关键词： Aflatoxins   ELISA   Inodorous melons   ISTA techniques   Seed-borne mycoflora  

摘要： Twenty-two seed samples of inodorous melons, collected from the areas of Peshawar, Swabi, Tordher, Fatu-chuk, Mardan, Karachi, Islamabad, Ghotki, and Mandibahauddin, yielded 75 species of 36 fungal genera, isolated through ISTA (International Seed Testing Association) techniques. The agar plate method was chosen as being best for the qualitative and quantitative isolation of fungi, followed by the standard blotter method. The agar plate method yielded 64 species of 29 genera, while the blotter method yielded 24 species belonging to 14 genera. The deep-freezing method yielded only 2 species belonging to 2 genera. Aspergillus niger, followed by A. flavus, Chaetomium globosum, and Rhizopus stolonifer were the most dominant fungi in all 3 methods used. Forty species belonging to 25 genera had not been previously reported from Pakistan. Seven seed samples, which were highly infected with fungi, were grown in test tube slants, included samples from Tordher (1), Ghotki (1), Mandibahauddin (1), Karachi (2), Islamabad (1), and Fatu-chuk (1). Aspergillus flavus was the most dominant fungi, causing pre- emergence rot of seedlings. Fusarium oxysporum caused 3.6% of seedling deaths after 10 - 12 days of incubation. Seed samples from Islamabad, Mandibahauddin, and Swabi were highly infected with A. flavus. The level of aflatoxin B1 estimated through CD-ELISA for the 3 samples was 32.64 ppb (Swabi), 11.48 ppb (Islamabad), and 7.30 ppb (Mandibahauddin), respectively, of which the seed sample from Swabi contained the highest level of aflatoxins. Surface sterilization of seeds with 1% Calcium hypochlorite (Ca (OCl)₂) greatly reduced the incidence of both saprophytic and superficial pathogenic fungi. © 2016, Walailak University. All rights reserved.

关键词： excipients   film coating   moisture-proof   preparation   traditional Chinese medicine   中药   制剂   薄膜包衣   辅料   防潮   Language of Keywords: English   Chinese  

摘要： 目的 综述近年来中药制剂防潮的策略,为质量控制提供依据。 方法 通过查阅近年来国内外相关文献,进行归纳、分析和总结。 结果 中药的提取技术、辅料的选用及薄膜包衣影响中药制剂的吸湿性。 结论 中药防潮技术的研究尚需进一步地深入。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]

关键词： 中药制剂   不良反应   预防  

摘要： 目的:探讨中药制剂不良反应报告分析及预防对策.方法:对110例中药制剂ADR报告患者的个体特征药品种类、给药途径以及累及器官分布情况进行分析.并结合相关文献资料与临床工作实践提出针对性的解决策略.结果:110例ADR患者中有60(54.55％)例为女性,有50(45.45％)例为男性;由此可知,女性出现中药制剂不良反应的概率要高于男性.而在出现中药制剂不良反应的年龄段中0-15岁以及46岁以上患者的发生率较高,其中,0-15岁之间的发生例数为43(39.09％)例.研究发现110例ADR患者中静脉注射患者有51例,占总数的46.36％(51/110);患者中使用活血化瘀类药品有39例,占总数的35.45％ (39/110)由此可以推断是的静脉注射所引起的中药制剂不良反应率较高,而由活血化瘀类药品所引起的不良反应病例较多此外,中药制剂不良反应主要累及皮肤.结论:在进行中药制剂治疗时应当谨慎用药并按照相关规范标准对症实施,提高临床用药的安全性.

