关键词： 胚胎干细胞   全人工繁殖   转基因动物   生物技术产品   中华鲟   中国农业科学院   长江水产研究所   砀山酥梨  

摘要： 用单倍体胚胎干细胞获得转基因动物日前,著名科学杂志《自然》在线发表了中国科学院动物研究所周琪研究组和赵小阳研究组合作完成的一项研究工作,该研究首次实现了利用基因修饰的单倍体胚胎干细胞而获得健康成活的转基因哺乳动物,具有重大意义。所谓单倍体胚胎干细胞是指包括人在内的哺乳动物的细胞都是二倍体,即细胞中含有两套染色体,一套来自父方,一套来自母方。单倍体胚胎干细胞是指只

关键词： 中华鲟   主人   雄鱼  

摘要： 初识中华鲟,它在我头顶前方游过,缓慢而坚定,如君王俯视。渺小的人类在它眼里犹若无物,无论如何赞叹,如何惊讶,都不会停留片刻。1.4亿年前海洋的主人,中生代的孑遗种,遍身鳞甲,维护着洪荒古兽的尊严。凝视她的眼睛,些许傲慢,些许寂寞。就是在那家居于三峡坝区腹地的民营小水族馆,我透过巨型水族箱的边壁,第一次见到了中华鲟。

关键词： 自然保护区   管理体制   中华鲟  

摘要： 长江口中华鲟自然保护区是上海市人民政府在2003年7月组织成立的省级自然保护区,并在2005年3月15日发布了《上海市长江口中华鲟自然保护区管理办法》。该保护区成立以来,对保护国家一级保护动物中华鲟及其栖息的长江口的自然环境发挥了巨大的作用。2008年长江口中华鲟自然保护区被列入国际重要湿地名录,并且自《管理办法》实施以来,也在实践中暴露出一些问题。2009年,上海市长江口中华鲟自然保护区地方性法规立法被列入市人大的立法规划。在新的上海市长江口中华鲟自然保护区条例出台之前,对该自然保护区的立法进行详细的研究就具有较强的现实意义。由于笔者时间和精力的限制,笔者选取了其中的管理体制方面做进一步的研究。通过对长江口中华鲟自然保护区的概况和立法现状进行研究发现：上海市农业委员会会同崇明县政府是该自然保护区的行政管理机关,上海市长江口中华鲟自然保护区管理处是其日常业务的管理机构,而上海市环境保护局是该保护区的监督和指导机构。市农委和保护区在各自的职责范围内都享有一定的行政处罚权。通过对我国自然保护区的立法研究发现：一方面我国自然保护区是分类型、分部门和分级管理,另一方面,自然保护区管理是综合管理和分部门管理相结合,中央和地方政府管理相结合的模式。在此基础上笔者提出了中华鲟自然保护区在管理体制方面可能存在的问题,包括(1)自然保护区管理机构重叠；(2)自然保护区管理机构的性质不明确；(3)自然保护区管理机构权责不明；(4)自然保护区相关管理机制的缺位,如投入保障机制、评审机制、激励机制和监督机制;(5)自然保护区与周边社区关系紧张等。通过分析其他国家如美国、英国、澳大利亚和巴西等国的自然保护区管理制度的立法经验,再结合长江口中华鲟自然保护区的实际情况,笔者提出了一些改革的建议：(1)明确管理职责,有主管部门直接管理保护区；(2)理清长江口中华鲟自然保护区与崇明东滩鸟类自然保护区的关系；(3)建立和完善保护区的评审机制；(4)完善保护区监督管理机制(4)切实加强涉及自然保护区的建设项目的管理；(5)实行自然保护区与周边社区不同合作伙伴的合作共管。

