关键词： 猫杯状病毒   原核表达   纳米抗体   流行病学调查   Fenobody  

摘要： 猫杯状病毒(Felinecalicivirus,FCV)是引起猫上呼吸道感染、口腔水疱性疾病、慢性胃炎及关节水肿等疾病的一种重要病原。猫杯状病毒病别名猫传染性鼻-结膜炎病，该病发病率高，呈全球性分布，康复猫也可能会终身排毒，个别健康猫也可能携带病毒，并且已经出现了一种急性的可引发致死性全身性疾病(Virulentsystemicdisease,VSD)的高致病力毒株（VS-FCV），严重危害着猫的健康;目前市面上仍没有针对猫杯状病毒病的特效治疗药，且现在使用的猫三联疫苗针对猫杯状病毒的保护效率较低。因此，需要了解猫杯状病毒病的发病规律、症状特征等，掌握其发病规律与品种、性别、年龄等的相关性;并且急需一种猫杯状病毒病的特异性抗病毒药物。目前已知的最小的具有抗原结合功能的活性片段是纳米抗体，其具有良好的稳定性、低免疫原性及高组织穿透性，并且纳米抗体易于表达且生产成本低，在抗病毒治疗方面表现出良好的临床应用前景。本研究首先进行西安地区2020年6月—2023年6月猫杯状病毒病的流行病学调查，统计分析FCV感染与季节以及猫的性别、年龄、品种等之间的关系。随后，本研究构建了具有中和FCV活性的单体纳米抗体和Fenobody原核表达载体，原核表达并纯化后，鉴定并比较两者中和活性。主要研究结果如下：　　1.西安地区猫杯状病毒病流行病学调查　　收集2020年6月-2023年6月期间来自西北农林科技大学西安动物医院就诊的疑似FCV感染病例信息，分析发病与病例的年龄、性别、品种、地区、发病时间、临床症状以及实验室检查结果的相关性，结果表明，FCV感染与季节、猫的性别和品种均无关，但与猫的年龄呈负相关，1周岁以下的猫易感，并且FCV感染与口腔黏膜炎呈现强相关性。　　***中和纳米抗体单体和Fenobody的原核表达及纯化　　将pCMV-FCV-Nb13真核表达载体转染HEK-293T细胞，收集上清作为模板进行PCR扩增得到FCV-Nb13的基因片段，将其与双酶切后的pET32a原核表达空载体进行同源重组反应，得到pET32a-FCV-Nb13重组质粒。同时，通过PCR从含有Ferritin基因片段的质粒中扩增出Ferritin片段，将FCV-Nb13的基因片段与Ferritin基因片段进行重叠PCR将两段基因融合，随后将得到的融合片段Fenobody-FCV-Nb13与双酶切后的pET32a进行同源重组反应，得到pET32a-Fenobody-FCV-Nb13重组质粒;将两个重组质粒进行转化至BL21（DE3）表达感受态后IPTG诱导表达，将获得的蛋白进行Ni柱纯化，通过SDS-PAGE和WesternBlot分析蛋白的表达及纯化情况，得到FCV-Nb13单体蛋白及Fenobody-FCV-Nb13蛋白。　　3.单体纳米抗体和Fenobody结合活性与中和活性的鉴定比较　　将FCV-C1接种于CRFK细胞，通过IFA、WesternBlot和ELISA等方法鉴定FCV-Nb13单体及Fenobody与FCV的结合，结果显示，FCV-Nb13单体和Fenobody都可与FCV-C1结合，且Fenobody比单体的结合力更强。将FCV-Nb13单体和Fenobody分别与0.01MOIFCV共孵育，通过IFA、WesternBlot、TCID50等方法对FCV-Nb13单体及Fenobody中和活性进行鉴定。结果显示，相比之下，FCV-Nb13单体和Fenobody都具有中和FCV的活性，Fenobody比单体具有更好的中和活性。　　综上所述，本研究首先进行了西安地区猫杯状病毒病流行病学调查，随后原核表达FCV中和纳米抗体的单体和Fenobody，鉴定比较两者的结合力和中和活性，为猫杯状病毒病的防控提供参考，为研发治疗猫杯状病毒病的特异性抗病毒药物奠定基础。

