关键词： Fms样酪氨酸激酶   增殖活性   Fms样酪氨酸激酶3抑制剂   分子对接   细胞凋亡   细胞周期  

摘要： 本研究设计并合成了一系列含咪唑-4-甲酰胺基和1，2，4-三氮唑的4-苯氧基吡啶类衍生物， 作为新型的Fms样酪氨酸激酶3 （Fms-like tyrosine kinase 3， FLT3） 抑制剂。结果表明， 该系列化合物具有良好的抗增殖活性， 其中， 优选化合物10c在含Fms样酪氨酸激酶3-内部串联重复 （Fms-like tyrosine kinase 3-internal tandem duplication， FLT3-ITD） 突变的两个细胞系即人髓性单核细胞白血病细胞 （MV4-11） 和人急性髓性白血病细胞 （Molm-13） 的抑制生长50%所需的浓度 (half maximal inhibitory concentration， IC50) 值分别为1.90和5.78 μmol·L-1。细胞凋亡和周期结果表明， 化合物10c能够促进细胞凋亡并将细胞阻止在S期。分子对接结果表明， 化合物10c与FLT3的PHE691和HIS809形成两个π-π堆积作用， 吡啶母核和Linker部分分别与FLT3的LYS644和CYS694形成重要的氢键作用。综上， 化合物10c在体外体现出较好的抗增殖活性， 具有进一步深入研究的价值， 同时也为开发出更多结构新颖的新型FLT3抑制剂奠定基础。

关键词： 克罗恩病   间充质干细胞   瘘管愈合率   Meta分析  

摘要： 目的 系统评价间充质干细胞对克罗恩病合并瘘管的疗效。方法 搜索CNKI、Wanfang、PubMed、Web of Science等数据库,收集自建库至2024年8月29日的相关临床试验,由2位研究者独立评估筛选纳入文献,再采用RevMan 5.4.1及R 4.2.2软件进行meta分析。结果 共纳入14篇文献,皆为随机对照试验,共891例患者。间充质干细胞所致的瘘管愈合率在短期（P=0.02）、中期（P=0.02）和长期（P=0.04）随访中均高于对照组,二者在远期（P=0.22）疗效中差异无统计学意义。以联合缓解（Z=2.33;P=0.02）或临床缓解（Z=2.19;P=0.03）作为瘘管愈合的评价标准,试验组的愈合率均高于对照组,且亚组间无异质性（I2=0%,P=0.91）。采用脂肪或骨髓来源、自体或异体来源、中等及大剂量的间充质干细胞相较对照组均获得更高的瘘管愈合率。根据瘘管大小注射间充质干细胞的瘘管愈合率高于对照组,单次注射固定剂量瘘管愈合率与对照组比较差异无统计学意义。结论 间充质干细胞治疗克罗恩病合并瘘管作为一种有效的新手段,较传统疗法可获得更高的临床缓解率及联合缓解率,未来需要开展更多的随机对照试验进一步研究。

关键词： 川芎多糖   免疫调节   肠道菌群   环磷酰胺  

摘要： 探讨川芎多糖对小鼠免疫调节及肠道菌群的影响。通过实验制备川芎多糖，并分析其化学组成。选用雄性昆明小鼠，以腹腔注射环磷酰胺诱导免疫抑制模型，给予川芎多糖干预12 d后，测定血清溶血素等免疫功能相关指标，并采用16S rRNA基因高通量测序技术测定肠道菌群的物种组成、丰度及多样性。同时结合生物信息学分析方法，深入探究肠道菌群群落结构的代谢通路、相关性分析等。川芎多糖分子量处于45.0～220.0 kDa区间，可能具有免疫活性。进一步实验表明，与免疫抑制模型组小鼠相比，川芎多糖给药组小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能增强、血清溶血素含量升高、脾脏指数和胸腺指数均显著改善，呈现出有利于免疫平衡的调节趋势。此外川芎多糖干预组小鼠肠道菌群结构发生显著改变，Lachnospiraceae和Akkermansia等有益菌的相对丰度显著恢复，从多样性指数来看，肠道菌群的丰富度得到有效提升，相关性热图结果提示，这些肠道菌群的变化与小鼠免疫功能改善密切相关。综上所述，川芎多糖免疫调节作用可能与调节肠道菌群结构，进而改善肠道微生态环境有关。

