关键词： 中华鲟   免疫器官   发育   socs1   表达特征  

摘要： 中华鲟(Acipenser sinensis)是长江的旗舰物种,1988年被列为国家一级水生野生保护动物。近年来,由于人类活动影响,自然种群呈逐渐衰退趋势,繁殖群体数量逐年下降,2010年世界自然保护联盟(IUCN)将其评估为极危(CR)物种。人工养殖是中华鲟迁地保护的基础。鲟鱼免疫器官主要包括头肾、胸腺和脾脏器官,免疫淋巴组织包括脑膜髓样组织、心包组织、皮肤黏膜组织、鳃组织和肠道黏膜组织(尤其是螺旋瓣淋巴黏膜组织)等,鲟鱼类免疫器官及组织的高度多样性和良好发育是其免疫机制有效发挥的基础。本文通过解剖学、组织学和分子生物学等方法研究了中华鲟免疫器官(头肾、胸腺和脾脏)的早期发育过程和免疫基因细胞因子信号抑制因子1(socs1)的表达模式分析,将加深对中华鲟免疫系统的了解,丰富中华鲟免疫系统的基础资料,为中华鲟苗种的健康养殖和疾病预防提供参考。中华鲟免疫器官发育研究利用形态解剖、连续石蜡切片和透射电镜技术研究了中华鲟仔鱼、稚鱼和幼鱼头肾、胸腺和脾脏器官的形态结构、早期发育规律和组织学超微结构。主要研究结果和结论如下:1.解剖学观察结果表明,中华鲟头肾位于心脏腹隔膜前背方,肾管向前延伸至最前端的膨大部位,左右两叶呈对称分布,为表面覆盖胶原纤维的红褐色扁平器官,组织早期呈弥散状,后期发育为实质状;胸腺1对,位于第2鳃弓的背侧,前端伸入鳃盖深处,后端延伸至鳃腔背角,左右对称分布,为表面光滑、质地松软的乳白色半透明薄片状实质器官;脾脏位于胃和十二指肠之间的系膜上,早期包裹在胰脏组织内,后期分离出来逐渐移动至鱼体腹部,为表面光滑、覆盖基膜的暗红色实质器官,主体部分为前部条带状和后部蝴蝶状两叶。2.连续石蜡切片和HE染色观察结果表明,中华鲟免疫器官原基出现顺序为头肾、胸腺和脾脏,淋巴化顺序为胸腺、头肾和脾脏。头肾原基3 dph可见,15 dph开始淋巴化,39 dph肾小管出现退化,150 dph发育为完全的淋巴造血组织;胸腺原基7 dph可见,12 dph开始淋巴化,20 dph结缔组织和毛细血管入驻胸腺实质,26 dph皮髓质分区;脾脏原基9 dph可见,33 dph开始淋巴化,92 dph出现红白髓分区。仔鱼期可见头肾和胸腺间具有淋巴细胞“桥”连接现象,180 dph胸腺内可见哈氏小体结构,头肾、胸腺和脾脏内含黑色素细胞或黑色素巨噬细胞中心(MMCs)。中华鲟免疫器官发育具有原基出现时间早、发育速度慢和发育周期长的特点。3.超薄切片和透射电镜观察结果表明,中华鲟头肾、胸腺和脾脏器官均为网状细胞连接的淋巴样器官。头肾结构最为复杂,细胞分布以颗粒细胞和红细胞为主,细胞种类最多;脾脏器官其次,红髓内红细胞为主,白髓内白细胞居多,可见多种形态的红细胞和颗粒细胞分布;胸腺结构相对简单,网状支架内以淋巴细胞填充为主,观察到不同形态淋巴细胞、网状上皮细胞和成纤维细胞。透射电镜下各组织超微结构与石蜡切片结果保持一致。中华鲟免疫基因socs1表达特征研究细胞因子信号抑制因子(suppressors of cytokine signaling,SOCS)是一类重要的细胞因子信号转导抑制剂,在各类细胞因子参与的免疫系统调控中起着重要的负调控作用。socs1作为该家族的重要成员,参与T淋巴细胞的分化、成熟与功能调控,在JAK/STAT信号通路中起负调控作用。本研究通过对中华鲟socs1基因的编码区cDNA序列特征、系统进化关系和表达模式特点进行了分析。主要研究结果和结论如下:1.对中华鲟的socs1基因研究发现,socs1基因cDNA序列长度为639 bp,编码212个氨基酸。将中华鲟socs1基因同其他脊椎动物对比发现,中华鲟socs1基因与其他脊椎动物类似,有一个高度保守的中央SH2结构域、一个相对保守的C端SOCS box结构域,以及一个低复杂度的N端结构域。系统进化分析的结果显示,中华鲟socs1与其他鱼类物种共同聚为一支,两栖类、爬行类、鸟类和哺乳类聚为另外一支,中华鲟与小体鲟的socs1基因的同源一致性最高。2.表达模式分析结果显示,中华鲟socs1基因在检测的肝脏、脾脏、胸腺、头肾、中肾、鳃、肠和皮肤等8种组织中均有表达,其中在鳃中表达量最高,胸腺其次,肠和头肾相对较低,其他组织表达水平接近;在嗜水气单胞菌和poly(I:C)感染下,socs1基因在脾脏细胞中的表达水平均显著升高;不同发育时期的中华鲟幼鱼头肾、胸腺和脾脏组织中socs1基因表达呈先上升后下降趋势。

