关键词： 中药   制剂   概述  

摘要： 目的：概述中药制剂分析。方法探讨中药制剂分析的意义、任务、特点。结论中药制剂分析的难度更大，要求仪器的灵敏度更高。

关键词： 黄曲霉毒素B1   克雷伯氏杆菌   去除菌筛选   白酒糟   固态发酵饲料   色谱检测  

摘要： 黄曲霉毒素（AFT）是一类真菌产生的有毒次级代谢产物，被世界卫生组织（WHO）划分为I类致癌物。其中，黄曲霉毒素B1（AFB1）毒性居首位。目前，黄曲霉毒素污染已经成为一个全球性问题，在我国的情况尤为严重。酒糟作为一种优良的饲料来源，近年来被广泛应用为饲料添加剂。然而，其储存不当极易受AFB1的污染，而被污染的酒糟如果不经处理，会通过食物链最终进入动物性食品和人体，危害食品安全和人类健康。如何高效去毒已经成为制约酒糟饲料化应用的一大障碍。目前，利用生物法进行污染饲料脱毒是该领域的研究热点。本文首先从环境中分离、筛选能够去除AFB1的优良菌株，然后将其应用于AFB1污染的白酒糟固体发酵过程中，并探索能使该菌对AFB1去除率达到最大的发酵条件，希望能通过该菌株的作用将有毒白酒糟转化为安全低毒饲料，从而为白酒糟的饲料化安全应用消除障碍。本文主要研究结论如下：\n 1.从土壤中筛选到一株能够去除AFB1的菌株—克雷伯氏杆菌（Klebsiella pneumoniae），其菌液与AFB1共同反应后，去毒率可达48.52%。研究还发现该菌株主要是通过细胞发挥去毒作用，细胞经加热和2mol/L的浓盐酸处理后，细胞去毒率由处理前的35.23%分别提升至52.25%和45.46%。\n 2.从样品提取、净化、液相色谱检测条件等方面进行优化，建立了系统的白酒糟AFB1液相色谱(HPLC)检测方法：取白酒糟样品粉末20g,按1:5（W/V）的比例加入100mL70%甲醇，同时加入5gNaC l，超声提取30min,超声功率为500W,过滤，调整滤液pH为7，滤液经免疫亲和柱净化，收集液水浴氮气吹干，加入200μL正己烷和100μL三氟乙酸室温下衍生30min，水浴氮气吹干，加入乙腈复溶，HPLC检测，液相检测条件如下，荧光检测器最大激发波长为360nm；最大发射波长为440nm。流动相为体积比为1：3：6的甲醇-乙腈-水三相体系。流速为0.6mL/min，柱温30℃，进样量为20μL。\n 在此色谱条件下，以浓度为5μg/L至500μg/L标准品衍生后建立的标准曲线线性良好，相关系数达到0.9999。加标量为10μg/L、20μg/L、50μg/L的酒糟样品经此方法检测后回收率均在85%以上，按三倍的信噪比确定的该方法检测限为1.5ng/mL，RSD值均小于5%，各项条件均符合国家规定，说明该方法准确可信。\n 3．将克雷伯氏杆菌（Klebsiella pneumoniae）应用于AFB1污染的白酒糟中进行固态发酵，并探索其最优脱毒条件如下：温度为35℃，pH为7，接种量为10%，发酵时间为72h条件下，菌株对白酒糟AFB1去除率达到最大值41%。

