关键词： 大柴胡汤   小柴胡汤   阿德福韦酯   乙肝纤维化  

摘要： 目的观察阿德福韦酯分别联合大柴胡汤与小柴胡汤治疗乙肝肝纤维化的疗效。方法陕西中医药大学附属医院慢性乙肝患者120例,随机数字表法将其分为两组,观察组为阿德福韦酯联合小柴胡汤,对照组为阿德福韦酯联合大柴胡汤,将两组的各项指标进行比较。结果治疗后,观察组的HA、LN、PCIII、ALT均低于对照组(P<0.05)。观察组HBe Ag转阴率、HBV-DNA转阴率均优于对照组(P<0.05)。结论在提高抗肝纤维化方面阿德福韦酯联合小柴胡汤要优于大柴胡汤。

关键词： 原花青素B2   黄曲霉毒素B1   肝功能   病理   氧化损伤   bcl-2/bax  

摘要： 目的:黄曲霉毒素（aflatoxin,AFT）是一类结构相似的化合物,主要由黄曲霉和寄生曲菌代谢产生。黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）是AFT中毒性最强的化合物,具有极强的致畸、致突变和致癌作用,其主要靶器官为肝脏,能引起肝细胞变性坏死及增生,严重者可导致癌变。在气候温暖潮湿的地区,霉菌易于滋长并产生AFB1,污染各类食物,危害人们的健康。原花青素（oligomeric proantho cyanidins,OPC）,广泛存在于水果、蔬菜、花瓣、种子等天然植物中,属于多酚类植物化学物。原花青素B2（Proanthocyanidin B2,PCB2）是原花青素中常见的一种二聚体,具有抗氧化、保护血管、抗炎、抗癌等功效,而关于PCB2对AFB1所诱导肝损伤的干预研究少有文献报道。本研究旨在探讨PCB2对AFB1致急性肝损伤的保护作用,为今后进一步研究PCB2的保肝护肝、防治肝癌的作用及其机制打下基础,也为今后预防AFB1的膳食指导以及AFB1治疗药物的开发提供一些理论依据。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、AFB1染毒组、PCB2干预组和PCB2单用组,每组10只,各组大鼠体重分布相近。预适应5天后,空白对照组、AFB1染毒组大鼠以双蒸水连续灌胃5天,每天一次;PCB2干预组和PCB2单用组大鼠用PCB2溶液以30mg/kg连续灌胃5天,每天一次。在灌胃的第六天,对照组和PCB2单用组大鼠予以DMSO溶液腹腔注射,AFB1染毒组和PCB2干预组大鼠予以2mg/kg AFB1溶液腹腔注射,观察48小时。观察期间每天每组大鼠仍以相应溶液灌胃。48小时后,取所有大鼠全血及肝组织,进行肝功能（AST、ALT、TBIL、DBIL、ALP）、病理学、脏器指数（肝指数、脾指数、肾指数）、氧化损伤（CAT、SOD、GSH、MDA、8-OHdG）、炎性因子（IL-6基因表达量及浓度）与凋亡相关指标（bcl-2、bax基因及蛋白表达）的检测。结果:1、在400倍镜下观察肝组织病理切片,空白对照组大鼠肝组织纹理清晰整齐,肝细胞呈多边形,边缘清晰。AFB1染毒组大鼠肝组织纹理杂乱不清,有炎性细胞浸润,存在点状坏死。肝细胞呈气球样变,细胞之间边界不清。PCB2干预组大鼠肝组织纹理整体相对清晰整齐,炎性细胞浸润减少,肝细胞变性程度降低。PCB2单用组大鼠肝组织情况同空白对照组。2、AFB1染毒组大鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL、ALP水平与空白对照组相比均明显升高（P<0.01）,PCB2干预后大鼠血清肝功能水平则明显降低（P<0.05）,但仍高于空白对照组（P<0.01）。PCB2单用组大鼠肝功能情况与空白对照组大鼠相同（P>0.05）。3、AFB1染毒组大鼠体重增长比空白对照组大鼠低（P<0.05）,肝指数、脾指数和肾指数均比空白对照组大鼠高（P<0.01）。PCB2干预组肝指数和肾指数比AFB1染毒组低（P<0.01）,脾指数比空白对照组高（P<0.05）。PCB2单用组大鼠体重增长幅度、肝指数和肾指数同对照组（P>0.05）,脾指数比空白对照组高（P<0.01）。4、与空白对照组相比,AFB1染毒组大鼠肝组织CAT、GSH、SOD水平降低（P<0.01）,血清MDA水平和肝组织8-OHdG含量增高（P<0.01）。PCB2干预后与AFB1染毒组相比,大鼠肝组织CAT、GSH、SOD水平提升（P<0.05）,血清MDA水平和肝组织8-OHdG含量降低（P<0.05）;与空白对照组相比,PCB2干预组大鼠肝组织CAT和GSH水平降低（P<0.01）,血清MDA水平和肝组织8-OHdG含量增高（P<0.01）,而肝组织SOD水平则无变化（P>0.05）。PCB2单用组大鼠肝组织CAT、GSH、SOD、8-OHdG含量与血清MDA水平均同空白对照组（P>0.05）。5、从大鼠肝组织IL-6基因相对表达量与血清IL-6浓度来看,AFB1染毒组均高于空白对照组（P<0.05）,PCB2干预组则低于AFB1染毒组大鼠（P<0.05）,但血清IL-6浓度高于空白对照组（P<0.01）。PCB2单用组大鼠IL-6基因相对表达量和血清IL-6浓度与空白对照组相近（P>0.05）。6、AFB1染毒组大鼠肝组织bcl-2基因与蛋白相对表达量低于空白对照组大鼠（P<0.01）,bax基因和蛋白相对表达量高于对照组（P<0.01）,bcl-2/bax比值低于空白对照组（P<0.01）。PCB2干预组大鼠bcl-2基因和蛋白相对表达量高于AFB1染毒组（P<0.01）,bax基因和蛋白相对表达量低于AFB1染毒组（P<0.05）,bcl-2/bax比值高于染毒组（P<0.01）。PCB2干预组大鼠bcl-2基因与蛋白表达、bcl-2/ba

