关键词： 急性肺损伤   发病机制   内质网应激   活性氧   恶化  

摘要： 急性肺损伤(ALI)是一种严重威胁全球人类生命健康的疾病,其主要病理特征为肺泡上皮细胞和肺毛细血管内皮细胞的损伤,导致弥漫性肺间质水肿和肺泡水肿,通常伴有急性低氧性呼吸功能不全。内质网应激(ERS)在ALI的发生和发展过程中扮演着关键角色。它通过多种途径加剧急性肺损伤:在细胞凋亡方面,关键蛋白如GRP78、CHOP和caspase-12参与调控,促进肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞的凋亡,从而加重肺组织损伤;在ROS代谢方面,诱导活性氧(ROS)的大量释放,NADPH氧化酶等参与ROS的产生过程,ROS会损害肺血管内皮细胞,导致液体渗漏,进一步加剧肺损伤;在炎症反应方面,激活中性粒细胞,补体产生的C5a与中性粒细胞C5aR结合,诱导ERS,进一步加重肺部炎症;在铁死亡途径方面,加剧肺泡上皮细胞的铁死亡,Mfn-2与IRE1-α等相互作用参与其中。因此,针对ERS的干预策略,例如使用化学分子伴侣或特定的信号通路抑制剂,可能为ALI的治疗提供新的方向,有望改善患者的预后,提高其生活质量。本文深入探究了ERS与ALI的关联性,对揭示ALI的发病机制及开发新的治疗方法具有重要意义。

关键词： 丹参   提取工艺   糖尿病   炎性因子  

摘要： 目的建立不同丹参提取物的质量标准,并探讨各提取物对糖尿病模型大鼠炎性因子的影响。方法采用薄层色谱(TLC)法对不同溶剂(水、50%乙醇、95%乙醇)提取物中丹参酮Ⅱ_(A)和丹酚酸B进行定性鉴别;以高效液相色谱(HPLC)法对提取物中丹酚酸B进行含量测定。色谱柱为Diamonsil^(TM)-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59,V/V/V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为286 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。将50只大鼠随机分为对照组、模型组、水提取物组、95%乙醇提取物组、50%乙醇提取物组,各10只。各组大鼠喂饲高脂肪高糖饮食1个月后腹腔注射1%链脲菌素(60 mg/kg)以复制糖尿病大鼠模型。建模成功后灌胃相应提取物(10 mL/kg)或生理盐水,每日1次,持续2个月。采用血糖测试纸测定大鼠空腹血糖(FBG)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-6、C反应蛋白(CRP)、细胞间黏附分子(ICAM)-1、白细胞分化抗原40配体(CD40L)水平,免疫组织化学法分析大鼠肿瘤坏死因子(TNF)-α表达情况。结果50%乙醇、95%乙醇提取物中丹参酮Ⅱ_(A)和丹酚酸B的TLC图斑点清晰,分离度良好,水提取物中未检出丹参酮Ⅱ_(A)。丹酚酸B进样量在0.525~2.625μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9997,n=5);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.4%;平均加样回收率为98.39%,RSD为1.28%(n=6)。样品中丹酚酸B含量依次为50%乙醇提取物(85.751 mg/g)>水提取物(61.733 mg/g)>90%乙醇提取物(43.335 mg/g)。与模型组比较,水提取物组、95%乙醇提取物组、50%乙醇提取物组大鼠FBG水平,血清中ICAM-1、CRP、CD40L、IL-6水平,腹主动脉组织中TNF-α表达水平均显著降低(P<0.05)。结论建立的不同提取物的质量标准操作简便,结果稳定可靠。丹参中的脂溶性和水溶性提取物可减轻糖尿病大鼠模型抗体炎性反应,其作用机制可能与丹参酮Ⅱ_(A)与丹酚酸B降低炎性因子水平有关,其中50%乙醇提取物降糖和抗炎效果最佳。