关键词： 棉籽粕   黄曲霉毒素B1   霉菌   黄曲霉菌   游离棉酚   棉籽   饲料原料  

摘要： 黄曲霉毒素B(Aflatoxin B,AFB)毒性极强,对人类和畜禽健康的危害极大,引起全世界的广泛关注。2013年长江中下游某地区的棉籽粕中AFB突然出现异常污染的现象,导致配合饲料中AFB严重超标,给当地的畜牧业生产,尤其是养鸭业造成了巨大的经济损失。本试验对此次棉籽粕中出现AFB异常污染现象的原因进行研究,以便为预防此类事件再次发生提供参考。本试验调查分析了当地自然气候特点和棉花品种状况,对棉籽中的霉菌区系进行了分析,筛选了产黄曲霉毒素菌株,并研究了高产毒菌株在不同饲料原料中的产毒差异,以及游离棉酚对高产毒菌株的生长速率和产毒能力的影响。具体研究内容及结果如下:1.2011-2015年间长江中下游某地区自然气候特点和棉花品种状况通过调查统计2011-2015年间当地的主要棉花品种和棉花生长期的温度分布以及降雨量情况,从而分析自然气候和棉花品种对当地棉籽粕中AFB污染水平异常的影响。结果表明,2013年棉花进入花铃期(7、8月份)后,温度较其他年份明显偏高,并且降水量充沛,这种高温高湿的炎热天气可能刺激产黄曲霉毒素真菌的生长。但在棉花吐絮盛期(9月份),温度与其他年份大致相同,比较温暖,降水量则比其他年份明显偏高,这种温暖潮湿的气候条件有利于AFB的产生,同时有可能导致棉花在收获、贮藏的过程中含水量偏高,从而更容易被霉菌污染。棉花品种的调查结果显示,2013年当地主要推广的棉花品种与其他年份相比并无明显变化。2.棉籽中的霉菌区系利用稀释分离法从AFB含量为862.25±67.02μg/kg的棉籽中分离霉菌,进一步培养获得纯化菌株,然后通过菌落形态特征观察和显微镜检进行形态学鉴定,并通过ITS序列分析进行分子学鉴定。结果表明,本试验共分离得到21个霉菌菌株,分别属于6个不同的属,即Aspergillus,Penicillium,Alternaria,Fusarium,Leptosphaeria和Arthrinium.其中曲霉属真菌出现最为频繁,其次是青霉属真菌,另外链格孢霉属和镰刀菌属也常出现;最普遍的物种为黄曲霉、产黄青霉和杂色曲霉。3.棉籽中的产黄曲霉毒素菌株及其产毒能力利用AFPA培养基筛选潜在的产黄曲霉毒素菌株,然后接种在PDA培养基上培养7天后检测AFB产量,从而筛选产黄曲霉毒素菌株并分析其产毒能力大小。结果表明,筛选到的5株黄曲霉菌都能够产生AFB,但不同菌株的产毒能力不同,在PDA培养基中的产毒能力大小依次为:CS05>NRRL3357>CS17>CS12>CS08>CS07。本试验得到的黄曲霉菌CS05为高产毒菌株,在PDA培养基中30℃培养7天后测得的AFB含量为16.91±1.79μg/皿,产毒能力显著大于标准产毒菌株黄曲霉菌NRRL3357(10.24±0.86μg/皿)(P<0.05),在后续试验中将黄曲霉菌CS05作为试验菌株。4.黄曲霉菌CS05在不同饲料原料中的产毒差异在不同的饲料原料及副产品中分别接种黄曲霉菌CS05和黄曲霉菌NRRL3357,培养10天后检测AFB含量,从而比较黄曲霉菌CS05在不同饲料原料中的产毒差异以及黄曲霉菌CS05和黄曲霉菌NRRL3357在不同原料中的产毒能力大小。结果表明,黄曲霉菌在不同饲料原料及副产品中产毒量具有明显的差异:在小麦、棉粕、豆粕中的AFB产量都比较低;而在玉米中的产毒量较高,并且灭菌之后产毒量更高;在未灭菌棉籽和大豆中的AFB产量较低,灭菌后产毒量显著升高。另外,在大多数原料和副产品中,黄曲霉菌CS05的产毒能力比黄曲霉菌NRRL3357强。在不灭菌或化学灭菌条件下接种黄曲霉菌CS05,颗粒棉籽中的AFB产量高于粉碎棉籽,而在高压灭菌条件下,颗粒棉籽中的AFB产量低于粉碎棉籽,表明微生物区系和游离棉酚含量影响黄曲霉菌CS05在棉籽中的产毒量。经测定,当地棉籽粕样品的游离棉酚含量明显偏低,间接反映了当地棉籽中游离棉酚含量低于其他地区。5.游离棉酚对黄曲霉菌CS05的生长和产毒的影响在合成培养基中添加不同浓度的游离棉酚,接种黄曲霉菌CS05进行培养,然后通过测量菌落直径以及检测AFB产量,分析不同添加水平的游离棉酚对黄曲霉菌CS05的生长速率以及产毒能力的影响。结果表明,在PDA培养基中游离棉酚的添加浓度≤300μg/m L时,并不影响黄曲霉菌CS05的生长,但却能够抑制黄曲霉菌CS05产生AFB,最高抑制率达到70.22%。在察氏培养基中添加游离棉酚能够抑制黄曲霉菌CS05的生长,并且不同的生长时期抑制率不同;同时游离棉酚也能够抑制黄曲霉菌CS05产生AFB,游离棉酚添加浓度≥75μg/m L时,产毒抑制率均超过90%。在一定浓度范围内,游离棉酚对黄曲霉菌CS05的抑制效果随浓度的增加而增加,达到一定程度后,其抑制效果趋于稳定。综上所述,本研究得出以