关键词： 中药制剂   静脉输液   不良反应   护理对策  

摘要： 目的探讨中药制剂静脉输液产生不良反应的原因、护理对策及护理价值。方法随机抽取我院接诊的6000例中药制剂静脉输液患者,并随机平均分成对照组和观察组,分别采取传统和针对产生不良反应原因的护理对策,然后比较观察两组患者护理后相应的不良反应发生率等各项临床效果。结果观察组患者的不良反应发生率等各项临床效果均明显比对照组好,经对比差异显著有统计学意义(P<0.05)。结论中药制剂静脉输液患者应用针对不良反应原因的护理干预后,可有效改善患者生活质量,提高患者满意度,减少不良反应的出现,值得予以临床推广。

关键词： 黄曲霉毒素B1   大鼠   急性肝损伤  

摘要： 目的 探索不同剂量黄曲霉毒素B1(AFB1)致大鼠急性肝损伤的作用.方法 35只雄性SD大鼠随机分为空白组和6个不同剂量染毒组.空白组腹腔注射DMSO,6个染毒组依次腹腔注射1、1.5、2、2.5、3、3.5mg/kg AFB1溶液.观察48h后,取血、肝、脾、肾,测定肝功能、脏器系数以及进行组织病理学检查.结果 2、2.5、3、3.5mg/kg AFB1染毒组与空白组相比,均有较明显组织病理损伤,且随着剂量升高而加重损伤程度.2、2.5、3、3.5mg/kg染毒组与空白组比,ALT、AST、TBIL、DBIL、IBIL有统计学差异(P<0.05),且呈现量-效关系.所有染毒组ALP均与空白组有统计学差异(P<0.05),随剂量上升而升高.各染毒组脏器系数及总蛋白(TP)与空白组相比,无统计学差异(P>0.05).结论 AFB1的剂量超过2mg/kg时(含2mg/kg)可引起明显大鼠急性肝损伤,且随着剂量的升高而加重损伤程度.

