关键词： 中药制剂   质量控制   现状   对策  

摘要： 中药制剂的质量控制是保证患者治疗安全性及效果的基础,其也是直接影响中药材的未来发展和广泛运用的重要因素。本文从中药制剂的质量控制的现状出发,总结影响中药制剂质量控制的因素,并总结出针对性对策。

关键词： 中药制剂   质量   影响因素  

摘要： 中药制剂以其服用方便,并具有较好疗效等特点,得到迅速发展,然而中药材来源复杂,采收季节、产地贮藏、饮片炮制质量等均可直接影响中药制剂产品的质量及其安全性和有效性,重视制剂质量,必须从生产制剂的物质基础抓起,注意中药饮片的选择、加工炮制和制剂的生产工艺,一步错步步错,尤其是要保证中药饮片的质量,环环相扣、步步扎实,才能保证中药制剂的安全、稳定、有效.

关键词： 复方中药制剂   运动性中枢疲劳   恢复影响机制   研究分析  

摘要： 目的 :分析复方中药制剂对运动性中枢疲劳恢复影响机制的研究。方法 :将中药理论作为本次研究的医药基础,在中药配制过程中应用药理、中医以及实验学等相关理论知识,给予大鼠实验室适应性饲养,时间为期1周,研究选取120大鼠,随机平分4组。对照组为C组,给予大鼠纯净水灌服对照,服药组为M组,给予大鼠中药灌服,训练组为T组,给予大鼠纯净水灌服同时加以训练,训练服药组为TM组,给予大鼠中药灌服,同时加以训练。分析复方中药制剂对大鼠行为、心率、体质量、力竭游泳时间长短,以及对血清BLA、下丘脑5—HT含量及海马NOS活性的影响效果,近一步探讨复方中药制剂对运动疲劳(大鼠运动能力)恢复的影响。结果:研究发现,复发中药制剂对丘脑5—HT含量、5-HIAA、多巴胺(DA)、力竭时间具有重要影响,对运动性中枢疲劳恢复具有较大影响。结论 :复方中药制剂应用于运动性中枢疲劳的恢复,其安全性高,没有副作用,能够通过调补结合的作用达到运动能力恢复作用,值得在临床广泛应用。

关键词： 中药制剂   药品不良反应   统计分析  

摘要： 目的：了解秦皇岛地区中药制剂不良反应（ADR）发生情况，为临床医师合理使用中药制剂提供依据。方法：采用回顾性分析方法，对秦皇岛地区2014年1月-2015年12月期间，不良反应监测中心监收到的中药制剂的不良反应资料进行调查、整理、统计分析，得出结论。结果：秦皇岛地区2014年1月-2015年12月期间中成药，各种剂型在常规剂量范围内使用时均有药品不良反应发生，而且涉及多个器官、系统，主要包括皮肤、神经系统、消化系统等。结论：临床应用中药制剂时，应注意品种的选择、使用时间、中药注射剂应用时间隔液的应用等，从而减少药品不良反应的发生。

