关键词： 中药制剂   周氏芪凌汤   乌苯美司   晚期前列腺癌   临床疗效  

摘要： 目的观察并探讨通过中药制剂周氏芪凌汤联合乌苯美司治疗晚期前列腺癌(advanced prostate cancer,APC)的临床疗效。方法选择APC患者150例,根据随机数字表法分为观察组及对照组各75例,其中,对照组患者给予常规的双侧睾丸切除加全雄激素阻断治疗,而观察组患者在对照组患者治疗的基础上给予周氏芪凌汤联合乌苯美司治疗。记录两组患者治疗前后的前列腺特异抗原(PSA)、最大尿流速、前列腺体积以及KPS评分,并统计其治疗后的并发症发生情况以及总体疗效。结果观察组患者治疗后PSA、最大尿流速、KPS评分优于治疗前;对照组治疗后最大尿流速、KPS评分优于治疗前,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后,两组患者的前列腺体积大小无明显差异(P﹥0.05);治疗后,观察组的PSA水平低于对照组,最大尿流速和KPS评分高于对照组,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。观察组和对照组患者并发症总发生率分别为62.67%(47/75)和93.33%(70/75),总有效率分别为29.33%(22/75)和20.00%(15/75),病情控制率分别为81.33%(61/75)和50.67%(38/75),差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论通过周氏芪凌汤联合乌苯美司治疗能改善APC患者的病情,提升患者的生活质量,在临床上值得推广应用。

关键词： 鸡球虫病   中药提取物   柔嫩艾美耳球虫   杯状细胞   HE染色   防治试验  

摘要： 鸡球虫病是危害养鸡业最为严重的疾病之一。该病是由一种或多种球虫寄生于鸡肠道上皮细胞内，引起肠道组织的损伤以及肠道正常机能降低，进而诱发病原的入侵和繁殖，导致较高死亡率的寄生虫病。耐过鸡表现为增重缓慢、饲料报酬率低和生产性能下降等，给养鸡业造成了巨大的经济损失。柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）是一种细胞内专性寄生虫，是危害鸡最为严重的球虫之一。目前，化学药物在球虫病的防治过程中发挥至关重要的作用，但是随着药物的长期使用，耐药虫株不断的出现，迫切需要寻求新的抗球虫措施。考虑到抗球虫药物的更新换代较慢且花费巨大，大量的学者将目光转向经济环保的中草药防治球虫病上。因此，本研究开展了马齿苋提取物、板蓝根大青叶提取物、女贞子提取物、苦参鸦胆子提取物和穿心莲大青叶提取物对鸡***防治效果的研究，以期为后续试验提供基础数据。主要通过以下几个方面进行研究：\n （1）中药提取物体外抑制E. tenella孢子化研究\n 收集获得 E. tenella新鲜未孢子化卵囊并与上述中药提取物共同孵育，分别于孢子化12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h时显微镜观察并计算卵囊孢子化率。通过两次试验结果表明：E. tenella卵囊孢子化能够在0～48 h之内完成，苦参鸦胆子提取物正常剂量和2倍正常剂量可以在孢子化前期阶段（12～24 h）减缓卵囊的孢子化。其它中药提取物对E. tenella卵囊的孢子化影响效果不明显。\n （2）中药提取物抗鸡E. tenella的疗效研究\n 以存活率、增重率、血便记分、病变记分、克粪便卵囊数（OPG）、卵囊值和抗球虫指数（ACI）为评价标准来衡量上述各中药提取物抗鸡 E. tenella的疗效。结果表明：当卵囊接种剂量为4×104个/只鸡时，鸡死亡率较高，中药提取物组的各项参考指标与感染不加药组差异不大，其发挥的抗球虫疗效有限。当卵囊接种剂量为1×104个/只鸡时，除了板蓝根大青叶正常剂量组，其它各中药提取物组鸡只的血便记分都低于感染不加药组，日均增重、净增重和增重率明显高于感染不加药组和地克珠利组，对鸡的生产性能有极大的促进作用。各种中药提取物抗球虫指数在110～160之间，表现出中等有效或接近中等有效。\n （3）中药提取物对鸡盲肠组织形态学的影响\n 采用组织切片和 HE染色技术对盲肠组织形态学变化进行了观察。结果表明：E. tenella主要寄生在盲肠肠腺以及肠上皮细胞内。其中马齿苋提取物2倍正常剂量组和苦参鸦胆子提取物正常剂量组盲肠肠腺完整，组织间有少量出血点。其它各组抗球虫效果均不明显。\n （4）中药提取物对鸡盲肠组织杯状细胞的影响\n 采用 PAS染色技术检测了鸡盲肠组织杯状细胞的分布变化，研究发现在对照组，盲肠组织杯状细胞主要分布在隐窝上皮，E. tenella感染后，大量的杯状细胞上移至盲肠粘膜上皮，中药提取物显著增加了盲肠杯状细胞的含量。提示中药提取物可以通过提高机体的粘膜免疫细胞的含量发挥抗球虫作用。\n 综上结论，所选中药提取物体外均对球虫卵囊的孢子化作用效果不明显，但体内试验表明当E. tenella按接种剂量为1×104个/只鸡时，各组中药提取物均表现出一定的抗球虫活性，这可能是因为中药提取物一方面通过提高鸡的生产性能，升高盲肠杯状细胞的分泌，增强机体肠道的黏膜免疫，另一方面通过直接杀灭球虫，进而发挥抗球虫作用。