关键词： DNA修饰金电极   黄曲霉毒素B1   电化学生物传感   检测方法  

摘要： 黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1, AFB1),被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌物的毒素,它的危害已经危及到了全世界人民的公共安全,世界各国也都已经在关注 AFB1的污染问题。各国都制订了针对各国不同国情的规章制度,以限定 AFB1在食品及动物饲料中的含量。同时,各国的科研工作者也都在为研究更快,更简易的AFB1检测设备以及检测方法。\n 本论文的主要工作包括:\n 1. AFB1单克隆抗体修饰金电极制备AFB1免疫传感器\n 制备了快速检测黄曲霉毒素B1的黄曲霉毒素B1抗体@纳米金修饰金电极电化学传感器单元。实验选用循环伏安法(CV)和示差脉冲伏安法(DPV)研究黄曲霉毒素B1在修饰电极上的电化学响应,确定了该传感器测定黄曲霉毒素B1的最优实验条件(黄曲霉毒素B1单克隆抗体的最适修饰条件为4℃、8 h,PBS缓冲溶液的最适pH值为7.4),建立了测定黄曲霉毒素B1的电化学方法,其线性方程为:i(μA)=0.02166 C+18.8682,线性相关系数R=0.9997;线性检测范围为1.427~150 ng mL-1,对不同猪饲料样品检测的加标回收率在94.44~101.36%。\n 2.基于电化学ssDNA损伤传感对饲料中黄曲霉毒素B1的检测\n 构建了一种快速、简便、价廉的检测黄曲霉毒素 B1(AFB1)的新型电化学DNA生物传感器,实现对AFB1的快速检测。试验中采用电化学方法为分析方法,对试验条件进行优化,并据最优化条件建立了标准曲线、检测样品。试验最终得出的最优化条件为:ssDNA于4℃下在裸电极上自组装14 h,ssDNA-Au电极与cDNA的杂交时间为2 h,然后得到dsDNA-Au电极,以60μM亚甲基蓝(Methylene blue, MB)为电化学活性指示剂,pH=7.0,0.2 M磷酸盐缓冲溶液(PBS)配制的铁氰化钾溶液为缓冲底液,不同浓度的AFB1对电极的损伤时间为9 min,不同浓度的AFB1对电极的损伤温度为37℃。该方法对AFB1的线性检测范围为21.839~800 ng mL-1,加标回收实验的回收率在98.34%~101.68%。建立的电化学DNA损伤方法可以实现对AFB1快速、简便、准确的定量检测。\n 3.基于电化学dsDNA损伤传感对饲料中黄曲霉毒素B1的检测\n 构建了一个以亚甲基蓝为电活性指示剂的电化学DNA检测系统。将巯基修饰的dsDNA固定在金电极上,通过探讨dsDNA在金电极表面的自组装、MB及黄曲霉毒素浓度对响应信号的影响等,讨论了传感体系的检测限及特异性。将固定好dsDNA的金电极与黄曲霉毒素B1的溶液进行反应,由于黄曲霉毒素B1与DNA的相互作用,通过与黄曲霉毒素B1反应前后电信号的变化,可以确定目标溶液中黄曲霉毒素B1的量。在对MB的浓度、反应底液的pH值以及温浴的时间和温度等优化后的条件下,黄曲霉毒素B1的浓度在12.458~500 ng mL-1范围时,经AFB1损伤前后的峰电流差值与lg(CAFB1)之间的关系满足线性关系,线性相关系数 R=0.9970,加标回收实验的回收率在95.98%~104.57%。说明实验室所建立的方法可以实现对AFB1快速、简便、准确的定量检测。

关键词： 中药制剂   不良反应   分析  

摘要： 目的:探讨中药制剂不良反应的发生情况及其特点。方法:对我院2008年1月至2012年1月期间发生的不良反应报告进行回顾性分析,分析发生不良反应患者的性别、年龄、制剂类型、累及系统及其临床表现。结果:中药制剂不良反应呈现逐年增加趋势;女性所占比例明显高于男性,为70.13%;>60岁患者不良反应构成高于其他年龄段,为39.93%;注射剂型不良反应占62.41%,高于其他剂型;最常见累及系统是皮肤及黏膜。结论:注意不良反应的及时反馈,在临床用药过程中加强不良反应的观察与监测,可有效减少并避免不良反应的发生,从而提高中药制剂的使用安全性。

关键词： 生产企业   中药制剂   中药饮片   平谷区   北京市   监管   食品药品监督管理局   食药  

摘要： 日前，为加强对中药饮片及中药制剂生产企业的监管，北京市平谷区食品药品监督管理局采取多项措施确保质量安全。

关键词： 高效液相色谱串联质谱   多反应监测   黄曲霉毒素B1   黄曲霉毒素M1   脱氧雪腐镰刀菌烯醇   赭曲霉毒素A   玉米赤霉烯酮   花生及制品  

