关键词： 黄曲霉毒素B1   电化学传感器   比率方法   双方法联用  

摘要： 黄曲霉毒素是一类具有强烈生物毒性的化学物质,主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌等霉菌产生,广泛存在于霉变农产品,其中尤以黄曲霉毒素B(AFB)毒性强、危害广。由于脂肪含量高、生长环境适宜,玉米是AFB污染高发区,而实现AFB精准、快速分析可为其霉变预警与质控提供技术支撑。现有AFB检测方法各有优缺点,其中色谱-质谱联用法精准、可靠,但依赖于精密仪器与专业操作人员;酶联免疫分析法检测速度快,但易出现假阳/阴性结果。由于灵敏度高、响应速度快,电化学传感法近年来被广泛用于AFB分析,但其检测精准度等有待进一步提高。基于此,本论文以发展精准、快速的AFB传感方法为目标,通过引入比率策略并结合电化学、光电化学、比色等方法联用,构建高性能比率适配体传感器,解决玉米中AFB的精准、快速分析难题。本论文的主要研究内容如下:1)温度与pH高耐受性比率电化学传感器构建及玉米中黄曲霉毒素B检测研究针对由不同探针对温度、pH响应差异性导致的比率检测精准度降低问题,构建了基于单一探针的自参比比率电化学传感器,其原理是利用温度、pH值对同一探针扰动的一致性,通过比率信号消除其对检测结果的影响。基于二茂铁标记的辅助DNA(Fc-a DNA)和二茂铁标记的适配体(Fc-Apt),构建AFB自参比比率电化学传感器。当AFB存在时,Fc-Apt与AFB特异性识别并脱离电极表面,导致Fc-Apt电流信号(I)减小,而源于Fc-a DNA的参比信号I保持不变。利用I/I与AFB浓度对数之间的线性关系,实现传感器对AFB的检测,其线性范围为0.0001～10 ng/m L,检出限为0.012 pg/m L。将该传感器用于玉米中AFB检测,其回收率为96.7～102.9%。2)基于光电-电化学双方法联用的比率传感器构建及玉米中黄曲霉毒素B检测研究为了进一步提升对AFB的检测精准度,引入光电-电化学双方法联用策略,发展了光电-电化学双比率传感器,其突出优势是可同时获取亚甲基蓝(MB)对AFB的电流和光电流响应信号,实现双方法信号原位同时获取。当AFB存在时,双链结构破坏并释放部分MB,因此MB的电流(I)和光电流(I)均降低,而传感体系中作为参比信号的I[Fe(CN)6])3-/4-保持不变。基于此,以I[Fe(CN)6])3-/I和I[Fe(CN)6]3-/4-)/I为比率信号,构建的传感器对AFB的线性检测范围分别为0.005～100 ng/m L和0.01～100 ng/m L,检出限分别为2.5 pg/m L和4.7 pg/m L。应用于玉米样品中AFB的检测,具有良好的可靠性。3)基于色差仪的比色-光电化学双模传感器构建及玉米中黄曲霉毒素B检测研究引入色差仪同时激发获取光电和比色信号,发展了比色-光电化学双模传感方法,其突出优势是利用色差仪同时实现硒化镉量子点(Cd Se QDs)光电流信号的激发与普鲁士蓝(PB)颜色变化的定量分析。当AFB存在时,与适配体结合,阻碍电极表面电子转移,光电流信号降低,而PB随AFB浓度增加而发生颜色变化。在光电分析模式下,传感器对AFB检测的线性范围为0.001～10 ng/m L,检出限为0.00048 ng/m L。研究工作从提高传感方法实用性出发,通过双方法与器件的集成,研发精准、快速的检测装置,有望用于玉米中AFB快速检测。