关键词： 臭壳虫   肺腺癌   MAPK信号通路   凋亡   自噬  

摘要： 基于网络药理学分析和体外实验验证，探讨臭壳虫治疗肺腺癌（lung adenocarcinoma， LUAD）的作用机制。通过收集臭壳虫入血成分的药物靶点与LUAD 疾病靶点，进行交集靶点基因本体（gene ontology， GO）和京都基因与基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes， KEGG）富集分析，预测臭壳虫治疗 LUAD 的功能过程和主要活性物质，对入血成分中核心活性化合物和关键靶点进行分子对接；并通过 CCK-8 实验、平板克隆实验、吖啶橙染色、流式细胞术和免疫印迹法等实验，验证臭壳虫治疗 LUAD 的机制。臭壳虫 39 个入血成分共有 766 个靶点，和 2 820 个 LUAD 疾病靶点取交集后得到 334 个潜在治疗靶点，综合 GO 和 KEGG 富集分析表明，丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路与 LUAD 密切相关，入血成分的主要活性物质包括山柰酚、甘草查尔酮B、(3，6，9-trimethylidene-2-oxo-3a，4，5，6a，7，8，9a，9b-octahydroazuleno[4，5-b]furan-8-yl) acetate、杨梅素和柚皮苷查尔酮；体外实验表明，臭壳虫以浓度依赖性方式降低 LUAD 细胞活力，并通过下调增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）表达水平，上调 Bcl-2相关X蛋白（BCL-2-associated X protein，BAX）/ B细胞淋巴瘤因子2（b-cell lymphoma-2，Bcl-2）、胱天蛋白酶3（cysteine-aspartate specific protease 3，Caspase-3）、苄氯素1（Beclin1）、微管相关蛋白轻链3 Ⅱ (microtubule-associated protein light chain 3 Ⅱ， LC3Ⅱ) 表达水平，诱导凋亡和自噬来抑制 LUAD 细胞的增殖，自噬抑制剂氯喹（chloroquine，CQ）增强了臭壳虫的促凋亡作用。此外，c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase， JNK）抑制剂（SP600125）抑制 JNK 通路的激活以及臭壳虫诱导的细胞凋亡和自噬。结论：综上所述，臭壳虫通过激活 MAPK/JNK 通路诱导 LUAD 细胞凋亡和自噬，在 LUAD 中发挥有效的抗癌作用。

关键词： 华支睾吸虫   肝纤维化   NLRP3炎症小体   小鼠  

摘要： 以华支睾吸虫人工感染小鼠为研究对象，探讨华支睾吸虫感染过程中NLRP3炎症小体是否激活及其对肝损伤和肝纤维化的影响。实验将6～8周龄BALB/C小鼠随机分为对照组和感染组，6周后安乐死，采集两组小鼠的血清及肝脏组织样品，检测肝功能、纤维化及通路相关指标。结果显示，与对照组相比，感染组肝组织HE染色结果显示，肝小叶结构遭到破坏，且有大量炎性细胞浸润；与对照组相比，感染组血清中AST（P<0.001）和ALT的活力极显著增加（P<0.01），SOD活性极显著下降（P<0.01），肝组织中MDA含量显著增加（P<0.05）且GSH活性显著下降（P<0.05）。与对照组相比，感染组Masson染色切片中有胶原纤维沉积，免疫组化实验检测到肝星状细胞（HSCs）被极显著激活（P<0.0001）；RT-qPCR检测显示，与对照组相比，感染组肝组织中α-SMA、Col3α1的mRNA表达水平显著升高（P<0.05），Col1α1的mRNA表达水平极显著升高（P<0.01）；Western-blot检测显示，感染组肝组织中Col3α1的蛋白表达水平显著升高（P<0.05），α-SMA和Col1α1的蛋白表达水平极显著升高（P<0.01）。与对照组相比，感染组IL-1β的mRNA表达水平显著升高（P<0.05），NLRP3、Caspase-1、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平极显著升高（P<0.01）与对照组相比，感染组小鼠肝组织中IL-18和ERK的蛋白表达水平显著升高（P<0.05），NLRP3、Caspase-1、IL-1β、p38（P<0.01）和p65（P<0.001）的蛋白表达水平极显著升高。此外，与对照组相比，感染组小鼠肝组织中NLRP3/ASC和NLRP3/Caspase-1的荧光聚集强度极显著增加（P<0.001）。综上，华支睾吸虫感染可使小鼠肝组织中NLRP3炎症小体激活，导致多种炎性细胞因子的产生并诱导小鼠出现肝损伤与肝纤维化。

