关键词： 中药制剂   不良反应   调查分析  

摘要： 目的探析中药制剂的有关不良反应,提出有效的防范对策。方法选取2012年1月;016年1月期间我院上报的中药制剂不良反应患者200例予以回顾性分析,总结中药剂型、给药途径、中药品种、累及系统的有关情况,结合实际情况,提出有效的防范对策。结果 200例中药制剂不良反应中,静脉注射剂最多且主要为静脉滴注,比例为53.5%;前3位中药品种为黄芪注射液、参麦注射液、鱼腥草注射液,比例分别为8.5%、7.0%、6.5%;前3位累及系统为皮肤及其附件、消化系统、循环系统,比例分别为33.5%、23.5%、16.5%。结论在中药制剂不良反应中,静脉注射剂与静脉滴注的发生率最高。为此,在以后中药制剂应用中,一定要加大中药注射剂的安全监测力度,充分重视中药制剂导致的不良反应,从而提高临床用药的合理性,确保患者可以早日康复。

关键词： 鸡腺胃炎   临床病例   黄曲霉毒素B1   内毒素   防治  

摘要： 鸡腺胃炎(Proventriculitis of Chicken)主要表现为生长缓慢,均匀度差,饲料利用率下降,病鸡腺胃明显肿胀,腺胃黏膜糜烂。近年来肉鸡和蛋鸡腺胃炎发病率较高,该病在中国大部分省份均有发生和流行,给养鸡业造成了严重的经济损失。近年来有关腺胃炎的报道较多,但其发病原因及致病机制观点不一,有的研究认为主要是由病原性因素所致,有的则认为是由非传染性因素引起。本研究首先对泰安及周边地区鸡腺胃炎的临床病例的发病情况及病理变化进行了调查分析,然后从腺胃炎相关的非传染性致病因素入手,构建疾病模型,研究非传染性因素在腺胃炎发病中的作用并探讨药物防治效果,为腺胃炎的防治提供理论依据。对鸡腺胃炎临床病例发病情况的调查和分析结果表明,该病在泰安、菏泽、聊城、莱芜、临沂、济南、济宁、德州、日照等地均有发生流行,患病无明显的季节性,夏季高温季节多发,秋冬季节也有较高的发病率;调查结果还表明,该病的发生与饲料及饲养管理因素密切相关。不同日龄、不同品种的鸡均可发病,发病日龄主要集中在90日龄以前,以蛋雏鸡及育成鸡发病居多,其次是1～3周龄的快大型白羽肉鸡和肉杂鸡(817),本地品种的麻鸡也有发病。一般呈散发态势,但患病鸡群发病率较高,慢性病例常难以治愈。对典型病鸡进行了剖检观察及病理组织学检查,急性病例主要表现胃肠黏膜急性卡他性炎症,肌胃角质膜糜烂、小肠扩张积气、积液。慢性病例主要表现腺胃黏膜慢性卡他性炎症,腺胃黏膜显著增厚,黏膜上皮细胞坏死脱落,黏膜固有层及腺体内淋巴细胞或异嗜性粒细胞弥漫性浸润增生。肝脏、脾脏等内脏器官萎缩。取28份典型病例的腺胃、脾脏等组织通过PCR/RT-PCR进行腺胃炎相关病原检测,检测结果表明:马立克氏病病毒(MDV)的检出率高达39.3%(11/28);网状内皮增生病病毒(REV)的检出率为32.1%(9/28);其中混合感染5份,占17.9%;传染性支气管炎病病毒未检出。根据腺胃炎临床病例调查分析结果结合国内外相关腺胃炎的非传染性致病因素的研究,本实验选择黄曲霉毒素B1和内毒素联合致病模型,并进行了药物防治试验。试验结果显示,黄曲霉毒素B1和内毒素模型组发生了明显的急性腺胃炎病症:实验组鸡生长发育不良,拉稀、拉料粪;剖检及病理组织学检查发现有急性卡他性或出血性卡他性胃肠炎病变,脾脏等免疫器官发育不良。说明黄曲霉毒素B1和内毒素的非传染性因素致病模型成功建立。试验结果显示,添加药物的1、2、3组生长状况明显好于模型组和正常对照组。饲料中添加0.01%硫辛酸、0.4%谷氨酰胺、0.5%精氨酸、0.5%板蓝根和0.1%Vc、粘杆菌素能有效防治由黄曲霉毒素B1和内毒素引起的鸡腺胃炎,并能改善肉鸡的肠道健康,提高肉鸡的生长性能和免疫机能。上述物质通过本实验的优化组合进一步提高了其对鸡胃肠道健康的保护作用。本研究进一步了解了泰安及周边地区鸡腺胃炎临床病例的发病情况,观察了患病鸡的病理学变化特征。成功构建了黄曲霉毒素B1和内毒素致鸡腺胃炎模型,并验证了功能性饲料添加剂的防治效果,对该病的病原学及防治方法研究具有一定的参考价值。