关键词： 凡纳滨对虾   饲料   黄曲霉毒素B1   硒元素   肝胰腺   组织结构   抗氧化能力  

摘要： 为了研究饲料中高浓度黄曲霉毒素B1(AFB1)对凡纳滨对虾（Litopenaeusvannamei）肝胰腺的影响，实验组投喂含1600μg/kg AFB1的饲料，对照组则饲喂正常的配合饲料，每组设置3平行组。饲喂8周后取样，分别测定对凡纳滨对虾生长性能的影响，饲料中AFB1及其代谢产物AFM1在凡纳滨对虾肝胰腺、肠道、肌肉中的残留量及肝胰腺和血淋巴中的生化指标，观察肝小管的显微结构。实验结果表明:当对虾长时间摄入高浓度AFB1时，除了肝脂肪沉积量没明显差异(P＞0.05)，成活率、肝体比、增重率等生长指标之间都存在显著差异(P＜0.05)，肝胰腺中残留量大于肠道中残留量，肌肉中检测不到残留量存在;AFM1残留量表现出相同规律;实验组肝胰腺中丙二醛(MDA)显著高于(P＜0.05)对照组，但是两组血淋巴中MDA平均含量没有显著性差异（P＞0.05），肝胰腺和血淋巴中超氧化物歧化酶(SOD)实验组均低于对照组，但只有肝胰腺中有显著性差异(P＜0.05);对照组肝胰腺中活性氧(ROS)含量显著高于(P＜0.05)实验组;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均为对照组高于实验组，但只有血淋巴中酶活性差异显著（P＞.05）;谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性肝胰腺为对照组高于实验组，血淋巴则表现出相反的规律，且都有显著差异（P＜0.05）;总抗氧化能力(T-AOC)均为实验组值低，且血淋巴中存在显著性(P＜0.05);实验组血淋巴中酚氧化酶(PO)酶活性高于对照组。从切片显微结构观察出肝胰腺细胞受到损伤，损伤规律为近消化道损伤严重，逐渐向肝胰腺边缘扩散，表现为肝胰腺细胞紧缩，出现空泡区，食道周围肝细胞消失，严重的仅残留肝小管甚至是消失。\n 在体外培养肝胰腺细胞的基础上，实验配制0，0.15，0.30，0.45，0.60，0.75μg/mL5个不同浓度的硒(Se)元素溶液来研究其对细胞抗氧化能力的影响，另用1600μg/L浓度的AFB1溶液感染细胞，来探究合适浓度的Se元素对AFB1毒性损伤的缓解作用，结果表明0～0.45μg/mL之间随着溶液中Se元素浓度的增加，微量丙二醛(MDA)含量呈现降低趋势，各个梯度之间并没有显著性差异(P＞0.05)，过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GR)、总抗氧化酶(T-AOC)酶活性在0～0.45μg/mL范围内随着Se元素浓度的增加而加强，但超氧化物歧化酶(SOD)活性最大值出现在0.60μg/mL浓度下，当浓度0.45μg/mL时GSH-Px酶活性明显要高于其他的浓度（P＜0.05）;当加入高浓度的AFB1时，MDA含量则表现一直升高的趋势，且0～0.5h与2.0～3.0 h之间存在显著差异(\'＜0.05)，CAT，GSH-Px，GR，SOD，T-AOC等酶活性都有下降的趋势，当加入合适浓度的Se元素溶液后随着时间的变化MDA含量有一定程度的改善，CAT，GSH-Px，GR，SOD，T-AOC等酶活性恢复一定水平。由此可见，本次实验中对肝胰腺细胞抗氧化能力影响最适的Se元素浓度为0.45μg/mL，Se元素可以缓解AFB1对肝胰腺细胞的毒性作用并增强其抗氧化能力。

