关键词： 蒙脱石   霉菌毒素   吸附材料   黄曲霉毒素B1   玉米赤霉烯酮  

摘要： 霉菌毒素是真菌或霉菌在适宜的条件下产生的剧毒、致畸和高致癌性的代谢产物,对农业和畜禽养殖业以及人类健康和食品安全构成严重威胁。蒙脱石是一种自然界中广泛分布的黏土矿物,对特定霉菌毒素表现出吸附性,用作霉菌毒素吸附剂具有无毒、无害、无毒副作用等优点。然而,天然蒙脱石由于自身强烈的亲水性,能够吸附强极性的黄曲霉毒素,但对弱极性的霉菌毒素,如玉米赤霉烯酮和呕吐毒素几乎没有吸附效果。但这些霉菌毒素同样对人和动物的健康和生产生活造成严重危害,不同极性的多种霉菌毒素同时存在将会对人类健康和食品安全产生更大的危害。但现有的技术却无法满足同时对强极性和弱极性复合霉菌毒素的脱除。因此,研发对强极性和弱极性复合霉菌毒素均具有高效吸附性能的蒙脱石霉菌毒素吸附剂对于保护人类健康、减少动物生病和死亡率、降低养殖业风险具有重要意义。本文采用阳离子、非离子和两性离子表面活性剂改性蒙脱石制备双亲蒙脱石吸附材料,同时深入研究了改性剂性质和用量与材料结构、界面特性和吸附性能之间的科学关系,以及双亲蒙脱石对强极性、弱极性霉菌毒素吸附机理,论文的主要工作和取得的研究成果如下:(1)霉菌毒素吸附剂用蒙脱石的筛选和提纯在对我国12个产区膨润土矿物组成、结构和理化性质全面分析的基础上,结合饲料、食品用黏土矿物安全标准筛选出安徽1、内蒙古1和辽宁膨润土三个满足制备双亲蒙脱石霉菌毒素吸附剂要求的膨润土原料,并对其进行擦洗分散-离心分选提纯;得出实验室选矿提纯优化工艺条件为:擦洗转速1500rpm;分散剂用量0.2%;擦洗时间20min;离心浓度10%;离心分离因数100;离心时间2min,提纯后的膨润土原料吸蓝量为34.35 g/100g。(2)阳离子改性蒙脱石霉菌毒素吸附材料的制备与性能通过离子置换法制备了单链十八烷基三甲基溴化铵(OTAB)和双链双十八烷基二甲基氯化铵(DODAC)改性蒙脱石,结果表明:改性剂性质和用量对材料结构、界面特性和吸附性能影响显著,DODAC-Mt比OTAB-Mt层间距大、亲油性好、对强极性黄曲霉毒素B1(AFB1)和弱极性玉米赤霉烯酮(ZER)吸附容量高;改性剂用量增加,层间距扩大,亲油性提升,对材料吸附AFB1和ZER起增强作用;OTAB-Mt和DODAC-Mt对强极性AFB1吸附符合Freundlich模型,最大吸附量由原矿的0.51 mg/g提高至3.00和3.35 mg/g,吸附增强机理为季铵盐阳离子对强极性AFB1的偶极相互作用和改性剂引入的有机质对AFB1的疏水相互作用;阳离子改性蒙脱石对弱极性ZER吸附符合Linear模型,OTAB-Mt和DODAC-Mt对ZER最大吸附量由原矿的<0.7 mg/g提高至48.97和52.57 mg/g,吸附增强机理为改性剂引入的有机质对ZER的疏水相互作用。(3)非离子改性蒙脱石霉菌毒素吸附材料的制备与性能基于氢键键合原理制备了辛基酚聚氧乙烯醚(OP-10)改性蒙脱石,结果表明:OP-10分子插入蒙脱石层间使非离子改性蒙脱石层间距扩大,有机碳含量增加,空间构型随OP-10用量变化;非离子改性蒙脱石的空间结构对AFB1和ZER的吸附容量起至关重要的影响,当OP-10用量超过一定浓度时,非离子改性蒙脱石彭胀不明显,对AFB1和ZER的吸附效果提升不明显;OP-10改性蒙脱石具有亲水、亲油双亲性;非离子改性蒙脱石对AFBi吸附效果增强,吸附满足Langmuir等温吸附模型,为单层吸附,0.50P-10Mt、***-10Mt和2.0OP-1 0Mt对强极性AFB1的饱和吸附量分别为2.78 mg/g、2.69 mg/g和2.72 mg/g,吸附增强机理为OP-10引入的有机质与AFB1的疏水相互作用和蒙脱石的层间阳离子与AFB1的偶极相互作用;非离子改性蒙脱石对弱极性ZER的吸附效果增强,吸附符合Linear等温吸附模型,0.5OP-10Mt、1.0OP-1OMt和2.0OP-10Mt对ZER的饱和吸附量分别为4.67 mg/g、8.54 mg/g和8.34 mg/g,吸附增强机理为OP-10引入的有机质对ZER的疏水相互作用。(4)两性离子改性蒙脱石霉菌毒素吸附材料的制备与性能基于静电相互作用原理制备了十二烷基二甲基甜菜碱(BS-12)和椰油酰胺丙基甜菜碱(LAB-35)改性蒙脱石,结果表明:BS-12/Mts和LAB-35/Mts具有亲水、亲油双亲性;改性剂自身特性和用量对材料结构、界面特性和吸附性能影响显著,LAB-35/Mts比BS-12/Mts层间距大,亲油性好,对AFB1和ZER吸附效果好,增加改性剂用量,改性剂分子在蒙脱石层间的空间构型变化,材料对AFB1吸附效果提升不明显,对ZER吸附效果先快速后缓慢上升;两性离子改性蒙脱石对 AFB1 和 ZER 吸附快,吸附效果增强,1.00 BS

