关键词： 达氏鳇   中华鲟   免疫球蛋白   木瓜蛋白酶   水解片段  

摘要： 首先采用饱和硫酸氨分步沉淀和Sephadex G-200凝胶层析的方法,获得了非免疫状态下中华鲟(Acipenser sinensis Gray)和达氏鳇(Huso dauricus Georgi)的血清免疫球蛋白(Ig),在此基础上使用木瓜蛋白酶水解对所获得的免疫球蛋白片段进行了酶解,并采用SDS-PAGE和Western-blot等方法分析了所获得的水解片段。结果显示,2种鲟鱼的免疫球蛋白均可被木瓜蛋白酶水解蛋白,通过Sephadex G-100凝胶层析后均可得到两个完全分离的、均一的蛋白峰。SDS-PAGE检测两个水解片段的相对分子量分别为44KD和66KD,West-ern-blot检测结果显示,66KD的片段可以在硝酸纤维素杂交膜上被各自的兔抗鲟IgM多克隆抗体所识别,而44KD片段的检测结果为阴性。这表明,2种鲟科鱼类的木瓜蛋白酶水解特性相同,提示鲟科鱼类的免疫球蛋白在免疫学及生化方面具有较大的相似性。

关键词： 脂蛋白脂酶   肝脂酶   基因克隆   序列分析   系统进化   淡水鱼类  

摘要： 为了研究鱼类脂蛋白脂酶(liportein lipase,LPL)、肝脂酶(hepatic lipase,HL)基因结构、功能及分子系统关系,作者克隆了中华鲟(Acipenser sinensis)、鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、鳙(Aristichthys nobilis)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鲮鱼(Cirrhinus molitorella)、尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)和斑鳢(Channa maculata)的LPL和HL基因cDNA核心序列,并推测了其相应氨基酸序列。同时,还应用5'RACE和3'RACE技术分别扩增中华鲟、鲢肝脏LPL基因与中华鲟肝脏HL基因cDNA全序列。序列同源性分析表明,LPL和HL氨基酸序列分别在哺乳类动物、鸟类、鱼类中相对保守。与已知的脊椎动物内皮脂酶(endothelial lipase,EL)和胰脂酶(pancreatic lipase,PL)氨基酸序列构建系统进化树,发现LPL、HL、EL与PL同属脂肪酶家族,四者聚集成一有根树。