关键词： 中药制剂   由繁入简   教学分析  

摘要： 中药制剂分析是相关涉中药专业学科中的基础必修课程,对学生的中药实践与研究能力的提升具有重要作用。该门学科具有理论与实践相统一的特征,不仅要求学生具备一定程度的中药学理论基础,同时要对其分析化学、鉴定试验能力具有较高要求。但现阶段的中药制剂分析教学仍多以"平铺直叙"的形式开展课堂活动,其实际性效果不佳。主要针对此现象进行中药制剂分析教学的改进研究,着重分析"由繁入简"的教学原则以及该原则指导下教学内容的梳理与完善策略,以期为中药相关课程教学发展提供参考依据。

关键词： 黄曲霉毒素B1   人血清白蛋白   结合反应   光谱法  

摘要： 黄曲霉毒素B1（AFB1）是目前发现的致癌能力最强的真菌毒素,严重危害人畜健康。人血清白蛋白（Human serum albumin,HSA）在结合、运输内源性和外源性等小分子物质方面具有重要的生理功能。研究AFB1与HSA的相互作用机理和作用过程,在分子毒理学上具有重要意义。本研究模拟在人体血液pH条件（pH 7.4,离子强度0.1 mol/L）,通过荧光淬灭、3D荧光法和圆二色谱（Circular dichroism,CD）等光谱方法研究AFB1与人血清蛋白的相互作用。结果表明,AFB1与HSA的内源荧光淬灭属于静态淬灭,AFB1-HSA在298,303,308和313 K4个温度条件下,结合常数均为10-4数量级,结合位点都约为1。根据Van＇t Hoff方程AFB1-HSA体系是熵增焓减的自发过程,分子间主要作用力为疏水作用和氢键。基于Forster＇s能量转移,得知AFB1与HSA结合距离为3.31 nm。竞争结合实验表明,AFB1结合在HSA的siteI位点上,靠近色氨酸Trp-214。通过3D荧光分析,AFB1的结合作用导致了HSA氨基酸残基微环境和二级构象发生变化。圆二色谱的分析结果表明,二者的结合使得HSA的α-螺旋含量增加。

关键词： 硒   黄曲霉毒素B1   丙二醛   过氧化氢酶   谷胱甘肽过氧化物酶  

摘要： 本试验旨在研究体外培养中硒（Se）对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）肝胰腺细胞抗氧化能力的影响以及对黄曲霉毒素B1（AFB1）毒性的缓解作用。在体外培养肝胰腺细胞的基础上,设定含不同浓度（0、0.15、0.30、0.45、0.60、0.75μg/m L）Se的培养液,研究Se对肝胰腺细胞抗氧化能力的影响;另用浓度为1 600μg/L的AFB1侵染细胞,探究Se对AFB1毒性的缓解作用。结果表明：当Se浓度处于0-0.45μg/m L时,随着Se浓度的增加,丙二醛（MDA）含量呈现降低趋势,但各个浓度之间并没有显著差异（P〉0.05）,过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力随着Se浓度的增加而增强,Se浓度为0.45μg/m L时GSH-Px活力显著高于其他浓度（除0.30μg/m L）时（P〈0.05）;当Se浓度处于0.45-0.75μg/m L时,随着MDA含量升高的同时CAT、GSH-Px活力下降。当细胞受到浓度为1 600μg/L的AFB1侵染后,随着培养时间的增加,MDA含量表现一直升高的趋势,同时CAT、GSH-Px活力都有一定程度的下降;当细胞受到浓度为1 600μg/L的AFB1和浓度为0.45μg/m L的Se共同作用后,随着培养时间的增加,MDA含量有一定程度的改善,CAT、GSH-Px活力得到一定程度的恢复。由此可见,在体外培养条件下,浓度为0.45μg/m L的Se有利于提高凡纳滨对虾肝胰腺细胞的抗氧化能力,且在一定程度上能缓解AFB1对肝胰腺细胞的毒性作用。