关键词： 内蒙古   驴   隐孢子虫   毕氏肠微孢子虫   分子流行病学  

摘要： 隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)和毕氏肠微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)是人和动物中常见的肠道寄生虫,是一种人兽共患病原体。关于驴隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫的感染率和遗传特性的数据有限,驴感染这两种寄生虫可能会造成隐孢子虫病和微孢子虫病的暴发。2022年在内蒙古2个驴养殖场采集粪便样本300份,样本根据年龄分为3组,根据临床症状分为2组;采用巢氏PCR法,对内蒙古自治区呼和浩特地区2个驴养殖场隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫进行检测与鉴定。以此来对呼和浩特区驴隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫的感染率有更清晰的认知,并掌握两种原虫在此地区的流行情况和基因型分布特征。 结果显示,隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫在驴的总体感染率分别为56.33%(169/300)和13.33%(40/300)。隐孢子虫的调查中,腹泻和非腹泻样本的感染率分别为69.30%(52/75)和52.00%(117/225),两者差异显著(p<0.05);两个养殖场的感染率分别为60.00%(120/200)和49.00%(49/100),差异不显著(p>0.05);幼年驴、青年驴和成年驴的总感染率分别为39.68%(25/63)、63.75%(51/80)和59.24%(93/157),不同年龄段驴之间隐孢子虫感染率差异显著(p<0.05);SSU r RNA序列分析鉴定出5种隐孢子虫,分别为安氏隐孢子虫(***)(77.51%,131/169)、微小隐孢子虫(***)(10.65%,18/169)、牛隐孢子虫(***)(9.47%,16/169)、芮氏隐孢子虫(***)(1.78%,3/169)和猪隐孢子虫(***)(0.59%,1/169);对gp60序列分析鉴定出微小隐孢子虫亚型为Ⅱd A20G1(66.67%,12/18)和Ⅱd A19G1(33.33%,6/18)。毕氏肠微孢子虫的调查中,腹泻和非腹泻样本中的感染率分别为16.00%(12/75)和12.44%(28/225),差异不显著(p>0.05);两个养殖场的感染率分别为8.00%(16/200)和24.00%(24/100),差异极显著(p<0.01);幼年驴、青年驴和成年驴的总感染率分别为19.05%(12/63)、18.75%(15/80)和8.28%(13/157),不同年龄段驴之间毕氏肠微孢子虫感染率差异显著(p<0.05);ITS基因序列分析显示存在3个已知基因型horse1(47.50%,19/40)、J(20.00%,8/40)、BEB6(12.50%,5/40)和8个新基因型NMG1-NMG8,分布在Group1(包括horse1和NMG6–NMG8)和Group2(包括J、BEB6和NMG1–NMG5);另外,有209个样本(69.67%,209/300)至少感染了隐孢子虫或毕氏肠微孢子虫,16个样本(5.33%,16/300)同时感染隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫。 综上所述,内蒙古呼和浩特地区驴普遍存在人畜共患的隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫感染,首次报告了驴混合感染隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫,首次在驴发现了牛隐孢子虫、芮氏隐孢子虫和猪隐孢子虫虫种,首次在驴发现了微小隐孢子虫Ⅱd A20G1亚型,确定了安氏隐孢子虫为呼和浩特地区驴感染隐孢子虫的优势虫种,首次在驴中发现了毕氏肠微孢子虫的8种新基因型,确定了horse1为呼和浩特地区驴感染毕氏肠微孢子虫的优势基因型。

关键词： 水痘   流行病学特征   预防控制措施  

摘要： 目的：分析水痘的流行病学特征，并探讨预防控制措施。方法：对2020年1月—2022年12月期间我院收治的67例水痘患者病例资料进行回顾性分析，明确水痘的流行病学特征，并制定预防控制措施。结果：(1)不同时间水痘发生率显示，2022年<2021年<2020年，12月>11月>4月及10月>3月>5月>1月>2月>6月、7月及9月>8月。(2)不同年龄水痘发生率显示，15～24岁>0～14岁>25～36岁>36岁以上。(3)不同职业水痘发生率显示，学生>其他职业者>学前儿童>医务工作者。(4)不同地域水痘发生率显示，农村>城市。结论：水痘可发生于一年四季以及任何年龄段、职业群体及地域中，且多发于春冬季及学生与其他职业人群中，需注重预防控制措施的普及与推广运用，以预防及减少水痘的发生。