关键词： 中华鲟   烂鳃病   胃充气   并发症   组织病理   血液生化  

摘要： 中华鲟(Acipenser sinensis)烂鳃并发胃充气病流行于每年的10月到翌年4月水温较低的季节，感染对象多为1龄中华鲟幼鲟，幼体中华鲟爆发烂鳃并发胃充气病，典型症状为：停食、活动迟缓、鳃坏死、腹部膨大、肝脏有红斑。患病鱼规格在体重78g/尾-100g/尾，体长21cm～35cm，且患病率高，治愈率低，损失惨重。目前已经对中华鲟烂鳃并发胃充气病的发病规律进行了调查，并查明了的病因。本文主要研究了患病后中华鲟各内脏组织器官的病理变化及血液中各成分变化情况，并分离到该病疑似病原，最后综合病原、机体与环境等因素提出一种有效的防控方法。\n 10到11月份以及3到4月份，随着水温的变化，病原感染鱼体鳃部，进而引起鳃、肝、肾和脾组织病变。为了说明中华鲟在患烂鳃并发胃充气病后各组织器官的病理变化，本试验采用徕卡全自动组织脱水浸蜡机及MICROM全自动切片染色机制备病理切片。组织病理结果表明，中华鲟烂鳃并发胃充气病的鳃组织病理变化实质上是一种炎性反应。前期症状不明显，仅鳃组织出现变性、渗出，鳃小片上的一部分单层扁平细胞(亦称呼吸上皮细胞)发生肿大变性，呈肥大和变圆状态。在疾病发展的后期，病鱼鳃小片坏死脱落，胃充气膨胀，肝脏组织淤血，中央静脉及窦状隙扩张，血细胞大量聚集，肝细胞空泡化。肾脏组织水样变性，脾组织内嗜碱性颗粒明显增多。\n 中华鲟在患烂鳃并发胃充气病后，除了在鳃及内脏器官上有明显的病变以外，其血液内的相关因子也有较大变化。本试验利用BS-200全自动生化分析仪对患病后血液中各重酶的变化进行了测定。实验结果表明：中华鲟幼鲟在患烂鳃并发胃充气后，其血液中白细胞数量急剧升高，血液中葡萄糖含量显著下降，白蛋白，球蛋白含量下降，在所测试酶中，肌酸激酶，谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量显著下降，碱性磷酸酶含量上升，尿素在血液中含量变化不显著，甘油三酯和肌酐含量下降，总胆红素含量升高。\n 为了查明该病的病原，本试验于2008、2009年对长江口中华鲟自然保护区管理处嘉定暂养基地出现的中华鲟烂鳃并发胃充气病发病情况进行调查和研究。并采集发病期间临床症状明显的濒死鱼，取其皮肤、鳃及内脏器官上病变组织进行病原分离培养，经两次纯化后挑取单菌落接种到普通营养琼脂斜面培养，4℃冰箱保存保种。采用常规K-B纸片法，选取市售21种抗菌药纸片，根据《现代诊断学手册》标准，判定病原菌对药物的敏感性。同时，采用Biolog微生物自动分析系统对病原菌进行鉴定。药敏结果表明：该病原菌在21种表明青霉素G，四环素，红霉素等对分离菌无效果，甲氧胺嘧啶效果最佳，氯霉素，复方新诺明，新霉素，环丙沙星等次之，庆大霉素，诺氟沙星，卡那霉素又次之。Biolog微生物自动分析系统对分离菌株的生理生化鉴定结果表明，试验分离菌株为嗜水气单胞菌，鉴定结果的可信度为100%。\n 根据中华鲟烂鳃并发胃充气病流行规律和细菌性疾病的特点，防控该病的指导思想和方针是以预防为主。对该病主要采取杀灭和抑制细菌，切断细菌传播途径，同时提高中华鲟自身抵抗该病的能力和改善水质等综合性措施，达到控制该病发生和发展的目的。