关键词： 橘属中药   枳实   虚拟代谢组学   肝保护机制   中药提取物  

摘要： 中医药以其多种特征成分的协同作用,整体发挥治疗作用。中医药在中国和其他亚洲国家广泛应用,用于疾病的预防,诊断,治疗或调节人体功能,并逐渐成为西方有效的补充疗法。在中医基础理论指导下的中医药是一种独特的医疗系统,具有通过多靶点作用、追求整体治疗效果的显著特征。它由多种主要或次要'成分组成,可以整体调节身体的平衡和内稳态。橘属植物是药物和食品同源性(药食同源)的植物药,因其含有大量的多酚类成分,对人类健康具有重要的治疗作用,而橘属水果及其果汁亦在世界各地大量销售。橘属中药中代表生物活性的酚类成分的含量和分布随果实的成熟进程变化很大。枳实、枳壳、青皮和陈皮四种橘属中药自古以来就被用作调节气血和强化脾胃的药物,而其在中国的实际临床应用更是多种多样。在本研究中,提出了基于虚拟代谢组学技术的可用于探索可靠的中药药效物质基础的研究策略。虚拟代谢组学技术将靶向和非靶向技术的优点相结合,采用基于最佳条件下的RRLC-QqQ-MS方法的靶向代谢组学用于特征性原型成分的体内定量血浆药物化学研究,使用具有更好特异性和分辨率的UHPLC-QE Orbitrap HRM S的非靶向代谢组学用于鉴定复杂血浆基质中未知的代谢物。最后,定量测定了经口服给予四种标记的柑橘类中药的标准提取物后血浆中的32种原型代谢物,66种经生物转化后的代谢产物。系统地描述了复杂中药在体内的吸收和代谢过程。在研究过程中我们发现了枳实对细胞色素P450酶系家族存在潜在的影响,显示出枳实在对乙酰氨基酚(APAP)过量给药时产生的毒性有可能的抵抗作用。APAP是最广泛使用的药物之一,是一种广泛运用于治疗疼痛和发热症状的药物。但是当过量服用时总会引起明显的肝脏损伤,甚至危及生命。在我们的研究中,枳实作为以多成分发挥疗效的代表中药,表现出对APAP中毒代谢活化的抑制能力。在进一步的研究中,我们测试了枳实对APAP诱导的大鼠和BRL-3A细胞肝损伤的保护作用。在枳实的七天预处理后,ALT和AST水平下降,肝脏病理损伤减轻,说明枳实对APAP诱导的大鼠肝损伤和APAP诱导的BRL-3A细胞死亡具有显著的保护作用。然后,采用代谢组学策略研究枳实调节肝脏代谢紊乱防止APAP诱导的肝损伤。根据PCA和OPLS-DA等多元统计学分析,确定了 APAP处理组与对照组代谢产物的显著差异。最后筛选出13种氨基酸、13种磷脂酰胆碱(PC)、11种磷脂酰乙醇胺(PE)和8种其他化合物的潜在生物标志物。以及与影响疾病治疗最相关的代谢途径:甘油磷脂代谢、脂肪酸生物合成和甘油脂代谢。此外,我们发现枳实通过同时调节PUMA,AMPK-SIRT1和JNK信号通路在APAP诱导的肝毒性时发挥保护作用,阻断凋亡过程并促进肝再生。综上所述,我们的研究结果表明,基于虚拟代谢组学技术,橘属中药在体内的移行成分和可能的药效物质基础得到最大程度的展现,为寻找和研究其他中药的药效物质基础提供了新的研究方法。同时,枳实通过抑制p53上调的凋亡调节因子相关通路同时逆转肝脏脂质代谢紊乱共同维持正常细胞功能,以此对抗过量APAP产生的肝脏毒性,这使我们深入了解橘属中药在药物性脏器损伤领域的潜力,为今后的药物开发和联合用药提供了理论基础。