关键词： 猪源   葡萄球菌   cfr基因   optrA基因   RAA检测方法   流行病学   耐药性  

摘要： 葡萄球菌(Staphylococcus sp.)是一类存在于环境中的条件性致病菌,可引起人和动物的多种疾病。而且,在抗生素频繁作用下,葡萄球菌极易产生耐药性,这严重阻碍了该菌感染的治疗,给人类和动物健康带来极大威胁。噁唑烷酮类抗生素作为防治革兰阳性菌感染治疗的最后一道防线,通常应用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌感染的治疗。而近几年发现的多药耐药基因optrA和cfr,导致噁唑烷酮类抗生素对含有该耐药基因细菌感染治疗的失败。因此,快速诊断葡萄球菌中多药耐药基因optrA和cfr,分析该耐药基因的流行情况,给葡萄球菌感染的治疗提供临床依据,对临床精准用药具有重要意义。 本研究以葡萄球菌为研究对象,建立多药耐药基因optrA和cfr的RAA快速检测方法,调查猪源葡萄球菌中optrA和cfr的流行传播情况,分析多药耐药基因optrA的碱基突变对细菌耐药性的影响,为葡萄球菌感染治疗的精准用药提供临床依据。本论文的内容及结果如下: 1.建立耐药基因cfr和optrA的RAA检测方法:(1)筛选出特异性好、敏感性强的optrA基因和cfr基因特异性引物和探针(荧光标记物分别为CY5和VIC);(2)特异性检测表明该检测方法仅能检测出含optrA和cfr基因的阳性样品、对其他样品的检测结果为阴性,显示出明显的特异性;(3)敏感性检测表明该检测方法最低能检测出10～1copies的细菌基因拷贝数,显示出良好的敏感性;(4)重复性实验结果表明该检测方法具有良好的重复性;(5)与PCR方法比较,该RAA检测方法的阳性检测符合率为100%。 2.多药耐药基因cfr和optrA的流行病情况调查:(1)从353份猪源样品中分离获得176株葡萄球菌,其中cfr基因阳性菌株为45株,检出率为25.56%;optrA基因阳性菌株6株,检出率为3.41%;且cfr基因和optrA基因均为阳性的菌株有2株,检出率为1.14%;(2)遗传进化树显示45株葡萄球菌的cfr基因均处于同一分支内,属于同一基因型;而6株葡萄球菌的optrA基因处于两个不同的分支,存在核苷酸序列差异,属于不同的基因型;(3)49株多药耐药基因cfr和optrA阳性菌均对氟苯尼考和氯霉素耐药,耐药率为100%,但对利奈唑胺的耐药率为79.60%,表明有9株含多药耐药基因cfr和optrA阳性菌株没有显示出对利奈唑胺的耐药性。 3.多药耐药基因optrA的碱基突变对细菌耐药性的影响:(1)多药耐药基因optrA导致细菌对氯霉素、氟苯尼考和利奈唑胺产生耐药性;(2)optrA基因第7A→G、19G→A、849 C→T、868G→A、1413G→T、1441A→C、1874C→T和1916G→A的碱基突变引起细菌对利奈唑胺的耐药性降低,而这些基因突变对氯霉素和氟苯尼考的耐药性却没有影响。 综上,本研究建立了一种快速、敏感和稳定的多药耐药基因optrA和cfr的RAA检测方法,该方法适宜对临床样品中这两种耐药基因的快速检测。应用该检测方法,对2022-2023年中分离获得的猪源葡萄球菌optrA和cfr基因的流行情况进行了调查,发现cfr基因检出率为25.57%,optrA基因的检出率却仅为3.41%。而且cfr基因均属于同一基因型,optrA基因属于两个基因型,存在基因差异。optrA基因中的碱基差异引起了细菌对利奈唑胺的耐药性降低,但对氯霉素和氟苯尼考的耐药性却没有影响。

