关键词： 白鲟   珍稀鱼类   科研人员   中华鲟   水电开发   人工繁殖   灭绝   鱼类保护区  

摘要： 笔者不是鱼类专家,不知道白鲟的人工繁殖的难度具体有多大?但是,根据我们已经成功地实现了对中华鲟的保护,我觉得如果我们对白鲟的研究和保护能开展的早一点,科研人员得到的活体样本能多一点,白鲟的人工繁殖也未必不成功。总之,我们最大遗憾一直就是,我们能够真正保护珍稀鱼类的水电开发建设太晚了点。如果,我们能在建立长江珍稀鱼类保护区的同一时期,就开始积极地科学保护,今天白鲟很可能会与中华鲟一样,依然健在。

关键词： 中华鲟   达氏鲟   胭脂鱼   圆口铜鱼   检索表   疾病诊断  

摘要： 为了掌握中华鲟(Acipenser sinensis)、达氏鲟(***)、胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)和圆口铜鱼(Coreius guichenoti)等长江珍稀鱼类常见疾病的流行规律和诊断方法,2011-2017年以自然患病的这4种鱼类为研究对象,采用流行病学调查、临床诊断方法进行了调查研究。结果:(1)归纳总结出20种常见疾病,其中细菌性疾病10种,寄生虫性疾病6种,真菌性疾病1种,营养性疾病1种,其他疾病2种;(2)中华鲟和胭脂鱼是主要易感群体,其幼鱼养殖阶段是疾病的高发期,春季和夏季是流行高峰期;(3)病原性疾病以细菌性疾病和寄生虫性疾病为主,细菌性疾病的主要病原体为气单胞菌,而寄生虫性疾病的病原体种类繁多。在上述调查研究的基础上,通过比较鉴别疾病临床症状的共同特征和特异性,以平行式检索方式构建了这4种鱼类常见疾病的快诊速查检索表。

关键词： 中华鲟   崇明东滩  

摘要： 2019年11月5日,三岛的碧空澄澈如洗,浩荡的长江从这里入海,南飞的候鸟在此觅食……秋日的崇明,一幅人与自然和谐相处的秀美画卷。近日,记者跟随全国人大组织的中华环保世纪行采访团实地调研发现,作为长江沿岸的重要城市.

