关键词： 沙门菌   鸡场   多重PCR   流行病学   风险评估模型  

摘要： 沙门菌不仅是重要的人兽共患病原菌,也是常见的食源性病原菌,给养殖业带来巨大负担,也会对人类健康造成重大危害。我国的家禽养殖方式目前大体上可分为散养、平养与笼养,其中平养和笼养是集约化鸡场较常用的模式。在养殖场中,沙门菌可以垂直传播给后代鸡群并逐级放大,还可以通过生物传播媒介及受污染的饲料、垫料等水平传播。不同地区养殖场的沙门菌流行情况受地理、政策、人类旅居等多种因素影响,而且不同养殖模式下的沙门菌流行状况及关键风险点也会有所不同。然而,一些养殖场或企业不了解场内沙门菌的污染状况,不清楚风险环节,容易造成防控力度不足或过度,导致疾病继续流行或是资源浪费。因此,针对不同模式的鸡场开展沙门菌流行病学调查与分析,可以进一步了解沙门菌“个性化”的流行特征与传播规律并探明关键风险点,为我国家禽养殖的沙门菌防控提供重要数据参考。 本研究针对家禽中常见的重要沙门菌血清型建立了多重PCR检测方法,实现了对肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌和婴儿沙门菌的同步检测以及对肯塔基沙门菌的靶向检测,并将上述方法运用于国内两家不同模式集约化鸡场的沙门菌流行病学调查中。之后对优势血清型分离株进行耐药性分析,结合菌株来源分布情况进行基于全基因组测序的溯源传播分析,并根据不同鸡场的现场流行病学考察情况,归纳总结出了各自的沙门菌传入传播关键风险点。在此基础之上,本研究基于德尔菲法和层次分析法,进一步建立了涵盖10个一级指标和73个二级指标的鸡场沙门菌传入传播风险评估模型,根据模型反映出的关键风险点的重要程度,并结合鸡场自身实际情况开展综合防控,有效控制了场内沙门菌的感染和流行。本研究为了解沙门菌在不同模式鸡场中的流行传播规律提供了重要理论参考,为我国家禽养殖过程中沙门菌的防控提供了有益技术支撑。 1.家禽中常见重要沙门菌血清型多重PCR检测方法的建立与应用 不同血清型沙门菌PCR鉴定方法耗时较短、成本和技术要求相对不高,已成为鸡场等基层单位使用较多的沙门菌血清型鉴定方法。但是,目前仍缺少涵盖家禽中主要优势血清型的多重PCR方法。因此本研究针对肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌和婴儿沙门菌分别选取lyg D、ipa J、mdh和SIN＿02055作为特异性检测靶标,分别设计引物并优化体系,建立了一种可以同时检测这四种常见家禽沙门菌血清型的多重PCR方法。梯度PCR结果显示适宜退火温度范围为48-58.3℃,结合特异性试验结果确立57℃为最适退火温度。将肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌和婴儿沙门菌的基因组和菌液梯度稀释后进行灵敏度检测,结果显示上述四种血清型的基因组浓度检测限分别为24.54 pg/μL、27.73 fg/μL、178.8 pg/μL和18.05 fg/μL,同时最低可检测到1×10～3CFU/μL的细菌浓度。使用该方法对157份临床沙门菌进行检测,共鉴定出112株肠炎沙门菌、11株鼠伤寒沙门菌、4株鸡白痢沙门菌和3株婴儿沙门菌。 同时,本研究基于文献报道的肯塔基沙门菌所含有的gly基因,同时加入flj B片段,建立了一种两重PCR检测方法以用于肯塔基沙门菌的靶向检测。梯度PCR结果显示适宜的退火温度范围为48-57.6℃,优化后的退火温度为57℃。特异性试验检测结果显示,除肯塔基沙门菌外其他细菌均无法同时扩增出gly和flj B两个片段。灵敏度试验结果表明该方法的基因组浓度和菌液浓度检测限分别为12.47 pg/μL和1×10～3 CFU/μL。使用该方法对37株临床样品分离株进行检测,共鉴定出19株肯塔基沙门菌。 结合基于WGS的血清型预测,对上述多重PCR方法在临床检测中的结果准确率进行验证。结果表明157株沙门菌中的五种目标血清型均能用本研究建立的多重PCR方法检测得到,且其他血清型沙门菌未出现假阳性。综上,本研究建立的多重PCR方法均有着较好的特异性、灵敏度与准确性,能够检测五种常见的家禽沙门菌,适合基层养殖企业运用到日常监测中,以快速准确鉴定沙门菌血清型。 2.不同养殖模式鸡场中沙门菌的流行病学调查与分析 为了解不同模式鸡场中沙门菌的流行特征与关键风险点,本研究对A、B两个鸡场开展调查与分析,其中A场的特点是“区域分布,多点分散,集中孵化”,B场则为“线性养殖、多龄管理”。对祖代肉种鸡场A的五个下属养殖场、孵化场以及运输环节进行追踪监测,沙门菌总分离率为2.43%(156/6423)。DL2场的鸡群抗体阳性率(33%,295/903)和沙门菌分离率(5.65%,69/1222)均显著高于其他下属养殖场(P<0.001)。沙门菌不仅污染孵化场的生产车间,同时也会污染其他的非生产区域。肠炎沙门菌(82.69%,129/156)为优势血清型,其次为肯塔基沙门菌(15.38%,24/156),均分布于不同下属养殖场以及孵化场的环境中,