关键词： 新生儿   病原菌   流行病学   耐药性   影响因素  

摘要： 目的:分析新生儿感染病原菌耐药性及围生期危险因素。 方法:1、选取2018年1月-2022年12月本院NICU感染患儿242例作为感染组,在感染组中,我们收集了患者的血液、痰液、尿液和分泌物样本,并对其进行了细菌培养和分离,以便对病原体和其耐药性进行研究。 2、从NICU中随机选取了248例未感染的新生儿,形成了对照组,在对照组中,我们收集了两组新生儿的基本状态、围生期的感染状态及其常规状态、侵袭性手术以及相关的副反应等信息,并做出了深度的比较研究。 结果:1、242例NICU感染新生儿共检出病原菌285株,主要分离自呼吸道(165)、血液(29)、脐部(31)、脑脊液(7);其中革兰阴性菌株占66%,革兰阳性菌株占33.3%、真菌株占0.7%,以大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌为主;主要革兰阴性菌对氨苄西林、头孢呋辛类耐药率较高(>60%),大部分的革兰氏阳性细菌,如青霉素类、大环内酯类、左氧氟沙星和氨苄西林,其耐药率都较高(>70%),而没有观察到对万古霉素、利奈唑胺具有耐药性的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌;新生儿感染病原菌主要为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌。 2、单因素分析表明,母亲的妊娠年龄、人工流产次数、胎盘异常、羊水异常、胎膜早破、产前发热等指标与新生儿的性别、孕周和出生体重,均显示对新生儿感染有显著影响(P<0.05)。然而,多因素logistic回归分析显示,母亲年龄超过36岁、有过人工流产史、胎膜早破、产前发热,以及新生儿出生体重偏低均是新生儿感染的独立危险因素。 结论:1、该院医院感染的病原菌以金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌,鲍曼不动杆菌,以及肺炎克雷伯菌为主,对青霉素、大环内酯、左氧氟沙星、氨苄青霉素等抗生素有很高的耐药性,革兰阴性菌对头孢呋辛、头孢唑啉,复方新诺明及氨苄西林等药物的耐药性较高。新生儿感染病原菌以革兰阴性菌为主。 2、新生儿感染的危险因素较多,需根据新生儿感染的危险因素制定相应的干预措施,在新生儿感染初期,及时进行针对性的干预;在新生儿感染发生后,根据检测到的病原菌选择合适的治疗方案。