关键词： 夏孢生枝孢   黄曲霉毒素B1   催化靶点   降解产物   黄曲霉毒素B1降解酶  

摘要： 黄曲霉毒素(Aflatoxins)是黄曲霉和寄生曲霉产生的一类次级代谢产物,黄曲霉毒素B(Aflatoxin B,AFB)是目前所发现的毒性最强的真菌毒素之一,分布广泛,对人畜具有致癌、致畸、致细胞突变性。本研究利用夏孢生枝孢(Cladosporiumuredinicola)的代谢产物降解黄曲霉毒素B,分析了玉米芯粉高效提升代谢产物降解AFB酶活的原理,研究了AFB降解产物的结构与毒性,分离纯化AFB降解酶并初步探究其酶学特性。具体研究内容如下:(1)玉米芯粉培养基能提升夏孢生枝孢发酵上清液AFB降解酶酶活,分析了碳源对夏孢生枝孢发酵及AFB酶解反应的影响。玉米芯粉经高温处理后水解产生糠醛、香草醛等一系列衍生物。100μg/mL糠醛可以将AFB的降解酶酶活提升约100%,80μg/mL香草醛可以将AFB的降解酶酶活提升约85%;糠醛能使AFB降解酶酶活降低约30%,香草醛能使AFB降解酶酶活降低约20%。说明这些衍生物可以诱导夏孢生枝孢产生多种AFB降解酶,AFB多个位点被同时降解,发酵上清液AFB降解酶酶活明显提升。推断这些AFB降解酶的主要催化AFB分子上的呋喃环和苯环。(2)夏孢生枝孢在察氏培养基中发酵后的发酵上清液降解AFB得到了两种降解产物P1和P2,对两种降解产物进行了结构表征。经高分辨液质联用(LC-Q-TOF MS)和串联质谱(MS/MS)分析,P1和P2的分子量分别为406和342,分子式分别为CHO和CHO,P1和P2在AFB的分子呋喃双键部位通过加成或氧化反应产生了新的支链。(3)通过软件模拟分析和细胞毒性试验表明,两种降解产物的毒性相较于AFB的毒性要低。利用TEST软件进行了理论毒性预测发现大鼠半致死剂量是29.01mg/kg,P1的大鼠半致死剂量为102.5mg/kg,而P2大鼠半致死剂量为26.48mg/kg;利用细胞毒性试验,将的AFB、P1、P2以10μg/mL加入到细胞培养基中,发现AFB处理后的细胞强烈的弥漫性坏死和细胞核固缩,而P1和P2处理的细胞并未有明显的坏死情况。说明P1和P2的毒性比AFB低,推测P2是P1形成过程中的中间代谢产物。(4)将夏孢生枝孢发酵上清液收集冻干浓缩,分离纯化,得到两种AFB降解酶(E1和E2)。经过SDS-PAGE初步推断E1和E2分子量分别在65kD和30kD左右。E1和E2的最适反应温度为45°C,最适反应pH为7.5和7.0,Km值分别为44.89μg/mL和42.908μg/mL,最大反应196.0784ng/min和125ng/min。E1可以催化呋喃环和苯环,E2主要催化呋喃环,通过2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)检测E1极有可能是一种过氧化物酶。

关键词： 中药制剂   临床不良反应   药房管理   方法  

摘要： 目的研究和论述中药制剂临床不良反应以及药房管理的方法。方法选取我院2017年一年期间发生中药制剂临床不良反应的患者100例,作为本次的主要的研究对象,同时分析这些患者的用药不良反应以及药房的管理方法。结果从分析中能够发现患者出现不良反应的主要为老年人与幼儿,主要用药不良反应为皮肤过敏、消化系统不良反应。结论在临床的实践中用药不良反应是多种多样的,这就需要医生加大执行力度对用药以及药房进行有效的管理,提高药品的安全性。