关键词： 中药制剂   质量控制   影响因素   措施  

摘要： 目的:探究影响中药制剂质量控制的相关因素,并制定针对性改善措施。方法:回顾性分析2017年5月-2018年4月我院中药制剂1847份,分析质量控制的影响因素,并制定改善措施。结果:影响中药制剂质量控制的因素包括制剂处方、制作工艺、原材料、制剂剂量及人员素质,其中剂处方为关键因素,制作工艺为决定因素,其他为重要因素。结论:制剂处方、制作工艺、原材料、制剂剂量及人员素质是影响中药制剂质量控制相关因素,因此应制定针对性措施,完善质量管理体系,逐渐提升中药制剂生产质量。

关键词： 黄曲霉素   黄曲霉毒素B1   中药污染   HPLC   防治  

摘要： 我国是世界上中药材以及中药饮片的生产和出口大国,但中药在生产、采集、加工、运输、贮藏等方面,容易遭受黄曲霉菌的污染.黄曲霉菌产生的黄曲霉毒素具有很强的毒性,和强烈的致畸、致癌作用,不仅降低中药的药效,对人体的肝脏、脾脏等器官也会造成极大的损害.本文查阅近年来中药中黄曲霉毒素的研究进展,综述了中药中黄曲霉素的污染状况、黄曲霉素的危害、检测方法以及防治措施,为控制黄曲霉毒素提供一定的参考.

关键词： 中药制剂   生产过程   质量风险   对策  

摘要： 中药制剂生产过程复杂,包括原料采购、仓储、加工等环节,任一环节出现质量问题,都会影响制剂的最终质量。因此,重点分析和识别中药制剂的生产质量风险,采用有效的防范对策尤为关键。本文首先分析了中药制剂生产过程的质量风险,然后探讨了相关的防范对策,希望能为相关人员提供参考。