关键词： 个体体重   硬骨鱼纲   杂交鲟   鲟鱼养殖   鲟形目   中华鲟   抗病力  

摘要： 鲟鱼是指鲟形目的鱼类。鲟鱼隶属于硬骨鱼纲、辐鳍亚纲、软骨硬鳞总目、鲟形目。鲟鱼是现存起源最早的脊椎动物之一。因地域或品种不同又有中华鲟、中国鲟、鳇鱼、苦腊子、鳣等名称,成年个体体重68~250 kg不等。目前中国无论是在北方,还是南方,许多鲟鱼养殖企业用不同种类的鲟鱼不断杂交得到杂交鲟,杂交鲟具有亲本双方的共同优点,且抗病力强、生长快,成为养殖企业重点养殖的对象。

关键词： 三峡   蓝家寨遗址   春秋时期   中华鲟   骨板  

摘要： 蓝家寨遗址位于重庆市巫山县大昌镇兴胜村(31°15'95"N,109°48'23"E),自然地貌特征为长江三峡北岸大宁河中游的一级阶地。2012年,在对蓝家寨春秋时期(距今2489多年前)古文化遗址考古发掘中,出土了1件保存较好的中华鲟骨鳞板,该枚骨鳞板长64 mm,宽35 mm;骨板平面最大厚度5 mm,骨板尾端高度为16 mm。根据该标本生长形态和中华鲟骨鳞板排列规律,可以确定该标本为中华鲟背鳍前部的最后一块骨鳞板。中华鲟是鲟形目中在地球上分布最南端的种类,主要生活于亚洲东部沿海大陆架水域和中国长江干流,是起源于白垩纪(恐龙时代)残留至今最为古老的现生鱼种之一。中国长江三峡地区,是世界上唯一发现有中华鲟考古材料的地区。中华鲟体内骨骼以软骨为主,自然状态下很难在土壤中保存,并且其体内软骨自古被人们视为名馔珍肴,所以考古发掘中迄今没有发现中华鲟体内骨骼。中华鲟体表分布有5列骨质鳞板,由于鳞板形态近似,数目较多,并且骨鳞板埋在地层中极易破碎,所以此前考古发现的零散骨鳞板,均未能鉴定出其具体生长体位。本文报道的重庆巫山县蓝家寨遗址考古发掘中,出土了迄今保存最为完整的1件骨鳞板,也是我国考古工作中首次发现可以确认具体生长体位的中华鲟骨骼。三峡地区大巴山、巫山、武陵山巨岭交错,陡峡深谷,其特殊地理位置、地貌特征及特色资源,使该地区形成富有特色的各种经济文化交流圈。史前时期,该地有盐业经济圈、太阳崇拜文化圈等。蓝家寨遗址中华鲟标本及其相关研究,使我们认识到春秋时期(距今2489多年前),三峡地区长江干流沿岸生活有专门捕捞中华鲟的渔民,这些沿岸渔民以中华鲟等渔获物与周围山区古居民进行物质交流,至少在沿江两岸35 km的直线范围内,还存在有以中华鲟为重要交换物的经济文化交流圈。中华鲟生存、演化了约1亿5千万年。但现代长江是在约100多万年前三峡贯通后才形成。现代长江形成后,中国海岸线海侵及长江河道改变等也曾经历过很大变化。所以,在现代长江形成之前和之后,中华鲟已在中国海域和河流经历过很多生态变化。在中国地貌环境巨大变化过程中,中华鲟始终适应并以较大种群在中国近海和长江流域生存下来。