关键词： 中华鲟   长江鲟   运动性气单胞菌   肠道菌群   益生菌  

摘要： 鲟形目(Acipenseriformes)鱼类是硬骨鱼纲中唯一现存的大型软骨硬鳞鱼类,具有极高的科学价值和经济价值。受过度捕捞、水利工程建设、栖息地破坏等人类活动的影响,全球27种鲟鱼类中已有25种处于不同程度的濒危状态。为拯救濒危的鲟鱼类,同时满足市场对鲟鱼子酱日益增长的需求,许多国家和地区先后开展了鲟鱼的人工养殖,全球鲟鱼养殖业蓬勃发展。自2003年以来,我国已经成为全球最大的鲟鱼养殖国。然而,随着鲟鱼种质资源的衰退和集约化养殖程度的不断提高,鲟鱼病害问题日益凸显,严重制约着濒危鲟人工保种及鲟鱼养殖业的可持续发展。本文主要针对湖北省3个养殖基地中华鲟(Acipenser sinensis)成鱼和幼鱼爆发的细菌性败血症,开展病原生物学、病理学、致病机制等方面的研究。同时,从健康的中华鲟和长江鲟(Acipenser dabryanus)肠道中分离筛选潜在的益生菌,以期为鲟鱼频发的细菌性疾病的防治提供科学依据。本研究采用的主要方法和得到的主要结果如下:1.2015至2017年间,湖北省3个养殖基地子二代中华鲟成鱼和幼鱼发生了严重的细菌性败血症。采用传统的病原菌分离培养方法,从濒死的中华鲟肝脏和脾脏中分离获得11株优势菌株。根据科赫法则人工感染健康的长江鲟,发现其中9株为致病菌,且从受感染的长江鲟肝脏中再次分离得到相同的病原菌。通过对菌株形态特征,生理生化特征,16S rRNA、gyrB、rpoD基因序列及系统发育树分析,确定9株病原菌均为运动性气单胞菌,且以维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和嗜水气单胞(Aeromonas hydrophila)为主。另外,观察了长江鲟感染维氏气单胞菌和嗜水气单胞菌后的组织病理变化,并对2种病原菌进行了药物敏感性分析。组织病理学研究表明,长江鲟感染嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌后表现出相似的病理特征,即肝脏实质细胞坏死、局灶性出血;脾脏红髓和白髓坏死;肾小球水肿、肾小管上皮细胞凝固性坏死;肠道粘膜脱落、结构完整性被破坏。药物敏感性试验结果表明,嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌均对氟喹诺酮类、第三代和第四代头孢类抗生素敏感,而对苯唑西林、氨苄西林、青霉素等抗生素耐药。2.为探究嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌对鲟鱼的致病机制,对长江鲟人工感染上述2种病原菌前后的脾脏组织进行转录组学分析。高通量测序共获得410996612条Clean reads,组装成26939820条Contigs,521713条Transcripts,254211条Unigenes。差异表达基因分析表明,嗜水气单胞菌感染组长江鲟的脾脏共有5574个显著性差异表达基因,其中2716个基因上调表达,2854个基因下调表达;维氏气单胞菌感染组长江鲟的脾脏共有1724个显著性差异表达基因,其中835个基因上调表达,889个基因下调表达,两组共有差异表达基因1087个。进一步分析表明,嗜水气单胞菌感染组长江鲟脾脏的差异表达基因主要富集于8条免疫相关的信号通路中,分别是Toll-like受体信号通路、吞噬体、细胞因子与细胞因子受体相互作用、溶酶体、肠道IgA产生的免疫网络、神经活性配体与受体相互作用、单纯疱疹感染和Jak-STAT受体信号通路;维氏气单胞菌感染组长江鲟脾脏的差异表达基因主要富集于5条免疫相关的信号通路中,分别是吞噬体、细胞因子与细胞因子受体相互作用、神经活性配体与受体相互作用、溶酶体和单纯疱疹感染。最后,随机挑选6个免疫相关的差异表达基因(LTBR、MHC2、Integrin、CD40L、V-type ATPase和CDH3)进行实时荧光定量PCR验证,发现荧光定量PCR与转录组分析结果的表达趋势基本一致,从而证明了转录组测序结果的可靠性。3.为探究嗜水气单胞菌感染对长江鲟肠道菌群的影响,采用Illumina Miseq高通量测序技术比较分析了嗜水气单胞菌感染组(患病组)和对照组(健康组)长江鲟肠道菌群的差异。基于Unweighted unifrac距离算法的主成分分析(PCoA)比较健康组和患病组长江鲟肠道菌群的结构差异。结果显示,健康组和患病组长江鲟的肠道菌群分布于不同的聚类群,表明嗜水气单胞菌感染对长江鲟肠道菌群结构造成了明显的改变。进一步分析表明,患病组长江鲟的肠道菌群Alpha多样性指数(Invsimpson index)显著性低于健康组(P<0.05)。群落组成分析表明,患病组长江鲟肠道菌群中梭杆菌门(Fusobacteria)、软壁菌门(Tenericutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度明显高于健康组,而厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)丰度明显低于健康组。最后,对健康组和患病组长江鲟肠道菌群中的差异物种进行组间Wilcox秩和检验分析。结果显示,患病

