关键词： 免疫检查点抑制剂相关糖尿病   暴发性1型糖尿病   糖尿病酮症酸中毒   胰岛素   血糖监测  

摘要： 目的　分析免疫检查点抑制剂相关糖尿病（ICI-DM）的临床特点、治疗及疾病转归。方法　回顾分析2019—2024年解放军总医院第一医学中心住院诊治的10例ICI-DM患者的临床特征、实验室检查、治疗方案和随访结果，通过PubMed、中国知网及维普等国内外数据库检索相关文献。综合文献结果，总结ICI-DM的临床特点。结果　10例患者均为PD-1抑制剂使用者，男、女各5例，年龄54.5（51.3，64.0）岁，体重指数（BMI）为（22.0±2.15） kg/m2。其中，暴发性1型糖尿病（FT1DM）9例（90.0%）；9例（90.0%）损伤的严重程度达到不良事件通用术语标准（CTCAE）3—4级。所有患者接受PD-1抑制剂治疗到发生糖尿病“三多一少”症状的时间为145.5（110.5，204.8） d，用药时间为6.0（4.3，7.8）周期。10例患者在就诊时血糖平均值为25.3（10.0～41.4） mmol/L，糖化血红蛋白(HbA1c)为8.0%（6.6%～10.9%）。绝大多数患者空腹、2 h C肽均<0.1 ng/ml（空腹C肽为0.010～0.098 ng/ml，2 h C肽为0.010～0.191 ng/ml）。10例患者中，9例的糖尿病自身抗体为阴性，1例阳性。10例患者均经胰岛素等救治成功，出院后随访期间，所有均仍依赖胰岛素治疗，胰岛β细胞功能较出院时未见明显恢复。复习文献发现，ICI-DM多见于PD-1抑制剂使用者（75.2%），临床以糖尿病酮症酸中毒（DKA）(65.4%)和糖尿病酮症（13.1%）为主要表现，患者胰岛功能严重受损且需长期胰岛素治疗，部分病例合并甲状腺或垂体功能异常。结论　ICI-DM多表现为暴发性1型糖尿病，常以DKA或糖尿病酮症起病，胰岛功能差且不可逆转，需要依赖胰岛素治疗。为了早期识别，及时救治，需要在免疫检查点抑制剂治疗中密切监测血糖。

关键词： 肝纤维化   培哚普利   NADPH氧化酶4   NLR家族,热蛋白结构域包含蛋白3   氧化性应激   炎症  

摘要： 目的 探讨培哚普利对硫代乙酰胺（TAA）诱导的大鼠肝纤维化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶4(NOX4)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。方法 32只SD大鼠随机分为空白组、模型组（TAA200 mg/kg,2次/周×6周）、TAA+培哚普利低/高剂量组（2/8 mg/kg），每组8只。造模2周后，给药组予相应剂量培哚普利灌胃（4周）；6周末，肝脏病理切片观察肝组织病理变化以及纤维化和炎症程度；生化分析仪检测丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）；酶联免疫吸附试验检测NLRP3、IL-1β；免疫组化检测NOX4、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白和α-平滑肌激动蛋白（α-SMA）。结果 与空白组比较，模型组肝脏胶原纤维明显增生，大量炎症细胞浸润，大鼠血清ALT、AST水平及NLRP3、IL-1β水平明显升高，大鼠肝组织NOX4、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA阳性蛋白平均光密度值明显增加（P<0.05）；与模型组比较，低剂量、高剂量组中胶原纤维增生及炎症细胞浸润均明显减少，大鼠血清ALT,AST水平，NLRP3、IL-1β水平明显降低；大鼠肝组织NOX4、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA阳性蛋白平均光密度值均明显下降（P<0.05），且高剂量组大鼠肝纤维化程度减轻优于低剂量组。结论 培哚普利可能通过抑制NOX4表达进而调控NLRP3信号通路，减轻氧化应激损伤及炎症反应，从而延缓肝脏纤维化进程。

