27.67%,河南省不同地区和季节PRRSV样品阳性率分别为13.95%～62.50%和21.74%～32.8%。对324份阳性样品ORF5基因序列进行扩增测序,对测序结果进行遗传进化和氨基酸序列变异分析,结果共扩增获得62条完整ORF5基因序列,其中包括61条PRRSV-2和1条PRRSV-1ORF5序列,61条PRRSV-2序列中有45株属于sublineage 1.8,8株属于sublineage1.5,1株属于sublineage 8.7,7株属于sublineage 5.1,所占比例分别为73.77%(45/61)、13.11%(8/61)、1.64%(1/61)、和11.48%(7/61),氨基酸序列比对结果显示,部分病毒株氨基酸变异位于GP5抗原表位关键区域,其中2株类NADC30 GP5存在氨基酸缺失,1株类NADC30在GP5插入一位氨基酸。表明河南省猪群PRSSV流行情况严重,且有多样化、复杂化趋势,其中sublineage 1.8为主要流行毒株。 2、PRRSV流行毒株的分离鉴定及特性研究 本试验根据试验一ORF5序列遗传分析的结果,并结合临床特征选择32份具有代表性的阳性临床样品且无其他病原体污染的病料研磨液接种PAM细胞和Marc-145细胞进行体外病毒分离培养,利用RT-PCR和间接免疫荧光试验(Indirect immunofluorescence assay,IFA)进行分离鉴定,并对鉴定为PRRSV的毒株进行传代20次后利用蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)法研究其对IFN信号通路相关的STAT2和ISG56两种蛋白的诱导作用,以期为PRRS新型高效疫苗的研发提供候选毒株。细胞分离结果显示感染HN-PY-01、HN-NY-01、HN-AY-04、HN-LH-01、HN-ZZ-045株的细胞出现形态变化,RT-PCR结果验证了导致细胞形态发生变化的是PRRSV,为了进一步确定该分离物是PRRSV进行了IFA鉴定,结果显示有5株检测到绿色荧光信号,说明成功分离到了5株PRRSV毒株。WB结果显示PRRSV HN-NY-01和HN-PY-01株可以在Marc-145细胞内诱导STAT2和ISG56蛋白的表达,且这种诱导作用是在病毒复制过程中产生的,而其他分离株不能诱导这两种蛋白的表达。这种能诱导IFN信号通路相关蛋白的PRRSV分离株的鉴定可能有利于针对PRRS的疫苗开发。 3、PRRSV分离株的遗传进化分析 为了了解HN-NY-01、HN-PY-01两株PRRSV分离株可能发挥诱导IFN信号通路相关蛋白作用的氨基酸位点,RT-PCR扩增其全长基因组,分析其全基因组序列相似性、遗传演化关系、重组事件以及与抑制IFN产生有关的Nsp1、Nsp2、Nsp4、Nsp11、Nsp12、N蛋白氨基酸序列变异特征,以期找到能诱导IFN信号通路相关蛋白产生的原因。同源性分析结果显示,两毒株与NADC30同源性最高,与QYYZ毒株同源性