关键词： 中华鲟幼鱼   Cu2+   毒性   酶活   血液生化指标   生长   积累  

摘要： 本研究应用毒理学原理，选取珍稀物种中华鲟幼鱼为研究对象，针对中华鲟幼鱼在长江口生活史阶段，以污染物对受试生物的毒性试验为切入点，通过水体铜暴露，研究Cu2+的安全浓度、抗氧化酶、血液生化、离子调节、行为、生长、消化酶和各组织中铜积累含量等方面的数据，以软骨鱼类为特色，展开铜对中华鲟幼鱼的毒理学效应、积累规律研究，探讨中华鲟幼鱼在铜污染中的反应和适应策略，以期得到可适用于Cu2+污染风险预警的终点指标，提出保护中华鲟的水体建议，了解Cu2+对中华鲟幼鱼的安全浓度并初步探讨铜离子对鱼类的致毒机理，针对长江水体对中华鲟的安全性进行风险评价，并为长江口及中华鲟保护区制订水质标准提供理论参考依据。主要研究结果归纳如下：\n 1.铜对中华鲟幼鱼的急性毒性及对肝脏抗氧化酶活性的影响\n 本实验采用静水生物测试法研究了铜(Cu2+)对中华鲟(Acipenser sinensisGray)幼鱼的急性毒性并进行了安全评价；根据预实验结果，设定0.005、0.01和0.015mg/L3个浓度梯度进行急性暴露试验，以肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽抗氧化酶(GSH-PX)活性为指标研究了Cu2+污染对中华鲟幼鱼的毒理作用。结果表明，Cu2+浓度升高对中华鲟幼鱼产生了较大的毒性，24h、48h、72h和96hLC50分别为0.05932、0.0340、0.0283和0.0217mg/L，安全浓度为0.00217mg/L:不同浓度浓度Cu2+暴露时，中华鲟幼鱼肝组织中SOD、CAT、GSH-PX的活性在暴露24h时被显著抑制（P＜0.05），在处理48h后酶活性逐渐恢复，随后又逐渐下降，其下降幅度与Cu2+质量浓度呈正相关（P＜0.05），SOD、CAT和GSH-PX活性变化可以反映中华鲟幼鱼受伤害的程度。\n 2.水体中铜对中华鲟幼鱼血液生化指标的影响\n 本文通过Cu2+不同浓度水体对中华鲟幼鱼的暴露，研究Cu2+对幼鱼血浆生化成分含量变化的影响及致毒效应。实验结果显示，中华鲟幼鱼血浆中Glu、ALP、Urea含量随Cu2+浓度的增加而显著升高，各浓度组间差异显著，低浓度组与对照组相比无显著性差异，中浓度和高浓度组均有显著性差异(P＜0.05)；TC、CREA随Cu2+浓度的增加相应升高，低浓度组与中、高浓度组有显著性差异，中、高浓度组间无显著性差异(P＞0.05)；TG随着Cu2+浓度的增加显著下降，各浓度组间差异显著（P＜0.05）；血浆中的TP、AST、ALT、LDH-L不受Cu2+的影响，与对照相比无显著性差异。血浆中的Na+、Cl-、P含量和pH值均有显著下降，Ca2+、Mg2+显著上升，其变化与Cu2+浓度存在相关性，K+含量不受Cu2+的影响。本实验表明Cu2+对中华鲟幼鱼血液生化指标的最低可观察效应浓度和最高无观察效应浓度分别为0.89μtg/L和0.4μg/L。血浆中ALP受Cu2+影响最明显，可以看着铜对中华鲟幼鱼作用功能指示剂。\n 3.水体铜对中华鲟幼鱼体重、消化酶活性和体内铜分布的影响\n 采用生态学单因子梯度试验，研究在不同铜(Cu2+)浓度梯度的水环境中中华鲟幼鱼体内Cu2+积累的变化及其生长相关的的消化酶活性的影响。30d时，对照组237.53±8.17g，铜质量浓度0.4μg体重为238.57±8.60g生长未受到抑制，甚至对鱼有促进生长作用，低浓度组，随着暴露时间延长到60d时，低浓度组鱼的生长受到抑制，但两时间段差异都不显著（P＞0.05）。中浓度组和高浓度组鱼的生长受到明显的抑制(P＜0.05)，不同浓度的Cu2+对中肠胃蛋白酶和淀粉酶活性均有不同程度的抑制，且Cu2+浓度越高，抑制作用越明显.对脂肪酶活性则有浓度依存的增强作用，通过酶的测定可以灵敏地反映Cu2+的胁迫程度和毒性。各组织器官中铜含量的测定表明随着水环境中添加的Cu2+浓度的增加，肝是最主要的Cu2+积累和代谢器官。在未添加Cu2+的对照组中，中华鲟幼鱼中Cu2+含量以肝为最高，鳃次之，软骨最低。随着水环境中Cu2+浓度的增高，相应组织中的Cu2+含量呈现不同的变化趋势，肝增加最快，肠胃次之，软骨和表皮中的Cu2+含量随着水环境Cu2+浓度升高而增快，骨板有一定的富集Cu2+能力。实验显示在不同的Cu2+水环境下，肝是Cu2+主要的累积场所。