关键词： 蒙脱石   花生粕   黄曲霉毒素B1   肉仔鸡   生产性能  

摘要： 本试验旨在利用活体动物,研究天然和改性蒙脱石对用霉变花生粕配制的饲粮饲喂肉仔鸡后,对其生产性能和健康的影响,确定天然和改性蒙脱石作为霉菌毒素脱毒剂的饲用效果。选用432只1日龄爱拔益加(AA)健康公雏,随机分为6个处理,每个处理6个重复,每个重复12只鸡。正对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,负对照组饲粮用霉变花生粕(含AFB1 1 284.21μg/kg;前后期饲粮分别添加8.8%和12.0%)替代部分豆粕,试验组分别在负对照组饲粮的基础上添加1.0和2.0 g/kg的天然和改性蒙脱石。试验期42 d。结果表明:与正对照组相比,霉变花生粕显著降低了肉仔鸡平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、胸肌率、腿肌率、血浆蛋白的含量(P<0.05),显著提高了42 d料重比(F/G)和免疫器官指数(P<0.05)。与负对照组相比,2.0 g/kg天然蒙脱石组肉仔鸡的42 d的ADG、ADFI、胸肌率和腿肌率,血浆ALB、GLB含量,显著升高(P<0.05),全期F/G,胸腺指数和法氏囊指数显著降低(P<0.05);1.0 g/kg改性蒙脱石组肉仔鸡的ADG、ADFI、胸肌率和腿肌率,血浆蛋白含量显著提高(P<0.05),全期F/G,胸腺指数和法氏囊指数显著降低(P<0.05);2.0 g/kg改性蒙脱石组显著提高了肉仔鸡的平均体重ADG、ADFI,42 d胸肌率和腿肌率及血浆蛋白的含量(P<0.05),F/G、免疫器官指数显著降低(P<0.05)。与1.0 g/kg天然蒙脱石组相比,2.0 g/kg改性蒙脱石组肉仔鸡前期ADG,ADFI,血浆TP和ALB的含量显著提高(P<0.05),前期和后期F/G,胸腺指数显著降低(P<0.05)。与2.0 g/kg天然蒙脱石组相比,2.0 g/kg改性蒙脱石组显著提高了肉仔鸡前期ADG及血浆TP和ALB的含量(P<0.05)。添加蒙脱石可以缓解因AFB1造成肝损伤病变,2.0 g/kg改性蒙脱石的缓解效果比较明显。综上,AFB1污染的霉变花生粕饲粮能影响肉仔鸡的生产性能和健康,天然和改性蒙脱石能缓解AFB1引起的毒性作用,2.0 g/kg改性蒙脱石脱毒作用效果更佳。