关键词： 黄曲霉毒素B1   单链抗体   噬菌体展示   酶联免疫吸附法  

摘要： 黄曲霉毒素 B1(Aflatoxin B1,AFB1)是一类由寄生曲霉(Aspergillusparasiticus,Aparasiticus)和产毒黄曲霉(Aspergillus flavus,***)等产生的有毒次级代谢产物,具有较强的致癌性和毒性,且结构非常稳定,一般高温加热都不能将其破坏,对人畜的生命安全具有严重的威胁。而在现阶段,无法通过有效的方法保证食品完全不受AFB1的污染,所以,世界上绝大多数国家都制定了食品和饲料中AFB1的最大允许含量,并积极探索快速、高效检测产品中AFB1含量的方法。在众多的检测方法中,采用免疫学原理进行检测的方法由于其成本较低、灵敏度高、操作简单快速等优点而成为研究热点。免疫学检测依赖于高亲和力、高特异性的抗体,由于传统抗体制备过程耗时长、价格昂贵、具有安全隐患等弊端,促使人们大力开发基因工程抗体。作为第三代基因工程抗体之一的单链抗体(Singlechain Fvfragment,ScFv)由于免疫原性低、分子量小、易于改造和表达而受到人们的广泛关注。噬菌体展示抗体库技术具有操作简单,库容量大,筛选通量高等优点,直接从噬菌体抗体库中筛选出有具有较高亲和力的单链抗体,为人们获得高质量抗体提供了强有力的技术支撑。本课题以AFB1为研究对象,从AFB1-BSA免疫小鼠的脾细胞内扩增ScFv基因,将ScFv片段插入pCANTAB5e载体中,应用噬菌体展示技术筛选抗AFB1-ScFv,并对其性质进行分析,研究结果如下。1抗AFB1单链抗体基因文库的构建采用AFB1-BSA完全抗原免疫Balb/c小鼠,免疫5次后,断尾取血分离抗血清,以ELISA法检测抗血清的效价和灵敏度,在第五次免疫后抗血清效价最高达到25600,灵敏度最高为35.5 ng/mL。提取小鼠脾细胞RNA,反转录生成cDNA,利用简并引物分别扩增出小鼠抗体的全套重链可变区和轻链可变区基因片段,采用重叠延伸 PCR(Gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)连接成完整的ScFv基因。利用SifI和Notl两个酶切位点将ScFv基因与pCANTAB5e载体连接后转化*** TGl,构建抗AFB1单链抗体基因文库,根据抗性平板上的转化子数量计算得出ScFv基因文库库容为5×l06 cfu/mL。2抗AFB1 ScFv噬菌体文库的构建、筛选及鉴定使用辅助噬菌体M13KO7感染带有ScFv基因文库的*** TG1,培养后离心,沉析上清液,得到初级单链抗体噬菌体库,实验测得库容约为2×l013 pfu/mL。使用抗原AFB1-OVA,对获得的单链抗体噬菌体库进行筛选,经过五轮筛选后,得到了两个呈阳性的单链抗体噬菌体,分别为ScFv-A和ScFv-B,提取质粒后测序得到两个单链抗体的核酸序列。3抗AFB1 ScFv的性质分析根据ScFv核酸序列推导得出氨基酸序列,将氨基酸序列输入SWISS-MODEL服务系统中,通过序列比对得到与ScFv同源性较高的序列。将相似性较高的多肽序列作为模板,利用Discovery Studio(DS)软件模拟得到ScFv-A和ScFv-B蛋白的三维结构。再将其三维结构与抗原AFB1进行分子对接,预测得到ScFv-A中重链可变区33位的Trp和106位的Ser,ScFv-B重链可变区33位的Tyr、52位的Ser、102位的Tyr在与AFB1结合时起关键作用。。构建重组表达载体pET-30a-ScFv-A和pET-30a-ScFv-B,转化菌株*** BL21(DE3),纯化表达目的蛋白,利用SDS-PAGE和ELISA对目的蛋白进行性质分析,结果表明,两种单链抗体均可在*** BL21中表达出有活性的可溶性蛋白,大小约为30 kDa。采用间接竞争ELISA进行分析,结果表明ScFv-A和ScFv-B的灵敏度分别约为72 μg/mL和60 μg/mL。