关键词： 干扰素   微波治疗   绝经   高危型人乳头瘤病毒   疗效   免疫功能  

摘要： 目的探讨阴道局部应用干扰素联合微波治疗绝经后持续高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的疗效,并分析对患者免疫功能的影响。方法将我院2023年2月~2024年12月收治的106例绝经后持续HR-HPV感染患者纳入本次研究,用信封随机法分为对照组和联合组,各53例,其中对照组在常规治疗的基础上接受阴道局部应用干扰素治疗,联合组在对照组的基础上接受微波治疗。比较两组患者疗效及HPV转阴率,比较两组患者治疗前后的阴道微生态[p H值、乳酸杆菌分布情况(Nugent评分)、清洁度]、炎症因子、免疫功能、不良反应。结果联合组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);治疗前,两组患者阴道微生态情况比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,两组pH值、Nugent评分、清洁度Ⅲ~Ⅳ度人数占比均较治疗前降低,且联合组低于对照组(P<0.05);治疗前,两组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-17(IL-17)、白介素-4(IL-4)、C反应蛋白(CRP)水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,两组TNF-α、IL-17、IL-4、CRP水平均较治疗前降低,且联合组低于对照组(P<0.05);治疗前,两组患者免疫功能指标水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,两组CD_(4)^(+)T细胞百分比、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)比值均较治疗前升高,且联合组高于对照组(P<0.05),两组CD_(8)^(+)T细胞百分比均较治疗前降低,且联合组低于对照组(P<0.05);两组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论阴道局部应用干扰素联合微波治疗绝经后HR-HPV感染患者的疗效显著,患者HPV转阴率提高,阴道微生态环境改善,炎性反应明显减轻,免疫功能提高,具有推广应用价值。

关键词： 半胱氨酸蛋白酶抑制剂   乳腺癌   增殖   细胞周期  

摘要： 目的 探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CST1)对乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力的调控作用及其潜在机制。方法 利用UALCAN和GEPIA数据库分析癌症基因图谱(TCGA)数据库中CST1在不同癌组织中表达水平;进一步分析CST1在乳腺癌中的表达水平以及与临床特征和生存预后的关系。通过CANCERTOOL和GeneCards数据库对CST1进行信号通路富集分析。基于Metabric数据库分析CST1与细胞周期相关蛋白(P21、P27、CyclinD1、CDK1)相关性。将MDA-MB-231细胞分为四组:OE-NC组(高表达对照组)、OE-CST1组(高表达组)、sh-NC组(低表达对照组)、sh-CST1组(低表达组)。通过CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测CST1对细胞增殖、迁移和侵袭中的影响。采用蛋白印迹检测CST1及下游蛋白(P21、P27、CyclinD1、CDK1)的表达水平。结果 公共数据库分析结果表明CST1在多种肿瘤组织中异常表达,CST1在乳腺癌组织中表达高于正常组织(P<0.05),且与年龄、淋巴结转移、临床分期呈正相关(P<0.05),CST1高表达患者总生存期较低表达患者更差(P<0.05)。通路富集分析显示细胞周期信号通路最靠前,并与P21、P27、CyclinD1、CDK1相关(P<0.05)。实验结果表明,CST1高表达促进乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,而低表达CST1则抑制上述表型(P<0.05)。蛋白印迹实验结果显示,与高表达组相比,低表达组乳腺癌细胞中CST1的蛋白水平明显较低(P<0.05)。另外,CST1高表达组中P21、P27的蛋白水平显著降低,CyclinD1、CDK1的蛋白水平显著升高(P<0.05),而CST1低表达组中却呈相反趋势(P<0.05)。结论 CST1的表达可调控乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并且也可以靶向调控P21、P27、CyclinD1、CDK1的表达,从而影响乳腺癌细胞周期。

关键词： 急性胰腺炎   重症胰腺炎   胆源性急性胰腺炎   高脂血症性胰腺炎   细胞胀亡   细胞凋亡  

摘要： 目的分析高脂血症性急性胰腺炎(hyperlipidemia-induced acute pancreatitis,HLAP)的临床特点,探讨其易发生重症胰腺炎的发病机制,为胰腺炎的预防和治疗提供决策支持。方法回顾性分析2005年1月至2020年12月在山东第一医科大学附属中心医院住院的928例急性胰腺炎患者的临床资料。根据病因将其分为两类:胆源性急性胰腺炎(biliary pancreatitis,BAP)和HLAP,根据CTSI评分将胰腺炎分为轻症急性胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)和重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP),分析两种不同病因情况下MAP和SAP的发病率、并发症及脏器功能损伤情况。结果BAP主要是轻症胰腺炎,HLAP重症的发生率明显高于BAP,两者相比差异显著(P<0.05);HLAP组并发症、脏器功能障碍发生率较BAP组高且严重。结论HLAP较BAP易发生重症化。高脂血症导致胰腺微循环障碍,胰腺严重缺血缺氧引起胰腺细胞胀亡,大量胰酶瞬间释放导致胰腺组织自身消化是导致其易重症化的重要发病机制。