关键词： 门急诊   输液患者   中药制剂   不良反应   管理控制  

摘要： 目的:对门急诊输液患者中药注射剂不良反应观察与护理方法进行分析、调查研究.方法:通过制定中药制剂静脉输液安全管理规范,从查对环节、配药与配伍环节、操作环节、药品不良反应统计上报环节等方面做好中药注射剂静脉输液的安全管理,旨在通过护理安全管理措施,使得中药注射剂输液更为规范、安全,减少中药制剂不良反应的发生.结果:门急诊输液患者中药注射剂不良反应会对多个系统造成波及,有诸多不同临床表现和共同的临床表现.结论:在门急诊输液中,应对中药注射剂不良反应加以预防并及时观察,采取有效治疗与护理措施,促使患者用药安全性显著提高,大幅降低门急诊输液患者中药注射剂不良反应发生率.

关键词： 黄曲霉毒素B1   多克隆抗体   单克隆抗体   酶联免疫  

摘要： 本论文分别制备了能够识别黄曲霉毒素B1的多克隆抗体与单克隆抗体,并建立了检测黄曲霉毒素B1的酶联免疫分析法。用AFB1-BSA作为免疫原,免疫新西兰兔,获得抗AFB1多克隆抗体。通过对免疫分析方法工作条件的优化,建立了检测AFB1的间接竞争ELISA方法,最优工作条件为:包被原包被量为0.05μg/孔,抗体稀释倍数1:30000,封闭液为0.5%脱脂乳粉,标准品稀释液为pH 7.4的0.01 M PBS缓冲液。该方法的灵敏度IC5o值为1.21±0.08 ng/mL,检测限IC15值为0.06±0.01 ng/mL。建立了检测AFB1的直接竞争ELISA方法,方法最佳工作条件为:抗体包被量为0.1 μg/孔,酶标抗原稀释倍数为1:200000,封闭液选择0.5%脱脂乳粉,标准品稀释液为pH 7.4的0.01 M PBS缓冲液。该方法的灵敏度 IC50 值为 0.31±0.01 ng/mL,检测限 IC15 值为 0.04 ± 0.01 ng/mL。经间接竞争 ELISA方法和直接竞争ELISA方法测定AFB1多克隆抗体的特异性,该抗体与AFG1的交叉反应率分别为19.56%和18.29%,与黄曲霉毒素其他结构类似物交叉反应率较低。用AFB11-BSA免疫balb/c小鼠,取小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经过细胞筛选及细胞克隆获得了一株能够稳定分泌抗AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株5A11C10A。将杂交瘤细胞打入小鼠体内诱导产生的腹水纯化后得到抗AFB1单克隆抗体。采用单克隆抗体亚型鉴定试剂盒进行鉴定,单克隆抗体的重链亚型为IgGi,轻链亚型为Lambda。利用所得到的AFB1单克隆抗体建立了检测AFB1的间接竞争ELSIA方法,最佳工作条件为:包被原包被量为0.05μg/孔,抗体稀释倍数为1:15000,封闭液为0.5%脱脂乳粉,标准品稀释液为pH 7.4的0.01 MPBS缓冲液。该方法的灵敏度IC50值为4.55±0.13 ng/mL,检测限IC15值为0.74±0.15 ng/mL。建立了检测AFB1的直接竞争ELISA方法,方法最优工作条件为:抗体包被量为0.02 μg/孔,酶标抗原稀释倍数为1:100000,封闭液选择0.5%脱脂乳粉,标准品稀释液为pH7.4的0.01 MPBS缓冲液。该方法灵敏度IC50值为1.07士0.01ng/mL,检测限IC15值为0.13±0.01 ng/mL。采用间接竞争ELISA方法和直接竞争ELISA方法测定AFB1单克隆抗体的特异性,与AFG1交叉反应率分别为23.90%和26.10%,与AFM1的交叉反应率分别为26.32%和25.36%,与黄曲霉毒素其他结构类似物的交叉反应率较低。