关键词： 动物伤害   流行病学   气象因子  

摘要： 背景:伤害在我国乃至全球范围内均造成了严重的疾病负担和经济负担，是世界各地导致早死的主要原因之一。在造成伤害的众多原因中，关于动物所致伤害的研究较少，目前研究范围主要集中在动物伤的流行病学调查，缺乏环境因素对动物伤害的影响研究。环境气温是否会影响哺乳动物行为从而导致哺乳动物相关伤害（mammalian-related injuries,MRI）还不确定。本研究旨在基于广州市伤害监测系统收集的数据，全面探讨广州市伤害尤其是动物伤害的流行病学特征，并量化评估气温对哺乳动物伤害发生的影响。　　方法:从广州市疾病预防控制中心获得2014-2019年的广州市伤害监测系统收集的所有门急诊伤害病例数据，对患者的人口学特征以及伤害特征进行描述性统计。使用Mann-Kendall检验分析不同种类伤害占比随时间的变化趋势，采用时间分层病例交叉设计，结合分布滞后非线性模型和条件准泊松回归方法来评估日均气温对MRI发生风险的影响。并按性别、年龄、教育程度和哺乳动物种类进行亚组分析。　　结果:本研究共纳入219,205例伤害病例，男女性别比是1.60∶1,伤害人群集中在15-34岁（34.0％）和35-59岁人群（31.6％）中。伤害地点主要发生在家中，伤害时进行的活动以休闲活动为主。其中伤害排名前五位的分别是跌倒/坠落（62,301例）、钝器伤（33,817例）、刀/锐器伤（32,970例）、动物伤（31,218例）和烧烫伤（23,710例）。除动物伤外，其余四种伤害占所有伤害人数的构成比呈下降趋势（p＜0.01）。在动物伤中，狗导致受伤的占比为43.2％,猫的占比为26.3％。动物伤害的数量呈现明显的季节性特征，8月份达到高峰。研究发现日平均气温对MRI存在非线性滞后影响。高温增加发生MRI的风险，其影响在当天最为明显，在第二天仍具有统计学意义的影响。发生MRI风险最低的气温为9.3℃(约为第2分位数气温)，与该参照气温相比，日均气温达到第75分位数(27.4℃)时，发生MRI的相对风险最大(RR=1.45,95％CI:1.25-1.68),27.4℃之后风险稍有下降。亚组分析中，高温对男性和女性的影响相似。与其他年龄组相比，15-59岁的人群更容易在高温下遭遇MRI。由猫、狗在高温下造成的伤害风险大小类似。　　结论:基于6年的广州伤害监测数据揭示了伤害的流行病学特征。研究发现不同伤害原因的危害性及重点人群。广州市居首位的伤害是跌倒/坠落，60岁以上的老年人群特别是女性需要重点关注。针对工作人群，特别是男性，应重点预防钝器伤和刀/锐器伤，提防职业伤害。还需重点关注儿童的烧烫伤。动物伤害具有明显的季节性特征与时间趋势，近七成由猫狗所致。研究揭示高温影响动物的行为，导致发生动物伤害的风险上升。研究结果对于伤害的认识了解以及防控具有重要意义。