关键词： 心肌纤维化   心脏成纤维细胞   镍纹样蛋白   Smad信号通路   大鼠   TGF-β1  

摘要： 目的:探讨镍纹样蛋白(METRNL)对TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活性、增殖和胶原合成功能的影响。方法:分离培养原代大鼠心脏成纤维细胞,采用TGF-β1刺激成纤维细胞诱导细胞活化、增殖,将其分为对照组、TGF-β1组、METRNL组、TGF-β1+METRNL组,采用MTT法检测细胞活性和增殖率,采用qRT-PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α平滑肌蛋白(α-SMA)mRNA的表达水平,采用免疫荧光染色检测Ⅲ型胶原和α-SMA蛋白的表达,采用Western blot检测p-Smad2、p-Smad3、Smad2、Smad3、Smad4蛋白的表达。结果:TGF-β1作用后细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及α-SMA mRNA表达水平增加,Ⅲ型胶原及α-SMA蛋白表达水平增加,p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3升高;METRNL作用后上述指标均降低,且TGF-β1和METRNL存在交互作用(P<0.05)。结论:METRNL可减弱TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活化、增殖和胶原合成功能。

关键词： 蒙药   心肌缺血再灌注   心肌梗死   纤维化   炎症反应   氧化应激  

摘要： 目的 探讨蒙药吉如很古日古木-7(JG-7)和广枣三味汤(GZ-3)预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤(Myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用。方法 将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、复方丹参滴丸(CDDP)阳性对照组、JG-7组、GZ-3组,每组12只建立MIRI模型,H9C2细胞随机分为Control(常氧)组、H/R(缺氧6 h复氧14 h)组、H/R+JG-7组、H/R+GZ-3组。各组小鼠缺血30 min,再灌注24 h、7 d后进行心功能指标检测,TTC染色检测MIRI 24 h后梗死面积,HE染色检测MIRI 24 h后观察心肌组织结构和细胞形态,TUNEL细胞凋亡试剂盒检测MIRI 24 h心肌细胞凋亡情况,Masson染色检测MIRI 7 d后心肌纤维化情况。腹主动脉取血,分离血清,检测各组小鼠MIRI氧化应激后指标,CCK-8法检测各组H9C2细胞H/R后存活率。结果 TTC结果显示JG-7、GZ-3减少小鼠MIRI 24 h后梗死面积。ELISA及试剂盒检测证明JG-7、GZ-3降低MIRI 24 h、7 d后肌酸磷酸激酶同工酶(CreatineKinase-MB,CK-MB)、乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase,LDH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平,增加超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)水平。HE染色结果显示JG-7、GZ-3可改善MIRI 24 h后心肌病理改变。TUNEL细胞凋亡检测结果显示JG-7、GZ-3可改善MIRI 24 h后心肌组织细胞凋亡情况。Masson染色结果显示JG-7、GZ-3可缩小MIRI 7 d后心肌组织纤维化面积。CCK-8法结果显示JG-7、GZ-3可提高H9C2细胞H/R后细胞存活率。结论 蒙药吉如很古日古木-7和广枣三味汤预处理可降低缺血再灌注(Ischemia-reperfusion,I/R)后造成的损伤,减少小鼠I/R后心肌梗死面积及纤维化情况,保护心脏。