关键词： 度拉糖肽   脂多糖   急性肺损伤   MLE-12细胞   炎症反应  

摘要： 目的 探讨度拉糖肽对脂多糖(LPS)引起的MLE-12细胞损伤的保护作用。方法 脂多糖(1μg/mL)诱导MLE-12细胞构建急性肺损伤体外模型,度拉糖肽处理24 h。细胞分成4组:CON、LPS、LPS+100 nmol/L度拉糖肽、LPS+200 nmol/L度拉糖肽组,提取各组细胞蛋白和RNA,qRT-PCR检测细胞中炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、单核细胞趋化因子1(CCL2)、C-X-C基序趋化因子配体(CXCL) 1、CXCL2水平,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测各组细胞磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)与磷酸化细胞外信号调节酶(P-Erk)的表达水平。结果 与CON组比较,LPS组细胞炎症介质TNF-α、IL-6、IL-1β、CCL2、CXCL1、CXCL2的mRNA水平升高,TUNEL阳性细胞数增加,P-Akt与P-Erk蛋白表达增加。与LPS组相比,LPS+100 nmol/L度拉糖肽组的TNF-α、IL-6、IL-1β、CCL2、CXCL1、CXCL2的mRNA水平下降,TUNEL阳性细胞数减少,P-Akt与P-Erk蛋白表达下降;而LPS+200 nmol/L度拉糖肽组对炎症因子的改善作用没有LPS+100 nmol/L度拉糖肽组明显。结论 度拉糖肽对LPS诱导的MLE-12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制Akt与Erk磷酸化来减少炎性介质的表达,使炎性损伤进一步减轻,从而达到保护肺脏的作用。

关键词： mitochondrial dynamics   mutant p53   MYH14   pancreatic ductal adenocarcinoma cancer metabolism  

摘要： Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is a highly lethal cancer marked by poor prognosis and frequent gain-of-function mutations in the TP53 tumor suppressor gene. Given the crucial role of mutant p53 in the context of metabolic reprogramming and aggressive tumor behavior, we explored its role on mitochondria, which may present a valuable therapeutic target. In this study, we characterized the unique mitochondrial proteome observed in PDAC cells harboring the gain-of-function TP53R273H mutation and discovered a strong mutant p53-dependent upregulation of myosin heavy chain 14 (MYH14), a nonmuscle myosin, implicated in mitochondrial dynamics. We deeply investigated the role of mutant p53 in the regulation of mitochondrial architecture and functionality in PDAC cells. Our morphological and morphometric analyses with transmission electron microscopy and three-dimensional confocal imaging revealed that mutant p53 induced marked mitochondrial fragmentation, whereas wild-type p53 stimulated mitochondrial elongation. Interestingly, the fragmented mitochondrial morphology is associated with higher mitochondrial respiration levels and more efficient mitochondrial cristae. These findings support the role of oncogenic mutant p53 isoforms in inducing mitochondrial fragmentation through a mechanism involving MYH14, resulting in an increased oxidative phosphorylation level that may support PDAC cell growth and aggressiveness.