关键词： 复方杨树花白头翁口服液   禽大肠杆菌病   耐药性   中药制剂   临床疗效  

摘要： 大肠杆菌病是条件性疾病，其病原大肠杆菌在动物体内正常存在，当外界环境变化，机体免疫力下降，体内菌群失衡，大肠杆菌就会大量繁殖，造成机体发病。传统的抗生素治疗已经产生严重耐药性，疗效不佳，对人体和环境危害很大。而中药制剂绿色环保、无耐药性，毒副作用小，疗效确切。因此中药制剂代替抗生素治疗大肠杆菌病势在必行。\n 本研究致力于制备一种杨树花口服液与白头翁口服液的复方制剂，在增加杨树花口服液的治疗范围和疗效的同时，降低白头翁口服液的剂量，复方后该制剂在治疗效果上有显著提高，同时能降低成本。更适用于畜牧业养殖绿色、环保、安全的发展。\n 1.复方杨树花白头翁口服液的制备\n （1）提取工艺采用水煮醇提法，通过对影响杨树花提取的四个因素：提取溶媒饮用水的PH值、提取次数，每次提取时间，醇沉时含醇量.采用正交实验筛选出最佳提取条件，提取溶媒饮用水的PH值为7.0，提取两次，每次提取2小时，在醇沉时含醇量为65%。\n 采用水煮醇提法，分别制得杨树花口服液和白头翁口服液，使溶液浓度中生药含量为1g/ml。取上述提取液，按杨树花口服液、白头翁口服液2:1混合配置。选择偏重亚硫酸钠作为抗氧剂，加入助溶剂α-吡咯烷酮、丙三醇、乙醇，用氢氧化钠调节PH值为5.5，加入纯水，过滤，115℃灭菌30min即得复方杨树花白头翁口服液。\n （2）质量标准对复方杨树花白头翁口服液进行薄层鉴定，鉴定结果复方杨树花白头翁口服液与黄连对照药材有四个点一一对应，与盐酸小辟碱的点也对应，证明黄连检测合格，与秦皮对照药材在相同位置有同样的荧光点，证明秦皮检测合格，与水杨苷的点相同位置对应，证明水杨苷检测合格。\n （3）稳定性实验复方杨树花白头翁口服液经过高温实验、加速实验、光照加速实验、长期放置实验、低温放置实验，外观澄清，PH值不变，薄层鉴别各项成分合格。\n 2.体外抑菌实验\n 通过体外抑菌实验，测得复方杨树花白头翁口服液对大肠杆菌的最低抑菌浓度（MIC）为3.12～6.24mg,而单方杨树花口服液对大肠杆菌的最低抑菌浓度（MIC）为6.24～12.48 mg；白头翁口服液MIC值在6.24mg～12.48mg之间；通过体外抑菌实验测得复方杨树花白头翁口服液、杨树花口服液、白头翁口服液的抑菌圈直径分别为33.7mm、21.3mm、22mm，从抑菌圈大小对比，复方杨树花白头翁口服液优于单方杨树花口服液，也优于白头翁口服液。\n 3.人工感染鸡的治疗\n 将240只3日龄雏鸡随机分为健康对照组、感染不给药组、单方杨树花口服液组、复方杨树花口服液组、10%氟苯尼考溶液组及白头翁口服液组六组，每组40只。健康对照组不攻毒，其余各组小鸡每只腹腔注射大肠杆菌菌液1ml。除健康对照组、感染不给药组外，其它各组均在实验鸡人工感染大肠杆菌致病出现症状后开始全天饮药水，连续用药7d。各组实验鸡从首次用药后即每天观察记录鸡群的发病、死亡情况，连续观察10d。结果显示，感染不给药对照组与四个治疗组的显效率分别为45%、80%、92.5%、87.5%、85%；治愈率分别为25%、70%、87.5%、80%、75%，表明四个治疗组均比发病不给药对照组疗效极显著（P＜0.01）；复方杨树花白头翁口服液治疗组与单方杨树花口服液治疗组、白头翁口服液治疗组对比，显效率及治愈率均差异显著（P＜0.05）；与氟苯尼考溶液治疗组对比，虽然差异不显著（P＞0.05），但从数据上显示，复方杨树花白头翁口服液也略优于氟苯尼考溶液的治疗效果。\n 4.自然发病鸡的治疗\n 通过两个2000只左右的发病鸡场的三组临床对比治疗实验，结果为复方杨树花白头翁口服液治愈率分别为98.9%、90%、91.7%，氟苯尼考溶液治愈率分别为98.7%、87%、85%，虽然统计学分析，两组治疗效果差异不显著（P＞0.05），但从数据看出，复方杨树花白头翁口服液疗效略优于氟苯尼考溶液，且复方杨树花白头翁口服液治疗成本低于氟苯尼考溶液。\n 总之本研究成功制备出复方杨树花白头翁口服液，其制备工艺先进、稳定性好，对大肠杆菌敏感，治疗效果明显。明显优于单方杨树花口服液与白头翁口服液的治疗效果，也优于氟苯尼考溶液的治疗效果，且治疗成本低，具有广阔的市场前景和推广价值。