关键词： 益气养阴活血方   糖尿病肾病   AMPK-SIRT3-BNIP3   机制研究  

摘要： 目的：基于AMPK-SIRT3-BNIP3信号通路探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病（DKD）大鼠肾脏保护机制。方法：本研究采用 SPF 级雄性 SD 大鼠 42 只 [（体质量 200±20）g]，经 1 周环境适应后，将其分为空白组（n=6）和疾病模型组（n=36），2组喂养分别采用普通饲料和高脂高糖饲料。单次腹腔注射链脲佐菌素（35 mg/kg）建立DKD模型。将造模成功的大鼠分为缬沙坦（代文）组（n＝8）、益气养阴活血方等剂量组（n＝8）、益气养阴活血方高剂量组（n＝8）以及模型组（n＝8）。各治疗组大鼠按照相应药物剂量灌胃，空白组与模型组均予等体积的蒸馏水，持续治疗7周。生化检测大鼠24 h尿蛋白定量（24hUTP）及血清生化指标：肾功能指标（SCr、BUN）、肝功能指标（ALB、ALT）、糖脂代谢指标（GLU、TC、TG）；H&E染色观察肾脏病理；Western blot检测肾组织AMPK、SIRT3、BNIP3蛋白表达；RT-PCR检测肾组织AMPK、SIRT3、BNIP3 mRNA表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠ALT、Scr、BUN、TC、TG、GLU、24hUTP、BNIP3蛋白相对表达量显著上调（P<0.05），ALB、SIRT3、AMPK蛋白相对表达量明显降低（P<0.05），肾脏病理损伤严重。与模型组比较，治疗各组大鼠ALT、Scr、BUN、TC、TG、GLU、24hUTP及肾组织BNIP3蛋白表达下降明显（P<0.05），ALB及肾组织AMPK、SIRT3蛋白表达上升（P<0.05），肾脏病理损伤明显减轻。各治疗组比较无显著统计学差异。结论：益气养阴活血方可有效降低DKD大鼠24hUTP、保护肾功能、改善肾脏病理，从而延缓DKD的发生发展，其机制可能与调控肾组织AMPK-SIRT3-BNIP3通路有关。

关键词： 桥本氏甲状腺炎   头颈前屈位固定   炎症反应   NF-κB p65/IκBα   甲状腺功能   超微结构  

摘要： 目的 探讨头颈前屈位固定对桥本氏甲状腺炎(HT)大鼠甲状腺功能及超微结构的影响及作用机制。方法 随机将雌性SD大鼠分成空白组、HT组、固定组和HT固定组,每组8只。HT组和HT固定组制备桥本氏甲状腺炎大鼠模型。固定组和HT固定组使用改良大鼠头颈前屈位固定器固定,6h/d,连续固定6周。ELISA法检测血清甲功及炎性因子含量;HE染色观察甲状腺、胸乳突肌组织形态;电镜观察甲状腺细胞超微结构;免疫组化检测甲状腺核因子-κB(NF-κB)阳性表达率;Western blot检测通路蛋白相对表达量。结果 与HT组相比,HT固定组FT3、FT4、TPOAb、TgAb、TNF-α水平升高(P<0.05),IL-10下降(P<0.01),甲状腺淋巴细胞浸润、滤泡上皮细胞破坏、线粒体及内质网破坏增多,NF-κB阳性率升高(P<0.01),p-NF-κB p65/NF-κB p65相对表达量升高(P<0.01),IκBα相对表达量下降(P<0.01)。结论 头颈前屈位固定使HT大鼠甲状腺功能异常和炎症加重,其机制可能与甲状腺中NF-κB p65/IκBα通路的激活相关。

关键词： 湖泊和水库   厌氧产甲烷   温室气体   碳循环   富营养化  

摘要： 内陆水体是大气中温室气体甲烷的一个重要自然来源。沉积物在厌氧条件下的产甲烷潜势是决定水体甲烷排放规模的一个关键指标。然而，截止目前尚缺乏针对内陆水体沉积物产甲烷潜势的跨系统比较研究，对其驱动因子的认识尚不清晰。本研究收集了我国内陆水体包括水库、湖泊、河流和湿地的沉积物产甲烷潜势数据，结合部分未发表自有数据(共210条数据)，探索了几种不同水体沉积物产甲烷潜势的时空分布，并识别了水环境因子对沉积物产甲烷潜势的驱动因子。研究发现，沉积物产甲烷潜势季节性明显，呈现雨季显著大于旱季态势(约3.5倍，P<0.01)；拦河筑坝会导致沉积物的产甲烷潜势增加十倍以上，水库、湖泊沉积物产甲烷潜势显著(P<0.01)大于河流或湿地。相关分析表明，人类活动引起的水体富营养化对沉积物产甲烷潜势驱动作用显著(P<0.05)，水温、水深、沉积物有机质含量均对沉积物产甲烷潜势有显著(P<0.01)正向刺激作用，而水体盐度对沉积物产甲烷存在显著(P<0.01)抑制作用。本研究表明，在全球气候变化这一背景下，预测未来内陆水体的碳排放，除去全球升温这一自然过程，一些强人类活动干扰诸如拦河筑坝、水体富营养化等过程也必须给予充分考虑。