关键词： 中华鲟   俄罗斯鲟   盐度   血清离子及渗透压   氯细胞   超微结构  

摘要： 本文以中华鲟(Acipenser sinensis)和俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedtii)幼鱼为材料，对两种幼鱼渗透调节过程中的生理状况及鳃组织结构变化进行了系统研究，重点开展了急性盐度刺激对两种幼鱼血清渗透压，离子含量及中华鲟幼鱼鳃组织氯细胞结构影响的研究，探讨了中华鲟及俄罗斯鲟幼鱼的渗透调节能力和调节机制，为中华鲟幼鱼顺利的降海洄游提供了理论依据，主要研究结果如下：\n 1.盐度对俄罗斯鲟幼鱼血清渗透压、离子含量及鳃丝Na+/K+-ATP酶活力的影响\n 研究了急性盐度胁迫对7月龄俄罗斯鲟幼鱼(86.1±18g)鳃丝Na+/K+-ATP酶活力、血清渗透压和血清离子(Na+, K+, Cl-)的影响。结果表明：幼鱼从淡水直接转入盐度15、20、25中，96h死亡率分别为72.22%、100%、100%，其它组无死亡。各盐度组96h血清渗透压、Na+、Cl-浓度随盐度升高而增加，且各盐度组显著高于对照组(P＜0.05)，盐度15组最高，盐度5、10间不存在显著差异(P＞0.05)。盐度组血清K+离子在48h中较对照组均显著降低(P＜0.05),96h时有所回升但仍低于对照组，盐度15与盐度5、10相比血清K+离子有显著性差异(P＜0.05)，盐度5、10之间无显著性差异(P＞0.05)。盐度组鳃丝Na+/K+-ATP酶活力呈先下降后上升变化，48h为最低，与对照组有显著性差异(P＜0.05),96h时盐度5、10组鳃丝Na+/K+-ATP酶活力与对照组及组间无显著差异(P＞0.05)，盐度15与对照组及盐度5、10均有显著差异(P＜0.05)。96h幼鱼的等渗点为303.2mOsm·kg-1，相当于盐度10.06，而Na+及Cl-等离子点分别为146.1和136.8mmol.L-1，分别相当于盐度9.02和8.95。与盐度15组相比，盐度10及其以下处理组各项检测指标变化幅度相对较小，在幼鱼渗透调节范围之内，盐度10中养殖15天后各项指标与淡水组差异较小，因此7月龄俄罗斯鲟幼鱼已具备在盐度10及以下的咸水中生活的能力，但不能耐受高于10的盐度。\n 2.盐度对中华鲟幼鱼血清渗透压、离子及血液水分含量的影响\n 以7月龄中华鲟幼鱼为材料(190.7士18.5g)，研究急性盐度胁迫对幼鱼死亡率、血清渗透压、血清离子的影响。结果表明：幼鱼从淡水中直接转入盐度25、20后分别在第1.5d及第9d死亡率达到100%，转入盐度15组32d时死亡率为40.63%，其它组无死亡。实验期间各盐度组血清渗透压、Na+、Cl-离子浓度随盐度升高而增加，血清K+离子及血液水分含量随盐度升高而降低，16d时，盐度5、10中华鲟幼鱼血清渗透压及离子指标与淡水组间无显著差异(P＞0.05)，盐度15仍显著高于低盐度组及淡水组(P＜0.05)并持续到实验结束。8d幼鱼的等渗点为281.14mOsm·kg-1，相当于盐度9.29，而Na+及Cl-等离子点分别为136.18和117.16mmol.L-1，分别相当于盐度8.37和7.65。血清渗透压及离子指标的变化说明7月龄中华鲟幼鱼的渗透能力较强，具备了在盐度10及其以下盐度生活的能力，对于盐度15幼鱼也表现出一定的适应能力，但对于更高盐度幼鱼则表现出不适应性，血清渗透压及离子含量严重偏离正常值且不能恢复，最终导致幼鱼死亡。\n 3.盐度对中华鲟幼鱼鳃丝显微及超微机构的影响\n 采用光镜和电镜技术对盐度15和淡水对照组中生活32d的中华鲟幼鱼的鳃丝进行组织结构观察，结果表明：光镜下幼鱼鳃丝上皮细胞主要由扁平细胞，氯细胞、粘液细胞和柱细胞组成，盐度组鳃小片间的鳃丝区域上，上皮细胞增生，氯细胞、粘液细胞的数量明显增多，体积增大。伪鳃具有与鳃相同的形态结构及变化特征，推测伪鳃也在渗透调节中起到重要作用。\n 电镜显示与淡水组相比，盐度组的氯细胞胞质中管网结构更加丰富，与线粒体的联接更为紧密，氯细胞胞质中线粒体明显增多。氯细胞顶膜开口处通常有一顶隐窝，顶隐窝没有明显凹入，开口区域缺少细胞器，但有较多囊泡和游离核糖体。盐度组氯细胞具有较为广阔的侧膜，胞膜通过多层折叠或形成管状结构而扩大基底膜的面积。盐度适应后氯细胞周围出现辅助细胞，与成熟的氯细胞形成多细胞复合体，多细胞复合体在排除体内过多Na+、Cl-离子方面发挥着重要作用。

