关键词： 大黄素   脓毒症   脓毒症心肌损伤   心功能   自噬   炎症反应   保护作用   工程化组织构建  

摘要： 背景:大黄素具有抗炎、抗病毒及抗氧化应激等多种药理活性,对脓毒症心肌损伤有一定的保护作用,但作用机制尚不清楚。目的:探讨大黄素是否可通过促进自噬来改善脓毒症小鼠心肌损伤。方法:将32只雄性昆明小鼠分为假手术组4只、假手术+大黄素组4只、模型组8只、模型+大黄素组8只、大黄素+3-甲基腺嘌呤组8只。采用盲肠结扎穿孔术构建脓毒症小鼠心肌损伤模型,在造模前1 h腹腔注射3-甲基腺嘌呤(10 mg/kg),在造模前30 min腹腔注射大黄素(20 mg/kg),其余各组在相同的时间点注射等量生理盐水。所有小鼠在术后24 h留取血液及心肌样本。ELISA检测血清中心肌损伤标志物脑钠肽、心肌肌钙蛋白I水平,Western blot检测心肌组织中LC3B、Beclin-1及p62的蛋白表达,苏木精-伊红染色观察心肌组织的病理变化,超声评估小鼠心脏功能。结果与结论:①与假手术组相比,假手术+大黄素组血清脑钠肽、心肌肌钙蛋白I水平和心肌自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62蛋白表达均无统计学差异(P>0.05);②与假手术+大黄素组相比,模型组血清脑钠肽、心肌肌钙蛋白I水平均显著升高(P<0.05);与模型组相比,模型+大黄素组血清脑钠肽、心肌肌钙蛋白I水平均降低(P<0.05);③与模型组相比,模型+大黄素组心肌组织中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达升高且p62蛋白表达降低(P<0.05);与模型+大黄素组相比,大黄素+3-甲基腺嘌呤组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1蛋白表达降低且p62蛋白表达升高(P<0.05);④假手术组心肌纤维正常,模型组心肌纤维紊乱伴大量炎症细胞浸润,模型+大黄素组心肌纤维稍紊乱,可见部分空泡状改变,大黄素+3-甲基腺嘌呤组心肌纤维排列紊乱,可见较多的炎症细胞浸润;⑤与假手术组相比,模型组左室短轴缩短率、左室射血分数均降低(P<0.05);与模型组相比,模型+大黄素组左室短轴缩短率、左室射血分数均升高(P<0.05);与模型+大黄素组相比,大黄素+3-甲基腺嘌呤组左室射血分数降低(P<0.05),左室短轴缩短率降低但无统计学意义(P>0.05);⑥以上结果表明,大黄素预处理可通过促进自噬改善脓毒症小鼠的心肌损伤和心肌功能障碍。

关键词： THZ1   脑胶质瘤   肿瘤干细胞   成球实验   干性标志物   Wnt/β-catenin信号通路   上皮-间充质转化   增殖   迁移  

摘要： 背景:THZ1是一种细胞周期蛋白依赖性激酶7的抑制剂,可以抑制多种肿瘤细胞的增殖,但THZ1是否可以通过Wnt/β-catenin信号通路影响脑胶质瘤干细胞的干性尚不清楚。目的:探究THZ1对脑胶质瘤细胞U87干性的影响及机制。方法:培养脑胶质瘤细胞U87形成干细胞球并通过Western blot验证干性相关蛋白的表达;采用CCK-8法检测THZ1作用于U87细胞的半数抑制浓度(IC_(50));通过克隆实验、划痕实验、Transwell迁移实验确定THZ1对U87细胞增殖、迁移的影响;分析THZ1处理对U87干细胞成球率及干细胞球体大小的影响;Western blot检测干性相关蛋白CD133、ABCG2、Nanog、OCT4、SOX2和上皮-间充质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Occludin、Snail以及Wnt/β-catenin通路相关蛋白Axin1、β-Catenin、Wnt-5a、GSK3β、Cyclind-1、C-myc的表达变化。结果与结论:①与贴壁细胞相比,U87干细胞干性相关蛋白Nestin、CD133、ABCG2、Nanog、OCT4、SOX2表达明显升高;②与对照组相比,THZ1减弱了U87细胞的增殖和迁移能力;③THZ1抑制U87干细胞成球率及球体大小,下调干性相关蛋白的表达;④THZ1处理后,U87干细胞中N-cadherin、Snail蛋白表达降低,而E-cadherin、Occludin蛋白表达升高;(5)THZ1处理使U87干细胞中Wnt/β-catenin通路相关蛋白Axin1、β-Catenin、Wnt-5a、GSK3β、Cyclind-1、C-myc表达降低。结果表明:THZ1通过下调Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达,抑制脑胶质瘤细胞U87的增殖、迁移,抑制U87干细胞成球能力、干性相关蛋白表达和上皮-间充质转化能力。

