关键词： 中华鲟   蛋白酶抑制剂   大肠杆菌   毕赤酵母   蛋白酶   抑制活性   cDNA表达  

摘要： 为了研究鱼类半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)的功能，探索其在水产品加工和病害防治中的应用潜力以及大量生产的技术途径，本实验利用基因工程技术，实现了中华鲟(Acipenser sinensis)cystatin在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达，得到了具有生物活性的重组中华鲟cystatin。 \n l 中华鲟cystatin在大肠杆菌中的表达利用PCR技术对中华鲟cystatin cDNA进行改造，并将改造后的编码中华鲟cystatin成熟肽的cDNA定向重组于大肠杆菌表达质粒pBV220，转化大肠杆菌：DH5α，构建重组工程菌。该工程菌经温度诱导、SDS-PAGE检测，在约l2.4 kD处有一特异蛋白带，该特异蛋白的含量约为菌体总蛋白的29％，实现了中华鲟cystatin在大肠杆菌中的高效表达。木瓜蛋白酶活性抑制实验结果表明，该重组cystatin具有明显的酶活抑制作用，lμg重组中华鲟cystatin约能抑制3μg木瓜蛋白酶的水解活性。 \n 2 中华鲟cystatin在毕赤酵母中的分泌表达将PCR改造后的编码成熟肽中华鲟cystatin的基因亚克隆到毕赤酵母整合型表达载体pPICZαA，氯化锂法转化毕赤酵母菌株GS 115，构建表达cystatin的酵母工程菌。经甲醇诱导、SDS-PAGE检测培养基上清液，实现了中华鲟cystatin在毕赤酵母中的表达。为进一步开展重组中华鲟cystatin发酵条件的研究，本实验对三种诱导方法进行了比较，并从诱导时间和培养基的pH值两方面对重组菌表达量的影响作了研究。结果表明，采用单培养基法，诱导72h，培养基pH值为6.5时，可达到较好的表达效果。重组cystatin表达量可达每升培养基215mg，约占培养基上清总蛋白量的76.3％。经离子交换层析法纯化后，重组蛋白的纯度达94.

关键词： 中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂   毕赤酵母   表达   活性   鱼类   生物防御作用  

摘要： 为研究鱼类半胱氨酸蛋白酶抑制剂 (Cystatin)的功能并探索其在水产加工和病害防治中的应用潜力 ,将PCR改造后的编码成熟肽中华鲟 (Acipensersinensis)cystatin基因亚克隆到毕赤酵母整合型表达载体pPICZαA ,氯化锂法转化毕赤酵母菌株GS115 ,构建表达cystatin的酵母基因工程菌。经甲醇诱导、SDS PAGE检测培养基上清液 ,表明中华鲟cystatin在毕赤酵母中实现了高效表达 ,重组cystatin表达量约为 2 15mg·L- 1 。纯化后重组蛋白纯度达94 .2 %。生物活性检测结果表明 ,1μg重组中华鲟cystatin约能抑制 15

关键词： 中华鲟   配合饲料   蛋白质含量   蛋白能量比  

摘要： 以酪蛋白和明胶为蛋白源 ,添加豆油、鱼油、糊精、纤维素以及适量的维生素和矿物质混合剂配制试验饲料 ,饲料配成5个蛋白质水平 ,每个蛋白水平分别包括5个能量级 ,以体质量增长倍数、蛋白质效率和饲料系数为评判依据 ,对体质量为8.73g±0.79g的中华鲟(Acipensersinensis)的适宜蛋白质含量及其蛋白能量比进行了研究。经过为期8周的试验 ,结果表明 :中华鲟幼鲟配合饲料中的适宜蛋白质含量范围为35.7%～41.8% ,饲料的最佳蛋白能量比范围为21.85～30.05ng/J。当试验饲料蛋白质含量为40.3% ,蛋白能量比为27.85ng/J时 ,试验鲟鱼获得最大体质量增长倍数为11.60±1.20,最低的饲料系数为1.68±0.23,以及最高的蛋白质效率为1.58%±0.14%。

关键词： 白鲟   救护车   中华鲟   长江上游   水产研究所   挽歌   长江流域   人工饲养   渔政部门   消炎药  

摘要： [背景资料]白鲟是距今一亿五千万年前中生代白垩纪残存下来的极少数远古鱼类之一,分布极为狭窄,全世界只有我国才有,集中分布在长江流域一带,被誉为“长江中的活化石”,极具学术研究价值,属我国一级保护野生动物。白鲟的吻长达到身体的一半,又称“象鱼”,是淡水鱼家族中的第一?（共4页)

关键词： 中华鲟   人工养殖   生活习性   生物学特征  

关键词： 中华鲟   鲟鱼类   千克   保护动物   生长发育   长江   幼鱼   易危   淡水   江河  

关键词： 室内试养   大规模养殖   中华鲟  

关键词： 中华鲟   夜间血压   高血压病人   白鳍豚   按揉   长廊   脂蛋白  

关键词： 中华鲟   放流   长江口   扬子江口   渔民  

关键词： 长江口   扬子江口   渔民   靖江市   渔政  

摘要： 2003年元月6月晚9时左右,江苏省靖江市渔民张灿荣、顾贵清在长江新港段江面东南3—4公里处下网捞蟹苗,收第2网时收上一条将网底搅缠成一团的中华鲟鱼。张灿荣率先发现了鱼脊上的标志牌,他猜这是国家保护动物。当日是靖江市自1986年以来温度最低的一天,陆地气温降至零下5℃—6℃,在无