关键词： 低温射频等离子体   黄曲霉毒素B1   降解产物   经口LD50   安全性  

摘要： 研究黄曲霉毒素B1（AFB1）经低温射频等离子体处理后降解产物的安全性。以300 W功率处理100 mg/L AFB1标准品4 min,通过HPLC分析黄曲霉毒素的降解率;随后测定降解产物对Wistar大白鼠经口半数致死量（LD（50））及灌胃大白鼠的体质量及脏器指数。结果表明,在等离子体处理AFB1的降解率为29.32%的条件下,降解产物对大白鼠经口LD（50）为29.41 mg/kg,95%的可信限为25.15-34.40 mg/kg。与AFB1标准品相比,等离子体处理AFB1降解产物对断奶后大鼠的LD（50）（雄鼠5.50 mg/kg,雌鼠7.00 mg/kg）有一个数量级的提高。大鼠灌胃给药后,由于其采食量和饮水量逐渐降低,与空白对照组相比,体重呈下降趋势。降解产物组脏器指数（除肝、肾指数外）与对照组无显著性差异（P〉0.05）。综上所述,等离子处理AFB1后降解产物毒性较AFB1本身的毒性有所降低。同时,等离子体处理AFB1的降解率与毒性成正相关,今后可以在提高降解率的基础上进一步深入研究降解产物的安全性。

关键词： 高内涵筛选   中药提取物   阿尔茨海默病   β淀粉样蛋白   SH-SY5Y细胞   凋亡  

摘要： 目的应用高内涵(HCS)技术快速筛选对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)致SH-SY5Y细胞损伤模型有保护作用的中药提取物。方法选取20种中药饮片,每种药材分别进行20%、40%和95%乙醇提取,以Aβ25-35损伤的SH-SY5Y细胞为模型,采用Hoechst33342和PI双染,并利用HCS技术观察60个提取物对模型细胞的保护作用;在此基础上进一步观察活性提取物对模型细胞Caspase-3/7活性的影响,快速筛选对阿尔茨海默病(AD)有潜在治疗作用的中药提取物。结果 HCS筛选发现,在60个提取物中,有17个提取物对模型细胞具有较好的保护作用;进一步研究显示,其中有8个提取物对模型细胞Caspase-3/7活性有较好的抑制作用。并且以刘寄奴40%乙醇部位及丹参20%、40%乙醇部位效果最优。结论以荧光标记为基础的HCS技术是有效、快速筛选对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤模型有保护作用中药提取物的分析方法,筛选出的中药提取物具有潜在的抗AD活性。