关键词： 2010年上海世博会   生态和谐   中华鲟   地球   生命   家园   城市生活   可持续发展  

摘要： 2010年上海世博会以探讨新世纪人类城市生活为主题,围绕＂城市,让生活更美好＂,充分展示城市文明成果,为生态和谐社会的缔造和人类的可持续发展提供生动的例证。

关键词： 中华鲟   铅   积累   血液酶   抗氧化酶  

摘要： 本研究分别设计慢性和急性溶液铅暴露实验，以发育早期的中华鲟幼鱼为研究对象，对其组织铅含量、血液代谢指标和组织抗氧化指标进行了研究，旨在探讨中华鲟幼鱼对铅的积累、排放特征及生理反应，并寻找适合作为环境监控的敏感性生理指标，为深入开展中华鲟生命早期触铅后机体的损伤、适应机制和自我修复能力奠定基础：还可以从一个侧面为长江口综合防治铅污染，保护生态环境提供科学指导，为更好的保护中华鲟物种服务。\n 1、慢性溶液铅暴露下中华鲟幼鱼对铅的积累与排放特征\n 从中华鲟受精卵发育至96h开始，采用水溶液静态置换法，进行了16周的铅暴露试验，试验浓度设计为：0mg·L-1、0.2mg·L-1、0.8mg·L-1和1.6mg·L-1，随后又进行了6周的铅排放试验。\n 结果：显示：中华鲟幼鱼各组织表现出随暴露浓度升高Pb积累增加的剂量效应关系；Pb积累基本表现为：骨（背骨板和软骨）和肌肉中积累量最高，胃、肠和皮肤次之，肝、鳃与脊索相对较低。经排放后，低浓度组(0.2mg·L-1)的各组织中Pb含量与对照组无显著差异（P＞0.05）；中浓度组(0.8mg·L-1)和高浓度组(1.6mg·L-1)除少数组织外，Pb含量仍较对照组高(P＜0.05)，低，中浓度组中鳃、皮肤和肝的Pb含量甚至高于积累时。通过试验探索出中华鲟幼鱼经鳃、皮肤和消化道摄入Pb，主要经鳃和皮肤进行排放，并且铅会选择性的大量积累在骨和肌肉当中。推测，Pb被隔离在骨和肌肉当中，能有效减轻Pb对肝脏的损伤作用，是中华鲟幼鱼的一种适应性保护机制。\n 2、慢性溶液铅暴露对中华鲟幼鱼血液酶的影响\n 经慢性溶液铅暴露和排放后，对中华鲟幼鱼血液中ALT、AST、ALP、LDH和CK的活力进行了测定。\n 结果：显示：Pb暴露后，幼鱼血液中ALT、AST、LDH和CK活力均表现为随Pb暴露剂量增加而升高的趋势：而ALP活力表现为随Pb暴露剂量增加而下降的趋势。0.2mg·L-1的低浓度Pb暴露对幼鱼各种血液酶的影响很小，而1.6mg·L-1的高浓度对其影响较大。其中AST和CK活性变化较为灵敏，浓度达到0.8mg·L-1时即表现出显著变化。