关键词： 细胞色素P4503A4酶   细胞色素P450 1A2酶   细胞色素P450 3A4酶   复方柴芩颗粒   黄曲霉毒素B1   肝损伤   肉鸭  

摘要： 本试验主要观察“复方柴芩颗粒”对AFB1 (Aflatoxin B1,简写AFB1)引起的肉鸭肝损伤的部分药理作用,并从分子水平上探讨“复方柴芩颗粒”对AFB1慢性中毒时细胞色素P450酶的活性和mRNA及蛋白表达的影响。主要试验内容及结果如下：试验方法健康1日龄樱桃谷肉鸭126只,饲喂试验基础日粮6天,于第7天(肉鸭7日龄)时,随机选取21只肉鸭作为正常组,继续饲喂实验基础日粮。其余105只肉鸭,每天饲喂含40μg/kg AFB1的饲料,建立肉鸭AFB1慢性中毒模型,同时分为模型组、阳性对照组、“复方柴芩颗粒”高剂量组、“复方柴芩颗粒”中剂量组、“复方柴芩颗粒”低剂量组,每组21只。本试验共六组,造模和用药同时进行,选取造模(用药)7 d、14 d和21 d为3个时间点,六个组每组分别随机选取7只肉鸭,取血和肝脏。检测血清氧化应激指标(SOD、MDA)、肝脏损伤标志性指标(AKP、GOT、GPT)、观察肝脏组织的病理变化。取2g肝组织制备肝微粒体,检测肝微粒体中CYP3A4、 CYP1A2和CYP2E1活性以及肝标本中CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1蛋白表达水平。取黄豆粒大小的肝组织,用于检测CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA表达量。试验结果结果显示,同模型组相比,用药三个时间点“复方柴芩颗粒”高、中、低剂量组,血清中丙二醛(MDA)含量、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活力显著降低(P<0.05);超氧化物歧化酶(SOD)显著升高(P<0.05)；肝组织空泡化降低、胆管增生现象较轻。综合考虑投药14d,各项指标更接近正值。与模型组相比,“复方柴芩颗粒”三个治疗组用药7d和14 d,肝脏微粒体细胞色素P450酶系CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性显著降低(P<0.05)；用药21d“复方柴芩颗粒”三个治疗组CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性升高(P<0.05),但与模型组相比差异不明显。与模型组相比,“复方柴芩颗粒”三个治疗组用药7d、14d和21d,肝脏CYP3A4、 CYP1A2和CYP2E1 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。与模型组相比,“复方柴芩颗粒”三个治疗组用药7 d、14 d和21d,CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。用药7d和14d CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA相对表达量和蛋白表达量明显低于用药21d的表达量(P<0.05),且低剂量组数据显著高于高、中剂量组(P<0.05)。试验结论：1.“复方柴芩颗粒”能有效的防治肉鸭AFB1慢性中毒,主要通过调节肉鸭的抗氧化功能、提升肝功能来实现的。且投药14 d药效最好。所以综合考虑,优选出最佳用药方案,即低剂量用药14d。2.用药7、14d,“复方柴芩颗粒”能有效抑制由AFB]导致的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性升高的趋势,减少AFB1前体物质代谢激活,降低其化学性肝脏损伤达到保护肝脏的作用。用药21d CYP450活性升高,可能与“复方柴芩颗粒”本身具有升高CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性的作用,但其诱导效果远远低于AFB1,且只是随着时间推移逐渐显现出来有关。3.“复方柴芩颗粒”能有效抑制由AFB1引起的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA相对表达量和蛋白表达量升高的趋势,从而减少AFB1前体物质代谢激活,降低AFB1引起的化学性肝脏损伤,进而达到保护肝脏的作用。但随用药时间增加,治疗组三种基因型表达量逐渐升高,进而证明“复方柴芩颗粒”本身很有可能具有一定的诱导CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1的作用,但其诱导效果只是随着时间推移逐渐显现出来。

关键词： 黄曲霉毒素B1   智能手机检测系统   间接竞争   现场检测  

摘要： 黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)主要是由黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasjticus)产生的次级代谢产物,极易污染玉米、花生、小麦、大豆、大米等谷物。AFB1具有极强的毒性和致癌性,对人或动物的肝脏具有破坏作用,可导致肝癌、肾癌甚至死亡,严重危害人们的身体健康。目前传统的检测AFB1方法大多需借助专业的仪器设备,操作繁琐,不能满足现场快速检测的需求,因此开发一种快速、简便、低成本的用于检测AFB1的方法是非常必要的。由于智能手机具有轻量便携,普及范围广,数据处理功能强大以及应用软件开发环境开放等优势,使得以智能手机为基础的生物分子检测技术有望成为新一代现场快速筛查工具。本文以间接竞争免疫法为基础,在透明塑料基底上进行反应,通过智能手机检测系统实现多个样品的同时检测,并直接显示出样品中AFB1的含量,真正实现对AFB1的快速、简便、低成本定量检测。本论文的主要研究内容如下:1.以透明塑料片PC(Polycarbonate)作为基底,借助PDMS(Polydimethylsiloxane)微通道进行间接竞争免疫反应。银染后PC上反应条带的光学灰度比(ODR)与AFB1浓度成反比。2.开发了用于实现AFB1快速定量检测的智能手机检测系统。此系统包括两部分:智能手机检测软件和便携式光学装置,智能手机检测软件的主要功能是对塑料芯片上反应区进行拍照,计算出反应条带的ODR值,通过AFB1标准品的浓度及对应的ODR值拟合出校准方程,并利用待测样品对应的ODR值与此校准方程计算得出样品中AFB1浓度值,将此结果直接显示到手机界面上。便携式光学装置是由3D Studio Max设计并由3D打印机打印出各部件,并将白色LED(Light Emitting Diode)灯、反光板(Reflector)、导光板(Light Guide Plate,LGP)、扩散板(Diffuser)、电池等组装到相应部件中,用于给银染后的塑料芯片提供均匀光照,排除外界环境光的影响。3.利用智能手机检测系统实现样品中AFB1的检测,检测范围为0.5-250 ng/m L,检测低限达到0.5 ng/m L,远低于国家对食品中AFB1含量的限定标准(20 ppb)。同时我们将本方法与商业化的ELISA试剂盒进行了比较,两者的检测结果呈现良好的一致性,从而验证了本方法的准确性与可靠性。

