关键词： 中药制剂   质量标准   制订  

摘要： 中医是我国传统医学的代名词,中草药却是中医治疗过程中的重要组成,也是施治以及达成治疗效果的重要载体,对于现代中药制剂而言,无论处方的组成,还是生产和销售,都需要依照国家相关部门制定的中药制剂质量标准而进行。就目前所制订的中药制剂质量标准而言,虽然在中药药剂制造领域已经有了一定的成绩,但是在具体应用方面依旧存在不少问题。本文就中药制剂质量标准的制定进行探讨。

关键词： 中药制剂   不良反应   用药途径  

摘要： 目的本次实验将针对使用中药制剂方案后,患者所产生的不良问题及其原因进行分析,提出相应的改善对策。方法本次实验选取了2017年1月～2018年12月在本院进行治疗的患者为对象,挑选了98例中药制剂所出现的不良反应报告,对中药制剂类型、用药方式,以及具体不良反应进行统计整理,分析原因。结果从调研结果中看,患者多为老年人,其更容易出现不良事件。其次,从疾病种类上看,以消化系统疾病最为突出,其次为呼吸系统和循环系统,不良反应人数多。而用药途径中,则以静脉用药问题为主,占比为52%。结论在使用中药制剂进行病情改善的同时,要关注患者的年龄、给药途径,并根据病情差异性实施关注,保障用药安全性。

关键词： 电化学传感器   适配体   特异性多肽   黄曲霉毒素B1   检测方法  

摘要： 黄曲霉毒素B1(AFB1)常被发现于腐败变质的谷物或以谷物为原料的食品中,当AFB1进入人体后会引起免疫系统病变,严重时甚至会诱发癌症。目前AFB1的常规检测方法有薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱一串联质谱法,这些传统的检测方法存在操作复杂,检测成本高,需要专业人员培训,无法实现现场检测的缺点。因此亟需开发一种低成本、操作简单、稳定性强又适合现场检测的新检测方法,以便在食品生产的不同阶段有效监测AFB1的水平。本文构建了两种新颖、简单、快速、灵敏的电化学传感器用于谷物中AFB1的痕量检测。基于适配体构建黄曲霉毒素B1的电化学传感器研究。根据AFB1与其适配体特异性结合的原理,构建一种基于适配体的电化学传感,用于AFB1的检测。将介孔碳(CMK)修饰在玻碳电极表面来增大电极的表面积,然后在工作电极表面恒电位沉积一层金纳米粒子(AuNPs),提高电信号的同时为下一步连接巯基化适配体提供位点。在检测过程中,AFB1可以竞争性的去除吸附在适配体链上的亚甲基蓝(MB)引起电信号的变化,建立AFB1定量分析方法。经过修饰的电极导电性能得到改善,灵敏度大大提高,对AFB1的线性响应范围为0.1～75μg·L-1,检出限低至3.6×10-2μg·L-1。在对不同谷物(大米、玉米、糯米)进行加标回收实验中,回收率在92.3～103.6%范围之间。高效液相色谱法与构建的适配体传感器方法进行比对,两者检测结果一致性良好,证明适配体传感器的可靠性和一定的实用能力。基于特异性多肽构建黄曲霉毒素B1的电化学传感器研究。借助计算机辅助模拟技术获得与AFB1特异性结合的多肽片段,此为识别元件构建了一种基于特异性多肽的电化学传感器,用于AFB1的检测。在预处理洁净的金电极表面电沉积金纳米粒子(AuNPs)和铜纳米粒子(CuNPs),经过H2SO4蚀刻后CuNPs被去除,电极表面的AuNPs呈现出多片层且多分枝状态。通过孵育的方式将一端修饰了巯基的特异性多肽修饰到工作电极表面,在检测过程中由于AFB1与多肽的特异性结合从而阻碍了电子的传递引起电信号的改变。在最优实验条件下,0.01～20μg·L-1的范围内电信号会随AFB1添加浓度的增加呈线性地减弱,该多肽传感器的检出限达到9.4×10-4 pg·L-1。在对不同谷物(大米、玉米、糯米)进行加标回收实验中回收率在88.4%-102.0%范围之间,实现了对目标物的定量检测。商业化的ELISA试剂盒与实验结果进行验证,得到了一致的检测结果,证明了该多肽传感器的可靠性和一定的实用能力。