关键词： 慢性肾病   中药制剂   灵芝呋喃A   药物合成  

摘要： 尽管生物医药技术取得了巨大的进步，多种疾病的发病机制被阐明清楚，成千上万种药物被成功研发，然而非传染性疾病（慢性病）仍然严重威胁着人类的健康并且没有得到有效地控制。中医药形成于人类与疾病抗争的实践中，其中蕴藏的智慧可为慢性病的治疗提供独特的视角。本文以慢性肾病为导向，以有机合成为基础，结合生物活性，对来源于三种重要中药中的活性分子进行了合成和生物活性研究。　　本研究分为四个部分：第一章概述了慢性肾病，并对TGF-β信号通路中的小分子抑制剂进行了综述。肾脏纤维化是慢性肾病进展至终末期肾衰竭的共同途径，因此抗肾脏纤维化对防止肾脏衰竭至关重要。TGF-β诱导的Smads依赖（经典通路）和非Smads依赖的信号通路在肾纤维化中扮演着非常重要的角色，药物化学家围绕TGF-β/Smads信号通路进行了大量的研究，发现了一批具有显著抑制活性的小分子。第二章分别围绕GQ5苯环上的取代基的种类和位置、侧链的长短、侧链中双键的位置进行修饰，共得到40个GQ5衍生物。以MTT法评价GQ5类似物的毒性大小，以免疫印记法评价GQ5类似物活性的强弱、选择性的高低。从中总结出基本的构毒关系、构效关系规律:发现引入氟原子可显著降低毒性、双键位置前移的同时缩短链的长度可使药效得以保持或增强、侧链中顺式双键的存在有利于维持选择性等。结合活性与毒性两方面的规律，最终优化出2个毒性明显降低、活性与选择性基本保持、稳定性得到提高的苗头化合物。第三章灵芝呋喃A的合成及抗肾纤维化活性研究。体外实验表明，来源于中药灵芝的小分子灵芝呋喃A可选择性抑制Smad3磷酸化。然而天然分离的量无法满足体内抗肾纤维化功能验证，为此开发了一条合成灵芝呋喃A的路线，该路线以廉价的二苯并呋喃为起始原料、直线11步反应、20％总产率，可实现数十克灵芝呋喃A的合成。以合成的量为基础，完成了体内功能验证，与此同时，还发现灵芝呋喃A具有较强的Wnt/β-catenin抑制活性。第四章多巴胺与碱基杂合体aspongdopamines A-C的合成、绝对构型确定及生物活性研究。从九香虫中分离得到的多巴胺与碱基杂合体aspongdopaminesA-C，该类分子天然的含量低，且存在绝对构型难以确定的难题。为了挖掘这类结构独特的分子的生物学意义，分别完成乙酰多巴胺单体aspongdopamineA、二聚体与碱基杂合体aspongdopamines B、C的消旋合成，杂合体aspongdopaminesA-C中的碳氮键均通过Mitsunobu反应来构建。对aspongdopamines B、C手性拆分可得到各自的4种光学异构体，然后通过振动圆二色谱(VCD)确定了各光学异构体的绝对构型。以合成的量为基础，分别开展了多方面的生物活性研究，发现aspongdopamine C具有COX-2抑制活性、(7R)-aspongdopamineA具有促神经干细胞活性。