关键词： 黄曲霉毒素B1   间接竞争ELISA   方法学研究  

摘要： 黄曲霉毒素B1是目前发现毒性最强、致癌性最高的化学物质之一,主要是由黄曲霉和寄生曲霉寄生产生的的代谢产物,理化性质稳定,易于污染,在农产品、蔬菜、加工食品、饲料等中常被检测出。黄曲霉入侵到食物链中,将产生对应的黄曲霉毒素,人体或动物一旦食用将对机体产生巨大的危害。目前,世界各国对农产品、食品、饲料等中黄曲霉毒素B1含量都有严格的限制。避免黄曲霉毒素在食物链中的污染,不仅仅是在农产品原料方面的防控,在农产品材料贮藏、食品加工、物流流通环节更要进行检测监督。我国对黄曲霉毒素B1检测技术的研究工作进行了许多年,形成的检测技术手段分为三大类,国际上权威的检测方法是利用精密仪器-高效液相法进行检测,我国也执行此项检测法,但该方法设备成本较高、不利于操作,样品的前处理繁琐,检测流程整体时间较长,不利于监测部门对市场的动态监督。间接竞争ELISA方法是利用抗原抗体相互结合,酶标二抗加入后与底物反应显色以确定检测物含量的实验技术,该实验技术转化为试剂盒产品将形成具有对样品的前处理要求低,便于操作,而且能大大缩短检测时间的可推广化产品。本项目研制的间接竞争ELISA试剂盒,通过条件的优化,确定了所需的包被抗原最佳加入量为50ng/孔,黄曲霉毒素B1单克隆抗体加入量为100ng/孔,二抗稀释比例为1：500最合适；所研制的间接竞争ELISA试剂盒检测结果较高效液相法(HPLC)对比符合率大于98%,检测结果与国际认可方法一致；试剂盒的准确度研究采取了检测大米、玉米、花生中黄曲霉毒素B1的检测,结果显示大米检测回收率为：85%-91%,玉米检测回收率为：84%-94%,花生检测回收率为：88%-92%,回收率均符合国家标准回收率80%-120%范围,说明了研制的试剂盒检测结果的准确度高；试剂盒灵敏度研究,进行了对大米、玉米、花生的检测限分析,结果显示出该试剂盒对大米的检出限为：0.25μg/kg,玉米的检出限为：0.30μg/kg,花生的检出限为：0.30μg/kg,说明了该试剂盒的检测限灵敏且比国家标准检出限更低更；试剂盒精密的研究,采取了监测大米的ELISA检测板,结果显示板内差异3.0%、2.7%、3.2%,板间差异2.9%,说明研制的试剂盒批内与批间的差异不大,检测方法稳定,检测结果不受研制试剂盒批次的影响。

关键词： 中药制剂   不良反应   安全性  

摘要： 随着目前医学界越来越重视中药制剂的治疗效果,在临床治疗中对中药制剂的使用越来越普遍,继而导致了中药制剂不良反应的增加,过去人们对中药制剂存在绝无毒副作用的误区,但实际上如果应用不当,会导致患者出现不良反应。本次研究对多种中药制剂的不良反应进行了分析,以期保证中药制剂使用的安全性。