关键词： 肝硬化   Ataxin-3   黄曲霉毒素B1   单核苷酸多态性  

摘要： 目的:Ataxin-3（AT3）是一种去泛素化酶,在不同个体间存在明显的多态性分布特征,这种多态性是否影响黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）相关的肝硬化（liver cirrhosis,LC）发病并不清楚,本项目目的在于探讨AT3基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）在AFB1相关性LC发病中的作用及相关机制。方法:（1）本项目是一项基于医院的病例-对照研究,包括384例LC患者（疾病组）和851例没有任何肝脏疾病的对照（对照组）。为了分析,我们设计了小样本筛选（含100对研究对象）和大样本确认（含284例患者和751例对照）两阶段研究模式以评估AT3基因SNPs与AFB1相关性LC的发病风险;（2）AT3基因SNPs通过SNPs数据库获得,我们以该基因的SNPs等位基因最小概率在亚洲人群中分布大于或等于0.1作入选标准,根据该标准,本研究共纳入264个SNPs作为第一个阶段的筛选对象;（3）以小测序法SNaPshot检测第一个阶段中的264个SNPs的基因型,以TaqMan探针法PCR技术检测第二个阶段中3个SNPs的基因型;（4）通过血液中AFB1加合物水平来评价研究对象的AFB1暴露水平,采用竞争酶联免疫吸附法检测血液中AFB1加合物的水平;（5）采用免疫组织化学方法检测LC组织样本中AT3蛋白的表达情况;（6）通过TaqMan-PCR法检测LC组织样本中AT3 mRNA的表达水平;（7）通过采用Logistic regression模型来分析AT3基因SNPs对LC发病风险的影响,使用优势比（odd ratio,OR）和相应的95%置信区间（confidence interval,CI）评价具体的贡献值;通过方差分析和Spearman’s等级相关法检验AT3基因SNPs对AT3基因表达及AFB1-DNA加合物的影响。结果:（1）在疾病组与对照组两组中,研究对象的年龄、性别、民族、吸烟和酗酒史、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染等临床学资料的分布差异无统计学意义（P<0.05）;（2）和对照组相比,LC患者具有更高的血清AFB1白蛋白加合物,分别为1.48±0.32 ln fmol/mg和2.40±0.91 ln fmol/mg;（3）和具有低AFB1暴露的个体相比,这些具有AFB1暴露的个体将具有更高的LC发病风险,中高暴露对应的风险值为3.59（2.65–4.84）和7.74（7.74–10.87）:（4）通过第一个阶段的筛选分析,我们发现三个差异性分布的AT3 SNPs,具体为rs8021276、rs7158733和rs10146249;（5）通过第二个阶段的确认分析,我们发现只有rs8021276与LC的发病风险有关,两个阶段数据的融合分析有相似的发现;以含有rs8021276 A等位基因的纯合子（即rs8021276-AA）相比,含有rs8021276 G等位基因的基因型（即杂合子基因型rs8021276-AG和突变型纯合子rs8021276-GG）有统计学意义地增加LC的发病风险,对应风险值分别为2.48（1.84-3.33）和6.98（4.35-11.22）;（6）在AFB1暴露和AT3 rs8021276基因型的联合分析中,我们发现AT3 rs8021276风险基因型（OR>1）与AFB1不同暴露水平间存在相乘交互作用;（7）在LC组织样本中,AT3 rs8021276多态性与更低的AT3 mRNA和蛋白水平相关,相关性分析显示为负相关(r=-0.25,,P=7.30×10-7);（8）AT3 rs8021276多态性影响LC组织中AFB1-DNA加合物水平,rs8021276-AA、rs8021276-AG和rs8021276-GG三种基因型对应的AFB1-DNA加合物浓度分别为1.51±1.23μmol/mol DNA、2.09±1.18μmol/mol DNA和3.92±1.81μmol/mol DNA,P值为5.61×10-4。结论:当前研究结果表明AT3 rs8021276多态性增加LC的发病风险,这种增加的风险在具有高AFB1暴露的条件下更为明显,可能机制为AT3 rs8021276多态性通过影响AT3表达和功能相关。这些结果提示AT3多态性可用于判断不同个体在AFB1暴露下的LC发病风险,其中rs8021276是一个潜在的可选标志物。