关键词： 埃可病毒25型   亲缘进化   起源进化   时空传播   基因重组   血清中和试验  

摘要： 研究背景: 埃可病毒25型（Echovirus 25,E25）作为肠道病毒B组（Enterovirus B,EV-B）中的成员之一,可引起无菌性脑膜炎（aseptic meningitis,AM）,病毒性脑膜炎（viral meningitis,VM）,急性弛缓性麻痹（acute flaccid paralysis,AFP）和手足口病（hand,foot,and mouth disease,HFMD）等相关疾病。自其原型株（JV-4）于上个世纪五十年代被发现以来,E25在世界范围内有着广泛的流行和传播,在国内外曾多次引起散在和暴发性感染的病例。目前国内尚无针对肠道病毒的完整监测系统,E25多在AFP监测或脑炎相关病例中检出,而手足口病相关病例的研究报道较少。 目前多数E25的相关研究多局限于某一地理区域分离毒株,在基因型别上没有统一的划分方法,其相关的病原学、分子流行病学及血清流行病学本底等方面的研究仍比较欠缺。因而本研究依托国家手足口病监测系统,收集整理2009～2018年中国大陆E25相关毒株,进行系统的流行病学、基因特征、起源进化、时空传播分析和血清流行病学分析,为我国E25引起手足口病的预防和监测提供相关的基础数据。 研究目的: 1.建立基于E25 VP1全长编码区的基因型/亚型划分方法,探讨全球及我国流行E25的型别特点; 2.构建全球范围的E25VP1全长序列数据集,分析其起源和进化特点及可能的传播途径; 3.基于E25全基因组序列,进行E25基因重组、选择压力位点分析,探讨不同重组模式对病毒进化的影响; 4.了解E25在代表区域健康儿童人群中的血清流行病学本底。研究方法: 本研究基于中国手足口病监测网络,收集2009-2018年中国大陆由E25引起的18例HFMD病例的临床标本,通过病毒培养及全基因组测序,结合Gen Bank中VP1区及全基因组代表序列,分别建立由113条VP1全长和38条全基因组序列构成的数据集。通过运用Sequencher、MEGA、Bio Edit、Simplot以及Beast等生物信息学软件,对建立的E25数据库中的序列进行系统发育学分析、起源进化、时空传播、同源性分析、重组分析、VP1区的变异位点以及选择压力的分析。 此外,本研究以HFMD高发地区宁波市为代表,收集其2019-2020年间5个不同地区的100份5岁以下正常儿童血清,并针对国内E25优势流行株开展血清中和试验,通过分析其抗体阳性率及抗体效价,初步探讨E25在宁波市的血清流行病学本底。 研究结果: 1.基于全球113条完整的E25 VP1序列,目前可将E25分为9个基因型:A-I。C基因型、E基因型、H基因型和F基因型,均含有中国株,其中F基因型所含序列占总序的一半以上（68/113）,且绝大多数序列为中国株（55/68）,也为中国大陆地区的优势基因型。 2.对全球的110条VP1全长序列和中国大陆地区的57条VP1全长序列分别进行贝叶斯起源进化和时空传播学分析,结果显示E25的平均核苷酸替换率为6.08×10-3替换/位点/每年,起源时间大约是1924年;中国大陆地区E25的核苷酸替换率为6.98×10-3替换/位点/每年,起源时间大约为1966年。 3.贝叶斯时空传播分析发现,E25在全球范围内存在六条重要的传播途径,最早起源于印度;中国大陆地区内部存在四条重要的传播途径。马尔可夫奖励值显示中国在世界范围内E25的输出中占据重要地位。 4.同源性分析发现,本研究中E25在P1区与原型株具有最高的同源性,而在P2和P3区部分序列与其他EV-B原型株的最大同源性超过了其原型株;F基因型相较其他基因型在P2和P3区存在更大的核苷酸差异。 5.通过进一步的重组分析发现,E25整体上存在17种重组模式,F基因存在九种的重组模式。VP1区的自然选择压力分析显示,E25在衣壳蛋白VP1区存在一个正向选择位点。 6.血清中和试验结果显示,宁波市5岁以下健康儿童群体中E25的抗体阳性率为5%,抗体滴度范围为11.3～256,抗体的几何平均效价（GMT）为78。 研究结论: （1）基于全长VP1编码区可将E25划分为A～I九个基因型,其中F基因型为中国大陆主要流行基因型。 （2）世界范围内E25的起源时间可以追溯到1924年,比中国大陆地区早42年,两个数据集中的E25核苷酸替换速率相近。 （3）E25最早起源于印度,其在全球范围内存在六条重要的传播途径,中国在E25的全球传播中占据重要地位。 （4）本研究提示P2、P3非结构蛋白编码区发生的基因重组事件在F基因型成为优势流行株过程中起到重要作用,且E25在VP1区存在正向选择位点,提示病毒持续进化。 （5）E25在健康儿童中血清阳性率较低,但抗