关键词： 复方中药制剂   免疫机能   抗病毒   MDV   鸡  

摘要： 马立克氏病(Marek's Disease, MD)是危害养鸡业健康发展的重大疫病之一,可引起鸡群较高的发病率和死亡率,给养禽业造成重大的经济损失。目前,疫苗的应用虽对本病的预防具有一定的效果,但免疫失败和强毒、超强毒马立克病毒(Marek's Disease Virus, MDV)毒株的出现,给本病的防治带来了新的问题,因此有效地预防措施是防控MD发生的重要环节之一。中药历史悠久、资源丰富,具有无残留、无抗药性、提高动物的生产性能和抗病力等优点。因而,复方中药制剂作为饲料添加剂在畜禽养殖业中应用,以提高动物的生产性能和抗病力方面成为研究热点之一。本研究拟进行四种复方中药制剂的筛选,并应用MD动物模型进行复方中药制剂抗病毒作用的研究,通过抗氧化指标、细胞因子等检测分析,探讨不同配方的复方中药制剂对鸡免疫机能的影响及抗MDV的作用效果,为复方中药制剂作为饲料添加剂在抗MD病毒及增强机体免疫力方面的应用提供科学的参考依据。首先,进行了免疫增强作用复方中药制剂的筛选,选用1日龄健康蛋雏鸡,随机分为5组,设1组为对照组,饲喂基础日粮,其它四组为试验组,在基础日粮中添加复方中药制剂,四种复方中药制剂由党参、连翘等五种中药为主,并加以不同剂量的两种不同功能的氨基酸配制而成。根据MD的发病病程,分别在21日龄、35日龄和42日龄随机选择相同数量雏鸡,检测鸡血清抗氧化指标水平及细胞因子的含量。分析结果表明与对照组相比,饲喂四种复方中药制剂的鸡血清总超氧化物岐化酶(T-SOD)活性均呈增强趋势,且42日龄时复方中药制剂四试验组鸡血清T-SOD活性显著增强(P<0.05)。丙二醛(MDA)含量均呈降低趋势,复方中药制剂四试验组鸡血清MDA含量显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01)。在35、42日龄时添加复方中药制剂三、复方中药制剂四试验组鸡血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-a)和干扰素γ(IFN-γ)的含量均显著高于对照组(P<0.05),而白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)的含量则在三个不同日龄显著或极显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。四种复方中药制剂对不同日龄的鸡作用效果不同,在鸡的不同日龄,添加复方中药制剂各组间鸡血清T-SOD活性及MDA含量差异均不显著(P>0.05)。添加复方中药制剂三、复方中药制剂四试验组鸡在42日龄时,血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α的含量均显著高于21日龄(P<0.05),IL-6、IL-8、IL-10的含量显著和极显著低于21日龄(P<0.05,P<0.01)。综合分析结果表明,基础日粮中添加四种复方中药制剂均能不同程度提高鸡的免疫机能,复方中药制剂四的作用效果最好。其次,应用四种复方中药制剂作为添加剂,对其抗MDV作用效果进行了研究。选用1日龄健康蛋雏鸡随机分为6组,设1组为空白对照组,腹腔注射生理盐水0.5mL/只。其它五组为攻毒组,腹腔注射等量的MD血毒,建立MD动物模型。攻毒对照组与空白对照组均饲喂基础日粮,攻毒试验组饲喂添加四种复方中药制剂的日粮。在21、35、42日龄,分别进行血清抗氧化指标及细胞因子含量等检测。研究结果表明,添加复方中药制剂的各攻毒试验组与攻毒对照组相比,鸡的发病率和病死率均有不同程度的降低。对MD动物模型鸡血清抗氧化指标及细胞因子含量的分析结果表明,与空白对照组相比,21、35日龄鸡血清T-SOD活性显著降低(P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.05),在不同日龄,鸡血清中IL-2、IL-18、IFN-γ、TNF-α的含量显著或极显著低于空白对照组(P<0.05,P<0.01),IL-6、IL-8的含量显著高于空白对照组(P<0.05)。添加四种复方中药制剂各攻毒试验组与攻毒对照组相比,鸡血清T-SOD活性均呈增强趋势,且35日龄时复方中药制剂四试验组鸡血清T-SOD活性显著增强(P<0.05)。丙二醛(MDA)含量均呈降低趋势,复方中药制剂四试验组鸡血清MDA含量显著降低(P<0.05)。在鸡35、42日龄时,添加复方中药制剂三、复方中药制剂四试验组鸡血清IL-2、IL-18、IFN-γ、TNF-α的含量显著或极显著高于攻毒对照组(P<0.05,P<0.01),在鸡42日龄时,添加复方中药制剂三、复方中药制剂四试验组鸡血清IL-6、IL-8、IL-10的含量均显著低于攻毒对照组(P<0.05)。表明复方中药制剂可以在一定程度上提高鸡的抗病毒感染能力,复方中药制剂四的作用效果最好。本研究结果表明,在鸡日粮中添加上述四种复方中药制剂,可以不同程度的提高机体的抗氧化能力、提高机体的免疫机能及抗病毒能力,复方中药制剂四作用效果最好。本研究结果为复方中药制剂作

