关键词： 超滤质谱筛选   中药提取物   α-葡萄糖苷酶抑制剂   糖尿病   化学成分  

摘要： 中药中含有的化学成分极为复杂，且中药的药理作用机制往往基于多种活性成分与多个靶点之间相互协同作用，中药药效物质基础和药理学机制需要进行深入一步的研究。目前研究表明，核酸、蛋白质、酶等生物活性大分子在人体的生命活动中起着十分重要的作用，以生物活性为导向，研究中药小分子与生物活性大分子之间的相互作用，有助于从分子水平阐明中药发挥药效的物质作用基础。同时，这些生物活性大分子也是药物在体内进行作用的靶分子，因此以生物活性大分子作为药物靶点分子，以中药小分子与药物靶点大分子之间的相互作用为基础，建立快速、简单、高通量的中药活性成分筛选方法，在中药现代化、新药研发中具有重要的意义和应用价值。\n 本论文选取的生物靶分子为糖尿病相关的作用靶点——α-葡萄糖苷酶，利用光谱学方法和质谱方法评价中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，并利用超滤技术结合液相色谱-质谱技术，对中药提取物中潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂进行了筛选、鉴定，具体研究内容如下:\n 首先，我们利用了两种体外酶活性测定方法（光谱学方法和质谱方法）评价中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。光谱学方法是以pNPG为底物，利用紫外分光光度计检测产物PNP的生成量从而测定α-葡萄糖苷酶的活性，评估18种天然产物单体、45种中药提取物和3种中成药对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。质谱方法是以麦芽糖为底物，利用质谱方法对产物葡萄糖进行定量分析从而测定α-葡萄糖苷酶的活性，利用质谱方法对葡萄糖进行定量分析可以避免传统检测方法带来的假阳性和假阴性结果。通过对6种黄酮类天然产物单体对α-葡萄糖苷酶抑制作用的评价，验证了质谱方法的有效性和可行性，同时利用质谱方法进一步评估了16种中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，研究结果为超滤质谱筛选奠定了初步的研究基础。\n 利用超滤技术从对α-葡萄糖苷酶抑制作用良好的中药提取物中筛选出了潜在的活性成分，并通过液相色谱-质谱对这些活性小分子化合物进行了结构鉴定，为寻找和研发新型、有效、低毒副作用的α-葡萄糖苷酶抑制剂提供了进一步的分子水平的理论研究依据。我们从虎杖、大黄、何首乌、钩藤、防己、牡丹皮这六种传统中药中筛选得到了28种潜在的α-葡萄糖糖苷酶抑制剂，包括8种蒽醌类化合物、6种二苯乙烯类化合物、7种生物碱类化合物以及黄酮类和酚酸类等化合物。\n 研究结果表明，利用光谱学方法和质谱方法可以很好的评估化合物和中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，同时结合超滤质谱技术从传统中药中筛选出潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂，此方法快速、灵敏、具有高通量的特点，对新型、有效、低毒副作用的α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选和研发具有重要的意义和应用价值。

关键词： 奶牛乳房炎   试验动物   治疗   中药制剂   林可霉素   临床型乳房炎   常见疾病   黑白花奶牛  

摘要： 1试验动物、分组及材料 奶牛乳房炎是奶牛最常见疾病之一，也是对奶牛业危害最大的疾病。本试验从2010年1月～2012年12月在黑龙江省查哈阳农场辖区内个体奶牛场饲养的黑白花奶牛，年龄在4～7岁，正在泌乳期，发生临床型乳房炎的病牛80头，随机分为2组，每组40头。试验1组使用“林可霉索”、“万乳康”、“乳康灵”治疗奶牛乳房炎，试验2组使用“无抗噻呋头孢”、“万乳康”、“乳康灵”治疗奶牛乳房炎。

关键词： 稳心颗粒   X射线衍射   傅里叶指纹图谱   中药制剂  

摘要： 目的建立稳心颗粒制剂的鉴定分析新方法。方法采用X射线衍射傅里叶(Fourier)指纹图谱法。结果对1个稳心颗粒样品进行试验,获得了其X射线衍射傅里叶指纹图谱及特征标记峰值。结论 X射线衍射傅里叶指纹图谱法可用于稳心颗粒的鉴定分析。

关键词： 喷雾干燥   条件   中药制剂  

摘要： 根据使用YC-015实验型喷雾干燥机的情况,总结中药鲜品榨汁或复方提取液一般使用条件为风机设定50,通针设定10,蠕动泵设定45,进风温度160℃,出风温度100℃,通过观察出粉的物理状态进行调节。