但是,现代人们在长江三峡地区的大江截流(1981年葛洲坝截流),是人类行为在短时间内突然强制性改变中华鲟繁衍生态,并且在筑坝过程中对中华鲟集中、过度捕捞。针对此情况,人类必须采取补救措施,严禁捕捞和增殖放流,帮助中华鲟适应新繁殖栖息环境。蓝家寨遗址中华鲟标本的发现及研究,对科学论证长江流域中华鲟资源价值、生态演化,以及深度剖析历史时期三峡古居民生业模式和文化交流等具有重要意义。

关键词： 子二代中华鲟   慢性氨氮胁迫   生长   抗氧化   免疫  

摘要： 以子二代中华鲟(Acipenser sinensis)为实验对象,研究不同氨氮浓度(0.01、0.5、1.0、2.0 mg·L^-1)慢性胁迫(60 d)对鱼体生长、抗氧化及免疫指标的影响。结果显示,子二代中华鲟的增重率和特定生长率随氨氮浓度的增加而逐渐降低(P<0.05),而脏体比、肝体比和肥满度无显著性变化(P>0.05)。在抗氧化指标中,血清和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)活性及谷胱甘肽(GSH)含量随氨氮浓度的增加呈逐渐降低的趋势,而丙二醛(MDA)含量呈升高趋势。免疫指标中,随着氨氮浓度的升高,血清、肝脏溶菌酶(LZM)活性及免疫球蛋白M (IgM)含量均显著下降(P<0.05)。结果表明,慢性氨氮胁迫显著抑制了子二代中华鲟的生长,降低了鱼体的抗氧化能力和免疫能力,研究结果对了解中华鲟氨氮胁迫反应以及其健康养殖具有重要的借鉴意义。

关键词： 中华鲟   活化石   恐龙时代  

摘要： 尖尖的嘴,纺锤一般的身体,剪刀一样的尾巴,身上披着厚实坚硬的鳞片.你知道这是什么动物吗?它就是世界现存鱼类中最原始的种类、被誉为恐龙时代“活化石”的中华鲸。

关键词： 中华鲟(Acipenser   sinensis)   热休克蛋白   HSP30   表达特征   温度胁迫  

摘要： 实验克隆了中华鲟(Acipenser sinensis)热休克蛋白hsp 30基因cDNA的全长、分析了其分子结构与特征,并研究了其在高温胁迫下的表达水平。结果显示,中华鲟hsp 30基因cDNA序列全长为1037 bp,其中开放阅读框(ORF)636 bp,5′端非编码区(5′UTR)38 bp,3′端非编码区(3′UTR)363 bp,共编码211个氨基酸。氨基酸多序列比对发现含有一个保守的α晶状体结构;系统进化分析显示,中华鲟HSP30与鱼类HSP30聚为一支,与小体鲟HSP30氨基酸序列相似性最高,为79%。荧光定量PCR结果表明,中华鲟hsp 30基因在皮肤中的表达量最高,肝脏次之,在肠中的表达量最低。高温胁迫后,心脏、脾脏、肾脏和皮肤中hsp 30基因表达量均显著增加,表明这些器官在中华鲟应对高温胁迫中可能起着重要作用。