关键词： 黄曲霉毒素B1   糙米   玉米   花生粕   挤压加工   降解产物   毒性  

摘要： 黄曲霉毒素（Aflatoxins,AFT）是由真菌黄曲霉和寄生曲霉等产生的次级代谢产物,其中,以黄曲霉毒素B1（AFB1）毒性最强,被国际癌症研究机构划定为IA类致癌物。由于AFB1广泛存在于污染的食品和饲料中,世界卫生组织已将控制食品中AFB1污染作为全球公共卫生管理的重要目标,其研究和安全管理也日益受到重视。挤压膨化和组织化是有效降解毒素污染粮食中AFB1的新型技术。然而,关于AFB1在污染毒素粮食挤压加工中的降解机理及其降解产物研究的相关报道还比较少。本课题以AFT污染的糙米和玉米为材料,研究了挤压膨化工艺对AFB1的降解效果;以AFT污染的花生粕为材料,研究了挤压组织化工艺对AFB1的降解效果;AFB1在挤压过程中的降解主要与挤压温度和物料水分有关,研究溶液体系中AFB1的热降解效果有助于理解AFB1的挤压降解机理以及降解产物的化学结构、降解路径,因此,本课题研究了溶液体系中AFB1的热降解。试验中还评估了AFB1污染的玉米挤压前后的毒性,有助于理解降解产物结构变化对其毒性的影响。本论文的研究内容和试验结果主要有以下五个方面:（1）挤压膨化技术降解AFT污染的糙米和玉米中的AFB1试验条件的优化。以AFT污染的糙米为原料,通过挤压膨化试验优化了糙米加工过程中的工艺参数:机筒温度160～180℃,物料水分21%27%,喂料速度40～60 g/min,螺杆转速140～180 r/min。以AFT污染的玉米为原料,优化了玉米的挤压膨化工艺参数:机筒温度150～170℃,物料水分21%27%,喂料速度42～54 g/min,螺杆转速120～160 r/min。通过响应面试验优化了挤压膨化过程中影响糙米中AFB1降解的工艺参数。试验中得到的最佳工艺条件为:机筒温度180℃,物料水分25%,喂料速度45 g/min和螺杆转速172 r/min,在该条件下AFB1降解率为53.8%。通过响应面试验优化了挤压膨化过程中影响玉米中的AFB1降解的工艺参数,得到最佳工艺条件为:机筒温度163℃,物料水分25%,喂料速度48 g/min和螺杆转速145 r/min,此时,AFB1降解率为39.6%。研究结果表明,物料水分和机筒温度对AFB1的降解率具有极其显著的影响。（2）挤压组织化技术降解AFT污染的花生粕中的AFB1试验条件的优化。以AFT污染的花生粕为原料,优化了花生粕的挤压组织化工艺参数:130～150℃,物料水分38%42%,喂料速度16～20 g/min,螺杆转速120～160 r/min。通过响应面试验优化了挤压组织化过程中影响花生粕中AFB1降解的工艺参数。试验中得到的最佳工艺条件为:机筒温度150℃、物料水分40%、喂料速度17 g/min和螺杆转速152 r/min,在该条件下AFB1降解率为77.6%。研究结果表明,物料水分和机筒温度对AFB1的降解率具有极其显著的影响。（3）AFB1挤压降解产物的研究。以液相色谱串联飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF-MS）为检测工具,分析了AFB1的降解产物。由于花生粕中AFB1的含量较低,试验中花生粕经挤压处理后未能检出AFB1的降解产物。因此,试验中改进了研究方法,利用恒温电加热器、聚乙烯管加热甲醇水溶液体系中AFB1标准品,研究了温度对AFB1热降解率及其产物的影响,明确热降解产物结构。初始浓度20 mg/L的AFB1经120℃处理后,热降解效果不明显;经210℃处理后,热降解效果非常明显,降解率达到93.8%。利用HPLC-Q-TOF-MS分析了AFB1在甲醇水溶液体系中的2个热解产物的分子结构信息,其分子式分别为C17H14O7和C18H16O7。试验中利用定量构效关系评估了AFB1的热降解产物的毒性效应。呋喃环双键部位是AFB1的毒性活性结构。比较2个热解产物与AFB1的结构发现,热解产物的呋喃环双键被加成,不饱和度降低。因此,与同浓度AFB1相比较,热降解产物的毒性要小,进而推测挤压加工可能会降低AFB1的毒性。（4）溶液体系中AFB1热降解动力学研究。在100、120、150、160和180℃下对200μg/L AFB1溶液体系（pH值分别为5、7和9）进行热处理,发现溶液体系中AFB1的热降解率随着温度的升高和加热时间的延长而升高。pH值为9的AFB1溶液体系在100℃加热60 min后,AFB1的降解率低于11%;pH值为5、7和9的AFB1溶液体系在150℃加热60 min后,AFB1的降解率分别为56%,29%和78%;不同pH的AFB1溶液体系在160℃加热处理60 min后,AFB1的降解率都在81%以上;不同的pH的AFB1溶液体系在180℃加热处理60 min后,AFB1全部降解。研究发现,AFB1在pH值为7的溶液中最稳定,在pH值为9的溶液中最不