关键词： 黄曲霉毒素B1   克雷伯氏杆菌   去除菌筛选   白酒糟   固态发酵饲料   色谱检测  

摘要： 黄曲霉毒素（AFT）是一类真菌产生的有毒次级代谢产物，被世界卫生组织（WHO）划分为I类致癌物。其中，黄曲霉毒素B1（AFB1）毒性居首位。目前，黄曲霉毒素污染已经成为一个全球性问题，在我国的情况尤为严重。酒糟作为一种优良的饲料来源，近年来被广泛应用为饲料添加剂。然而，其储存不当极易受AFB1的污染，而被污染的酒糟如果不经处理，会通过食物链最终进入动物性食品和人体，危害食品安全和人类健康。如何高效去毒已经成为制约酒糟饲料化应用的一大障碍。目前，利用生物法进行污染饲料脱毒是该领域的研究热点。本文首先从环境中分离、筛选能够去除AFB1的优良菌株，然后将其应用于AFB1污染的白酒糟固体发酵过程中，并探索能使该菌对AFB1去除率达到最大的发酵条件，希望能通过该菌株的作用将有毒白酒糟转化为安全低毒饲料，从而为白酒糟的饲料化安全应用消除障碍。本文主要研究结论如下：\n 1.从土壤中筛选到一株能够去除AFB1的菌株—克雷伯氏杆菌（Klebsiella pneumoniae），其菌液与AFB1共同反应后，去毒率可达48.52%。研究还发现该菌株主要是通过细胞发挥去毒作用，细胞经加热和2mol/L的浓盐酸处理后，细胞去毒率由处理前的35.23%分别提升至52.25%和45.46%。\n 2.从样品提取、净化、液相色谱检测条件等方面进行优化，建立了系统的白酒糟AFB1液相色谱(HPLC)检测方法：取白酒糟样品粉末20g,按1:5（W/V）的比例加入100mL70%甲醇，同时加入5gNaC l，超声提取30min,超声功率为500W,过滤，调整滤液pH为7，滤液经免疫亲和柱净化，收集液水浴氮气吹干，加入200μL正己烷和100μL三氟乙酸室温下衍生30min，水浴氮气吹干，加入乙腈复溶，HPLC检测，液相检测条件如下，荧光检测器最大激发波长为360nm；最大发射波长为440nm。流动相为体积比为1：3：6的甲醇-乙腈-水三相体系。流速为0.6mL/min，柱温30℃，进样量为20μL。\n 在此色谱条件下，以浓度为5μg/L至500μg/L标准品衍生后建立的标准曲线线性良好，相关系数达到0.9999。加标量为10μg/L、20μg/L、50μg/L的酒糟样品经此方法检测后回收率均在85%以上，按三倍的信噪比确定的该方法检测限为1.5ng/mL，RSD值均小于5%，各项条件均符合国家规定，说明该方法准确可信。\n 3．将克雷伯氏杆菌（Klebsiella pneumoniae）应用于AFB1污染的白酒糟中进行固态发酵，并探索其最优脱毒条件如下：温度为35℃，pH为7，接种量为10%，发酵时间为72h条件下，菌株对白酒糟AFB1去除率达到最大值41%。