关键词： 水生野生动物   中华鲟   物种保护   产卵场   野生种群   溯河洄游   极度濒危   自我维持  

摘要： 中华鲟(Acipenser sinensis Gray)是我国国家一级重点保护水生野生动物,是全球濒危水生动物保护的旗舰物种,受到公众的高度关注.作为一种大型溯河洄游鱼类,中华鲟的产卵场曾经在长江和珠江都有分布.但是,珠江中华鲟的产卵场在20世纪90年代后期就已经逐渐消失,长江中华鲟的产卵活动则在2013年、2015年、2017年和2018年出现中断的现象.上述情况表明,中华鲟正在失去一个物种的自我维持能力,野生种群处于极度濒危的状态.

关键词： 珍稀濒危物种   中华鲟   急性毒性实验   鲟鱼   杂交种   暂养   控制指标   最大限度  

摘要： 鲟鱼作为一类大型而又古老的鱼类,多数品种和杂交种是重要的经济物种,有重要的经济价值。另外,鲟鱼中具有代表性的中华鲟是现存的“活化石”,具有极其重要的生态价值和研究价值。采用经济种开展相关的实验研究,可为中华鲟的研究提供重要的参考依据,以最大限度保障中华鲟实验群体的安全。氨氮是中华鲟等珍稀濒危物种暂养过程中重要的控制指标,研究其对鲟鱼幼体的毒性,可为中华鲟相关研究奠定重要基础。

关键词： 中华鲟   血细胞组成   应用   健康评价  

摘要： 血细胞是临床健康的重要指标。本文对北京海洋馆养殖的40尾中华鲟(Acipensersinensis)外周血细胞组成进行研究,研究对象包括超过30龄、18龄、16龄、15龄、11龄、7龄和4龄共7个龄组,并分析比较不同年龄、性腺快速发育前后以及处于疾病前后血细胞指标变化,希望应用于健康评价。结果表明,1)外周血红细胞总数(RBC)平均为(5.56±1.19)×10^11/L,18龄和11龄与其他龄组之间存在显著性差异(P<0.05),超过30龄组血细胞比积(HCT)和血红蛋白(HB)值显著高于其他龄组(P<0.05);2)白细胞总数(WBC)平均为(16.53±4.94)×10^9/L,18龄与4龄间存在显著差异,且分别与其他龄组间存在显著性差异(P<0.05)。3)白细胞分类计数(DLC)中各类型白细胞平均所占百分比分别为,大淋巴细胞(LLYM)5.26%±3.95%、小淋巴细胞(SLYM)77.74%±11.73%、嗜中性粒细胞(NEU)9.40%±7.98%、嗜酸性粒细胞(EOS)1.90%±2.06%和单核细胞(MON)5.50%±4.00%,超过30龄和4龄间显著差异,且分别与其他龄组间存在显著性差异(P<0.05)。4)性腺进入快速发育阶段后,红细胞总数、血细胞比积和白细胞总数较发育前均显著增加(P<0.05),血红蛋白值有增加但差异不显著。5)疾病中华鲟白细胞总数显著增高(P<0.05)并伴随红细胞各指标降低,白细胞数增加幅度达90%,分类计数中中性粒细胞和单核细胞比例显著变化(P<0.05)。中华鲟快速发育阶段及疾病状态的血细胞组成不同,血细胞密度的变化以及分类计数的差异可及时判断中华鲟健康状况,结果对中华鲟的健康评价与保育研究有重要的参考意义。