关键词： 运动神经元病   疾病负担   流行病学   防控力度  

摘要： 目的：分析1990～2019年运动神经元病疾病负担的变化趋势和流行病学特征，并预测2020～2030年疾病发展趋势。　　方法：本研究使用描述性分析探讨和比较1990年和2019年中国运动神经元病疾病负担的流行病学特征。采用Joinpoint回归模型分析近 30 年中国运动神经元病年龄别标准化发病率、死亡率和伤残调整寿命年(disability-adjusted life year, DALY)率的变化趋势，确定重点变化时期。应用年龄－时期－队列模型被用来评估运动神经元病发病、死亡和DALY风险的年龄效应、时期效应和出生队列效应，以探讨影响疾病负担的风险因素。使用贝叶斯年龄－时期－队列模型预测未来10年我国运动神经元病上述疾病负担指标的变化趋势。　　结果：（1）从1990～2019年的总发病率从0.51/10万上升至0.63/10万，上升幅度为23.53%;总死亡率从0.22/10万下降至0.20/10万，下降幅度为9.10%;总DALY率从12.50/10万下降至7.51/10万，下降幅度为39.92%。　　（2）1990～2019年，总人群、男性和女性运动神经元病年龄别标准化发病率分别以年均-0.26%、-0.26%和0.27%的速率下降;总人群、男性和女性运动神经元病年龄别标准化死亡率分别以年均-1.67%、-1.27%和-2.37%的速率下降;总人群、男性和女性运动神经元病年龄别标准化DALY率分别以年均-2.41%、-1.89%和-3.18%的速率下降。　　（3）年龄－时期－队列模型分析显示，年龄效应：0-4岁年龄组的发病、死亡和DALY相对风险最大，其次是中高年龄组，可知年龄效应在一定程度上增大运动神经元病的疾病负担;时期效应：运动神经元病的发病率、死亡率和DALY率与时期效应有关，随时期变化呈先下降后上升的趋势;队列效应：疾病负担的相对风险随着出生队列的变化而明显降低，队列效应有助于运动神经元病发病率、死亡率和DALY率的持续下降。　　（4）贝叶斯年龄－时期－队列模型结果提示，2020～2030年，各类人群的年龄别标准化发病率、死亡率和DALY率均呈现上升的趋势。预计到 2030 年，总人群运动神经元病年龄别标准化发病率、死亡率和DALY率将比 2020 年分别上升11.82%、20.63%和19.05%。　　结论：（1）2019 年中国运动神经元病的发病情况较 1990 年上升，死亡情况和DALY情况有明显好转;（2）近30年运动神经元病年龄别标准化发病率、死亡率和DALY率年均变化速率均有所下降;（3）年龄效应、时期效应和队列效应均对近30年运动神经元病的疾病负担有一定影响，其中年龄效应的影响最大;（4）未来10年预测中国人群运动神经元病年龄别标准化发病率、死亡率和DALY率将呈现持续上升的趋势，运动神经元病疾病负担进一步加重，建议加大防控力度，以减轻该病疾病负担。