关键词： 中华鲟   非致死活体取样   基因表达   免疫组织化学  

摘要： 中华鲟为我国特有珍稀物种。迄今为止,国内学者在中华鲟幼鱼渗透调节方面开展了一些积极有益的研究,但这些研究还远不能满足中华鲟保护工作的需求,本论文从基因克隆、表达、离子转运蛋白定位三个方面入手,初步系统地研究了中华鲟幼鱼渗透调节的分子机制。 为了建立鲟鱼的非致死鳃组织取样技术,分别在实验开始和结束时检测活体取样组、对照组及淡水组中鲟鱼生长指标、血清渗透压、离子浓度、鳃丝Na+K+-ATPase(NKA)活性的变化,结果显示,非致死活体取样方法对鲟鱼的生长特性没有显著影响。活体取样实验组和对照组的各项生长指标(体长、全长、体重),血清渗透压、离子浓度、NKA活性均无显著性差异(P>0.05),淡水组与盐度10条件下的实验组相比,其生长指标无显著差异,但血清离子、渗透压及NKA活性有显著差异(P<0.05)。盐度10条件下活体取样实验组的上述生理指标显著高于淡水组。说明经活体取样的鲟鱼能够正常进行渗透调节。 为了研究盐度10条件下中华鲟幼鱼鳃丝Na+,K+-ATPase(NKA)α亚基的分子调节机制,采用克隆方法得到中华鲟幼鱼鳃丝NKAα亚基部分基因序列,该序列与其他鱼类相同类型的亚基序列比对显示其为较保守的编码区开放阅读框。在鲟鱼转移后3、6、12、24、48、72和96 h检测实验组(淡水-盐水)和对照组(淡水-淡水)中华鲟幼鱼鳃丝NKAα亚基的mRNA表达水平、鳃丝NKA活性、血清Na+、Cl-的浓度和渗透压。结果显示：在转移后0～12 h,实验组中的mRNA表达量与酶活性为适应盐度变化而显著增加(P<0.05),离子浓度和渗透压均显著上升(P<0.05)；在转移后12～24 h,mRNA表达和酶活性开始降低,但仍然显著高于对照组的值(P<0.05),离子渗透压的变化与酶活性及mRNA变化趋势一致,这表明中华鲟鳃丝NKA在应对盐度变化时通过改变mRNA表达量来增加酶活性,高活性NKA调节血清离子和渗透压平衡。 为确定中华鲟幼鱼鳃丝Na+,K+-ATPase(NKA)和Na+/K+/2Cl-(NKCC)转运子在组织中分布,通过免疫组织化学的方法检测两种酶的免疫反应。结果显示,NKA广泛分布于鳃丝和鳃小叶上,其中盐度组的NKA免疫阳性细胞数量显著多于淡水组,盐度组细胞的荧光强度大于淡水组。在细胞中除核外,NKA普遍分布在细胞质中；NKCC广泛分布在鳃小叶上,盐度组NKCC免疫阳性细胞数量与淡水组相比无显著差异,但其细胞形态发生变化,盐度组细胞荧光强度增强且单个细胞的荧光区域边缘呈现不规则褶皱,NKCC同样在细胞质中广泛存在,但荧光强度较NKA弱,显示其蛋白的量较少。在相同组织区域的NKA和NKCC分布在不同细胞中。本研究结果表明盐度影响NKA和NKCC的分布。

关键词： 长江   调水量   水电站   发电厂   东湖水   中华鲟   南水北调   跨流域引水   调水工程   水利工程  

摘要： 她与黄河一样,同是我们的母亲河,共同哺育了中华民族。然而目前,她每年接纳相当于一条黄河的污水量;自2003年以来,长江的水量约减少了7%。"黄河缺水了,长江可以救;将来长江出了问题,谁来救?"对于母亲河面临的重重危机,翁立达忧虑地发问。"不尽长江滚滚来","唯见长江天际流",……古往今来,长江的宏伟气势在无数诗人笔下一次次再现。她与黄河一样,同是我们的母亲河,共同哺育了中华民族。不过,她的水量比黄河要多20倍。她像一张弓,辐射着中国19个省

关键词： 嫦娥三号   激光产业   工业产业   人工肌肉   减水剂   塑化剂   美国国际贸易委员会   硅光伏电池   中国芯   中华鲟   “双反”   科学技术情报研究  

摘要： "人工肌肉"据这项技术的发明者称,这种人工肌肉的潜在用途之一便是应用到超级强壮的机器人身上,它能在寒冷的时候保暖,而在阳光照耀的时候抵挡强烈的光线。由纳米技术制成并注入固体石蜡的人工肌肉能够举起自身重量10万倍的重物,产生的力量是同等人类肌肉的85倍。