关键词： 黄曲霉毒素M1   黄曲霉毒素B1   Caco-2细胞   细胞周期   紧密连接  

摘要： 真菌毒素污染农作物和食品的现象普遍存在,严重威胁人类健康。真菌毒素被摄入机体后,胃肠道组织首先暴露于这些真菌毒素。肠道是人体最大的消化器官,对营养物质的吸收、转运、机体健康的维持具有重要意义,同时也能抵抗有害物质进入机体后造成的损伤和功能障碍。这种屏障功能很大程度上取决于上皮细胞完整的结构和有效的功能。真菌毒素等污染物被摄入后,肠上皮细胞的暴露水平高于其他组织;并且由于肠上皮细胞的代谢活性较强,其容易受到真菌毒素更强烈的破坏。在诸多真菌毒素中,黄曲霉毒素(aflatoxins,AFs)毒性最强并且在世界范围内分布,其中黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)是哺乳动物中最强的致癌物质之一,黄曲霉毒素M1(aflatoxin M1,AFM1)是牛奶及各种奶制品中最主要存在也是目前唯一具有限量标准的真菌毒素。随着人们对牛奶及奶制品消费的增多,以及饮食结构的复杂多样化,人们暴露于AFB1和AFM1的风险不容忽视,这也可能成为食品安全风险评估的新内容。但与单独的AFB1和AFM1作用相比,二者联合作用的潜在风险和毒性机理需进一步研究揭示。因此,为了研究牛奶中特异存在的真菌毒素AFM1的毒性作用机理,以及AFM1和AFB1联合对肠上皮细胞的毒性作用,本研究首先检测了不同浓度的AFM1对分化Caco-2细胞活性的影响,并分析了Caco-2细胞暴露于AFM1后转录组水平的变化,结合本实验的结果和文献数据,探究AFM1在不显著降低细胞活性的浓度下对Caco-2细胞的毒性机理。然后探究了0.5～8μg/m L的AFM1和AFB1联合处理分化Caco-2细胞48 h后对细胞跨上皮细胞电阻值(TEER)、FITC-葡聚糖(4和40 kDa)的渗透率的影响;之后检测了紧密连接蛋白mRNA水平和蛋白水平的变化,并通过免疫染色观察紧密连接蛋白的定位情况;除此之外,还分析了AFM1和AFB1的交互作用类型;探究了AFM1和AFB1导致紧密连接蛋白亚细胞定位改变的可能机制。主要结果如下:一,AFM1的细胞毒性具有剂量效应:高于4μg/mL时显著降低细胞活性,低浓度下(0.0005和0.005μg/mL)对细胞转录本的影响极小。趋势分析表明差异基因主要富集到模块0和3两个下降的模块中。在生物学进程类中,差异基因主要富集到细胞过程和代谢过程中;在分子功能类中,差异基因主要富集到结合和催化活性上。STRING分析得出这些候选差异表达基因参与到细胞周期的调控中。筛选到的差异基因经q-PCR验证,表达趋势与RNA-seq的趋势一致。AFM1能引起Caco-2细胞周期阻滞,并且与其所用剂量有关。细胞周期的变化和分布与细胞凋亡(DNA损伤)、细胞活性降低、细胞膜损伤无关。AFM1能引起细胞周期阻滞,并且CDK1、SOS1/Akt和AMPK信号分子参与其中。二,AFM1和AFB1联合处理组的Caco-2细胞活性显著低于对照组及单独毒素处理组(p<0.05)。AFM1能显著降低分化Caco-2细胞TEER值,增加分化细胞单层的通透性,且具有剂量效应。低浓度AFM1有促进紧密连接蛋白mRNA表达的趋势,高浓度的AFM1能降低分化Caco-2细胞中紧密连接蛋白mRNA水平和紧密连接蛋白丰度。TEER、FITC-葡聚糖(4和40 kDa)的渗透率和紧密连接蛋白表达量之间具有显著相关性。AFM1和AFB1单独及混合都会影响紧密连接蛋白的分布,并发现毒素处理后紧密连接蛋白出现一定程度的内化——由膜定位变为胞质定位。AFM1导致的细胞膜损伤会引起紧密连接蛋白定位的改变,并且网格蛋白介导的内吞作用可能与毒素引起的紧密连接蛋白内化现象有关。通过两部分的试验研究发现,高浓度的AFM1会导致细胞周期阻滞,另外,AFM1与AFB1共存时毒性作用被增强,导致分化Caco-2细胞之间的紧密连接被破坏,这些都表明了AFM1对分化Caco-2细胞的毒性作用。