关键词： 慢性疼痛   流调   老年人  

摘要： 为探讨深圳市老年人群中慢性疼痛的流行病学特征，基于深圳市南山区人民医院疼痛专科医联体，于2023年2月—12月对辖区内医院及社康中心老年人群进行问卷调查。研究发现，深圳老年人群疼痛在年龄、性别、BMI、急慢性疼痛程度方面的差异无统计学意义，而慢性疼痛在疼痛类型分类、对生活影响方面的差异有统计学意义。慢性疼痛与急性疼痛以轻度疼痛为主，受年龄、性别及BMI影响小，慢性疼痛中轻度持续性疼痛为主要特征，对情绪感受和临床表现影响较大，对日常生活影响小。因此，应尽早识别干预相关因素以评估疼痛程度、制定个性化治疗方案，改善疼痛治疗和管理效果。

关键词： 羊源冠状病毒   流行病学调查   分离鉴定   致病性   腹泻  

摘要： 冠状病毒(coronavirus,CoV)可感染人类和多种动物,感染后多引起呼吸系统和消化系统疾病。现有的流调资料对羊源冠状病毒(caprinecoronavirus,cpCoV)研究极少,国内羊群中是否存在cpCoV感染,其流行情况、基因组特征、致病性及危害均处于研究空白,系统研究cpCoV的流行病学及病原学特征是综合防控该病的理论基础。本研究在中国部分地区羊场开展cpCoV及其它三种羊腹泻相关病原的流行病学调查,从阳性样品中分离获得12株cpCoV流行毒株,并选取代表毒株评价其对羊、牛的致病性。获得如下结果: 1.在中国部分地区羊群中开展羊腹泻相关病毒流行病学调查,结果显示,在623份羔羊粪便及组织样品中,cpCoV、羊肠道病毒(Caprineenterovirus,CEV)、牛星状病毒(Bovine astrovirus,BoAstV)、牛腺病毒(Bovine adenovirus,BAdV)的样品阳性率分别为15.57%、29.79%、32.74%、29.73%,四种病原感染情况在不同地区差异较大,存在多种混合感染类型。cpCoV在腹泻样品中的阳性率显著高于非腹泻样品,其可能是引发羊群腹泻的重要病原之一,其感染呈现季节性流行特征,冬、春季为高发期。 2.成功分离获得12株cpCoV流行毒株,分别来自江苏、浙江、安徽及新疆。全基因组、N基因及RdRp的进化分析均显示与现有Betacoronavirus 1型病毒存在显著差异,cpCoV S基因在Betacoronavirus 1型病毒进化树中形成独立分支。其基因组结构独特,NS4a-4b序列与现有毒株存在明显差异。以上数据都说明羊源冠状病毒的独特性,是一种新的冠状病毒。 ***2302G/cpCoV毒株经口鼻途径可有效感染2月龄羔羊,经鼻、咽、肛拭子排毒,感染后2dpi即可检测到病毒,3 dpi病毒检出率达100%,持续排毒至10 dpi。cpCoV可导致腹泻及轻微呼吸道症状,但未引起羔羊死亡,病理观察可见羔羊肠道出血和肠绒毛坏死脱落、肺脏实变及淋巴细胞填充、肠系膜淋巴结肿大和淋巴细胞流失等明显病理损伤,检测各组织病毒载量,回肠、大肠及肺脏病毒载量较高,对肺及大肠具有组织嗜性。本研究结果有助于深入了解cpCoV对羔羊的致病性,说明cpCoV是羔羊腹泻的重要致病病原之一。 ***2302G/cpCoV毒株经口鼻途径可感染1周龄犊牛,并诱发严重腹泻症状,成功构建了cpCoV感染犊牛的动物模型,拓宽了cpCoV感染宿主谱。cpCoV感染犊牛经鼻、咽、肛拭子排毒,最早于1 dpi即可检测到病毒,排毒高峰持续一周,伴随严重腹泻和血便,病理观察可见犊牛肠道出血和肠绒毛坏死脱落、肺脏实变、肠系膜淋巴结肿大等明显病理损伤,检测各组织病毒载量,小肠、大肠等病毒载量较高,对肠道具有组织嗜性。研究还发现,7 dpi剖杀犊牛的组织病毒载量明显高于14 dpi,揭示了cpCoV在犊牛体内的动态感染过程及致病机制。本研究结果有助于深入了解cpCoV对犊牛的致病性,说明cpCoV可感染犊牛并引起严重腹泻及死亡。 综上,cpCoV在各地区的流行较为广泛,可能是导致季节性腹泻的重要病原。cpCoV分离毒株具有独特的基因组结构与进化关系,表明其可能是一种新的动物冠状病毒,这一发现具有重要公共卫生意义。cpCoV对牛、羊均具有较强的致病性,主要引起腹泻、排毒及肠道病变,甚至能引起犊牛发病死亡。目前已知的cpCoV宿主谱包括牛和羊,提示在生产实践中应加强对cpCoV感染的认识和防控。同时,也提示后续的研究应加强对cpCoV的流行病学监测,研发相关疫苗,从而有信心防控该病毒,减少养殖业的经济损失。