关键词： 药物制剂   新技术   中药制剂现代化   应用分析  

摘要： 各种药物制剂新技术的发展,极大的促进了我国中药制剂现代化的发展。而将新颖、多样化的的药物制剂技术与中药制剂的传统方式进行科学整合,不仅有助于促进中药治疗质量,以及临床用药价值的不断提升,也能够进一步拓展中药现代化的发展空间。

关键词： 中药   幽门螺杆菌   实验  

摘要： 目的研究5种中药制剂杀灭幽门螺杆菌的效果。方法选择2014年5月~2015年5月我院保存的新鲜活检胃黏膜标本作为实验材料，培养幽门螺杆菌群，制作细菌悬液，制备40、50、55mg/ml的黄连、黄芪健中汤、逍。汤、枳实、紫草中药制剂，记录菌群存活情况和中药的灭菌率。结果一定浓度的黄连、黄芪健中汤和枳实可有效灭杀幽门螺杆菌，可将幽门螺杆菌的菌落数从107CFU/ml降至106CFU/ml，黄连该浓度在在40~50mg/ml之间，黄芪健中汤和枳实的该浓度在50~55mg/ml之间，逍。汤和紫草的灭菌效果随着中药制剂的浓度增大而增强；黄连的杀菌作用最理想，50~55mg/ml黄连灭杀幽门螺杆菌的杀菌率达99.00%，而枳实、黄芪健中汤的杀菌功效次之。结论黄连的杀菌作用最强，其次为枳实、黄芪健中汤、紫草、逍。汤。