关键词： 黄曲霉毒素B1   玉米赤霉烯酮   中草药   荧光免疫层析法   免疫亲和柱   超高效液相色谱串联质谱法  

摘要： 畜禽养殖业中抗生素长期不规范使用导致残留和细菌耐药性问题十分突出,严重威胁人类健康。中草药以其低毒、低残留和不易诱导耐药性等特点越来越广泛应用于动物生长性能改善和疾病预防治疗。但是,中草药在其生长、加工、运输、储藏过程中,极易发生霉变,产生真菌毒素,如黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮等,这些毒素具有潜在的“三致”作用,严重威胁动物安全。加强对中草药中真菌毒素检测是保障中草药质量安全的重要手段。本文旨在建立同时检测中草药中多类真菌毒素的荧光免疫层析方法(FICA)和超高效液相色谱串联质谱方法(UPLC-MS/MS),以期为中草药的安全使用提供技术支撑。通过优化荧光背板、反应体系pH、抗原和抗体的用量、孵育时间和显色时间等条件,成功建立了同时检测中草药中黄曲霉毒素B1(AFB1)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的背景荧光免疫层析方法。方法对AFB1和ZEN的半数抑制率(IC50)分别为0.0192 ng/mL和0.61 ng/mL,cut-off值分别为0.1ng/mL和2ng/mL。在薏苡仁、山药和桔梗样本中,AFB1的检测限(LOD)均为0.38μg/kg,添加0.5、1、1.5 μg/kg,平均回收率在72.7%-88.0%之间,变异系数小于9.4%;ZEN的LOD均为10 μg/kg,添加10、30、50 μg/kg,平均回收率在74.9%-90.2%之间,变异系数小于8.9%。产品稳定性结果表明,该试纸条在室温下至少可保存12个月。通过优化微球、抗原和抗体用量、反应缓冲体系、检测模式、孵育时间和显色时间等条件,成功建立了同时检测中草药中AFB1和ZEN的时间分辨荧光免疫层析方法。方法对AFB1和ZEN的IC50 分别为 0.039 ng/mL 和 0.018 ng/mL,cut-off 值分别为 0.1 ng/mL 和 0.05 ng/mL。在薏苡仁、山药和桔梗样本中,AFB1的LOD均为0.60 μg/kg,添加1、2、3 μg/kg,平均回收率在73.0%-95.0%之间,变异系数小于9.5%;ZEN的LOD均为0.40 μg/kg,添加0.4、0.8、1.2μg/kg,平均回收率在75.8%-90.0%之间,变异系数小于11.3%。产品稳定性结果表明,该试纸条在室温下至少可保存12个月。成功建立了基于免疫亲和柱(IAC)净化的同时检测中草药中AFB1和ZEN的UPLC-MS/MS方法。以NHS-Sepharose4B为载体,分别与AFB1和ZEN的抗体进行偶联制备免疫亲和柱,优化了免疫亲和柱制备、上样洗脱等条件。在薏苡仁、山药和桔梗样本中,AFB1的LOD均为0.03μg/kg,添加0.1、0.5、μg/kg,平均回收率在80.3%-98.1%之间,变异系数小于13.2%;ZEN的LOD均为0.05 μg/kg,添加0.15、0.75、1.5μg/kg,平均回收率在73.2%-92.8%之间,变异系数小于12.8%。将方法用于实际样品检测,检测结果与荧光免疫层析方法结果进行比较,一致性良好,满足同时检测AFB1和ZEN的要求。综上所述,本文建立的同时检测中草药中AFB1和ZEN的FICA和基于免疫亲和柱净化的UPLC-MS/MS方法,具有灵敏、准确、简便等特点,满足国家相关检测要求,可用于实际样品中多类真菌毒素的筛查和确证。