关键词： 藤黄单胞菌   赭曲霉毒素A   黄曲霉毒素B1   生物降解  

摘要： 真菌毒素是某些有害真菌产生的分子质量小、化学性质稳定、具有毒害作用的次级代谢产物,其存在不仅严重威胁着动物生产性能和人类健康,也给畜牧业和食品行业造成了巨大的经济损失。黄曲霉毒素B1(AFB1)和赭曲霉毒素A(OTA)是真菌毒素中危害最大、分布最广泛,也是最被关注和研究的两种真菌毒素。作为一种天然污染物,霉菌毒素的污染难以避免,生物脱毒技术研究应运而生,脱毒技术的研究对食品安全、人类健康及农业绿色发展具有重要意义。由于物理、化学脱毒法存在着营养成分流失、脱毒不彻底等问题,而不能被广泛应用。生物脱毒法在近些年得到了快速的发展,具有作用条件温和、安全环保的优点,是一种较为理想的脱毒方法。本研究以课题组前期筛选的一株具有OTA和AFB1双降解功能的藤黄单胞菌(Luteimonas sp.)菌株CW574为研究材料,对其降解特点及其在玉米豆粕性饲料中的应用做进一步的探讨。实验证明,该降解菌株可以在低浓度的毒素污染条件下有效降解OTA和AFB1。将菌株CW574的菌液分别接种到OTA和AFBi的营养肉汤(NB)培养基中,与OTA共同培养到120 h后,降解率可达到75%左右,与AFB1共同培养到96 h时,降解率可达到67.0%。菌株CW574的细胞重悬液对OTA的降解效率以及80℃高温条件下的无细胞上清液对AFB1的降解效率都比降解菌株降解的效率更高,分别在3 h和24 h内几乎可以把浓度约为40 μg/L的OTA和AFB1完全降解。通过探究菌株CW574无细胞上清液、细胞重悬液和胞内粗酶液对两种毒素的降解情况,结果发现CW574对OTA的降解活性物质存在于菌体细胞内,对AFB1的降解活性物质在无细胞上清中。最适反应条件研究结果表明:菌株CW574降解OTA的最适温度在20℃-50℃之间,最适pH值在5-8之间;菌株CW574对AFB1的降解反应耐高温,降解能力随着温度的升高而增强,温度为80℃时,降解率最高,为99%,最适pH值为8;终浓度为0.1 mol几的Fe3+、Cu2+、C32+、Zn2+对OTA和AFBi的降解反应均有显著的抑制效果。酶抑制实验结果表明:金属螯合剂EDTA、EGTA对OTA的降解反应没有显著抑制效果,对AFB1的降解反应有不同程度的显著抑制效果;SDS处理、蛋白酶K处理、SDS和蛋白酶K共同处理以及加热处理对OTA的降解反应均有显著的抑制效果,加热处理对AFB1的降解反应具有显著的促进作用,蛋白酶K处理对AFB1的降解反应没有影响,SDS处理、SDS和蛋白酶K共同处理对AFB1的降解反应均有显著的抑制效果。基本断定菌株CW574降解OTA的活性物质来源于细胞内的蛋白酶;而菌株CW574对AFB1的降解能力可能不单单只来源于生物酶,还有其他小分子物质的参与。将摇瓶培养好的菌液与含有80μg/kg的OTA和80 μg/kg的AFB1两种毒素的饲料混合,初步检测降解菌株对玉米豆粕型饲料中污染毒素的实际脱毒能力。研究结果表明:CW574菌液处理后的玉米豆粕型饲料可以显著降低饲料中OTA和AFB1的污染浓度。当降解菌株与饲料充分混匀孵育至120 h时,可降解体系中将近80%的OTA和50%的AFB1。降解菌株的培养液对玉米豆粕型饲料中人工污染的两类曲霉毒素脱毒效果明显,具有后续饲料脱毒剂开发潜力。