关键词： 姜提取物   二脂酰甘油酰基转移酶-2   脂肪肝   果糖   CD36   胰岛素抵抗   红景天   肌膜  

摘要： 目的观察姜提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用,并探讨其可能的作用机制。方法取SD大鼠24只,随机分为4组,每组6只,即正常对照组(给予正常饮食饮水),模型组(给予10%果糖水),姜提取物低、高剂量组20 mg·kg-1、50 mg·kg-1,给予姜提取物灌胃,连续28 d。用酶法和ELISA检测血浆葡萄糖、甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(total cholesterol,TC)和胰岛素含量,苏木精-伊红(HE)染色和油红-O染色观察肝脏组织中的脂肪沉积程度,Real-time PCR和Western blot法检测肝脏相关基因和蛋白表达。结果姜提取物逆转了果糖过量消耗引起的大鼠肝脏甘油三酯的过度堆积(P<0.05)、肝细胞空泡化的增加和肝脏油红-O染色面积的增加(P<0.05)。然而,姜提取物并不影响大鼠食物摄入量和体质量。姜提取物能够抑制肝脏二脂酰甘油酰基转移酶(acyl-coenzyme A:diacylglycerol acyltransferase,DGAT)-2 m RNA和蛋白的过表达(P<0.05),但对肝X受体(liver X receptor,LXR)、DGAT-1、单酰甘油酰基转移酶(monoacyglycerol acyltransferase,MGAT)-1、MGAT-2、激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)m RNA的表达无影响。结论姜提取物可能通过抑制果糖所致大鼠肝脏甘油三酯生物合成的关键酶DGAT-2的过表达来改善脂肪肝。目的红景天用于治疗衰弱、抑郁症、疲劳和心血管系统疾病,这可能与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)相关。本实验旨在探讨大花红景天根(Rhodiola crenulata root,RCR)提取物对胰岛素抵抗的影响及其可能的作用机制。方法33只SD雄性大鼠随机分成正常对照组(n=6)与果糖组(n=27)。果糖组给予10%果糖水溶液。于实验第13周,果糖组随机分为果糖对照组,RCR低、高剂量(10 mg·kg-1、50 mg·kg-1)组,每组9只,继续果糖水溶液喂养。实验周期为18周,第18周末禁食14小时后,称体质量,大鼠脱颈处死,用酶法和ELISA测定血浆脂质及葡萄糖代谢指标,Real-time PCR检测相关基因表达,Western blot和免疫荧光、激光共聚焦检测相关蛋白表达水平。结果RCR高剂量(50 mg·kg-1)组能够抑制果糖诱导所致的大鼠高胰岛素血症,降低胰岛素抵抗指数和脂肪组织胰岛素抵抗指数。此外,RCR高剂量(50 mg·kg-1)组还恢复了葡萄糖与胰岛素的比率和游离脂肪酸(non-esterified fatty acid,NEFA)与胰岛素的比率。从机制上而言,RCR抑制了口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)期间由果糖诱导所致的血浆NEFA清除率的增加,并且降低了腓肠肌甘油三酯(triglyceride,TG)含量和油红-O染色面积。此外,RCR还逆转了果糖诱导所致脂肪酸转运酶/CD36(fatty acid translocase/CD36,CD36)在肌膜的过表达和肌浆内的低分配,改善大鼠胰岛素抵抗。结论RCR通过调控CD36在骨骼肌肌膜和肌细胞内再分配,改善果糖诱导的大鼠胰岛素抵抗。