关键词： 宠物源沙门氏菌   流行病学   耐药性   发病机制   检测方法   防控措施  

摘要： 随着宠物饲养数量的不断增加，宠物与人类之间的接触日益频繁，这显著增加了人兽共患病传播的风险。其中，沙门氏菌病是与宠物相关的细菌性传染病中最为常见的类型之一。该病原菌具有较强的生存能力和广泛的传播途径，并且其耐药性问题日益突出，给公共卫生安全带来了严峻挑战。本文综述了宠物源沙门氏菌的流行病学特征、耐药性、发病机制以及检测方法等关键内容。

关键词： 绵羊家畜衣原体   绵羊流产衣原体   血清学调查   MOMP蛋白   单克隆抗体  

摘要： 家畜衣原体（Chlamydophilia pecorum）、流产衣原体（Chlamydophilia abortus）是衣原体科衣原体属的两个衣原体种,在绵羊群中普遍存在,感染后引起多发性关节炎、结膜炎、肺炎、肠炎、幼羊生长迟缓、母羊流产或不孕等病症,引发新生羔羊高死亡率,致使羊群繁殖能力下降并引起多种疾病混合感染。在绵羊密集饲养区,因其临床表现不明显,难以与其他病原区分,且衣原体未被列入羊群常规病原检测中,故家畜衣原体、流产衣原体的流行给绵羊养殖业造成严重经济损失。吉林省作为农业大省,养羊业在农业中占据重要地位。当前,吉林省对绵羊感染衣原体的研究较少,针对家畜衣原体、流产衣原体的研究更是匮乏,因此开展绵羊家畜衣原体及流产衣原体血清学调查以及制备单克隆抗体是本研究要解决的主要问题。 本研究采集吉林省白城、松原、长春、延边四个地级市不同羊场不同生理阶段的绵羊血清样品,采用抗体间接ELISA法对采集的绵羊血清样品进行家畜衣原体、流产衣原体抗体测定。四个地级市绵羊家畜衣原体、流产衣原体均存在抗体阳性,群体阳性率为100%（4/4）。家畜衣原体血清抗体阳性率为33.42%（247/739）、流产衣原体血清抗体阳性率为9.47%（70/739）、混合感染血清抗体阳性率为7.30%（54/739）,表明家畜衣原体、流产衣原体在吉林省部分规模化绵羊场普遍存在、伴有混合感染的发生;其中,白城、松原、长春、延边绵羊家畜衣原体血清抗体阳性率分别为:37.5%（6/16）、37.08%（168/453）、28.86%（56/194）和22.36%（17/76）,流产衣原体血清抗体阳性率分别为:37.5%（6/16）、11.03%（52/453）、5.15%（10/194）和2.63%（2/76）;羔羊、母羊、种公羊家畜衣原体血清抗体阳性率分别为:5.8%（8/31）、32.13%（205/638）、34.28%（24/70）,流产衣原体血清抗体阳性率分别为:22.58%（7/31）、7.36%（47/638）、22.85%（16/70）。 在对吉林省家畜衣原体和流产衣原体流行病学进行调研的基础上,制备了单克隆抗体。以纯化后重组蛋白MOMP、截短蛋白MOMP201～390为免疫原分别免疫BALB/c小鼠,采集脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行电融合,经间接ELISA法通过细胞有限稀释法对杂交瘤细胞阳性克隆株及亚克隆筛选,得到能稳定分泌的2株重组蛋白MOMP单克隆抗体细胞株和2株截短蛋白MOMP201～390单克隆抗体细胞株;通过免疫小鼠制备腹水单抗,纯化透析后,以重组蛋白MOMP、截短蛋白MOMP201～390为抗原,经western-blot检验证明,获得的4株单克隆抗体能与抗原特异结合,其单克隆抗体ELISA效价分别达到1:32 000和1:64 000。 本研究通过对吉林省部分地区绵羊家畜衣原体、流产衣原体的流行病血清学调查,为及时掌握吉林省内部分地区绵羊衣原体的流行情况、衣原体病的防控提供有效依据;同时,单克隆抗体的制备为下一步两种衣原体血清学诊断方法的建立及疫苗研制提供了重要生物原材料。