关键词： 中华鲟   单个免疫相关受体蛋白   肿瘤坏死因子受体相关因子   免疫反应  

摘要： 中华鲟是我国古老的珍稀鱼类之一，是处在硬骨鱼类与软骨鱼类之间，在物种进化的位置最为独特。随着中华鲟的人工繁殖技术不断取得成功，在人工养殖过程中，中华鲟受到不同种类疾病的侵袭，因此，免疫防护为中华鲟的疾病预防提供理论依据。单个Ig-IL-1R相关分子（SIGIRR）和肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）是toll样受体（TLR）通路中的两个重要信号转导元件。本研究对中华鲟转录组的SIGIRR和TRAF6的同源物进行了鉴定，分别命名为SIGIRR和TRAF6，并探讨了它们在致病性感染中的作用。SIGIRR的全长cDNA为3554bp，包括191bp的5''-非翻译区（UTR）、1417bp的3''-UTR和1892bp的开放阅读框（ORF）。TRAF6的全长cDNA为2555bp，由52bp的5''-UTR、871bp的3''-UTR和1974bp的ORF组成，编码587个氨基酸的蛋白质。中华鲟的TRAF6蛋白的空间结构：包含一个环型锌指结构域、两个TRAF型锌指结构域、一个螺旋线圈结构域和一个保守的C末端meprin和TRAF同源结构域。中华鲟的SIGIRR蛋白空间结构包括一个IG结构域与TIR结构域。SIGIRR和TRAF6在健康鲟的11个组织中都有广泛的表达，SIGIRR基因在肠道组织中表达量最高，在血液中的表达量最低。TRAF6在在头肾中表达量最高，表达量最低的是血液中。在使用Poly（I:C）进行模拟感染中华鲟脾脏细胞后，中华鲟SIGIRR在3h时的表达显著下调（P＜0.01），在6h上升恢复到正常水平;中华鲟TRAF6在6h至24h持续显著上调。这些结果表明SIGIRR和TRAF6在中华鲟抵御病原入侵的免疫防御中起着重要作用。本研究结果将为了解中华鲟的天然免疫反应提供有价值的信息，并有助于开发针对病原体的预防方法。　　肿瘤坏死因子（Tumornecrosisfactor，TNF）是一种重要的细胞因子，可参与细胞凋亡和坏死，机体的生理和病理等过程。本研究通过对中华鲟肿瘤坏死因子（TNF-α1，TNF-α2，TNFSR-25，TNFSR-27，TL1，Trial，TNFSR-1，RANKL，TNF-N）转录组的分析，鉴定了新的TNF家族基因。序列分析表明，TNF-α1和TNF-α2具有相似的特征，系统发育分析表明，TNF-α基因与其它物种相应的TNF-α基因簇聚在一起。所有TNF-α基因的相似性和一致性j结果分析表明肿瘤坏死因子-α基因在硬骨鱼类中是保守的。TNF-α1和TNF-α2与其它鱼类的基因具有相同的基因组结构，即4个外显子和3个内含子。这些结果表明中华鲟的TNF-α和雀鳝的TNF-α可能是从一个共同的祖先基因进化而来，并随后分化。肿瘤坏死因子家族基因广泛在组织中大量表达，表明其在免疫和非免疫组织中发挥其生物学功能。在脂多糖（LPS）和多聚肌苷酸（polyI:C）的刺激下，肿瘤坏死因子家族基因的转录本在脾细胞中呈现不同的表达变化，表明TL1与其他家族基因相比具有更强的抗病毒活性，TNF-α1和TNF-α2对细胞外病原菌的抑制作用较强，但TNF-N和RANKL在病原菌感染过程中可能起重要作用。这些基因对LPS和polyI:C的不同免疫反应结果暗示了宿主对胞外病原体的不同防御机制。

