关键词： 中华鲟   HSP30   HSP70   表达特征   温度胁迫   细菌感染  

摘要： 热休克蛋白（Heat shock proteins,HSP）是普遍存在于各类生物体中的一类应激蛋白,当生物体受到环境中各种物理、化学等因素刺激时就会产生应激反馈合成该类蛋白质,从而增强自身抵抗力,降低外界刺激对机体的伤害。中华鲟（Acipenser sinensis）为国家I级水生保护动物,其本身没有维持体温恒定的生理机制,所以它们的代谢容易受到外界温度的影响,尤其是高温季节养殖中华鲟易患多种细菌性疾病,给该物种的保护研究带来巨大挑战。本研究通过RACE和同源序列比对克隆、鉴定在温度应激中起重要调控作用的中华鲟HSP30蛋白和HSP70蛋白家族基因,分析其序列特征和系统进化关系,并研究其在高温胁迫和细菌感染条件下的组织表达特征,为研究该基因在应对温度胁迫和细菌感染中的功能奠定基础。***30蛋白基因的克隆及其在高温胁迫下的表达分析克隆了中华鲟热HSP30蛋白基因的全长,分析其分子结构与特征,并研究了其在高温胁迫下的表达水平。结果表明,中华鲟HSP30蛋白基因cDNA序列全长为1037 bp,其中开放阅读框（ORF）636 bp,5'端非编码区（5'UTR）38 bp,3'端非编码区（3'UTR）363 bp,共编码211个氨基酸。氨基酸多序列比对发现含有一个保守的α晶状体结构;系统进化分析显示,中华鲟HSP30与其它鱼类HSP30聚为一支,与小体鲟HSP30氨基酸序列相似度最高,为79%。荧光定量PCR结果表明,中华鲟HSP30蛋白基因在各组织中表达,其中在皮肤中的表达量最高,肝脏次之,肠中的表达量最低。高温胁迫后,心脏、脾脏、肾脏和皮肤中HSP30蛋白基因表达量均显著增加,表明这些器官在中华鲟应对高温胁迫中可能起重要作用。***70家族基因的克隆及其在高温胁迫、细菌感染下的表达分析克隆并鉴定了来自中华鲟HSP70家族的9个成员（命名为HSC70,HSP70-A1,HSP70-4,HSP70-4L,HSP70-12A,HSP70-12B,HSP70-12Blike,HSP70-13和HSP70-14）。对HSP70家族9个成员保守结构域的分析结果表明:所有HSP70家族成员均含有NBDsugar-kinaseHSP70actin超家族结构域,其中HSC70和HSP70-A1具有相同结构域（HSPA1-26-8-likeNBD）;HSP70-4和HSP70-4L具有相同结构域（HSPA4NBD）;HSP70-12A、HSP70-12B和HSP70-12B-like具有相同结构域（HSPA12-likeNBD）;HSP70-13和HSP70-14分别具有保守的结构域HSPA13-likeNBD和HSPA14-likeNBD。系统进化分析结果表明,中华鲟HSP70家族的9个成员在系统发育树中分布在5个不同的分支,且含有相同结构域的成员分布在同一分支。荧光定量PCR结果表明,HSP70家族的9个成员在检测的中华鲟6种组织中（肝、肾、脾、肠、脑和皮肤）均有表达,且在不同组织中的表达量存在明显差异。高温胁迫和嗜水气单胞菌感染后,HSP70家族的9个成员在中华鲟脾脏和肾脏中的表达量均显著增加,表明HSP70家族成员可能在维持机体正常生理状态及应对外界温度胁迫和病原菌侵染中起着重要作用。

摘要： 第七届世界军人运动会的吉祥物一经发布,迅速成了"国际网红".吉祥物名为"兵兵",设计灵感来源于我国一级野生保护动物——中华鲟,其棱角分明的外形和逆流而上、洄游迁徙的习性与军人坚韧硬朗的气质高度契合.中华鲟主要生活在长江流域,能够代表东道主武汉."兵兵"活泼可爱、阳光自信,它张开双臂、迈步向前的造型象征着新时代的中国愿以更加开放包容、热情好客的姿态与各国友人共享友谊、同筑和平.它赢得了各国参会人员的喜爱.