关键词： 黄曲霉毒素B1   比色传感器   酶联免疫法   快速检测   谷物  

摘要： 黄曲霉毒素B(Aflatoxins B,AFB)是一类主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的黄曲霉毒素中分布最广泛、毒性最强和污染水平最高的一种毒素,是世界卫生组织公认的IA类致癌物,严重危害人类安全。目前AFB的传统检测方法如质谱法存在操作难度大、检测成本高、需要经过专业培训、无法现场快速检测的问题。为了克服上述方法的弱点,目前已经开发出许多快速检测方法,其中免疫测定中的酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)因其高通量、良好的特异性、稳健性和易于自动化而成为应用最广泛的免疫测定技术,但是ELISA法存在比色信号弱、显色底物选择局限性大以及信号标记物不稳定的问题,这限制了它的进一步应用。因此,本论文构建了三种新颖、简单、快速、灵敏的比色传感器来改善ELISA法存在的上述问题,并将其用于谷物中AFB的痕量检测。为了解决AFBELISA检测方法中比色信号弱的问题,开发了一种基于葡萄糖氧化酶(GOx)/兔抗小鼠免疫球蛋白G标记的金纳米粒子的简单、灵敏和特异性比色免疫测定对AFB污染的定量检测方法。在该策略中,以GOx催化辅助的Fe和Fe(CN)系统生成的普鲁士蓝(Prussian blue,PB)作为比色探针,在GOx的催化下,葡萄糖氧化产生的HO将Fe还原为Fe,导致溶液颜色由黄色变为蓝色。此外,随着AFB浓度的增加,706 nm处的吸光度从0.5至5 ng/m L逐渐线性下降,检测限(Limit of detection,LOD)为350 pg/m L。此外,在大米粉加标样品中达到了可接受的回收率(87.60%-106.00%)。使用商业化AFBELISA试剂盒与所提出方法的检测结果进行比较验证,两者检测结果一致,证明了所提出的比色策略具有一定的准确性和实用性。为了解决AFBELISA检测法显色底物可选择性小、显色底物对环境不友好的问题,本文选择了安全无毒的姜黄素为显色底物建立了以姜黄素为比率探针的间接竞争ELISA法检测谷物中的AFB。该测定基于脲酶将底物尿素水解生成氨,氨分子诱导溶液p H值增加,姜黄素中的酚羟基在碱性条件下电离成酚氧负离子,增强了姜黄素的电子供给和吸收协同作用。结果,姜黄素的颜色由黄色变为红棕色,呈现视觉可见的颜色变化。姜黄素的吸收光谱随着Δ/Δ强度比的变化而不断红移。在最佳条件下,吸光度比(Δ/Δ)在0.01-5 ng/m L范围内随AFB浓度的增加呈线性下降,LOD为10 pg/m L。AFB在大米粉和小麦粉样品中的回收率分别为86.00%-110.00%和96.00%-113.00%。使用商业化AFBELISA试剂盒与所提出方法的检测结果进行比较验证,两者检测结果一致,证明了所提出的比色策略具有一定的准确性和实用性。为解决AFB快速检测方法中信号标记物稳定性差的问题,建立基于金属有机骨架的酶联免疫法检测大米粉中AFB。采用仿生矿化方法将辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)封装在沸石咪唑骨架结构材料(Zeolite imidazole frameworks-8,ZIF-8)中,在HRP@ZIF-8表面修饰多巴胺(dopamine,DA)形成聚多巴胺(Polydopamine,PDA)层。以ZIF-8作为模板制备了具有丰富π电子的HRP@ZIF-8/PDA复合物与免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)偶联,合成信号标记物HRP@ZIF-8/PDA/IgG。利用该复合物催化3,3’5,5’-四甲基联苯胺(3,3’5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)显色。发现HRP@ZIF-8复合材料在碱性条件、高温等极端条件下能保持稳定的催化活性。在此基础上建立间接竞争免疫比色法检测AFB,通过肉眼可直接分辨含有AFB样品。在最佳条件下,随着AFB浓度的增加,吸光度在0.01-20 ng/m L内递减,具有明显的线性关系,LOD为72 pg/m L,同时精密度和特异性都达到可接受的水平,AFB在大米粉和小麦粉中的添加回收率分别在96.00%-105.00%、82.00%-110.00%之间,相对标准偏差均小于5%。使用商业化AFBELISA试剂盒与所提出方法的检测结果进行比较验证,两者检测结果一致,证明了所提出的比色策略具有一定的准确性和实用性。本论文构建的三种新型快速检测方法分别从比色信号放大、选择无毒无害、环境友好型的姜黄素作为显色底物、增强信号标记物的稳定性方面设计比色方法,实现了AFB的高效检测和更宽的检测范围,拓宽了其在分离和临床诊断等方面的应用研究,构建的三种快速、简单、低耗和高选择性的检测方法为谷物安全中AFB的分析提供了新的技术支持和研究前景。