关键词： 肝细胞癌   AKR1B10   黄曲霉毒素B1   肝切除术   肿瘤复发  

摘要： 目的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,患者预后差,术后复发率较高。因此,寻找预测HCC术后早期复发的肿瘤标志物对于提高患者的生存率是十分重要的。本课题组前期应用iTRAQ结合2DLC-MS/MS定量蛋白质组学技术研究广西地区人群HCC的差异蛋白质谱,发现醛酮还原酶家族1成员B10(aldo-keto reductase family 1 member B10, AKR1B10)蛋白在HCC组织中上调表达。本课题拟研究AKR1B10在HCC组织中的表达,探讨HCC组织中AKR1B10的表达水平与黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1, AFB1)暴露的关系,评估AKR1B10在预测HCC术后早期复发的价值。方法 1、收集2013年1月至2014年6月在广西医科大学附属肿瘤医院行根治性肝切除术的124例HCC患者的癌组织、癌旁组织及其组织切片,同时收集8例肝血管瘤患者的病灶旁的正常肝组织及组织切片作为正常对照。通过实时荧光定量PCR、免疫组织化学以及Western Blot等分子生物技术,在mRNA和蛋白水平检测AKR1B10在HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中的表达情况。2、通过检测HCC组织P53基因第7外显子249密码子的突变鉴定出AFB1暴露相关性HCC患者。比较AKR1B10 mRNA在AFBl暴露相关性HCC患者与非AFB1暴露相关性HCC患者的癌和癌旁组织中的表达。3、分析HCC组织中AKR1B10 mRNA的表达水平与患者临床病理特征的关系,并通过生存分析和COX风险评估模型分析AKR1B10的表达水平对HCC患者术后2年内肿瘤复发的影响。结果1、实时荧光定量PCR结果显示,AKR1B10 mRNA在HCC组织中的平均表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001),且有80.1%的HCC患者癌组织中的AKR1B10 mRNA相对癌旁组织高表达；AKR1B10 mRNA在正常肝组织中表达量较低,明显低于癌旁组织(P=0.008)。免疫组化显示,HCC组织中AKR1B10蛋白的阳性率和染色强度均明显高于癌旁组织(均P<0.001)。Western Blot结果也证实HCC组织中AKR1B10蛋白的表达高于癌旁组织。2、基因测序结果显示,P53基因第7外显子249密码子发生突变的患者有28例(即AFB1暴露相关性HCC)；未发生突变的患者有84例(即非AFB1暴露相关性HCC)。AKR1B10 mRNA在AFB1暴露相关性HCC患者的HCC组织和癌旁组织中的表达水平均明显高于非AFB1暴露相关性HCC患者(分别P：0.012,P=0.034)。在AFB1暴露和非AFB1暴露相关性HCC患者中,AKR1B10 mRNA在癌组织中的表达水平均明显高于癌旁组织(均P<0.001) 。3、AKRIB10mRNA的表达与血清甲胎蛋白浓度和乙肝病毒DNA的滴度相关。在血清甲胎蛋白<200 ng/mL的患者中,有63.7%(33/49)的患者HCC组织中的AKR1B10 mRNA高表达,明显高于高于血清甲胎蛋白≥200 ng/mL的患者(P=0.048)。在110例乙肝相关性HCC患者中,乙肝病毒DNA≥ 1000IU/ml的患者AKR1B10 mRNA的表达水平明显高于乙肝病毒DNA< 1000IU/ml的患者(P=0.046)。生存分析的结果显示,AKR1B10 mRNA低表达的患者在6、12、24个月的肿瘤复发率明显高于AKR1B10 mRNA高表达的患者(29.2%、64.6%、73.4%比23.1%、34.5%、65.7%,P=0.030)。多因素分析结果显示,肿瘤低分化、最大肿瘤直径>5cm、大血管侵犯和AKR1B10 mRNA低表达是影响HCC患者术后早期复发的独立风险因素。结论AKR1B10参与了HCC的发生,特别是AFB1暴露相关性HCC的发生,是诊断AFB1暴露相关性HCC的潜在肿瘤标志物。AKR1B10低表达提示HCC患者术后有较高的早期复发的风险。