关键词： 备案制下中药制剂   风险规制   元规制  

摘要： 长期以来,我国对中药制剂和西药实施相同的管制措施。中药院内制剂也同西药院内制剂一样,需要已取得制剂资格的医疗机构报主管部门审批,批准后方可着手配制中药院内制剂。然而,这种无差别的批准制度,因审批周期长、费用高且申报材料不符合中药制剂的特征,导致医疗机构不愿意配制中药院内制剂,阻碍了中药院内制剂的发展。由于不少学者专家对中药院内制剂的审批制提出了批评和质疑,2016年颁布的《中华人民共和国中医药法》将仅应用传统工艺配制的中药制剂由审批制改为了备案制。然而,这样的变革引起了新的质疑。一方面,有人认为尽管将部分中药制剂的审批制改为备案制,但中药院内制剂的备案手续与原本的审批手续相差无几,并没有从实质上放松管制。另一方面,也有人认为,放松事前监管会使中药院内制剂的风险程度增加,一旦出现安全事故,中医药在公众心中的形象恐会被严重破坏。引发争议的原因在于,首先,不同主体对中药制剂的风险认知存在差异;其次,我国缺乏对中药制剂风险的明确分级。因此,想要完善备案制下中药制剂风险控制法律体系,首先应明确其风险来源,并对风险程度进行分级,使各主体对不同程度风险的认知达到基本一致的程度。其次应当明确对备案制下中药制剂的法律规制目标,明确控制中药风险与促进中医药发展并重的原则。最后,针对具体的风险规制关键环节,依据规制目标,确立备案制下中药制剂的规制原则,并选择与之相匹配的元规制风险规制模式及其实现路径,辅以合理的责任追究机制来保障风险规制手段的有效实施。

关键词： 纳米抗体   免疫传感器   前列腺特异性抗原   黄曲霉毒素B1  

摘要： 分子识别元件对免疫传感器灵敏度和稳定性的提高具有至关重要的作用,本研究采用新一代抗体——纳米抗体为识别元件,构建灵敏、稳定的免疫传感器,探讨纳米抗体在改善免疫传感器检测性能中的优势。具体研究工作如下:1.双纳米抗体夹心检测PSA的免疫传感器研究以前列腺特异性抗原(PSA)为靶点,从免疫文库中筛选得到13种能特异性结合PSA的纳米抗体;以纳米抗体A40为捕获抗体,进一步从其他12种纳米抗体中筛选配对抗体,双抗夹心ELISA结果表明,A2与A40具有最佳的匹配效果,测得二者亲和常数分别为4.84×1077 M(A2)及4.86×1077 M(A40)。以石墨烯-纳米金(rGO@AuNPs)复合物为免疫传感器基底材料,偶联捕获纳米抗体A40,随后分别加入待检测的PSA和纳米抗体A2以构建夹心型免疫传感器。采用基因工程技术构建的A2与链霉亲和素结合肽(SBP tag)融合蛋白,可通过结合辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(SA-HRP)产生检测信号。本研究构建的免疫传感器检测线性范围为0.1-100 ng mL,最低检测限为0.8 ng mL;与人血清蛋白(HSA)、人免疫球蛋白(IgG)、葡萄糖、维生素C无明显交叉反应;对血清样品的加标回收率为90%01%,批内变异系数为5%%,批间变异系数为7%3%。实际血清样本的检测结果与Roche Cobas 6000的检测结果相关性良好。2.基于纳米抗体和信号协同放大策略的AFB免疫传感器研究制备MWCNT-WS复合材料,采用电化学一步沉积法于该复合材料表面修饰AuNPs,用于抗AFB纳米抗体(Nb-G8)的锚定。在竞争抗原AFB-SA浓度为30μg mL时,构建AFB-杂交链式反应(AFB-HCR)信号平台,经优化,DNA1-biotin和发卡探针(H1和H2)的工作浓度分别为1μM和10μM。随后建立AFB-HCR与待检测的AFB竞争结合Nb-G8的检测模式,并引入SA-polyHRP产生可检测的信号从而定量AFB。该传感器的定量范围为0.5 pg mL-10 ng mL,检测限为67.88fg mL;与OTA、DON、ZEN、FB未见明显交叉反应;四周内信号下降10.18%,稳定性较好;此外,对玉米样品的加标回收率为81.97%12.30%,批内和批间变异系数(CV)分别为3.42%0.35%和4.03%2.11%。采用HPLC进行方法学确证,其结果与本研究建立的检测方法具有较好的相关性,相关系数r为0.9673。