关键词： H9N2   风险评估   跨种传播   环境空气污染物   新发突发传染病  

摘要： 近年来,新冠肺炎、猴痘、埃博拉病毒病、大流行H1N1等国际关注的突发公共卫生事件频发,新发突发传染病的暴发与流行对人类健康和社会经济造成了严重危害。随着分子生物学、生物信息学、数理统计等学科以及大数据、人工智能技术的快速发展,研究人员对新发突发传染病的致病机制、流行特征和传播规律等开展了广泛且深入的研究,但仍难以预测评估新发病原体跨种传播的风险及因素,难以全面掌握其在人间暴发流行的发生发展规律,因此,在新发病原体感染与流行风险的早期预警、精准防控方面仍面临巨大挑战。作为应对与防范新发突发传染病威胁的第一道屏障,监测预警工作目前主要涉及病原监测、症状监测、病例监测、互联网大数据监测等多种形式,上述监测处于新发突发传染病发生发展过程的不同节点上,对于新发突发传染病的风险评估、早期预警和有效处置具有重要意义。由于上述节点均处于新发突发传染病业已发生的时间节点,在预警的时效性方面仍存在一定的滞后。如何将新发突发传染病发生与流行早期预警的关口前移,是当前面临的重大科学问题与研究热点。 流感病毒曾多次出现跨种传播进而引发人间的全球大流行,对人类的健康和社会经济产生了巨大影响。其适应人体后转化为季节性流感,能在人间反复流行,因其一波流行在人群中导致大量的感染,往往造成严重的疾病负担、住院与死亡负担,是人类社会面临的主要传染病威胁之一。流感的监测预警体系相对完善,以流感病毒为例开展其监测预警研究具有较高的可行性和一定的示范作用。甲型流感病毒（influenza A virus,IAV）是流感病毒中最常见的类型,其中既包括季节性流感亚型,也包括以禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）为代表的动物流感亚型,具有遍布全球、宿主广泛、亚型众多、变异频繁、研究深入等特点,是解析跨种传播、人间流行发生发展规律的良好研究对象。 作为流行病学的分支学科之一,地理流行病学重点关注疾病的空间分布特征以及环境因素对疾病发生、传播的影响,并对疾病的流行风险进行预测评估。本研究针对新发病原体频繁溢出、本底水平掌握不全面、监测不均衡、预警方法相对滞后等现实问题,以流感病毒为研究对象,采用地理流行病学研究方法,系统收集、标准化、地图化整合IAV在动物和人群中感染的基因序列数据、流感病毒溢出事件和人群病例报告等信息,从流感病毒感染发生、发展演化的不同节点（溢出前、溢出事件发生、适应人间的季节性流行）出发,采用四种机器学习算法预测评估了IAV跨种传播的潜在风险地域及其主导因素,明确了当前监测不足亟需加强的重点区域;基于AIV感染动物的种群结构与多样性特征、报告频率与时空扩散演化等要素开发了AIV溢出风险快速评估工具,基于该工具预测评估了各种AIV的潜在溢出风险等级;综合分析了与季节性流感暴发流行强度时空异质性相关的驱动因素,为流感病毒溢出风险及热点地域、传播流行的早期预警、监测资源的合理配置及针对性防控策略的制定提供科学依据与技术支撑。 1.全球IAV跨种传播风险评估 本研究遵从GATHER声明和PRISMA规范,通过文献调研和公共数据库整理、多源异构数据标准化与地图化融合,形成1981年1月～2022年6月全球甲型流感病毒跨种传播事件数据集,共计发现跨种传播事件3823起,其中动物传人事件3786起,占所有事件的99.03%。在全球省级空间尺度上,纳入53个人、动物、环境、病毒相关因素指标,基于4种机器学习方法开展的潜在空间分布预测结果显示:全球受跨种传播事件影响的人口高达44.43亿（95%CI:33.64,59.47）,其中68.10%（95%CI:65.33,79.00）的风险人口生活在亚洲,东亚、南亚和西非等地同时受到禽到人和猪到人的影响。分别通过跨种传播和首发事件的监测情况设置了两阶段监测力度目标,监测力度不足量化结果显示:根据第一阶段监测力度目标,全球共计缺乏13 258.66条序列,平均缺乏0.22类0.48种宿主;根据第二阶段监测力度目标,全球共计缺乏28 613.94条序列,平均缺乏0.85类2.22种宿主;非洲和南美洲同时受到测序数量不足和宿主监测范围不足的影响;监测力度不足主要表现在数量上而不是监测范围上。风险因素分析表明鸭密度的相对贡献度在跨种传播模型（6.2%,95%CI:5.0,7.4）和禽到人模型（27.5%,95%CI:20.1,33.9）中排名第一。 ***溢出风险快速评估工具的开发 本研究基于1981年1月～2022年6月甲型流感病毒基因序列数据,分别从国家和宿主科层次详细描绘了各亚型的流行本底,并基于4种机器学习方法预测了22种主要亚型的潜在分布区域。纳入空间分布、宿主分布、动物中的流行强度等255条生态和流行情况相关指标,分别构建了首次溢出预测模型和再次溢出预测模型,预测结果显示空间和宿主的快

关键词： 流行性腮腺炎   季节性   疫苗接种  

摘要： 目的 掌握2017—2022年北京市昌平区流行性腮腺炎（流腮）流行病学特征，为科学防控流腮提供依据。方法 收集2017—2022年昌平区流腮报告病例的基本信息、临床症状及接种信息，利用Stata 16.0软件，采用描述性流行病学方法、季节指数法、聚类分析法、卡方检验及logistic回归模型进行统计分析。结果 2017—2022年昌平区报告流腮1 075例，年平均发病率为8.35/10万。4～9月季节指数>100.00%,5月和9月的C值分别为142.89%和140.66%，分别为C值2个高点。采用系统聚类分析发病地区，第一类为高发区域，由回龙观镇组成；第二类为次高发区域，由城北街道办事处、沙河镇和北七家镇组成；第三类为低发区域，由天北街道办事处、东小口镇、小汤山镇、延寿镇、龙泽园和史各庄街道办事处组成；其他镇街组成第四类中发区域。病例男女性别比为1.30∶1，男、女性发病率分别为8.75/10万和7.88/10万，差异无统计学意义（χ2=2.90,P=0.088）。发病年龄集中在3～<6岁，有399例（占37.12%）。幼托儿童、学生和散居儿童累计报告867例（占80.65%）。临床症状以腮腺肿大和疼痛为主，其次为发热、头痛。病例中有接种史者816例（占75.91%），疫苗接种剂次越多，发生腮腺肿大的部位越少（β=-0.289 4），出现发热（β=-0.285 7）和头痛（β=-0.503 1）的可能性越低。结论昌平区流腮发病率较低，但季节性和地区分布差异明显。学校学生、托幼机构儿童仍是流腮防控重点人群。