关键词： 糖尿病心肌病   养心定悸胶囊   黑色素瘤缺乏因子2   消皮素D   焦亡  

摘要： 目的：探讨黑色素瘤缺乏因子2（absent in melanoma 2，AIM2）介导的细胞焦亡对糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy，DCM）金黄地鼠心肌组织炎性损伤的影响及养心定悸胶囊（Yangxin Dingji Capsule，YXDJ）的调控机制。方法：50只SPF级雄性金黄地鼠按照随机数字表法平均分为对照组（10只）、造模组（40只）。造模成功后随机分为模型组、中药高、低剂量组和恩格列净组。中药高、低剂量组分别给予YXDJ 2 g·kg-1·d-1、0.5 g·kg-1·d-1，恩格列净组给予恩格列净0.01 g·kg-1·d-1；对照组和模型组给予等体积生理盐水。干预8周后处死。采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血糖、血清肌钙蛋白（cardiac troponin I，cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase MB，CK-MB）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量；生化法检测血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平；免疫荧光法检测心肌组织活性氧（reactive oxygen species，ROS）荧光强度；小动物超声影像系统进行M型超声测量评价心脏功能；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色、马松（Masson）染色观察金黄地鼠心脏病理形态学变化；透射电镜观察心肌细胞线粒体超微结构变化；免疫组化、蛋白免疫印迹（Western blot）及实时荧光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction，RT-PCR）法检测心肌组织AIM2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（cystein-asparate protease-1，caspase-1）、消皮素D（gasdermin D，GSDMD）、IL-1β、IL-18等分子表达。结果：与对照组比较，模型组金黄地鼠精神萎靡，动作迟缓懒动；血糖、血清cTnI、CK-MB、IL-1β、TNF-α升高（P < 0.01）；血清SOD活性下降、MDA升高（P < 0.01）；心肌组织ROS荧光强度增加（P < 0.01）；心脏质量上升（P < 0.01），EF、FS、CO明显下降（P < 0.01）；心肌组织胶原沉积增加，心室肥厚；心肌细胞线粒体受损严重，线粒体嵴消失；心肌组织AIM2、caspase-1、消皮素D N端片段（gasdermin D-N，GSDMD-N）、IL-18等分子表达上调（P < 0.01）。与模型组比较，各治疗组金黄地鼠一般情况不同程度改善；血清炎症因子、心肌损伤及氧化应激相关指标改善（P < 0.05或P < 0.01）；ROS荧光强度降低（P < 0.05或P < 0.01）；心功能及心肌组织病理损伤改善（P < 0.05或P < 0.01）；线粒体受损减轻；心肌组织AIM2等相关指标表达降低（P < 0.05或P < 0.01）。结论：AIM2介导的细胞焦亡在DCM金黄地鼠心肌组织炎性损伤中扮演重要角色，YXDJ可通过调控ROS-AIM2-GSDMD轴改善DCM金黄地鼠心肌细胞损伤，发挥心肌细胞保护作用。

关键词： 血根碱   LKB1/AMPK/SIRT1通路   ER应激   衰老   软骨细胞  

摘要： 目的 探究血根碱（sanguinarine,SG）在骨关节炎（osteoarthritis,OA）进展中的作用，并阐明其可能涉及的机制。方法 分离原代小鼠膝关节软骨细胞，分为SG、叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide,TBHP）、TBHP+SG、TBHP+SG+毒胡萝卜素（thapsigargin,TG）、TBHP+SG+肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)siRNA组。利用CCK-8、流式细胞术、DCFH-DA探针、β针半乳糖苷酶（β-galactosidase,β-gal）染色分别检测细胞活力、凋亡、活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平和β-gal活性。利用RT-qPCR和Western blotting检测衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotype,SASP）的mRNA水平和LKB1/AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）/去乙酰化酶1(sirtuin 1,SIRT1)通路相关蛋白表达。将小鼠分为Sham、Sham+SG(1.25μM,10μL)、OA、OA+SG(0.8/1.25μM,10μL)组，利用番红O-固绿和末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL）染色评估软骨丢失和凋亡情况。结果 浓度筛选显示SG处理软骨细胞的最适浓度为1.25μM。SG处理可逆转TBHP诱导的细胞活力下降，细胞凋亡、细胞外基质（extracellular matrix,ECM）降解、ROS生成、衰老相关蛋白[如细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin dependent kinase inhibitor 1A,p21)和周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin dependent kinase inhibitor 2A,p16)]表达、SASP[如单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)、C-X-C基序趋化因子配体10(C-X-C motif chemokine ligand 10,Cxcl10)]mRNA表达以及β-gal活性升高。TG处理可逆转上述改变。SG处理有效中和TBHP诱导的内质网（endoplasmic reticulum,ER）应激相关蛋白[如葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD, GRP78)和C/EBP同源蛋白（C/EBP Homologous Protein,CHOP）]表达上调以及LKB1和AMPK磷酸化水平和SIRT1蛋白水平降低。沉默LKB1可抵抗SG对ER应激的抑制作用，表明SG通过调控LKB1/AMPK/SIRT1通路抑制TBHP诱导的ER应激。在体内，SG以剂量依赖方式减轻OA小鼠的软骨细胞凋亡和软骨丢失。结论 血根碱通过激活LKB1/AMPK/SIRT1信号通路抑制ER应激，从而缓解氧化应激诱导的软骨细胞ECM降解、凋亡和衰老，阻碍小鼠OA进展。