关键词： 雏鸡   黄曲霉毒素B1   法氏囊   细胞周期阻滞   G0G1期   G2M期   氧化损伤  

摘要： 黄曲霉毒素B(Aflatoxin B,AFB)是黄曲霉毒素中毒性最强的一种霉菌毒素,具有较强的“三致”作用,其主要由寄生曲霉菌和黄曲霉菌产生。硒(Selenium,Se)是人类和动物重要的微量元素之一,其具有较好的抗氧化和解毒功能。我们前期的研究显示AFB污染的日粮饲喂雏鸡能诱导法氏囊(Bursa of Fabricius,BF)细胞周期阻滞在GM期。特别地,在日粮中添加Se之后,可以较好的缓解AFB在BF诱导的组织损伤,从而改善体液免疫功能。然而,关于AFB对雏鸡BF细胞周期阻滞以及硒对其保护作用的分子机理还未见报道。本研究以肉雏鸡为研究对象,用组织病理学、流式细胞术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和生物化学方法,研究AFB诱导BF组织损伤和细胞周期阻滞的分子机理以及Se在其中的保护作用。试验选用1日龄科宝肉鸡健雏288只,随机分为4组,每组包含3个重复,每个重复24只,分别用对照组日粮(基础日粮)、+Se组日粮(硒添加量0.4 mg/kg)、AFB组日粮(AFB添加量0.6 mg/kg AFB)和AFB+Se组日粮(硒和AFB添加量分别为0.4 mg/kg和0.6 mg/kg),饲喂21天。其结果如下:组织病理学观察显示,与对照组相比,AFB组雏鸡法氏囊脏器指数降低,组织病理学变化表现为淋巴滤泡皮质区和髓质区细胞核碎片增多和空洞形成;+Se组和AFB+Se组则未见明显病理变化。生化试剂盒检测抗氧化指标显示,从7日龄到21日龄,AFB组雏鸡法氏囊组织中抗氧化酶GR,GSH-Px,CAT,SOD的活力,羟自由基清除能力和GSH的含量与对照组相比呈极显著或显著下降(p<0.01或p<0.05),但脂质过氧化产物MDA的水平是极显著或显著升高的(p<0.05或p<0.01)。在补充日粮Se之后,抗氧化酶GR,GSH-Px,CAT,SOD的活力,羟自由基清除能力和GSH的含量与AFB组相比较呈极显著或显著上升(p<0.01或p<0.05),MDA的水平呈极显著下降(p<0.01)。然而,这些抗氧化标志物在对照组、+Se组和AFB+Se组之间并没有显著的变化趋势被发现(p>0.05)。以上结果表明:日粮中添加0.4 mg/kg的Se能够缓解AFB诱导的氧化损伤,从而改善AFB导致的病理损伤。流式细胞术检测结果显示,在7日龄,AFB组GG期细胞百分比与对照组相比是极显著降低的(p<0.01),在14和21日龄极显著增加(p<0.01);AFB组GM期细胞百分比在7日粮与对照组相比极显著增加(p<0.01),在14日龄极显著减少(p<0.01)。重要的是,从7日龄至21日龄,以上参数在对照组,+Se组和AFB+Se之间并没有表现出明显的差异(p>0.05)。该研究结果显示0.6 mg/kg AFB可能诱导雏鸡法氏囊细胞周期在7日龄阻滞在GM期,在14和21日龄阻滞在GG期。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,在7日龄AFB诱导了ATM和Chk2mRNA表达量增加(p<0.01或p<0.05),cdc25 mRNA表达量和cyclin B/cdc2复合物水平降低(p<0.01或p<0.05)。在14和21日龄AFB能诱导ATM,Chk2和p21 mRNA表达量增加(p<0.01或p<0.05),p53和cyclin D/CDK6复合物的mRNA表达量减少(p<0.01或p<0.05)。有趣的是,在14和21日龄,AFB组cdc25的mRNA表达量也是减少的(p<0.01或p<0.05)。重要的是,以上指标在AFB+Se组的表达量均接近于对照组,且+Se组中这些指标与对照组相比也无差异(p>0.05)。以上试验结果表明日粮中添加0.4 mg/kg硒缓解0.6 mg/kg AFB诱导的细胞周期阻滞,其在GM期可能通过ATM-Chk2-cdc25-cyclin B/cdc2途径,在GG期可能通过ATM-Chk2-cdc25-cyclin D/CDK6和ATM-Chk2-p21--cyclin D/CDK6两个途径。综上,日粮中添加0.4 mg/kg硒具有较好的抗氧化作用,从而缓解0.6 mg/kg AFB在BF诱导的组织损伤。此外,硒可能通过激活ATM-Chk2-cdc25-cyclin B/cdc2通路来保护AFB在7日龄诱导的BF细胞GM期阻滞,通过激活ATM-Chk2-cdc25-cyclin D/CDK6途径和ATM-Chk2-p21-cyclin D/CDK6途径缓解AFB在14和21日龄诱导的BF细胞GG期阻滞。该研究提示Se可以作为一种潜在的抗氧化剂添加在日粮中,具有缓解AFB毒性的功能。