关键词： 大米储藏   腐败真菌   黄曲霉毒素B1   植物精油   芽孢杆菌   防腐作用   脱毒作用  

摘要： 大米在采后储藏期间极易受曲霉菌（Aspergillus spp.）所侵染，导致大米腐败变质。部分曲霉菌可产生强致癌的次级代谢物黄曲霉毒素B1（AFB1）并残留在大米中，不仅造成粮食浪费和经济损失，还严重危害人们的健康。目前对大米防控常用化学防腐杀菌剂与脱毒剂，但存在化学残留及环境污染等因素而限制其使用种类和应用范围。因此，寻找高效且环境友好的防腐脱毒剂具有重要性与必要性。本文以大米常见的腐败病原菌黄曲霉菌（***）、赭曲霉菌（***）和AFB1为研究对象，筛选具有优良抗菌活性的植物精油成分（Essential oil components,EOCs）运用于大米储藏中，并进行相关机制探讨，旨在全面分析精油成分对侵染大米腐败菌的防控作用;同时筛选出具有高效去除AFB1能力的微生物，并研究AFB1脱除反应过程、反应前后毒理效应以及生物脱毒转化规律。开展系统的微生物安全性评估，为扩大微生物的推广应用提供保障。最后将精油成分与脱毒微生物联合应用在大米防腐过程中，旨在从源头上控制霉菌并减少或去除已被毒素污染大米中的AFB1，主要研究结果如下：　　（1）多种精油成分的体外抗菌活力比较及在大米中的应用研究　　前期研究显示许多精油具备抑菌活性，通过比较多种植物精油中普遍存在的组分对腐败菌的抑制活力，确定了两种具有最佳抑菌活性的化合物香叶醇和柠檬醛，其中柠檬醛在体外对黄曲霉和赭曲霉的最低抑菌浓度（MIC）分别为0.5μL/mL和0.4μL/mL。同时将香叶醇和柠檬醛分别用于大米中的试验表明香叶醇和柠檬醛均能显著抑制大米中的微生物数量、延缓MDA含量和脂肪酸值的上升，维持大米淀粉颗粒的完整性，且防腐效果部分优于或接近于商业化学储粮熏蒸剂磷化铝。　　（2）香叶醇和柠檬醛分别对黄曲霉和赭曲霉的作用机制及结合气调包装对大米腐败防治的增效应用　　从细胞膜通透性、细胞内活性氧变化和霉菌生长相关基因角度分别探讨了香叶醇和柠檬醛对黄曲霉和赭曲霉的作用模式，结果表明香叶醇则分别通过诱导黄曲霉胞内活性氧的产生和改变赭曲霉的膜通透性来显示抗菌作用。柠檬醛主要通过下调黄曲霉的产孢基因brlA及代谢基因laeA的表达量，抑制赭曲霉的生长基因pacC来发挥抑菌特性，并且柠檬醛还可以影响曲霉菌的部分次级代谢产物基因如可以干预调控黄曲霉毒素合成基因aflR和显著降低赭曲霉中编码参与赭曲霉毒素合成的前体酶基因pks、P450-B03的转录水平。结合扫描电镜观察到曲霉菌经过香叶醇处理后其自身微观结构遭到破坏，并伴有细胞内容物溢出，进一步证实香叶醇能显著影响曲霉菌的膜通透性来发挥抑菌防霉作用。同时，柠檬醛和香叶醇分别与50％CO2+50％N2或75％CO2+25％N2气体成分的包装结合对大米的防控效果优于磷化铝熏蒸剂，可起到完全替代磷化铝的作用。　　（3）芽胞杆菌对AFB1的去除作用　　通过以AFB1类似物的香豆素为唯一碳源培养基进行初筛和高校液相色谱（HPLC）分析复筛获得一株具有去除AFB1能力的新型菌株，经鉴定为阿耶波多氏芽胞杆菌DT，并探究不同反应条件对其清除AFB1的影响，结果表明菌株DT在37℃、pH8反应72h后对2.0μg/mL的AFB1达82.92%清除率。另外，AFB1的毒性评估模型表明AFB1经过阿耶波多氏芽孢杆菌DT处理后对大肠杆菌基本没有毒性作用，且能更好地维持LO2、Caco-2和HaCaT的细胞活力。此外，通过液质联用（HPLC-MS）推测菌株DT与AFB1反应过程中新生成产物的毒性作用减弱是由于原AFB1的内酯结构遭到破坏。　　（4）芽胞杆菌菌株安全性评估并分别与柠檬醛和香叶醇联用对大米的防腐脱毒作用　　采用不同剂量（108、109和1010CFU/g）的芽胞杆菌DT，一次性灌胃ICR级小鼠并进行15d饲养试验，结果表明不同剂量菌株DT处理的小鼠体重、摄食量、饲料转化率与对照组相比均无明显异常;脏器指数均无显著性差异;组织切片观察小鼠的肝脏、肾脏形态均未发生病变，无明显炎症反应，表明菌株DT在1010CFU/g范围内是实际安全无毒。同时，将菌株DT与柠檬醛和香叶醇共同运用于大米的防治试验中，发现在大米储藏后期，菌株DT与香叶醇共同处理对2.0μg/mL的AFB1去除率为83.88%，其菌落数量为对照组的5%，表明菌株DT与0.5μL/mL的香叶醇不会相互干扰，能共同发挥各自的功效。　　综上所述，本文确定了植物精油成分中香叶醇和柠檬醛对黄曲霉和赭曲霉的优良抑制效果，证实了香叶醇和柠檬醛在大米中的防腐作用，并探讨其与腐败病原菌的作用机制。同时筛选获得一株体外去除AFB1的阿耶波多氏芽胞杆菌DT，对其脱毒功效和安全性进行评估，并将其分别与香叶醇和柠檬醛联合运用实现对大米中黄曲霉菌侵染的源头控制且对被AFB1污染的大米进行脱毒的双重防

