关键词:
针刺
肥胖
转化生长因子β/Smad同源物3信号通路
高脂饮食
自噬
摘要:
目的:观察针刺对高脂饮食导致的肥胖大鼠转化生长因子β(TGF-β)/Smad同源物3(Smad3)信号通路及自噬相关因子表达的影响,探讨针刺减肥效应的生物学机制。方法:SD大鼠随机分为正常组10只和高脂饮食造模组30只,高脂饮食复制肥胖大鼠模型。造模成功后,将高脂饮食造模组再分为高脂饮食组、奥利司他组、针刺组,每组10只。针刺组针刺“关元”“中脘”及双侧“天枢”等穴,每次30 min,每日1次,共治疗4周;奥利司他组给予大鼠32.4 mg/kg奥利司他灌胃,每日1次,共治疗4周。测量大鼠体质量并计算Lee’s指数,测量大鼠附睾、肾周脂肪质量;测量大鼠空腹血糖与胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMAIR),进行腹腔葡萄糖耐量和胰岛素耐量实验;测量血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL)含量;HE染色观察肝脏及附睾脂肪组织形态结构,油红O染色观察肝脏组织脂滴;采用荧光定量PCR和Western blot法测定附睾脂肪组织中TGF-β、TGF-β受体1(TGF-βR1)、Smad3、重组人自噬效应蛋白酵母Atg6的同源蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)的mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,高脂饮食组大鼠体质量、Lee’s指数、肾周和附睾脂肪质量、血清TC、TG、LDL、FINS含量和HOMA-IR升高(P<0.01),HDL含量降低(P<0.01);与高脂饮食组比较,针刺组和奥利司他组体质量、Lee’s指数、肾周和附睾脂肪质量、血清TC、TG、LDL含量、HOMA-IR降低(P<0.01,P<0.05),针刺组HDL含量升高(P<0.01)。与正常组比较,在注射葡萄糖后30、60、120 min时,高脂饮食组血糖和胰岛素水平升高(P<0.01,P<0.05)。与正常组相比,高脂饮食组大鼠脂肪组织脂滴明显增大且排列紊乱,肝细胞内的脂质沉积显著增多;与高脂饮食组相比,针刺组、奥利司他组大鼠脂滴体积均缩小。与正常组比较,高脂饮食组大鼠附睾脂肪组织中TGF-β、TGF-βR1、Smad3、LC3和Beclin-1的mRNA表达水平升高(P<0.01,P<0.05),p62的mRNA表达水平降低(P<0.01);与高脂饮食组相比,针刺组和奥利司他组大鼠附睾脂肪组织中TGF-β、LC3和Beclin-1的mRNA表达水平降低(P<0.01,P<0.05),p62 mRNA表达水平升高(P<0.01),针刺组TGF-βR1表达水平降低(P<0.05)。与正常组比较,高脂饮食组大鼠附睾脂肪组织中TGF-β、TGF-βR1、p-Smad3/Smad3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达水平升高(P<0.01),p62蛋白表达降低(P<0.01)。与高脂饮食组相比,针刺组和奥利司他组附睾脂肪组织中TGF-β、p-Smad3/Smad3和Beclin-1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p62显著上升(P<0.01),针刺组TGF-βR1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。针刺组血清HDL含量、附睾脂肪组织TGF-βR1及p-Smad3/Smad3 mRNA的表达水平显著降低(P<0.01),结论:针刺可通过抑制TGF-β/Smad3信号通路,抑制脂肪组织过度自噬,改善肥胖大鼠代谢状态,减小脂肪细胞体积,实现减重效应。