关键词： 糖尿病肾病   中医学   中西医结合学   国家自然科学基金   项目申请和资助  

摘要： 系统梳理和归纳近10年（2015～2024年）糖尿病肾病中医药研究领域国家自然科学基金（NSFC）申请和资助项目的主要研究特点。时空分析结果提示，近10年NSFC中医及中西医结合学科糖尿病肾病领域内申请总数为1 878项，获资助数为203项，资助率为10.81%，获批立项数量10项及以上的单位有北京中医药大学、南京中医药大学、中日友好医院、海南医科大学、南方医科大学和上海中医药大学。研究内容分析结果提示现有研究的药物载体以自拟复方为主体；药效机制探索以信号通路为主体，集中于表观遗传学机制的研究；病理表型研究以上皮间充质转化、纤维化和细胞程序性死亡为主，逐步向细胞器层面深入；药效反应以炎症、氧化应激为主，包括肠道代谢、脂代谢在内的代谢组学差异是近年的研究热点。但也存在对中医理论的探讨不足；药效物质基础的建立不够扎实；共病和继发性疾病的研究较少；新技术新方法的研究较少等问题。

关键词： 血糖   空腹血糖   糖基化血红蛋白A   糖尿病前期   葡萄糖代谢障碍   筛查  

摘要： 背景 当前，医院体检中心或社区主要采用空腹血糖和糖化血红蛋白作为评估血糖水平的指标。已有研究探讨了这两种指标单独或联合检测的诊断价值，但这些研究仅关注指标的准确性，而忽略了其实践价值。本研究基于现实情景，构建2型糖尿病和糖尿病前期的筛查策略，以早期发现和管理糖代谢异常人群。目的 利用空腹血糖和糖化血红蛋白指标，形成针对2型糖尿病和糖尿病前期的筛查策略和筛查界值，以提高糖尿病和糖尿病前期人群的检出率。方法 纳入2023年9—11月在上海市某医院体检并接受餐后2 h血糖检测的527名受检者，比较空腹血糖、空腹血糖结合糖化血红蛋白两种筛查流程中不同筛查界值的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数、筛查成本和成本效果。结果 527名受检者中2型糖尿病患者有74名（14.04%），糖尿病前期患者有141名（26.76%），正常血糖有312名（59.2%）。单独使用空腹血糖的筛查策略中，约登指数最大值0.461对应的空腹血糖筛查界值为5.4mmol/L，灵敏度为54.42%，特异度为91.67%，成本效果为233.97元/人；空腹血糖的最佳筛查界值为5.9 mmol/L，灵敏度为33.02%，特异度为99.68%，约登指数为0.327，成本效果为212.55元/人。空腹血糖结合糖化血红蛋白筛查策略中，约登指数最大值0.433对应的糖化血红蛋白筛查界值为6.1%，灵敏度为51.63%，特异度为91.67%，成本效果为480.23元/人；糖代谢异常的糖化血红蛋白最佳筛查界值为5.9%，灵敏度为73.95，特异度为65.71，约登指数为0.370，成本效果为475.62元/人。结论 使用空腹血糖作为单一指标筛查糖代谢状态异常人群时，降低空腹血糖的筛查界值为5.9 mmol/L时具有良好的筛查效果和经济性。糖化血红蛋白可以作为有效的补充筛查工具，补充应用糖化血红蛋白（界值为5.9%）筛查空腹血糖正常人群，能更多地发现实际糖代谢状态异常人群，从而提高他们进行糖耐量试验的依从性，为筛查策略的优化提供更多可能性。