关键词： 新剂型   新技术   中药制剂  

摘要： 中药是我国医药科学体系的主要特色,在多种疾病治疗中具有较为突出的优势。相比于西药,中药材化学成分多样,药物稳定性偏低,治疗期间需大剂量给药,且起效速度缓慢,进而导致中药在国际医药体系中影响力偏低。伴随科学技术的发展完善,多种新技术及全新的药物剂型得到日益广泛应用,为研发稳定且疗效显著的活性中药单体创造有效条件。本文重点总结分析药物新剂型与新技术应用于中药制剂的相关问题,希望为相关人员提供必要的参考。

关键词： 中医院   中药制剂   成本管理  

摘要： 公立中医院中药制剂体现中医临床医生的经验积累,继承传统中药处方,具有明显的专科特色.本文总结中医院中药制剂成本管理的现状,分析中药制剂成本管理存在的问题,以WZ市中医院制剂科为例,通过中药制剂工艺及流程的调查研究,提出中药制剂成本管理完善措施,为中药制剂制定合理价格提供参考依据.

关键词： 结直肠癌细胞   消化系统恶性肿瘤   三叶青   HCT116   CDCA   肝癌细胞增殖   中药提取物   葡萄科  

摘要： 结直肠癌是临床常见的一种消化系统恶性肿瘤,中药提取物具有抗氧化、抗肿瘤等作用,并可抑制结直肠癌等肿瘤细胞的增殖等生物学行为[1-3]。三叶青属于葡萄科崖爬藤属多年生藤本植物,可抑制肝癌细胞增殖并可促进细胞凋亡[4]。miR-515-5p在肿瘤细胞中表达下调,上调其表达可抑制肿瘤细胞迁移[5]。starbase预测显示CDCA5可能是miR-515-5p的靶基因,CDCA5在结直肠癌细胞中表达水平升高,并可通过激活ERK信号通路从而促进结直肠癌发展进程[6]。因此,本研究主要探究三叶青乙酸乙酯提取物对结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,探讨其对miR-515-5p/CDCA5分子轴的调控作用。

关键词： 苦荞种子   黄曲霉毒素B1   高效液相色谱法   免疫亲和柱  

摘要： 利用AFB1免疫亲和柱对苦荞籽进行前处理,使用高效液相色谱仪测定AFB1的质量浓度,建立了一种检测苦荞籽中AFB1质量分数的检测方法。采用该方法测定了凉山州不同区域苦荞籽中AFB1的质量分数。结果表明:新建方法的检测限为0.2 ng/mL,精密度良好,添加回收率平均为85.87%。利用此法测定了凉山州不同区域的苦荞籽,在凉山州不同地区收集的苦荞籽中均未检出AFB1。

关键词： 课程思政   中药制剂学   教学模式  

摘要： 为响应习近平总书记传承发展中医药事业的号召,“增强民族自信,勇攀医学高峰,深入发掘中医药宝库中的精华,充分发挥中医药的独特优势”,以中药学专业核心课程“中药制剂学”为例,在教授知识的过程中,强调思政教育的全面融入,积极探索实施课程思政的有效措施,使学生在掌握扎实的制剂专业知识、操作技能与创新能力的同时,借助中医药思维的建立和职业道德的培养,提升其对中华民族优秀传统文化的认知程度,增强民族自豪感和专业认同感。

关键词： 高校附属医院   医疗机构制剂   中药制剂   发展对策  

摘要： 目的以北京大学为例,分析高校附属医院医疗机构制剂特别是中药制剂发展面临的挑战并提出建议。方法设计访谈提纲,采取目的抽样方法,对北京大学附属医院药剂科相关管理人员进行半结构式深度访谈。结合各医院的制度文件和医疗制剂资料,建立主题框架进行资料分析。结果高校附属医院医疗机构中药制剂对于适应临床需求、凸显医院特色、提升研发能力具有一定优势,但面临成本不断增加、临床使用受到局限和中药审批的特殊性的问题。结论建立医疗机构制剂统筹发展模式及产业化可行性,应围绕制剂特色加大转化力度,同时高度重视和加强中药制剂的研发与应用。

关键词： 中药制剂技术   课程思政   思政元素   案例库  

摘要： 《中药制剂技术》课程内容庞杂,蕴含着丰富的思政元素,文章结合课程内容、特点以及与思政教育的特点,充分挖掘该课程所蕴含的思政资源,凝练思政元素案例库,并将其融入中药制剂技术教学,学生不但学习了理论知识、提高了技能,同时增强了专业自信。