关键词： AFB1检测   SPR   适配体   醋检测   HPLC  

摘要： 黄曲霉毒素(AFT)是寄生曲霉和黄曲霉产生的致癌和致突变的化合物,它主要有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2以及两种代谢产物M1和M2。在六种化合物中,黄曲霉毒素B1(AFB1)易存在于各类食品以及农产品中,是目前致癌能力最强的天然化合物,严重威胁了人类的生命安全。我国国标(GB 2761-2011)规定以粮食为主要原料的调味品中AFB1的残留量不得超过5μg·kg-1,因此建立快速检测食品、农产品中AFB1的方法尤为重要。表面等离子体共振(SPR)是动态的、无需标记的现代检测手段。核酸适配体是能够特异性识别目标分子的DNA、RNA或者肽,它具有成本低、稳定性好以及容易修饰的特点。本文利用SPR与适配体技术结合检测AFB1。1、本文参考文献,选择的AFB1的适配体的序列为：5'-GTTGGGCACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTGCCCTTCGCTA GGCCCACA-3'。等温滴定量热技术测定AFB1与AFB1-aptamer的结合特性。通过实验优化,最终AFB1和适配的浓度分别为5μM和64μM。在此条件下,AFB1与适配体的KA等于1.51×106±1.68×105M-1,它们之间结合计量数为0.9993±0.0205。2、利用链霉亲和素(SA)和生物素之间的高亲和力,将SA偶联于CM5芯片上,捕获生物素修饰的AFB1核酸适配体；优化AFB1的进样和解离时间,建立AFB1标准品的工作曲线。AFB1的浓度在0.19～200 ng·mL-1,浓度与相应的响应信号成四因素关系；AFB1的浓度在0.19～50 ng·mL-1,浓度与相应的响应信号成线性关系。3、通过优化酱油和醋样品基质中AFB1的提取和纯化方法,用已建立的SPR与适配体结合的方法完成酱油和醋样品中AFB1的检测。当醋中AFB1浓度为2、10、20 ng·g-1(相对于醋的质量),该方法的平均回收率在94.1～125.9%范围内。4、建立液质联用方法检测AFB1,得到的结果与SPR方法做对比。该方法的线性范围为1～200 ng·mL-1,检出限为0.5 ng·mL-1。5、建立液相方法检测AFB1,得到的结果和SPR方法做对比。该方法的线性范围为1.56～200 ng·mL-1,检出限为0.78 ng·mL-1。

关键词： 黄曲霉毒素B1   提取   生物传感器法   超声波  

摘要： 黄曲霉毒素(AFT)是已知的化学物质中致癌性最强的一种,经食品摄入后会对人体产生严重危害,因此食品中AFT定性和定量的检测显得尤为重要。本文主要研究了黄曲霉毒素B(AFB)的提取方法及生物传感器法测定AFB的方法研究。对AFB进行提取分别使用旋涡振荡辅助法和超声波辅助法。采用响应曲面法优化得出了2种辅助方法的最佳工艺条件:旋涡振荡辅助法-提取时间12 min,料液比为1:5,甲醇浓度为81%,转速为1892 rpm,得到AFB的含量为2.95μg/kg;超声波辅助法-提取时间8.5 min,料液比为1:5,甲醇浓度为65%,超声波的功率为63 W,得到AFB的含量为4.32μg/kg。对比这两种提取方法确定超声波辅助为AFB的最佳方法。最佳提取条件是:提取时间8.5 min,料液比为1:5,甲醇浓度为65%,超声波的功率为63 W,再经过免疫亲和柱,得到AFB的含量为5.2μg/Kg。研究和建立了一种快速测定AFB的方法:生物传感器法。讨论了戊二醛浓度和交联时间对固定化酶膜条件的选择。生物传感器法在检测黄曲霉毒素B的含量中起到关键作用的元件是酶电极,因此需要探讨酶电极的最适工作条件。通过对pH值、温度和搅拌对酶电极检测过程的影响,初步确定了生物传感器法测定的最佳工作环境。另外从线性范围、回收率、精密度、稳定性和特异性这五个方面评价生物传感器法测定AFB的可行性。结果表明:优化固定化条件为戊二醛浓度为2.5%、交联时间为3 h。在温度为40℃、pH=7和搅拌时间为20 s的条件下的生物传感器的电位值最高。生物传感器法的线性范围为0-100 g/m L,线性良好(R2=0.9984),相对偏差小于8%,精密度高,特异性好,该法测定的结果与高效液相色谱法测定的结果之间有较好的一致性(r2=0.9916)说明此法可应用于快速测定AFB。

关键词： 生物利用度   中药制剂   口服  

摘要： 针对病证采取中药治疗,治疗有效性高,本文从中药口服机制方面着手,分析中药制剂口服生物利用度,改善中药制剂难溶活性成分的溶出、溶解速度,控制消化系统中活性成分代谢,充分发挥中药制剂中的各活性成分之间的有益影响,使得中药制剂口服生物利用度得以提升。