关键词： 抗病毒药   中药制剂   儿茶提取物   药物提纯  

摘要： 目的：目前临床上使用的抗甲型流感病毒药物，由于存在易产生耐药性、不良反应大以及对宿主的毒副作用等缺陷，需发现新的抗流感病毒药物，以解决目前流感防治面临的问题。为此，本实验拟从中草药中筛选抗甲型流感病毒药物，在此基础上，研究中药儿茶水提物的抗流感病毒作用，并对其作用机制进行初步研究。\n 方法：⑴提取抗病毒药物。分别以水提和醇提的方式提取15种药材。首先将药材粉碎，分别称取25g用于水提和醇提。水提时，先用500ml超纯水浸泡24h，然后回流提取两次（料液比:1∶20，提取温度:90℃，提取时间:2h），药液经浓缩、过滤、除菌后保存于-20℃;醇提时，先用500ml95％乙醇浸泡2h，然后回流提取两次（料液比:1∶20，提取温度:60℃，提取时间:2h）药液经浓缩、过滤后保存于-20℃。⑶细胞水平观察药材提取物的细胞毒性。将MDCK细胞接种24孔板(15000细胞/孔)，37℃、5％ CO2培养箱中培养24 h，将提取物稀释成7个不同浓度，加到24孔板中（每个浓度3个复孔），同时设不加药的细胞对照组，逐日观察细胞病变(CPE)，记录结果。⑶细胞水平观察药材提取物的抗病毒活性。将MDCK细胞接种24孔板（15000细胞/孔），37℃、5％ CO2培养箱中培养24 h后，加100 TCID50病毒吸附3h，然后将提取物在其最大无毒浓度范围内，梯度稀释5个浓度加入24孔板中（每个浓度3个复孔），同时设病毒对照组和细胞对照组。每隔12h观察1次，记录结果。⑷CCK-8测定儿茶水提物对病毒感染细胞存活率的影响。将MDCK细胞种在96孔板（3000细胞/孔），培养24h。加100TCID50病毒吸附细胞3h，然后吸出病毒，并将儿茶水提物稀释成11个浓度(1 mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、7.5mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、12mg/ml、14mg/ml、16mg/ml）加到96孔板中（每个浓度3个复孔），同时设病毒对照组、细胞对照组和空白培养基对照组，培养36h后加CCK-8试剂检测吸光度值，计算细胞存活率。⑸儿茶水提物对病毒感染性的影响。将MDCK细胞种在6孔板中（60000细胞/孔）培养24 h后，用Lipofectamine2000转染Gluc质粒（质粒与脂质体的比例为1∶2.5），培养24h后消化计数，将细胞分到96孔板中（3000细胞/孔），再培养24 h后加100TCID50的病毒吸附细胞3h，然后吸出病毒，并将儿茶水提物稀释成4个浓度（4mg/ml、8mg/ml、12mg/ml和16mg/ml）加到96孔板中（每个浓度4个复孔），同时设质粒对照组（阴性对照组）和病毒对照组（阳性对照组），培养36h后，加荧光素酶底物检测吸光度值，计算相对荧光强度。⑹检测儿茶水提物的抗病毒活性是否以RNA聚合酶为靶点。将293T细胞种24孔板（90000细胞/孔），培养24 h后转染五质粒（表达流感病毒RNA聚合酶的4个质粒:pHW181-PB2、pHW182-PB1、pHW183-PA、pHW185-NP和表达荧光素酶的质粒Rluc;质粒与脂质体的比例为1∶1.3），再培养24h后，将儿茶水提物稀释成3个浓度（4mg/ml、8mg/ml、12mg/ml）加到24孔板中（每个浓度4个复孔），同时设质粒对照组（阴性对照组）和细胞对照组（阳性对照组），培养36h后加入荧光素酶底物检测吸光度值，计算相对荧光强度。\n 结果：①采用水提和醇提得到30种药材提取物。各药材提取物的浓度为:黄连水提物1000mg/ml、黄连醇提物1000mg/ml、儿茶水提物1500mg/ml、儿茶醇提物2000mg/ml、羌活水提物1500mg/ml、羌活醇提物2000mg/ml、厚朴水提物2500mg/ml、厚朴醇提物2000mg/ml、穿心莲水提物1000mg/ml、穿心莲醇提物2000mg/ml、贝母水提物1000mg/ml、贝母醇提物2000mg/ml、金银花水提物1000mg/ml、金银花醇提物2500mg/ml、甘草水提物1000mg/ml、甘草醇提物1000mg/ml、鱼腥草水提物1000mg/ml、鱼腥草醇提物1000mg/ml、鸡血藤水提物1000mg/ml、鸡血藤醇提物1500mg/ml、桂枝水提物1000mg/ml、桂枝醇提物2000mg/ml、赤芍水提物500mg/ml、赤芍醇提物1500mg/ml、防风水提物1500mg/ml、防风醇提物1000mg/ml、荆子水提物1500mg/ml、荆子醇提物2000mg/ml、栀子水提物1000mg/ml、栀子醇提物1500mg/ml。②得到了30种药材提取物的最大无毒浓度范围。各种药材提取物的最大无毒浓度范围是:黄连水提物0.4～2mg/ml、黄

关键词： 中药提取物   中药制剂   防潮  

摘要： 中药提取物和中药制剂大多容易在制造、贮存、使用期间潮湿变质,影响其正常使用及临床药效,合理采用防潮措施是保证药效的关键。本文探讨了中药提取物及中药制剂的防潮策略,认为中药提取物的纯化工艺、表面性质、干燥方式及中药制剂的薄膜包衣技术、制剂制粒方式、包装材料选择、贮存方式选择等均是降低提取物及制剂吸湿性,提升防潮效果的关键所在。

关键词： 中药制剂   人员   洁净厂房   设备管理  

摘要： 现在,我国中药制剂企业在很多方面都存在明显缺陷,包括人员素质及配备、洁净区的管理以及设备管控等问题,对于中药制剂设备的管理要加强管理模式的创新,中药制剂人员要加强自身素质的提升,这样才能做出安全、合格、有效的药品,才能保证人们的用药安全,促进中药制剂企业的可持续发展。

关键词： 近红外光谱技术   中药制剂分析   质量控制方法  

摘要： 近红外光谱技术具有传统分析方法不具备的快速、无损、可在线分析等特点与优势。文章在阐述近红外光谱技术在中药复方制剂质量控制中的独特优势与不足的基础上,分析了近红外光谱技术在全面控制中药制剂质量中的应用,以期近红外光谱技术在中药及其复方制剂分析方面有更广阔的应用前景。

关键词： 中药提取物   药品监管   产品出口   征求意见稿   从严管理   天然药物   监督管理  

摘要： 中药提取物、天然药物从严管理即将开始了。国家食品药品监管总局近日发布了《关于加强中药提取和提取物监督管理的通知》的征求意见稿，对此进行严格规范。