关键词： 中华鲟   卵黄沉积及水解   饲料脂肪水平   基因克隆   基因表达  

摘要： 中华鲟(Acipenser sinensis)是我国特有的大型生殖洄游性鱼类,数量稀少。为更好的保护这一珍稀资源,中华鲟的人工繁殖工作很早就已经开展。但由于养殖过程中大多数中华鲟雌性个体始终无法突破生殖障碍由II期顺利过渡到III期,这给人工增殖工作带来很大的困难。因此,研究其卵巢发育的分子机制以及影响其卵巢发育的关键营养因子至关重要。本文系统地克隆了中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的c DNA全序列,对其分子特征及功能进行了详细的分析。最后通过投喂中华鲟不同脂肪水平的饲料,根据卵巢的发育状况以及卵黄沉积及水解相关基因的表达情况来研究饲料中不同水平的脂肪对其卵巢发育的影响。研究结果如下:1.关于中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的分子鉴定及表达分析本文首次较系统地克隆得到了6个中华鲟卵黄沉积及水解关键基因(vtgr,atp6v1c1,atp6v1h,ctsb,ctsd和ctsl)的c DNA全长序列,对其c DNA及氨基酸序列进行生物信息学分析发现,我们克隆得到的6条基因(vtgr,atp6v1c1,atp6v1h,ctsb,ctsd和ctsl)的序列全长分别是3640 bp,1638 bp,1751 bp,1317 bp,1483bp和1438 bp,包括的开放阅读框分别是2568 bp,1152 bp,1434 bp,1020 bp,1191 bp和1020 bp,分别编码855,383,477,339,396和339个氨基酸。与其他脊椎动物氨基酸序列比对结果显示:相似性分别为76.4-85.7%,93.2-97.1%,93-97.7%,75.9-83.2%,66.4-92.7%和71.5-87.9%,同源性分别为70.4-81.5%,88-93.5%,89.2-94.8%,68.5-78.2%,58.9-86.1%和63.2-80.5%。结构域分析显示:中华鲟VTGR的氨基酸序列含有8个半胱氨酸富集的配体结合域(LBD),5个低密度脂蛋白受体YWTD结构域,3个类表皮生长因子结构域(EGF),1个跨膜结构域(TM)以及1个胞内域(CD)。中华鲟ATP6V1C1的氨基酸序列包括了7个酪蛋白激酶II磷酸化位点、5个N-肉豆蔻酰化位点、4个蛋白激酶C磷酸化位点、2个酪氨酸激酶磷酸化位点、2个O-糖基化位点、1个酰胺化位点和1个膜螺旋。中华鲟ATP6V1H氨基酸序列包含5个重复结构和27个α螺旋结构。中华鲟CTSB氨基酸序列包含3个半胱氨酸蛋白酶的保守活性位点(C108,H278,N298),1个氧阴离子穴(Q),1个保守的N-糖基化位点,1个GCNGG保守序列和1个闭塞环。中华鲟CTSD氨基酸序列包含1个前体域、1个天冬氨酸蛋白酶结构域、2个活性位点、2个保守的N-糖基化位点。中华鲟CTSL氨基酸序列包含1个保守ERWNIN结构域、4个催化必须残基。时空表达的结果表明:这些基因在Ⅱ、Ⅲ期的卵巢中表达量相对比较高,在其他各组织中这些基因也均有差异性表达。氨基酸同源性分析、功能结构域分析以及系统进化树分析表明:中华鲟和雀鳝相关氨基酸序列的相似性以及同源性最高,亲缘关系最近。总而言之,这些基因在进化过程中是相对较为保守的,这为我们研究其生理功能以及分子机制奠定了基础。2.不同脂肪水平的饲料对中华鲟亲鱼卵巢发育的影响为研究饲料脂肪对中华鲟卵巢发育的影响,本研究分别用三种含不同脂肪水平(10%、14%、18%)的饲料进行性腺II期的中华鲟雌鱼培育。养殖一年后检测3组鱼的性腺发育推进程度以及卵黄沉积及水解相关的基因表达情况。结果表明:性腺分期的推进程度、卵巢厚度(d)以及卵巢区域比例(Po)都随着饲料中脂肪增加而增加,甚至在18%脂肪组中有2尾雌鱼卵巢直接进入III期。经卡方检验分析,性腺分期的推进程度与饲料中脂肪添加量显著相关。基因表达结果显示,饲料中脂肪显著上调了卵黄沉积及水解关键基因的表达水平。本研究初步解析中华鲟卵黄沉积及水解关键基因的分子特征及功能,为进一步探究中华鲟卵巢发育的分子机制奠定基础的同时也可以为研究亲鱼营养以及中华鲟的繁育与保护提供新的思路。

关键词： 中华鲟   性腺发育   血清代谢   养分沉积   能量代谢  

摘要： 自上个世纪八十年代葛洲坝等水利工程的修建以来,野生中华鲟数量急剧下降,为了保护中华鲟物种资源,中华鲟的人工繁殖早已开展。遗憾的是,人工繁殖中华鲟的雌性亲本性腺难以发育成熟,其背后的生理机制仍不清楚,温度、光照、营养等都可能是阻碍其性腺发育成熟的因素。本实验从亲鱼营养与代谢角度对性腺发育分别处于Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期的雌性中华鲟进行研究:首先对血清生化指标和代谢组学进行分析;然后进行肌肉组织学观察及相对脂滴含量分析,并分析卵巢(卵粒)组织学,卵巢能量(AMPK)代谢、脂代谢、卵黄蛋白沉积及精氨酸代谢相关基因表达。综合这两部分研究探明中华鲟雌鱼在卵巢发育期间的养分沉积、机体代谢响应及相关机制。结果显示:1在中华鲟卵巢发育Ⅱ期至Ⅳ期过程中,血清中总蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白以及大量氨基酸含量都在Ⅱ期和/或Ⅲ期较高,因此卵巢营养物质的蓄积可能主要是在Ⅱ期和Ⅲ期;在性腺发育至Ⅳ期左右,血清中脂氧素、叶酸生物合成相关代谢物、丙氨酸、组氨酸以及牛磺酸含量相对较高,这些物质可能在卵母细胞的最终成熟以及排卵方面发挥其特殊的生理功能。2在雌性中华鲟性腺发育II期至IV期过程中,卵母细胞体积剧烈增大,大量脂滴和卵黄蛋白沉积其中,同时肌肉切片中脂滴相对面积随着卵巢发育显著下降,表明肌肉中的脂滴有可能迁移到性腺。3卵巢中AMPK调控、脂代谢以及卵黄蛋白沉积相关基因表达情况证明,雌性中华鲟性腺发育II期至III期过程中,由于脂滴和卵黄蛋白的大量沉积,卵巢组织对能量的需求也随之增加,卵母细胞中脂质生成和脂质分解都处于活跃的动态变化中,以维持整体的代谢平衡。4精氨酸代谢相关基因表达情况证明,精氨酸可能是雌性中华鲟性腺发育过程中非常重要的氨基酸,这与其合成多胺类物质、合成肌酸等多种生理功能有关。本研究的开展可为探究中华鲟雌鱼性腺成熟的调控机制提供理论依据,并有助于解决雌性中华鲟卵巢发育障碍。