关键词： 光电化学生物传感器   纳米复合材料   心肌肌钙蛋白   牛奶   黄曲霉毒素B1   荧光假单胞脂肪酶  

摘要： 生物传感技术是多学科相互渗透发展来的一门新型检测技术,它主要涉及生物、化学和物理等学科。由于其有非常高的灵敏度、良好的选择性和快速分析等特点受到广泛关注,在多个方面得到广泛的应用,例如:食品安全、临床诊断和生物医学等领域。以光为激发源的光电化学（PEC）生物传感器检测信号是光敏材料产的光电流,其将光电化学技术与生物识别技术相结合形成的一种新兴生物传感器。其成为生物分析化学领域的研究热点的原因有很多,例如:很低的背景信号和易小型化特点。纳米复合材料能兼容多种半导体纳米材料的优点,拥有单一材料不可比拟的优势。本文基于纳米复合材料构建了3种PEC生物传感器,并将其应用于生物活性物质的分析。1.利用Ag@Cu2O核壳亚微米颗粒（Ag@Cu2O core-shell SPs）对硫化镉量子点敏化的二氧化钛纳米电极（Ti O2/Cd S QDs）的双重抑制作用,开发了一种新型超灵敏测定心肌肌钙蛋白（c Tn I）的PEC免疫传感器。在本研究中,成功构建了Ti O2/Cd S QDs电极,与单独的Ti O2电极相比,光电流增加2.8倍。Ti O2/Cd S复合材料不仅表现出稳定、优良的光电信号,而且为固定c Tn I抗体（Ab1）提供了丰富的官能团。采用Ag@Cu2O core-shell SPs作为二级抗体（Ab2）的标记,竞争吸收光能和消耗电子供体,使得光能和电子供体到达Ti O2/Cd S电极表面减少,增加了传感器的灵敏度。此外,Ag@Cu2O core-shell SPs标记的二级抗体（Ag@Cu2O-Ab2）的空间位阻效应阻碍电子的转移和电子供体向电极表面的扩散,致使光电流被降低,进一步提升了传感器的灵敏度。该免疫传感器在0.02pg·m L-1-50 ng·m L-1能够灵敏识别c Tn I,检测下限为6.7 fg·m L-1,具有良好的灵敏度和良好的稳定性。2.以N-GQDs敏化的Zn-Sn S2纳米复合材料为基底,构建了一种新型的检测牛奶黄曲霉毒素B1（AFB1）的PEC适配体生物传感器。N-GQDs敏化的Zn-Sn S2复合材料表现出良好的PEC性能,利用AFB1适配体和AFB1之间的特异性识别,实现了对牛奶AFB1的灵敏检测,检测浓度范围10 pg·m L-1-20 ng·m L-1,检出限为3 pg·m L-1。3.人工合成了可被牛奶中荧光假单胞杆菌脂肪酶（Lipase）水解产生抗坏血酸的2-抗坏血酸酯（AAP）,该AAP被应用到光电化学脂肪酶生物传感器的构建。（1）构建了Ti O2/Cd S QDs电极检测溶液体系中脂肪酶酶活的PEC传感器。检测溶液中催化产生不同AA浓度电信号差异,用以反映脂肪酶的活性。（2）构建了基于Ti O2/N-GQDs/Cd S QDs/Lipase的光电化学生物传感器。该传感器能灵敏检测抗坏血酸范围0.1～0.0001mol·L-1,根据酶量、电信号强度以及时间计算酶活,为酶活的检测提供了一种新的方法。

关键词： 中职实训   中药制剂   综合实训教学   相关问题   对策  

摘要： 中药制剂综合实训属于中职中药制药专业重要的实践性教学内容,同时也是提高学生岗位工作能力、综合职业能力的有效途径,为学生后续的顶岗实习、就业奠定基础。但是,在综合实训教学期间,实训项目陈旧、趣味性较差以及操作不规范等问题仍然存在,这也严重制约着综合实训教学的开展。对此,为了更好地提高教学质量,简要分析中职教育中药制剂综合实训存在的问题并给出对策,希望可以为相关教育者提供一定帮助。