关键词： 中华鲟   pou2   nanos1   DAZ家族基因   基因克隆   表达分析  

摘要： 中华鲟（Acipense sinensis）为濒危物种，国家一级保护动物；其性成熟期长达10年以上，且发育不同步。虽然其全人工繁殖于2009年已实现，但此种方法需要对其亲本长期养殖，需要投入大量的人力、物力和财力，而且还存在亲鱼死亡等多种风险，因此，有必要寻求其他办法对该物种进行多途径的保护。近年来随着生物技术的快速发展，生殖细胞移植被认为是一种周期短而且有效的方法，在鱼类中有成功应用的报道。该种方法的实施需要首先找到生殖细胞的标记基因。另外，到目前为止，关于中华鲟性别分化、生殖调控的分子机制的相关信息，依然十分有限。鉴于此，本研究通过同源克隆的方法，在中华鲟中得到4个已知在生殖细胞或/和生殖干细胞中起重要作用的基因（pou2、nanos1、dazl和boule）的全长cDNA序列；运用RT-PCR技术，研究它们在中华鲟不同组织和/或不同胚胎发育时期和/或不同年龄性腺中的表达特征。另外，将中华鲟nanos1基因进行原核表达，制备多克隆抗体，运用Western Blot研究中华鲟Nanos1蛋白在不同组织中的表达；通过免疫荧光定位，研究中华鲟Nanos1蛋白在性腺中细胞的表达部位。主要研究结果如下： 1.脊椎动物中，第Ⅴ类POU基因家族成员包括：pou5f1和pou2，其编码的产物为转录因子。该转录因子起着维持胚胎干细胞和生殖干细胞多能性的作用。中华鲟pou2基因（Aspou2）的全长cDNA序列为2853bp，其中开放阅读框为1296bp，编码431个氨基酸，5非编码区为489bp，3非编码区为1068bp。通过将AsPou2与其他物种第Ⅴ类POU家族基因氨基酸序列的多重比对，发现第Ⅴ类POU家族成员均含有一个非常保守的POU结构域。AsPou2POU结构域与青鳉的氨基酸序列一致性最高，达到了90%，其次为斑马鱼（88%），爪蟾（69%），小鼠（67%）和人类（67%）。RT-PCR分析发现，除肝脏外，Aspou2mRNA在脾脏、心脏、卵巢、脂肪、肾脏、肌肉、肠、垂体、下丘脑、端脑、中脑、小脑和延脑都表达，而在肌肉、垂体和脑中的表达量较高。Aspou2为母源表达，且在胚胎发育过程中，其表达量逐渐降低，出膜后一天不表达。另外，还发现随着性腺的发育，Aspou2的表达量增加。这些结果表明Aspou2可能在体细胞、多能干细胞、胚胎和性腺发育的过程中扮演着重要的角色。 2. nanos基因家族成员在种系细胞发育过程中起着重要的作用。本研究通过同源克隆的方法，得到了中华鲟nanos1基因（Asnanos1）的全长cDNA序列。该序列为775bp，开放阅读框为为687bp，编码228个氨基酸，5非编码区长88bp，没有发现3非编码区。通过同源比对发现，AsNanos1有一个非常保守的锌指结构域。RT-PCR分析发现，除脂肪外，Asnanos1mRNA在脾、心、卵巢、肝、肾、肌肉、肠、垂体、下丘脑、端脑、中脑、小脑和延脑中有表达。另外，将AsNanos1原核表达，获得纯化的重组蛋白，免疫家兔，成功制备有效的多克隆抗体。Western Blot分析发现，除脂肪、肌肉和肠外，AsNanos1蛋白在脾、心、卵巢、肝、肾、垂体、下丘脑、端脑、中脑、小脑和延脑都表达。这与其mRNA在组织中的表达模式不一致。随后，通过免疫荧光定位，发现AsNanos1在初级卵母细胞和精母细胞的细胞质中表达，并且随着卵巢的发育，其分布在整个初级卵母细胞的细胞质中。这些结果表明，对于Asnanos1的定位以及与其他因子的相互作用，可能存在着另外的一种机制。同时，不同物种之间nanos1mRNA表达特征具有保守性和差异性。另外，AsNanos1可能在生殖细胞的发育过程中起作用，同时也可以作为中华鲟初级卵母细胞和精母细胞的标记基因。 3. DAZ家族基因为在性腺特异表达，作为多种生物的生殖细胞标记基因。在中华鲟中，克隆得到了dazl和boule的同源基因，即Asdazl和Asboule，并且发现Asboule至少存在10个亚型。Asdazl全长cDNA序列为2337bp，开放阅读框为为675bp，编码224个氨基酸，5非编码区为126bp，3非编码区为1536bp；Asboule1全长cDNA序列为2572bp，开放阅读框为为1062bp，编码353个氨基酸，5非编码区为157bp，3非编码区为1353bp。结构域分析表明，AsDazl和AsBoule1都含有两个保守的结构域，即RNARecognition Motif和DAZ-repeat。同源性分析发现，AsDazl与其他鱼类的氨基酸序列的一致性为60%左右，而与其他脊椎动物Dazl氨基酸的相似性较低，只有40%左右；但是，AsBoule1与哺乳类氨基酸序列的一致性为60%左右，而与其他脊椎动物和无脊椎动

关键词： 中华鲟   放流   水产   自然保护区   葛洲坝工程   人工繁育   禁伐禁猎区   人工繁殖   繁殖方法   亲鱼  

摘要： 由于葛洲坝工程的修建阻隔了中华鲟洄游到上游产卵场的通道,对中华鲟的救护被推向前台。从自江中捕捞中华鲟野生亲鱼转至建立中华鲟的人工养殖群体,中华鲟保护已历经三十个春秋。三十年来,从对葛洲坝坝下中华鲟性腺发育的调查到使用人工激素LRHA替代鲟鱼脑垂体,从剖腹取卵到活体无创伤采卵,从成功培育出子一代中华鲟亲鱼到全人工繁殖子二代中华鲟的诞生,中华鲟保护走出了一条非凡之路。

关键词： 中华鲟   葛洲坝   鱼卵   雌雄   底质   万里长江第一坝   卵子   自然繁殖   中华鲟产卵场  

摘要： 中华鲟生在长江,长在大海。金沙江得天独厚的底质和水流条件是中华鲟理想产卵场。葛洲坝的修建阻隔了中华鲟洄游到上游产卵场的通道。1982年中华鲟在葛洲坝下找到了新的产卵场自然繁殖,三峡大坝蓄水后这个产卵场的状况如何呢?近三年调查结果表明,三峡大坝蓄水后中华鲟在葛洲坝坝下水域仍能够进行自然繁殖。