\n Pb排放后，各暴露组血液中ALT和LDH活力与对照组无显著差异(P＞0.05)，表现出明显恢复；1.6mg·L-1组的AST活力依然较高，约是对照组的2倍，且1.6mg·L-1组的AST/ALT值仍然较高；ALP活力在各Pb暴露组中均较对照组要低。初步表明高浓度Pb暴露可致中华鲟幼鱼的肌肉、肝脏等组织损伤以及生长发育受阻（特别是骨骼发育）、代谢异常，且血液中高AST活力很可能主要源于损伤的肌细胞而少量来自于受损的肝细胞。\n 此外，血液AST和CK活力变化最为灵敏，可作为监控中华鲟幼鱼受Pb污染的敏感指标。\n 3、急性溶液铅暴露下中华鲟幼鱼对铅的积累与排放特征\n 采用水溶液静态置换法，研究了中华鲟幼鱼(体长：28.14±0.26cm，体重：76.07±2.75g)不同组织对铅的积累与排放。在8mg·L-1Pb水溶液中暴露7天，结果显示：暴露前3天所选9种组织的Pb含量均随暴露时间的延长而上升，鳃上升显著（P＜0.05），其余组织上升相对平稳(P＞0.05)；到暴露第5天各组织中的Pb含量（皮肤除外）均出现急剧上升（P＜0.05），并伴随幼鱼的畸形弯曲；肾、鳃、背骨板、肝及血液中Pb含量较高，肌肉、软骨、皮肤和脊索中Pb含量较低。暴露试验结束后将幼鱼转入清水中进行了16天排放试验，结果显示：先是皮肤中Pb含量大幅上升（P＜0.05）；随后背骨板和血液中Pb含量大幅上升(P＜0.05)：其余组织Pb含量呈下降趋势，其中鳃、肝和肾中Pb含量下降明显：至16天排放结束时，所选9种组织中Pb含量均不同程度的高于对照组。表明在急性溶液铅暴露下，中华鲟幼鱼主要经鳃摄入Pb，经血液循环将Pb运送至肝肾处解毒并迅速排除和转运，主要沉积在背骨板中进行隔离保护，经皮肤将Pb排出体外。4急性溶液铅暴露对中华鲟幼鱼SOD和MDA的影响\n 经急性溶液Pb暴露和排放后，研究了8mg·L-1Pb水溶液对中华鲟幼鱼肝脏、肾脏和脑组织SOD和MDA的影响。结果显示：肝脏中SOD活力波动最大，在整个试验期间，呈现出“抑制-恢复-抑制-诱导-恢复”的复杂变化规律；脑SOD活力在Pb暴露的7天中呈现阶梯式递降趋势，受抑制程度较深，至试验结束其活力仍低于对照水平，且表现不稳定：肾脏SOD活力表现出先诱导升高后抑制降低的变化趋势，其总体变化幅度较肝脏和脑要小，并在恢复后期基本达到对照水平。三种组织中只有肝脏MDA含量被显著的诱导升高；肾脏MDA含量基本维持正常水平，在恢复后期略有降低：脑MDA含量总体变化很小，呈缓缓下降趋势