关键词： 视频终端   干眼症   眼部不适   大学生   海拔  

摘要： 目的:本次调查旨在了解大学生出现视频终端（video display terminal,VDT）相关眼部不适的影响因素及其相关性;并进一步了解并分析中高海拔（昆明）地区大学生眼部不适主观症状和客观体征之间的相关性。 方法:本次调查为横断面研究,基于本次研究目的,在2022年12月至2023年5月期间,通过网络向不同海拔地区在校大学生1387人随机发放眼部不适调查问卷。在问卷调查结束后1周内,对于问卷中具有眼部不适（OSDI评分≥13分）且身处中高海拔（昆明）地区就读,同意并能够配合进一步行眼部检查的148名大学生,完善角膜荧光素染色（Fluorescein corneal staining,FCS）和泪膜破裂时间（Tear Break up time,TBUT）检查,了解并分析眼部不适主观症状和客观体征之间存在的相关性。 结果:1.本次调查共收集到符合标准的大学生调查问卷1387份,其中男性大学生520份问卷（37.49%）,女性大学生867份问卷（62.51%）;其中无眼部不适763例（55.01%）,轻度眼部不适306例（22.06%）,中度眼部不适209例（15.07%）,重度眼部不适109例（7.86%）。 2.对影响眼部不适程度的相关因素进行单因素比较分析结果显示:所处城市平均海拔、性别、每日使用VDT总时长以及单次使用VDT平均时长、是否每日使用VDT总时长≥8h这五组指标的差异具有统计学意义（P<0.05）;其余指标包括:所学专业、每日睡眠时长、是否有屈光手术或其他眼部手术史、是否每日戴角膜接触镜超过2小时这四组指标的差异无统计学意义。 3.将上述具有统计学意义的单因素变量进一步进行二分类Logistic回归分析,结果显示:（1）所处城市平均海拔:OR平均海拔=1.93,P<0.001,说明当所处城市平均海拔每升高1km,患者出现重度眼部不适的可能性就会增加93%;（2）性别:OR性别:女=1.72,P=0.022,说明女性出现重度眼部不适的可能性是男性的1.72倍;（3）每日使用VDT的总时间:OR每日使用VDT的总时长=1.23,P<0.001,说明患者每日使用VDT的总时长每增加1小时,其出现重度眼部不适的可能性就会增加23%;（4）单次使用VDT的平均时长:OR单次使用VDT的平均时长=1.10,P=0.029,说明患者单次使用VDT的平均时长每增加1小时,其出现重度眼部不适的可能性就会增加10%; 4.在对主观症状与客观体征相关性的分析中,我们对身处中高海拔（昆明）地区就读且已经完善TBUT及FCS检查的148名大学生的检查结果进行统计分析,结果显示:不同程度的眼部不适主观症状与客观体征呈正相关关系,有统计学意义（r=0.84,P<0.001）;OSDI总分与TBUT呈负相关关系,有统计学意义（r=-0.31,P<0.001）;OSDI总分与FCS情况呈正相关关系,有统计学意义（r=0.88,P<0.001）;将TBUT和FCS分别与每日平均睡眠时长、每日使用VDT总时长、单次使用VDT平均时长进行相关性分析,结果均无统计学意义（P>0.05）。 结论:1.接受此次调查的大学生人群中的结果分析显示:女性、每日使用VDT的总时间、单次使用VDT平均时间越长、所处城市的平均海拔越高出现重度眼部不适的可能性越大。 2.接受此次调查的中高海拔（昆明）地区大学生人群的结果显示:OSDI总分越高,TBUT时间越短,FCS程度越重;眼部不适症状程度越严重,客观体征程度越严重。