关键词： 中华鲟   人工种群   三峡集团   长江大保护   生态修复   长江流域  

摘要： 4月13日,2019年长江三峡中华鲟放流活动在湖北宜昌举行,700尾不同年龄的大规格子二代中华鲟放归长江。这是中华鲟研究所成立以来实施的第61次中华鲟放流活动。此次放流活动由三峡集团、农业农村部长江渔政监督管理办公室和宜昌市人民政府共同主办。来自大自然保护协会(TNC)、世界自然基金会(WWF)、中国科学院水生生物研究所等单位和组织,以及专家学者、志愿者、学生代表、宜昌市民等近1000人参加活动。

关键词： 夏令营   中华鲟  

摘要： 2019年7月22日,宜昌市三峡坝区迎来319名来自全国各地的学生,他们在这里展开了为期6天的"三峡娃娃行·宜昌水电夏令营"活动。暑期烈日炎炎,孩子们的心情比天气更火热,他们怀揣着对世界的新奇和对知识的渴望,从全国各地齐聚在这里,体验了一堂生动的"公开课",也给三峡坝区增添了许多欢声笑语。这些"课程"在他们心中埋下了一颗颗急欲破土而出的种子,仿佛明天就会生根发芽,长成参天大树。据了解,参加活动的319个娃娃来自三峡集团帮扶的9个区域:云南

关键词： 中华鲟   干扰素e   干扰素调节因子   生物学功能   表达模式  

摘要： Ⅰ型干扰素(IFN)是由病原感染细胞后分泌的多肽,具有抗病毒、抗细菌和抗肿瘤的活性,同时还能促进免疫应答调节。因此,了解发病中华鲟(Acipenser sinensis)中高表达的IFNes的功能有利于加强中华鲟的保护,并且有助于加深对免疫进化机理的认识。在本研究中我们通过体外重组中华鲟IFNe2蛋白,并对其功能进行了初步的研究。本试验将去除信号肽的中华鲟IFNe2编码区序列克隆进入pET-32a原核表达载体,发现中华鲟IFNe2在大肠杆菌中主要以可溶性蛋白的形式表达,通过镍亲和层析可以得到较纯的重组IFNe2蛋白。为了后续更好地对IFNe2的功能进行研究,我们将位于中华鲟干扰素调节因子(IRF)3及IRF7 DBD(DNA-binding domain)结构域与IAD(IRF association domain)结构域之间的序列克隆到pET-32a载体中,发现IRF3和IRF7也都能以可溶性蛋白的形式表达,并且可以得到较纯的蛋白用于多克隆抗体制备。在4次免疫小鼠之后,获得了较高效价的IRF3和IRF7多克隆抗体,其中IRF3抗体滴度超过1:729000,IRF7抗体滴度超过1:81000,此外,通过Western Blot检测IRF3和IRF7多克隆抗体的特异性发现两个多克隆抗体都具备较强的特异性。在中华鲟中,过去的报道已经研究了IFNe2时空表达规律,但其生物学功能尚不清晰。本试验检测了IFNe2的抗病毒作用,并且研究了IFNe2对IFN信号通路的影响。结果显示,添加终浓度为1μg/mL重组中华鲟IFNe2蛋白能够诱导EPC(epithelioma papulosum cyprini)细胞中Mx、PKR和Viperin的表达而激活EPC细胞的抗病毒活性,并且可以降低EPC细胞中SVCV(spring viraemia of carp virus)病毒G蛋白、N蛋白和P蛋白的表达,减少病变效应的产生,这一结果说明中华鲟IFNe2具备抗病毒活性。重组中华鲟IFNe2蛋白还能影响IFN信号通路上基因的表达。通过在中华鲟鳍细胞系中加入1μg/mL的重组IFNe2蛋白可以诱导Mx、PKR、Viperin和ADAR4等干扰素刺激基因的表达,尤其是极显著地上调了Mx和Viperin的表达,但是重组IFNe2不能诱导ADAR1-1和ADAR1-2的表达,此外,重组IFNe2可以诱导IRFs的表达,在诱导后3 h和6 h时显著上调IRF1和IRF2的表达,并持续上调IRF3和IRF7的表达至24 h,且诱导IRF7发生磷酸化。在加入1μg/mL的重组IFNe2蛋白刺激中华鲟鳍细胞系后,细胞中IFNe1和IFNe3的表达都在3 h时出现显著上调,并且随后就恢复到正常水平,同时IFNe2还能诱导其自身的表达,在6 h时先出现下调,随后在12 h时出现极其显著的上调表达。这些结果说明IFNe2可能通过诱导IRF7发生磷酸化而扩大IFN的免疫应答。IRF是病毒和细菌诱导IFN信号通路的转录介质,在多种细胞过程中起着重要作用,例如抵抗病毒入侵,促进细胞生长和凋亡等。IRF对IFN的转录起着至关重要的作用,为了了解中华鲟IRF对IFNe2转录的调控,本文以长江鲟(Acipenser dabryanus)为研究对象研究了IRF1、IRF3、IRF4、IRF5和IRF8的结构及表达模式。除了IRF1外,所有IRF由8个外显子和7个内含子组成。此外,在预测的蛋白质序列中,DBD结构域与斑点雀鳝(Lepisosteus oculatus)具有最高的一致性。关于表达模式,发现五种IRF基因在所有检测的组织中组成型表达,并且在血液,肾,肠和脾中具有更高的表达。嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染后,IRF1和IRF3的表达在脾脏和中肾中上调,而IRF5和IRF8基因在中肾中均下调。此外,感染3 h后IRF4在脾和中肾中被嗜水气单胞菌显着上调。这些结果表明长江鲟IRF1、IRF3和IRF4可能对依赖于细菌诱导的IFN的转录起着重要的作用。