关键词： 中华鲟   种群生存力   栖息地适宜性   性比   种群资源量  

摘要： 中华鲟(Acipenser sinensis)是国家一级保护动物,其繁殖和生存受到越来越大的关注。2003年,世界上最大的水电站三峡工程建成并开始运行,改变了产卵场的水温和水文节律,对中华鲟种群产生了深远的影响。虽然自上世纪80年代以来,国内广泛开展了关于中华鲟的相关研究,但目前为止仍然缺乏有关三峡工程对中华鲟种群生存和繁殖的系统的、长时间尺度的影响研究。为探究中华鲟种群资源不断衰退原因,本研究结合中华鲟种群动态的时间变化,重点分析了中华鲟种群衰退的主导因素,以及中华鲟种群对栖息地环境变化的响应。并利用二维水动力学模型模拟了三峡工程对中华鲟栖息地适合度变化及其繁殖的影响;利用漩涡模型和种群矩阵模型模拟预测了环境变动下中华鲟的种群动态。本研究结果可为进一步保护中华鲟种群资源提供理论基础和科学支撑。主要研究结果如下:(1)中华鲟繁殖群体数量变动研究表明:人为活动对种群的影响在逐年加剧。而中华鲟繁殖群体资源量在加剧的人为活动影响下进一步下降,自2011年开始下降到50尾以下并仍逐年降低,根据50/500理论法则,种群将不能维持长时间的持续生存。(2)中华鲟栖息地研究表明:大坝运行至少需要达到10000 m3/s流量才能提供适合的中华鲟产卵环境,达到17000 m3/s时可为中华鲟提供最佳的产卵场条件。三峡工程蓄水引起中华鲟产卵场繁殖季节流量显著下降,导致中华鲟栖息地适宜性面积不断减小,限制了中华鲟的自然繁殖规模。栖息地适宜性的改变是2002年以后影响中华鲟繁殖的主要因素。因此,通过生态调度恢复中华鲟种群的栖息地适宜度是促进中华鲟种群恢复的重要手段。(3)中华鲟种群生存力研究表明:2010年以后,随着参与繁殖的雌鲟比例和雌雄性比的升高,种群增长率出现了升高的趋势。因此,雌雄性比的偏倚可能是中华鲟种群应对环境变化的生存对策。而对种群增长率影响最大的因素是雌鱼参与繁殖活动的比例,其次是捕捞影响,最后是雄雌性比。因此,通过生态调度提供最适的产卵场环境以达到最大数量的雌鱼参加繁殖活动是目前促进中华鲟种群自然恢复的最可行手段。(4)中华鲟种群瞬态动力学研究表明:中华鲟种群受到干扰后,种群动态在一定时期内波动,最终恢复到稳定水平。对于种群瞬态动力学而言,叠加的不确定因素延长了种群恢复到稳定水平的时间,2003年以后逐渐加剧的人为活动促使中华鲟种群变动幅度加剧。因此,三峡工程蓄水造成的中华鲟繁殖期产卵场流量变化以是造成中华鲟种群动态进一步下降的主要原因。干扰分析还表明增加20-30龄雌鲟个体数量或者促进这阶段雌鲟个体的生长是促进中华鲟恢复的最有效手段,而增加1-5龄的雌鲟个体则会促使种群进一步衰退。总之,三峡工程的运行使得中华鲟产卵场的适宜性下降,影响了中华鲟的繁殖活动。而三峡工程的影响叠加其他人为活动以及葛洲坝的影响,使得中华鲟种群恢复到稳定状态的时间延长,种群动态下降幅度增大,是近年中华鲟种群进一步衰退的主导因素。通过生态调度消除三峡工程运行的影响是维持中华鲟种群生存的最有效和最可行的手段。

摘要： 11月28日,农业农村部与中国长江三峡集团有限公司在湖北宜昌联合开展中华鲟增殖放流活动,共放流大规格子二代中华鲟150尾。农业农村部部长韩长赋、三峡集团董事长雷鸣山出席活动。韩长赋强调,要深入贯彻习近平生态文明思想,落实总书记重要指示精神,切实抓好中华鲟等珍稀物种抢救保护,加力推进长江水生生物保护工作,争取早日重现长江清水绿岸、鱼翔浅底的美丽景象。