关键词： 糖尿病膀胱病   线粒体   逼尿肌细胞   尿路上皮细胞   外周神经细胞   工程化组织构建  

摘要： 背景：线粒体功能障碍是糖尿病膀胱病发生发展的关键机制。近年研究发现，靶向线粒体代谢、氧化应激及凋亡通路的药物可抑制膀胱组织变性，为糖尿病膀胱病治疗提供了新方向。目的：探讨线粒体异常与糖尿病膀胱病的关联，总结药物干预线粒体功能的作用机制。方法：以“线粒体，糖尿病，糖尿病膀胱病，逼尿肌，尿路上皮，周围神经”为中文检索词，“mitochondria, diabetes,diabetic cystopathy,diabeticbladderdysfunction,detrusor,urothelium,neuron,peripheralnerves”为英文检索词，检索中国知网、万方、PubMed、Web of Science数据库，筛选并分析相关文献。结果与结论：在糖尿病膀胱病发展过程中，逼尿肌、尿路上皮和外周神经细胞中的线粒体可表现为表征、活性、功能和行为的改变。在糖尿病情况下，线粒体受损，产生更多的活性氧，细胞色素C释放，Bcl-2/Bax比值降低，凋亡诱导因子向细胞核易位增加，聚ADP核糖聚合酶/c-Jun氨基末端激酶/线粒体凋亡通路激活；线粒体还可作为损伤相关分子模式调控NLRP3，激活炎症反应；线粒体能量代谢过程紊乱，AMP活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α信号轴介导线粒体生物学的表型变化，呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ含量降低，氧化磷酸化受到干扰，三羧酸循坏被抑制，线粒体备用呼吸能力下降。新型药物或制剂能够通过改善氧化应激、抗炎、调节能量传感通路改变线粒体功能，治疗糖尿病膀胱病。尽管线粒体在其他糖尿病并发症中的作用已被广泛研究，但其在糖尿病膀胱病中的相关研究仍显不足，需进一步探索。

关键词： 无创脑刺激   脑瘫   下肢运动功能   步态   经颅磁刺激   经颅直流电刺激   运动功能康复   工程化组织构建  

摘要： 目的：研究表明，重复经颅磁刺激和经颅直流电刺激对改善脑瘫患儿粗大运动功能具有积极作用。采用网状Meta分析方法评价重复经颅磁刺激和经颅直流电刺激对脑瘫患儿下肢运动功能及步态改善的临床疗效。方法：检索中国知网、万方、维普、SinoMed、PubMed、Web of Science、Medline数据库，搜索关于重复经颅磁刺激与经颅直流电刺激改善脑瘫患儿下肢运动功能及步态的随机对照试验，检索时限均为数据库建库至2024-10-05。筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险，采用Stata 15.0软件进行网状Meta分析，使用GRADE证据分级系统进行质量评价。结果：最终纳入19篇研究，涉及常规治疗、高频重复经颅磁刺激、低频重复经颅磁刺激、阳极经颅直流电刺激4种治疗方案。网状Meta分析结果显示，与常规治疗相比，低频重复经颅磁刺激改善脑瘫患儿粗大运动功能方面的疗效最佳[MD=9.48,95%CI(6.61,12.34),P <0.05]，在缓解痉挛方面，高频重复经颅磁刺激的疗效最佳[MD=-0.63,95%CI(-1.72,0.45),P <0.05]，经颅直流电刺激改善脑瘫患儿踝关节活动度和步速方面的疗效最佳[MD=2.27,95%CI(1.37,3.17),P <0.05;MD=0.11,95%CI(0.05,0.17),P <0.05]。结论：现有临床证据表明，对于脑瘫患儿，在改善下肢粗大运动功能方面，低频重复经颅磁刺激展现出最佳疗效；对于降低肌痉挛程度，高频重复经颅磁刺激的效果更为显著；在步态改善方面，经颅直流电刺激则表现出明显优势。