关键词： 血凝素   流感病毒   免疫原性   昆虫-杆状病毒表达系统  

摘要： 目的构建4种重组季节性流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA),并在小鼠模型中评价其免疫原性。方法将4种季节性流感病毒Wisconsin(H1N1)、Darwin(H3N2)、Austria(B/Victoria lineage,BV)和Phuket(B/Yamagata lineage,BY)株HA蛋白编码序列进行密码子优化合成,构建重组质粒,经过转化和转染获得重组杆状病毒,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组HA蛋白。重组HA蛋白经镍柱亲和层析纯化,与Al(OH)3或AddaVax佐剂配伍后肌肉免疫BALB/c小鼠。间接ELISA和血凝抑制试验检测小鼠体液免疫应答,ELISPOT检测小鼠细胞免疫应答,微量中和抗体试验检测小鼠血清抗体效价。采用t检验或非参数秩和检验对数据进行统计学分析。结果PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳证实重组杆粒构建正确。Western blot验证了重组蛋白H1N1-HA、H3N2-HA、BV-HA和BY-HA正确表达,SDS-PAGE结果显示4种重组HA蛋白纯度均>95%。3针免疫后,与AddaVax佐剂配伍的重组H1N1-HA、H3N2-HA和BV-HA蛋白组总IgG水平高于同种亚型免疫组且差异均有统计学意义(P均<0.05)。4种重组HA蛋白混合配伍AddaVax佐剂组的IFN-γ、IL-2和IL-4分泌水平比四价流感病毒裂解疫苗组高且差异有统计学意义(P均<0.01)。微量中和抗体试验检测结果显示,四价流感病毒裂解疫苗组效价为1∶225,而4种重组HA蛋白混合与AddaVax佐剂配伍组效价可达1∶1200。结论本研究成功表达了4种重组季节性流感病毒HA蛋白,与AddaVax佐剂配伍免疫小鼠有较好的免疫原性。

关键词： 乳腺炎   乳腺上皮细胞   细胞凋亡   和厚朴酚   SIRT3信号通路  

摘要： 和厚朴酚(Honokiol,HKL)是一种具有抗炎、抗氧化特性的天然双酚类化合物。该研究旨在探讨HKL通过激活沉默信息调控因子3(SIRT3)调控脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)凋亡的分子机制。采用CCK-8法筛选LPS(0~400滋g/mL)和HKL(0.05~2滋M)的安全浓度,结果显示:400滋g/mL LPS显著抑制了细胞活力(P<0.05),0.1~1滋M HKL无显著毒性(P>0.05);通过Western blot分析凋亡相关蛋白表达发现,LPS处理后促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.0001)、抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调(P<0.01),且Bax/Bcl-2比值增加(P<0.001);HKL(0.1~1滋M)可呈剂量依赖性逆转上述趋势,使Bax/Bcl-2比值恢复至对照组水平(P<0.0001)。机制研究显示,LPS组SIRT3蛋白表达显著降低(P<0.0001),而HKL预处理可剂量依赖性地上调SIRT3表达(P<0.0001)。上述研究表明,HKL通过激活SIRT3信号通路调控Bax/Bcl-2比值平衡,从而抑制LPS诱导的BMECs凋亡。该发现为开发基于天然产物的奶牛乳腺炎防治策略提供了新靶点。

关键词： 2型糖尿病   糖化血红蛋白   血脂检测   诊断  

摘要： 目的分析糖化血红蛋白(HbA1c)与血脂四项联合检测在糖尿病诊断中的应用效果。方法将在天津市北辰区天穆镇社区卫生服务中心于2023年9月—2024年9月接受治疗的90例2型糖尿病患者纳入研究中,分为观察组。同期将在该院接受健康检查的90例健康体检者纳入研究中,分为对照组。两组研究对象均接受了血糖检测与血脂四项联合检测。比较两组患者HbA1c与三酰甘油(TG)等血脂指标检测结果。计算HbA1c与血脂四项联合检测对2型糖尿病的检出率,计算联合检测对2型糖尿病诊断的灵敏度与特异性。结果观察组患者血糖、血脂指标均与健康体检者指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与葡萄糖耐量试验这一金标准相比,联合检测诊断2型糖尿病的准确率、灵敏度及特异性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病患者HbA1c与血脂四项指标检测结果与健康体检者检测结果有着较大的不同,尤其是血糖与部分血脂指标明显超出正常值,以此为依据在糖尿病诊断中具有良好的诊断符合率与灵敏度,值得临床应用。