关键词： 中药分散片   成型性工艺   最佳提取物   药物化学   中药制剂  

摘要： 目的:　　优选具有耐缺氧作用中药分散片的最佳提取工艺、成型性工艺条件，建立相应的质量标准，为有效控制分散片最佳提取物（中间体）质量，进而保证成品质量，建立其最佳提取物的指纹图谱，继而进行其血清药物化学研究，从而为该制剂开发成中药新药与保健食品提供全面实验数据支撑及前期基础。　　方法:　　1.提取工艺研究路线筛选:查阅文献，按功能主治对处方中药材的提取方式进行查寻，依据检索结果，设计若干提取工艺路线，针对所设计的工艺路线提取物，以常压耐缺氧作用、急性耐缺氧作用和体外的H2O2干预下H9c2细胞的存活率为指标，进行耐缺氧活性综合评价分析，对所设计几条工艺路线进行了优选;2.提取工艺参数的确定:运用现代中药提取纯化技术，针对所确定的最佳药效工艺路线，对提取及纯化工艺参数进行优化试验。　　3.成型性工艺的制定:运用现代中药制药技术，采用单因素试验和正交实验，以分散片崩解时间、硬度、脆碎度等为评价指标，对辅料种类及用量、制粒及片剂成型进行优选试验研究。　　4.质量标准研究:采用薄层色谱法，建立分散片中红景天、丹参、人参三味药材的TLC鉴别;采用高效液相法，建立分散片主要有效成分红景天苷及丹参酮ⅡA的含量测定方法;结合2015年版《中国药典》四部0101片剂项下的要求，建立分散片崩解时限、重量差异等检查项。　　5.指纹图谱的建立:采用Agilent-DAD HPLC色谱议，运用HPLC指纹图谱技术确定最佳提取物色谱条件，测定十批样品，建立其HPLC指纹图谱，并采用聚类分析法对各药材产地的质量进行划分;6.血清药物化学的研究:以所建立的指纹图谱中18个共有峰及所鉴别出的成分峰为参考依据，通过灌胃给药，给予SD大鼠最佳提取物，运用硫酸铵除蛋白，制备含药血清，进行给药后血中移行成分的确认，并对血清中原型成分进行药材的归属。　　结果:　　1.为试制出高效稳定的制剂，确保所制定的提取工艺将处方中所有药材的有效成分提取出来，依据文献共设计出6条提取工艺路线，通过体外细胞活性活性及体内的耐缺氧机能试验，进行6条工艺的药效筛选试验，结果显示中药分散片的不同工艺提取物具有不同程度的提高小鼠常压及急性耐缺氧作用，其中提取工艺路线4的提取物在耐缺氧活性方面效果最佳。　　2.提取工艺研究:采用正交试验，优选出耐缺氧中药最佳提取工艺为:提取2次，每次2小时，加水量为药材重量的9倍。采用单因素比较试验，优选出耐缺氧中药最佳纯化工艺为:采用D101型大孔吸附树脂，以0.5g生药/ml上样，上样量为生药∶树脂=1∶2，选择8倍柱体积的20％、30％、50％乙醇为洗脱剂，洗脱流速为1BV/h。　　3.成型性工艺:采用正交试验结合单因素比较试验，制定出分散片的成型性工艺条件为:按提取物干浸膏粉∶辅料=1.5∶1的比例，以微晶纤维素、预胶化淀粉作为填充剂，L-HPC、PVPP作为崩解剂，填充剂∶崩解剂配比为5∶3（其中微晶纤维素∶预胶化淀粉=4∶1，L-HPC∶PVPP=17∶13），过80目，备用;按药粉与辅料1.5∶1的比例称取药粉与辅料，混合均匀，总混物以5％PVP的80％乙醇溶液(总混粉量(g)∶乙醇用量(ml)为1∶0.75）为润湿剂，14目筛制粒，50℃干燥5小时，16目整粒，加硬脂酸镁，压片。　　4.质量标准研究:采用薄层色谱法，通过供试品提取方法选择、薄层展开剂选择等耐用性试验研究，分别以红景天苷作为对照品、丹参酮ⅡA与丹酚酸B作为对照品、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1作为对照品，建立了红景天、丹参、人参三味药材的薄层色谱鉴别方法，所建立的三种鉴定方法专属性良好、稳定可靠。采用高效液相色谱法，通过色谱条件优选试验、供试品制备方法优选试验，分别建立了君药红景天中红景天苷及臣药丹参中丹参酮ⅡA的高效液相含量测定方法，两种含量测定方法经方法学验证表明，所建立的含量测定方法准确、稳定、可靠。结合2015年版《中国药典》四部0101片剂项下的要求，检测了五批分散片样品的崩解时限、重量差异等检查项，结果表明三批分散片的崩解时限均在3分种内完全崩解，完全符合分散片快速崩解的要求，并最终制定了崩解时限、重量差异各检查项的检测标准。　　5.指纹图谱的建立:采用单因素分析方法，建立了稳定可控的耐缺氧分散片最佳提取物高效液相指纹图谱;通过对十批中药分散片的比较及相似度评价软件分析，建立了中药分散片最佳提取物的指纹图谱的共有模式图，其中共有峰18个，并在色谱图中标示出红景天苷、酪醇、人参皂苷Re、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA色谱峰，为中药分散片最佳提取物质量控制及血清药物化学研究奠定了基础。　　6.血清药物化学的研究:通过比较含药血清、空白血清色谱图、含药血清色谱图、空白溶剂色谱图、样品色谱图可知血清中原型成分有9个，随着给药剂量的增加，这些原型入血成分也呈成正相增加