关键词： 中华鲟   微生态   长江口   16SrRNA   RAPD  

摘要： 中华鲟系河海洄游鱼类，幼鱼在长江中上游孵化后，经长江口洲游入海。为挽救国宝中华鲟，人工增殖放流的方法被用来恢复中华鲟种群，而由此产生的人工养殖群体对野生群体的影响有待研究。本义运用分子生物学方法，研究了长江口附近水域微生物的生态现状，进而研究了中华鲟种群的现状，分析了环境要素对中华鲟种群的影响，同时分析了人工放流对野生中华鲟种群遗传多样性的重要影响，为人工增养殖放流提供了一定的科学借鉴，对中华鲟自然保护区的建设也具有重要的指导作用。\n 本文的研究成果主要有如下几个方面：\n 1、长江口崇明岛附近南支盐度相对于北支低很多，且这种趋势不随季节变化，其中南支入海口处盐度常年保持在4‰以下，而北支盐度则都在20‰以上。秋冬季节，长江口附近海域盐度较高，其中冬季长江口附近各水域的盐度平均值为14.003‰，南支平均盐度为26.802‰，北支平均盐度为1.204‰，最高盐度达到了27.800‰，这与长江流域进入枯水期有重要关系；而中华鲟洄游的高峰期5-8月份同时也是长江的丰水期，长江口附近水域的盐度较低，其中8月份的盐度达到了最低值，其平均盐度为10.211‰，最大值出现在北支为26.597‰；5-8月份较低的盐度为来自上游的中华鲟幼鱼洄游入海适应高盐度的生活环境提供了缓冲带，从而使长江口附近水域成为中华鲟幼鱼从淡水环境适应高盐度的海水环境提供了天然的摇篮。\n 2、春季，各个站位的营养质量指数普遍偏高，都在3.00以上，平均营养质量指数值为5.01，远远超出富营养化评价标准(NQI＞3.00)，水体富营养化严重；秋季，营养质量指数最大值为4.39，最小值为2.06，超标率为30%。富营养化水平很高，水体状况令人堪忧。随着水温的升高，水域中浮游藻类在营养充足的条件下，有过度增殖生长的可能，存在产生赤潮的严重危险，这将影响到水域中溶解氧的含量，影响到其他水生生物的生存。而对于在底层摄食的中华鲟来说，不仪减少了其食物的来源同时还存在窒息危险，严重影响到中华鲟幼鱼的生存。尤其每年5-8月份足中华鲟幼鱼洄游入海的高峰期，这一阶段环境状况将直接影响到中华鲟种群的稳定。\n 3、以16SrRNA为参照标准，采用分子生物学方法，对长江口附近海域中华鲟活动频繁区域的微生态环境进行分析，并使用MEGA4.0软件构建微生物分子发育树。本论义共检测出的17个属、81种不同微生物。研究发现，微生物种群结构随季节温度变化明显，优势种随温度变化有所不同；分子发育树体现的遗传差异性较小，存在明显的季节分布特征；夏季是微生物最为活跃的季节，春秋季节次之，而冬季微生物类别最少。同时，通过检测也发现存在大量的致病微生物，如Klebsiella pneumoniae, Enterobacter hormacchei, Staphylococcus epidermidis等可以对人和水生生物产生危害，引起消化道、呼吸道等疾病。5-8月份足中华鲟幼鱼洄游入海的高峰期，微生物的群落结构对于海洋水体状况的影响，必然影响到水生生物的生存，进而对中华鲟的种群产生影响。\n 4、近几年，人工放流被广泛用于恢复中华鲟种群规模，通过插网监测调查可以发现：每年的6月份与7月份是长江口中华鲟幼鱼的高峰期，在长江口监测发现的中华鲟的数量与长江流域中华鲟人工放流规模基本呈正相关趋势。长江口水域主要是中华鲟幼体的活动场所，除误捕死亡发现大型中华鲟外，监测研究很少发现成年中华鲟。近年来中华鲟的大量放流，是对这一濒危物种数量上的一个极大补充，对这一物种的保护起到了积极的作用。\n 5、应用随机扩增DNA多态性(RAPD)技术对中华鲟野生与养殖群体的遗传多样性进行了分析。从40个10bp的引物中选取10个用于群体遗传多样性分析，共扩增出1230条DNA片段，平均每个样本共扩增出52条DNA片段；野生与养殖群体的多态位点比例分别为43.16%和33.68%;野生中华鲟群体间平均遗传距离为0.127，遗传相似率为87.3%，遗传多样性上具备较强的优势。人工养殖中华鲟相对于野生群体来说，在遗传上有一定的退化。通过MEGA4.0软件构建分子发育树发现，野生中华鲟群体遗传多样性上已经受到人工养殖群体的影响。长江流域每年都进行大量的中华鲟人工增殖放流，这对于维持中华鲟种群数量有一定的积极意义。但足人工增殖放流的所有亲本均来自于相近的样本，成年中华鲟的减少将会直接导致中华鲟近亲效应的出现，随着时间的推移可能对长江中华鲟资源遗传结构产生不可预测的影响。

关键词： 中华鲟   巨型   重伤   自然保护区管理   捕捞作业   主管部门   长江口   上海市  

摘要： 2010年3月6日08：12，上海市长江口中华鲟自然保护区管理处接到崇明渔民的中华鲟抢救热线，称在佘山岛附近水域进行鳗苗捕捞作业时，误捕到一尾巨型中华鲟，该中华鲟受伤严重，急需救援。鉴于崇明基地抢救条件有限，经主管部门同意，管理处人员决定将重伤巨型中华鲟运回位于嘉定徐行的临时基地进行进一步救治。