关键词： 漆酶   理性设计   酶学性质   毒素降解   黄曲霉毒素B1   玉米赤霉烯酮  

摘要： 为解决目前制约食品等领域发展的霉菌毒素污染问题,选取了枯草芽孢杆菌来源的BsCotA漆酶并且通过理性设计提高酶活力、稳定性,从而实现对霉菌毒素降解效率的提高。利用理性设计改造BsCotA漆酶,获得了4个突变体漆酶,包括3个点突变体CotA^(A344K)、CotA^(A317T)、CotA^(T36Y),和突变整合体CotAgold,使用毕赤酵母进行异源表达,测定其酶学性质,并检测其对霉菌毒素的降解效率。基于蛋白质结构进行设计的3个单点突变,均从不同程度上提高了漆酶的稳定性。而将3个突变位点同时整合到1个漆酶突变体上时,3个突变位点间未发生显著拮抗作用,使得突变整合体CotAgold展示出最好的稳定性以及催化能力;CotAgold比酶活力为99.4 U/mg,相比BsCotA的比酶活力提高了10倍,对于ABTS的k_(cat)/K_(M)达到了7.12×10^(5)L/(mol·s),相比BsCotA提高了1.9倍;突变体CotAgold的最适反应pH值为4,最适反应温度均为70℃,与野生型BsCotA催化条件保持一致;CotAgold在pH 2~12,孵育30 min,剩余酶活力均在70%以上,相比野生型BsCotA在酸性条件下的稳定性有明显提高;CotAgold在40~90℃,孵育30 min,残留酶活力均在90%以上,相比野生型BsCotA在高温条件下的稳定性有明显提高;并在ABTS阳离子自由基作为介体的条件下,漆酶CotAgold能完全降解黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮;相比之下,野生型漆酶BsCotA的降解率仅为5%。通过蛋白质的理性设计得到了漆酶突变体CotAgold,表现出显著提高的pH稳定性以及热稳定性,蛋白表达量也有一定的提高,在霉菌毒素降解等领域具有良好的应用前景。

关键词： 高分辨质谱   实验教学   仪器分析   中药制剂分析   成分鉴定  

摘要： 中药制剂是由多种中药配伍组成的,是一个复杂的分子体系,其分析鉴定工作存在较大难度。高效液相色谱与高分辨质谱联用系统(HPLC-HRMS)在中药复方的定性研究中发挥着重要作用。本论文通过探索将高分辨液相色谱质谱联用系统应用到中药学本科生实验教学实践中,建立了对中药制剂参松养心胶囊中5种特征性成分进行鉴定的实验教学方法。使学生了解高分辨质谱在中药制剂分析和鉴定中的重要应用,开阔了本校中药学专业本科生的科研视野,提高了学生对仪器分析的理解,对培养高素质高水平的药学本科生起到了积极作用。

关键词： BOPPPS-CDIO教学模式   中药制剂检测技术   过程性评价   教学改革  

摘要： 采用BOPPPS-CDIO教育模式进行“中药制剂检测技术”课程的教学改革。具体而言,在理论教学环节中,运用BOPPPS模式,实施以学生为中心的参与式学习模式,促进学生理论知识水平的提升;在实训教学环节中,按照CDIO教育模式,致力于锻炼学生的操作技能、培养其科学探究精神和增强其分析解决问题的能力;最后,通过多元化的考核方式,评价学生在学习过程中的表现。该课程的教学改革与实践取得了较为明显的成效,可为中药学专业实践类课程建设提供借鉴与参考。

关键词： 中药   中药提取物   细菌生物膜   葡萄球菌   抗菌药物  

摘要： 葡萄球菌生物膜形成是一个多因素、分阶段的复杂过程,也是葡萄球菌出现多重耐药和持续性感染的重要机制,目前尚无有效药物根除葡萄球菌生物膜引起的感染。与现代抗菌药物相比,中药具有其独特的抗菌效果,且较少产生耐药性。本文从葡萄球菌生物膜形成的过程及调控机制的角度,整理近年来中药及中药提取物抗葡萄球菌生物膜的相关研究进展,重点分析单用中药,或联合抗菌药物使用的抗生物膜作用机制及效果,为临床用药及新型抗葡萄球菌生物膜中药研发提供参考。

关键词： 中药制剂检测技术   项目化   校本活页式教材   课程思政  

摘要： 中药制剂检测技术是将中医药理论与现代分析技术相结合,以此来控制中药制剂质量的专业核心课程。本教材以项目化教学改革为基础,对接工作岗位,重构教材内容,并将课程思政、中药传统技能大赛、微课资源等融入活页式教材编写中,以此培养中医药行业的高素质技术技能型人才,同时为中药制剂检测技术校本活页式教材的开发与研究提供参考。