摘要： 建立了高效液相色谱-串联质谱（***／MS）测定花生及制品中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮五种真菌霉素的快速分析方法。用甲醇．水（55：45，V／V）对样品进行提取，采用真菌毒素免疫亲和柱萃取，在ESI＋模式下采用多反应监测（MRM）模式进行检测。目标物在C18色谱柱上实现了有效分离，在6minffq完成一个样品的分析，相关系数（r2，n=6）大于0．999，检测结果稳定，灵敏。黄曲霉毒素Bl、黄曲霉毒素Ml、脱氧雪腐镰刀菌烯醇线性范围0．5-50．0μg／L，检出限为0．05μg／kg（LOD，S／N=3），赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮线性范围5．0---100．0μg／L，检出限为0．5μg／kg（LOD，S／N=3），方法回收率为86．8～102．7％，精密魔RsD为0．360．79％。该方法快速、灵敏，适用于花生及制品中黄曲霉毒素Bl、黄曲霉毒素M1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮五种真菌霉素的检测与确证。

关键词： 干细胞   骨髓干细胞   骨髓间充质干细胞   中药   心肌样细胞   三七总皂苷   加味丹参饮   淫羊藿苷   黄芪甲苷  

摘要： 背景:中药具有临床应用安全性高等特点,目前已有很多研究应用中药或单体成分体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化。目的:总结、分析中药诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究进展,并展望其应用前景。方法:应用计算机检索CNKI数据库中2001年1月至2013年1月关于中药诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的文章,以"中药;骨髓间充质干细胞;心肌细胞"或"bone marrow mesenchymal stem cells,myocardial cells"为检索词进行检索,排除陈旧及重复实验文章,重点对36篇文献进行分析。结果与结论:经三七总皂苷、丹酚酸B、加味丹参饮、淫羊藿苷、黄芪甲苷等不同的中药诱导制剂诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化,诱导后细胞免疫组化和RT-PCR检测结果显示肌细胞纤维蛋白、心肌肌钙蛋白I和主要组织相容性复合体表达均呈阳性,阳性细胞呈梭形和成纤维细胞样形态,即表明有促进增殖分化的作用。结果显示中药诱导骨髓间充质干细胞定向分化为心肌细胞已成为国内外该领域的研究热点,为临床治疗心肌梗死等缺血性心脏病提供理论基础。

关键词： 超滤质谱筛选   中药提取物   α-葡萄糖苷酶抑制剂   糖尿病   化学成分  

摘要： 中药中含有的化学成分极为复杂，且中药的药理作用机制往往基于多种活性成分与多个靶点之间相互协同作用，中药药效物质基础和药理学机制需要进行深入一步的研究。目前研究表明，核酸、蛋白质、酶等生物活性大分子在人体的生命活动中起着十分重要的作用，以生物活性为导向，研究中药小分子与生物活性大分子之间的相互作用，有助于从分子水平阐明中药发挥药效的物质作用基础。同时，这些生物活性大分子也是药物在体内进行作用的靶分子，因此以生物活性大分子作为药物靶点分子，以中药小分子与药物靶点大分子之间的相互作用为基础，建立快速、简单、高通量的中药活性成分筛选方法，在中药现代化、新药研发中具有重要的意义和应用价值。\n 本论文选取的生物靶分子为糖尿病相关的作用靶点——α-葡萄糖苷酶，利用光谱学方法和质谱方法评价中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，并利用超滤技术结合液相色谱-质谱技术，对中药提取物中潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂进行了筛选、鉴定，具体研究内容如下:\n 首先，我们利用了两种体外酶活性测定方法（光谱学方法和质谱方法）评价中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。光谱学方法是以pNPG为底物，利用紫外分光光度计检测产物PNP的生成量从而测定α-葡萄糖苷酶的活性，评估18种天然产物单体、45种中药提取物和3种中成药对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。质谱方法是以麦芽糖为底物，利用质谱方法对产物葡萄糖进行定量分析从而测定α-葡萄糖苷酶的活性，利用质谱方法对葡萄糖进行定量分析可以避免传统检测方法带来的假阳性和假阴性结果。通过对6种黄酮类天然产物单体对α-葡萄糖苷酶抑制作用的评价，验证了质谱方法的有效性和可行性，同时利用质谱方法进一步评估了16种中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，研究结果为超滤质谱筛选奠定了初步的研究基础。\n 利用超滤技术从对α-葡萄糖苷酶抑制作用良好的中药提取物中筛选出了潜在的活性成分，并通过液相色谱-质谱对这些活性小分子化合物进行了结构鉴定，为寻找和研发新型、有效、低毒副作用的α-葡萄糖苷酶抑制剂提供了进一步的分子水平的理论研究依据。我们从虎杖、大黄、何首乌、钩藤、防己、牡丹皮这六种传统中药中筛选得到了28种潜在的α-葡萄糖糖苷酶抑制剂，包括8种蒽醌类化合物、6种二苯乙烯类化合物、7种生物碱类化合物以及黄酮类和酚酸类等化合物。\n 研究结果表明，利用光谱学方法和质谱方法可以很好的评估化合物和中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，同时结合超滤质谱技术从传统中药中筛选出潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂，此方法快速、灵敏、具有高通量的特点，对新型、有效、低毒副作用的α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选和研发具有重要的意义和应用价值。