关键词： 中华鲟   细菌性疾病   诊断   防控   气单胞菌  

摘要： 2010—2017年以自然患病中华鲟为研究对象,用流行病学调查、病原学检验、病理解剖检验、体外药物筛选、临床治疗相结合的方法,分析总结中华鲟主要细菌性疾病的种类及其诊断与防控方法。研究结果表明,中华鲟细菌性疾病主要包括细菌性败血症、细菌性烂鳃病、肠炎病、花斑病、脓包病和腹水病,其中花斑病、脓包病和腹水病为新病;气单胞菌是中华鲟细菌性疾病的主要病原体,可导致细菌性败血症、肠炎病、花斑病和腹水病的发生;细菌性败血症与肠炎病诊断要点在于后者一般仅限于肠道充血明显,且肠道变薄、弹性差;细菌性败血症与腹水病的诊断要点在于后者主要发生于高温季节,且体表无明显疾病症状,解剖体腔内可见大量腹水,内脏非实质性充血;中华鲟细菌性疾病一般采用改善养殖环境、浸泡+内服相结合的方法进行防控。通过调查研究中华鲟细菌性疾病的基本情况,可为中华鲟人工保种过程中主要细菌性疾病的防治提供基础性资料。

关键词： 中华鲟   日本鲺病   诊断   治疗  

摘要： 2016年9月,在中华鲟研究所黄柏河基地养殖的子二代中华鲟中发生日本鲺病,通过对疾病发生过程、病例症状、解剖变化、鱼体检查和水质检测结果、镜检及体内细菌分离结果进行综合分析,诊断为单一性日本鲺病。根据诊断结果,结合实际情况及以往的防治经验,采取外用敌百虫进行治疗以及改善养殖环境等综合防治措施,成功治愈此病,且未见复发。文章介绍了该病的发生过程、病例症状、解剖变化、诊断方法及治疗技术等,可为中华鲟日本鲺病的防治提供参考依据。

关键词： 长江   珍稀鱼类   中华鲟   资源保护  

摘要： 中华鲟是我国最为珍惜的鱼类物种之一,分布在我国长江流域。本文将针对长江珍稀鱼类中华鲟物种特性进行详细的分析,其目的是研究出长江珍稀鱼类中华鲟物种资源保护措施,并针对未来的保护工作进行展望。

关键词： 流化床生物滤器   挂膜方式   细菌群落结构   焦磷酸测序   中华鲟  

摘要： 为探讨挂膜方式对流化床生物滤器的启动时间及其对微生物群落结构的影响,了解流化床生物滤器的净水机制,并将其应用于中华鲟循环水养殖系统中,研究自然挂膜法和接种微生态制剂2种挂膜法工况下滤器的启动时间,并采用焦磷酸测序方法,分析不同时期滤器中微生物群落结构的变化。结果显示:采用接种微生态制剂挂膜法滤器启动的时间显著短于采用自然挂膜法。挂膜初期,两种挂膜方式下滤料载体表面微生物种类较少,其优势细菌都是厚壁菌门;生物膜成熟后,采用自然挂膜法的滤器中细菌群落的多样性显著高于采用接种微生态制剂培养法,并且群落结构更加稳定,筛选出的功能性细菌的比例也高于采用接种挂膜方式,如黄杆菌属和紫色非硫细菌等,表明采用自然挂膜法更利于流化床生物滤器的稳定运行。

关键词： 中华鲟   安徽宣城   长江   误捕   渔民   放归   工作人员   宣州区  

摘要： 8月24日11时许,安徽省宣城市暨宣州区渔政部门工作人员驱车赶到芜湖长江轮船码头,将当地渔民误捕的一条珍稀野生中华鲟放归长江.