关键词： 姜黄素   上皮间质转化   胃癌   人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因   中药提取物  

摘要： 目的探讨姜黄素(Cur)对甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱导胃黏膜上皮细胞(GES-1)上皮间质转化(EMT)的抑制作用及其机制。方法将GES-1分为对照组、MNNG处理组(MNNG浓度为20μmol/L,该处理组获得的稳定传代细胞为MC1细胞)、Cur处理组(Cur浓度为20μmol/L)、MNNG+Cur组(该处理组获得的稳定传代细胞为MC2细胞)。采用噻唑蓝(MTT)法评价不同浓度姜黄素对GES-1细胞增殖的影响;光学显微镜观察Cur干预对MNNG诱导的胃黏膜上皮细胞的细胞形态及生长情况的影响;划痕愈合法检测细胞的迁移能力;Western Blot及免疫荧光检测PTEN、Vimentin表达。结果MTT结果显示在5~20μmol/L浓度范围内姜黄素对GES-1细胞生长增殖无影响,较大浓度姜黄素作用后GES-1细胞增殖受到抑制。MNNG可诱导GES-1细胞发生EMT转化过程,Cur对MNNG诱导GES-1细胞EMT形态学变化有明显影响。通过划痕修复试验显示,与MC1细胞比较,MC2细胞在48、72 h的划痕愈合速度慢(P<0.05);Western Blot、免疫荧光试验显示,与MNNG处理组比较,MNNG+Cur组PTEN表达上调;MNNG+Cur组、Cur组间质标志物Vimentin表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05);EMT转化稳定传代后的MC1细胞中PTEN表达明显低于MC2细胞(P<0.05)。结论Cur可以抑制MNNG诱导的GES-1细胞EMT进程,其机制可能与PTEN介导的相关信号通路有关。

关键词： 中药配方   中药制剂   质量因素   对策  

摘要： 中药配方作为中医临床实践中防病治病的重要环节,其质量直接影响临床疗效及患者健康,通常由多种草药按照一定比例组合而成。属于中药制剂中的一种,应当具有药效稳定、剂型多样、临床应用广泛等特点,在中医临床实践和科学研究中占有重要地位,也是中药研究、生产和监测的关键组成部分。但中药材成分复杂,同科同属来源的药物,主要质量特征难以确定。该药物的质量控制水平与公众更好地使用中药的期望有很大差异。鉴于此,本文主要分析影响中药配方质量的因素及对策。

关键词： 兼用型   优质高效栽培技术   大宗中药材   双黄连口服液   连翘   木犀科   观花灌木   中药制剂  

摘要： 连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl.为木犀科连翘属多年生落叶灌木,药林兼用型植物,是中国传统的大宗中药材之一[1],许多研究表明,连翘的茎、叶、果实、根均可入药,在制药行业和中药饮片生产中被广泛应用,是连翘败毒丸、双黄连口服液、银翘解毒冲剂等诸多中药制剂的主要原料[2,3]。连翘早春先花后叶,满枝金黄,是优良的观花灌木,可广泛用于园林绿化。连翘根系发达,对周围环境适应能力很强,不仅可以改善生态环境,还能产生巨大的经济效益、社会效益。

关键词： 纳米中药制剂   纳米材料   河道污染   污水治理  

摘要： 针对中国城市河道污水黑臭及富营养化等水体污染问题,制备了一种用于污水治理的纳米中药制剂复合材料,通过污水试样的污染物降解试验,研究了纳米中药制剂对河道污水的治理修复效果。试验结果表明,经过纳米中药制剂处理,污染水体的色度、COD(化学需氧量)、TN(总氮)、TP(总磷)相关指标得到了有效改善,纳米中药制剂对污染水体具有良好的修复效果。研究成果可为城市河道污水治理修复提供一定的指导作用。

关键词： 复方中药制剂   小尾寒羊   生产性能   生化指标   抗氧化指标   粪便评分  

摘要： 为探讨复方中药制剂对小尾寒羊生长性能、血清生化指标、抗氧化指标、粪便形态的影响及驱虫效果,试验选取3月龄左右小尾寒羊母羊100只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复5只羊,分别为对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验期42 d,测定并统计小尾寒羊的生长性能、血清生化指标、抗氧化指标及粪便评分。结果表明:与对照组相比,试验Ⅱ、Ⅲ组终末重量显著升高(P<0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组增重和平均日增重显著升高(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组血清总蛋白(TP)含量显著升高(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组血清白蛋白(ALB)含量显著升高(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组血清丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);试验第28、42天,试验Ⅱ、Ⅲ组粪便评分显著降低(P<0.05)。综上,日粮中添加复方中药制剂可以提高幼年小尾寒羊的生长性能,改善血清生化指标,提高抗氧化能力,改善粪便形态,适合应用于临床,适合的添加剂量为1%。