关键词： 猫口炎   流行病学调查   猫杯状病毒   卵黄抗体  

摘要： 猫口炎疾病常见于猫科动物。患猫会出现口腔溃疡、疼痛等症状,严重影响生活质量。迄今为止猫口炎的致病机理还有待研究,学者们认为与病毒感染以及免疫作用有关。现今流浪猫和家养猫的数量不断增多,因此本研究对长春地区猫口炎的流行病学特点进行调查,以期为猫口炎的预防、诊断及治疗提供参考。在猫口炎的研究调查中发现猫口炎临床病例杯状病毒的检出率较高,但用于杯状病毒治疗的药物较少。由于卵黄抗体具有高效、安全、成本低的特点,目前临床已用于杯状病毒引起的猫传染性鼻结膜炎和疱疹病毒引起猫传染性鼻气管炎的联合治疗,因此开展猫杯状病毒卵黄抗体制备与应用的研究。 本文收集了2022年10月—2024年1月,来自长春市4家宠物医院的126例猫口炎病例基本信息。对收集数据进行统计分析,分析长春地区猫口炎发病与年龄、性别、品种、季节、免疫情况和饲养情况的相关性。分析病例血常规、血液生化、猫血清淀粉样蛋白A等实验室结果变化,对比分析病例的不同治疗方案和治疗效果。 本研究使用猫杯状病毒灭活疫苗对170日龄蛋鸡进行免疫,每间隔14天免疫一次,每次免疫后14天使用间接ELISA方法对鸡蛋进行抗体效价检测。四次免疫后抗体效价达到1:256开始收蛋,采用聚乙二醇沉淀法提取卵黄抗体,对制备的猫杯状病毒卵黄抗体进行安全性评价与临床初步应用。 研究显示长春地区猫口炎的发病与年龄、性别、季节、品种无关,猫口炎的发病与免疫接种有关,多猫家庭的发病率高于单猫家庭。在猫口炎病例中杯状病毒检出率为60.3%,疱疹病毒检出为30.2%。患猫的血液结果中,猫血清淀粉样蛋白A、中性粒细胞数、淋巴细胞数、肝脏和肾脏指标均有变化。在调查中发现选择常规药物治疗多于选择手术治疗,手术治疗和常规药物治疗的治愈率分别为77.8%和64.8%。 以猫杯状病毒灭活疫苗为抗原免疫蛋鸡,制备并提取了猫杯状病毒卵黄抗体,小鼠安全性评价结果表明,制备的卵黄抗体无不良反应、安全可靠。经临床初步应用结果表明,与正常治疗组相比,使用卵黄抗体治疗可以有效改善病猫的精神状态,恢复食欲,缓解流涎、疼痛、口腔溃疡等临床症状,缩短了完全康复时间,而且患猫皮下注射后未见局部和全身不良反应。 实验结果表明长春地区猫口炎的发病率与年龄、性别、季节、品种无关,与疫苗接种有关,多猫家庭的发病率要高于单猫家庭。实验制备的猫杯状病毒卵黄抗体安全可靠,可以有效改善猫口炎的临床症状,缩短完全康复时间。