关键词： 黄曲霉毒素B1   雏鸭   肝脏   基因表达   RNA-seq   金属硫蛋白   泛素蛋白连接酶E3  

摘要： 饲料中黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）污染普遍存在,严重损害动物的健康,降低动物的生产性能,并造成畜产品中黄曲霉毒素的残留,给畜产品的食用安全带来极大隐患。雏鸭是常见畜禽中对AFB1最敏感的物种之一。我国是鸭生产大国,约占全世界出栏量80%。因此,阐明AFB1对鸭的毒性机理是寻求鸭AFB1中毒病防治的理论基础。肝脏是经口摄入AFB1在动物体内主要的蓄积、生物转化的场所,也是AFB1危害的主要靶器官,且雏鸭的肝脏损伤具有典型的病理学变化特征。因此阐明AFB1致鸭肝脏损伤的机理,并筛选出调控AFB1致鸭肝脏损伤的关键基因,为AFB1中毒病的防治提供了理论基础,是指导鸭安全生产的迫切需要。本研究首先从机体整体水平研究AFB1对雏鸭肝脏的毒性效应。在成功建立雏鸭亚急性中毒模型的基础上,采用RNA-seq技术测定AFB1亚急性中毒雏鸭肝脏基因表达谱的变化,采用生物信息技术分析AFB1作用下的差异表达基因、KEGG通路分析以及GO分析,并据此筛选调控AFB1致亚急性中毒雏鸭肝脏损伤过程中的重要候选基因。最后通过分子生物学试验验证候选基因在AFB1致雏鸭肝脏损伤过程中的作用,并对其调控机制进行研究,以阐明AFB1致雏鸭肝脏损伤的机制。本研究得到的主要结果如下。第一部分,模拟生产中雏鸭实际接触AFB1的剂量,建立雏鸭AFB1肝脏损伤模型。试验选取24只1日龄雄性樱桃谷肉鸭,分为4组,每组6只鸭。于8日龄开始连续2周分别灌胃0、10、20及40μg/kg·BW AFB1溶液,于23日龄时屠宰取样,测定并分析AFB1对雏鸭生长性能、血液生化指标、肝脏抗氧化功能及组织病理学变化的影响,综合评价AFB1对雏鸭的亚急性毒性效应。本试验得到的主要结果如下:1.与对照组相比,灌胃20及40μg/kg·BW AFB1使得雏鸭体重分别显著降低（P<0.05）8.6%及18.9%。同时,雏鸭的采食量在灌胃20及40μg/kg·BW AFB1组中分别下降了6.6%及17.8%。灌胃10μg/kg·BW AFB1对雏鸭生产性能无显著影响;2.与对照组相比,灌胃20及40μg/kg·BW AFB1显著增加（P<0.05）了雏鸭血清中ALT（35.3%及73.9%）和AST（28.8%及137.3%）的活性,降低（P<0.05）了血清中TP（20.8%及55.6%）和ALB（27.8%及67.5%）的含量。灌胃10μg/kg·BW AFB1对雏鸭血液指标无显著影响;3.与对照组相比,灌胃20及40μg/kg·BW AFB1显著降低了（P<0.05）雏鸭肝脏中GPX（17.5%及34.5%）、SOD（12.7%及18.1%）及CAT（17.1%及37.1%）的活性和GSH（30.9%及43.4%）的含量,以及升高了（P<0.05）肝脏中MDA（160.0%和251.4%）的含量。灌胃10μg/kg·BW AFB1仅显著增加（P<0.05）肝脏中MDA（48.6%）的含量,而对其它抗氧化指标无显著影响;4.不同浓度AFB1处理均导致雏鸭肝脏发生了病理学变化。与对照组相比,10μg/kg·BW组有轻微的胆管上皮增生,肝细胞胞质内空泡较大。20μg/kg·BW组部分肝细胞坏死,汇管区胆管上皮细胞增生较明显,肝细胞内脂滴增大且集中。40μg/kg·BW组肝细胞大量坏死,胆管上皮细胞增生明显,约一半面积被增生的胆管上皮占据,肝组织中脂质含量较少。第二部分,在AFB1致雏鸭肝脏损伤模型基础上,选取对照组及40μg/kg·BW AFB1灌胃组雏鸭肝脏样品,每组各取3个生物学重复的RNA样品等质量混合,进行RNA-seq测序,研究AFB1致雏鸭肝脏亚急性损伤过程中的差异表达基因,系统分析AFB1致雏鸭肝脏损伤的分子机制。本试验得到的主要结果如下:1.对照组和AFB1处理组肝脏组织RNA-Seq测序共得到了14.9 Gb的原始数据,经质量控制和de novo拼接后,对照组和AFB1处理组分别得到60,723,216及73,435,290个高质量的Reads,分别占其原始Reads比例的90.4%和89.7%。将这些转录子序列投射至NCBI NR和Uni Prot数据库中进行比对,最终有38110个转录子能得到注释,达到总测序数据库的39.3%;2.与对照组相比,40μg/kg·BW AFB1处理后雏鸭肝脏中共有749个基因差异表达大于2倍以上,其中,40μg/kg·BW AFB1处理使得肝脏中有512个基因在转录水平上调及237个基因转录水平下调;3.通过GO功能归类分析发现,上述差异基因中有391个基因是参与机体生物学过程、细胞组成和细胞功能相关。按照生物学过程分类方法中参与细胞代谢、氧化还原反应、免疫应答以及负调控细胞凋亡和脂肪酸代谢等过程相关基因变化最多。按照细胞