关键词： 黄曲霉毒素B1   筛选   枯草芽胞杆菌   脱毒   雏鸭  

摘要： 黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）污染范围广且具有很强的毒性作用,严重危害到人类和动物健康,采取有效的脱毒措施成为亟须解决的问题。益生菌不仅具有很好的益生效果还具有较强的脱毒功能,已成为极具发展潜力的霉菌毒素脱毒剂。本研究从益生菌菌株中成功筛选出脱毒功能强、益生性能优的枯草芽胞杆菌菌株,并对其脱毒特性进行研究、脱毒效果进行验证,为研发脱毒型动物微生态制剂提供理论与技术支撑,为畜牧业的健康可持续发展提供保障。1、益生菌菌株的筛选及鉴定以香豆素为唯一碳源对实验室保藏的42株益生菌菌株进行初筛,筛选出可在AFB1环境下存活的优势菌株;以AFB1为底物,通过ELISA方法进行脱毒复筛,筛选出3株脱毒性能优的菌株;通过对其生物学特性（生长曲线、抑菌性能、耐受性能）的综合评估,成功筛选到脱毒功能强、益生性能优的HDR-02为目的菌株;通过形态学观察、生化指标鉴定、16S r RNA鉴定,鉴定HDR-02为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。2、目的菌株的脱毒特性研究研究结果如下:（1）不同时间点对脱毒效果的影响。脱毒时间越长对AFB1的脱毒率越高。（2）不同p H对脱毒效果的影响。在p H值2～9条件下脱毒率无明显变化。（3）不同组分对脱毒效果的影响。HDR-02菌株灭活菌悬液对AFB1的脱毒能力最强,脱毒率达到87.1%,活菌悬液次之,发酵液上清和胞内物对AFB1的脱毒率较低。（4）评估菌体-AFB1复合物的稳定性。评估表明菌体-AFB1复合物具有很高的稳定性。结果提示,脱毒率与脱毒时间有关但与p H无关;HDR-02的胞外产物可以降解AFB1;灭活菌悬液的结果排除了HDR-02菌体通过生物代谢脱毒的假设,表明HDR-02的菌体通过紧密吸附AFB1的方式脱毒。3、动物试验验证效果动物试验方案:A组（空白对照组）;B组（益生菌组）;C组（益生菌+AFB1攻毒组）;D组（AFB1攻毒组）。分别在第7天和第10天采样,评价各组各期雏鸭生产性能、血清生化指标、肝脏病理变化,分析动物试验效果。各组各期雏鸭的生产性能结果表明,灌服HDR-02能显著提高未攻毒组雏鸭的体重和平均日增重（P<0.05）,提高雏鸭的生产性能;AFB1攻毒显著降低雏鸭体重、平均日增重（P<0.05）,甚至引起雏鸭死亡;灌服HDR-02菌悬液能降低AFB1中毒雏鸭死亡率,显著缓解AFB1中毒对雏鸭体重、平均日增重的影响（P<0.05）。血清生化指标结果表明,益生菌组雏鸭的血清生化指标与空白对照组相比无显著差异（P>0.05）;AFB1攻毒组雏鸭的血清生化指标中ALT、AST指标显著高于空白对照组（P<0.05）,而HDR-02的添加可以显著缓解这一现象（P<0.05）。肝脏切片观察发现,HDR-02菌株和饲养管理不会对雏鸭的肝脏组织结构造成损伤;AFB1破坏雏鸭肝脏组织结构,导致脂肪变性、炎性细胞浸润、胆小管增生等病理学变化;HDR-02菌株的添加能缓解AFB1对雏鸭肝脏组织结构的破坏。以上结果表明HDR-02既可以发挥益生作用,提高雏鸭的生产性能;又可以发挥脱毒作用,有效缓解AFB1对雏鸭的损伤。