关键词： 医用光学   糖尿病视网膜病变分类   深度学习   注意力机制   眼底图像  

摘要： 糖尿病视网膜病变已成为导致劳动年龄人群视力受损的首要因素。现有基于深度学习的诊断模型虽性能优异，但其性能提升常依赖模型复杂度增加，导致分类效率降低。对此，本文提出了一种分类效果良好，兼具高效分类性能的卷积神经网络CA-and-RepVGG。该模型以RepVGG为核心架构，结合空间注意力机制Coordinate Attention捕获图像位置信息，增强特征提取能力以改善模型对病变程度的鉴别性能。所提出的模型在公开数据集上得到94.8%的准确率、92.5%的精确率、97.4%的灵敏度；在临床数据集上得到94.8%的准确率、90%的精确率、97%的灵敏度。相较于ResNet-50，分类速度提升了12.2%。此外，通过消融实验验证了引入Coordinate Attention对模型特征细节提取的有益对比。实验结果表明，该模型在保持经典模型优异分类性能的基础上，显著提升筛查效率，对实现视网膜病变的早期诊断与干预具有重要临床意义。

关键词： 白藜芦醇   核因子E2相关因子2   铁死亡   肝纤维化  

摘要： 目的：探究白藜芦醇通过介导Nrf2/HO-1/GPX4信号通路抑制铁死亡改善肝纤维化的可能机制。方法：SPF级SD大鼠，随机分为正常对照组、40%CCl4肝纤维化模型对照组、白藜芦醇25、50 、100 mg/kg组和秋水仙碱0.2 mg/kg组。采用40%CCl4橄榄油溶液皮下注射造模12周，第7周开始各组分别灌胃给予相应药物，1次/d，连续6周。微板法检测肝细胞损伤指标丙氨酸氨基转移酶（ALT），天冬氨酸氨基转移酶（AST）活力；HE染色和Masson染色观察肝组织病理；免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I 型胶原蛋白α1 （COL1A1）蛋白阳性表达水平；TBA法与微板法分别检测氧化应激指标丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）；普鲁士蓝染色检测肝组织铁离子沉积情况；Western blot检测溶质载体家族7成员11（SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、核因子-E2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶1（HO-1）蛋白表达；免疫荧光共定位检测Nrf2核易位水平。结果：与正常对照组相比，模型对照组血清中ALT、AST活力显著升高（P<0.01），肝脏炎性细胞浸润及胶原沉积显著升高，α-SMA、COL1A1蛋白表达显著升高（P<0.01），肝组织匀浆中MDA含量显著升高（P<0.01），GSH含量显著降低（P<0.01），铁离子沉积情况明显增多（P<0.01），Nrf2、HO-1、GPX4和SLC7A11蛋白表达显著下调（P<0.01），Nrf2蛋白多表达于细胞核外；和模型对照组相比，0.2 mg/kg秋水仙碱组、白藜芦醇各组ALT、AST活力明显降低（P<0.05或P<0.01），肝组织炎性细胞浸润及胶原沉积情况下降，α-SMA、COL1A1蛋白表达降低（P<0.01），MDA含量降低（P<0.01或P<0.05），GSH含量升高（P<0.01），铁离子沉积情况下降（P<0.01或P<0.05），Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7ALL蛋白表达增加（P<0.01或P<0.05），且白藜芦醇100 mg/kg组Nrf2蛋白多表达于细胞核内。结论：白藜芦醇通过促进Nrf2入核，介导Nrf2/HO-1/GPX4信号通路抑制铁死亡改善肝纤维化。