关键词： 工作工程   录像观察反馈法   中药制剂教学模式   调查问卷  

摘要： 目的探讨基于工作过程运用录像观察反馈法的中药制剂教学模式的教学效果及优势。方法采用个体内差异评价法设计调查问卷,调查中药专业2009级118名学生,让学生在教学模式培养前、教学模式培养中、教学模式培养后进入实习就业三个阶段对教学模式进行价值判断,每次118人次,共发放调查问卷354份,回收有效问卷354份,调查结束后,在对调查问卷采用百分比、频数进行简单的定量分析后,使用统计软件对结果进行统计分析。结果培养前学生对改革现有中药制剂教学模式的认识各条目中回答"希望"与"不希望"间比较,差异有统计学意义(P<0.05);培养中学生对采用基于工作过程录像观察反馈法的效果评价条目中回答"有"与"不确定"间比较,差异有统计学意义(P<0.05);培养后学生进入实习阶段对采用基于工作过程录像观察反馈法的效果评价条目中回答"满意"与"不确定"间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论学生希望改变以课堂讲授为主的现有教学模式,希望采用基于工作过程运用录像观察反馈法教学模式,认为基于工作过程运用录像观察反馈法能够提高学习积极性、学习能力及创新能力,对实践能力、就业能力有积极影响。本文认为基于工作过程运用录像观察反馈法具有明显的教学效果及优势,应进一步完善并推广该教学模式。

关键词： 傅里叶变换红外光谱   中药   寒热药性   模式识别  

摘要： 对60种植物类中药提取物的红外光谱药性特征标记及其模式识别模型进行评价筛选。利用傅里叶变换红外光谱结合(linear discriminant analysis,LDA),(logistic discriminant analysis,Logistic-DA),(principal component analysis-linear discriminant analysis,PCA-LDA),(partial least-squares discriminant analysis,PLS-DA),(random forest,RF),(support vector machine,SVM)六种模式识别技术进行研究。水提取组采用加热回流提取1.5h,无水乙醇、氯仿、石油醚提取组采用室温超声提取45min。首先分别建立六种模式识别模型,然后采用四种统计方法综合识别,包括60味中药组内回代、60味中药10次迭代5折交叉验证、48味中药训练集、12味中药测试集。选取组内回代识别正确率、交叉验证识别正确率、组外预测正确率同时很高,且理论图谱反映寒热中药原始图谱分布特征者为适宜模型。LDA和SVM是水提取物红外光谱的适宜模式识别模型,LDA是无水乙醇提取物红外光谱的适宜模式识别模型,SVM是氯仿提取物红外光谱的适宜模式识别模型,石油醚提取识别效果不佳。结论:根据适宜识别模型,通过红外光谱数据可识别表征中药寒热成分和寒热程度的特征参数,寒热成分特征参数为与红外光谱吸收位置波谱相对应的识别模型的识别系数,识别系数大于零为寒性标记,识别系数小于零为热性标记;寒热程度特征参数为识别模型的识别得分,得分越大(正值)则寒性越强,得分越小(负值)则热性越强。