关键词： 儿科中药制剂   中药制剂   合理用药   应对策略   管理   儿科  

摘要： 目的:随机选择到药房取药或咨询中药制剂合理使用相关知识的患者各150例,分析药房管理措施对儿科中药制剂临床不良反应的影响及药房管理措施的效果.方法:150例分为观察阶段和对照阶段,未施行药房儿科中药制剂管控方案,分析两个阶段内因中药制剂引发的不良反应发生情况,开展儿科中药制剂、临床反应以及药房管理措施相关知识考核(满分100分),对比两次考核成绩,以及两个阶段内医、护、患三方对药房工作满意度.结果:观察阶段内不良反应发生率显著低于对照阶段(P<0.01);观察阶段药房工作人员中药制剂、临床反应以及药房管理措施相关知识考核成绩显著高于对照阶段的(P<0.01);观察阶段医、护、患三方对于药房工作满意率显著高于对照阶段(P<0.05).结论:加强药房管理措施,全方面提升药房服务质量,有助于提高儿科中药制剂合理化应用,降低不良反应发生风险,同时在就诊患者中树立良好口碑,有利于本院形象建设.

关键词： 中药制剂   质量   影响因素   控制措施  

摘要： 目的总结分析影响中药制剂质量的因素及控制措施。方法回顾分析我院中药制剂质量的影响因素情况,从而制定针对性质量控制措施。结果通过对1200份中药制剂的质量影响因素进行分析,发现制剂处方为影响中药制剂产品质量的关键因素,制作工艺为影响中药制剂产品质量的决定因素,原材料、制剂剂量、人员为影响中药制剂产品质量的重要因素。结论中药制剂质量的影响因素主要包括制剂处方、制作工艺、原材料、制剂剂量、人员因素等,药品管理中要制定针对性管控措施,加强质量把关。

关键词： 中药制剂   ADR   特点   影响因素  

摘要： 目的:总结中药制剂的药品不良反应(ADR)的特征,并探析影响因素.方法:采集2016.4～2017.8期间在我院接受中药制剂治疗且出现ADR的200例患者资料进行分析,明确ADR损害的器官与具体表现、ADR发生时间.结果:男性、女性ADR发生率分别为54.5％、45.5％,经比较分析,差异无统计学意义(P>0.05);皮肤系统损伤是最为常见的中药制剂的ADR,占53.5.5％(107/200),消化系统ADR发生率次之,占20.5％(41/200),经比较分析,差异有统计学意义(P<0.05);血化瘀类、清热解毒类、抗肿瘤类药物是诱发ADR的主要中药制剂,其给药途径以静脉滴注为主,且和其他给药途径相比较,静脉用药诱发ADR发生率更高(P<0.05);通常是在用药首日出现ADR,占65.5％(131/200).结论:中药制剂治疗期间可诱发多种ADR,临床应加强中药制剂ADR的检测,提升用药的合理性,以将ADR发生率降至最低水平,促进疾病转归.

关键词： 胰岛素   代谢异常   中药   突变体果蝇  

摘要： 生物体的糖代谢异常与糖尿病、肥胖、心血管等疾病的发生密切相关,而果蝇调控血糖稳态的机制与人类具有高度保守性,并且果蝇的个体较小、易于操作、染色体数目较少,因此,近年来利用果蝇模型筛选缓解糖尿病的中草药已逐步成为研究热点。中草药具有毒副作用小、成本低廉、资源丰富等优点。为研究中药对胰岛素通路突变体果蝇生长发育的影响,本实验首先分析了突变体果蝇喂食中药提取物后的生长状态,筛选出对其生长速率及蛹壳体积具有缓解作用的中药。结果表明,在128种中药中,野菊花、独活、决明子、荔枝核、白芷、马齿苋、元胡、猪苓、白前9种对S6k1-1/TM6B突变体的生长缺陷有明显的缓解作用。另外,chico1/CyO突变体喂食野菊花、白芷、白前、猪苓、独活、茵陈、马齿苋、肉桂8种中药能够显著加快生长速率,并增加其蛹壳体积。为进一步探究筛选出的中药对突变体生长发育的影响,本实验继续分析了果蝇的个体大小、成虫体重、翅膀面积、脂肪细胞大小、脂滴面积以及寿命的变化。实验结果表明,对S6k-1/TM6B具有缓解作用的9种中药中,喂食野菊花、独活、决明子、荔枝核能够明显增加其成虫大小、翅膀面积、脂肪体细胞面积及脂肪油滴大小。另外,独活、决明子、荔枝核能够显著增加高糖饮食诱导的S6k1-1/TM6B雄果蝇的寿命。在chico1/CyO突变体初步筛选出的8种中药中,喂食野菊花、白芷、猪苓、白前、茵陈、肉桂能够明显增加细胞大小,其中野菊花、肉桂还能够显著增加突变体的脂滴大小。以上研究结果能为中药对糖尿病的缓解与治疗提供理论基础。