关键词： 5-FU   Chemoresistance   Curcumin   DNA repair   KMT5B   Mutant p53   Nasopharyngeal carcinoma  

摘要： Nasopharyngeal carcinoma (NPC), a malignancy arising from the nasopharyngeal epithelium, is common in the east and southeast area of Asia. Treatments for locally advanced and recurrent NPC include chemotherapy (usually combined with 5-Fluorouracil, 5-FU) and radiotherapy, but response is limited due to chemo-resistance. p53 mutation is a critical factor for 5-FU resistance in some cancers, but its role in NPC chemo-resistance remains unclear. Here, we demonstrate that p53(R280T), a common p53 somatic mutation found in multiple NPC tumor samples, induces gain-of-function upregulation of DNA repair genes which leads to 5-FU resistance in NPC. p53(R280T) specifically upregulates the expression of DNA repair-associated gene KMT5B by binding to its promoter, which leads to 5-FU resistance. Depletion of KMT5B in NPCs restores 5-FU induced DNA damages and improve the efficacy of 5-FU. By screening compounds affecting KMT5B expression, we identify curcumin as an effective down-regulator of KMT5B in NPC cells. We therefore evaluate the therapeutic potential of a 5-FU/curcumin combination to treat NPC and discover that curcumin enhances the efficacy of 5-FU to suppress NPC tumor growth. In summary, our findings indicate that mutant p53 and its regulated DNA repair genes serve as potential therapeutic targets to reverse 5-FU resistance for NPC patients. © 2025 Elsevier B.V.

关键词： 重症急性胰腺炎   甲磺酸加贝酯   亚胺培南西司他丁钠   疗效   肠黏膜功能   炎症反应  

摘要： 目的:探讨甲磺酸加贝酯联合亚胺培南西司他丁钠治疗重症急性胰腺炎(SAP)的疗效,并分析其对肠黏膜功能、胰腺功能、炎症反应的影响。方法:选取2021年9月至2023年9月开封一五五医院收治的86例SAP患者开展回顾性分析,依据治疗方案分为对照组(n=43)、观察组(n=43)。对照组予以亚胺培南西司他丁钠治疗,观察组予以甲磺酸加贝酯联合亚胺培南西司他丁钠治疗,连续治疗14d。比较两组临床疗效、临床症状体征改善情况及治疗前后肠黏膜功能[D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)]、胰腺功能[葡萄糖(GLU)、淀粉酶(AMY)、胰蛋白酶原-2(TPS-2)]、胃肠动力[胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、血管活性肠肽(VIP)]、炎症因子[白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-35(IL-35)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、病情相关指标[血栓素B2(TXB2)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、血管性血友病因子(vWF)]水平。比较两组不良反应。结果:观察组总有效率高于对照组(88.37%vs 69.77%,P<0.05);观察组腹膜刺激征消失时间、腹胀腹痛消失时间、肠鸣音恢复时间、血清淀粉酶恢复时间、胃肠减压时间均短于对照组(P<0.05);与对照组比较,观察组治疗后D-乳酸、DAO、GLU、AMY、TPS-2水平降低(P<0.05);与对照组比较,观察组治疗后血清MTL、VIP水平升高,GAS水平降低(P<0.05);与对照组比较,观察组治疗后血清IL-8、TNF-α水平降低,IL-35水平升高(P<0.05);与对照组比较,观察组治疗后血清TXB2、sTREM-1、vWF水平降低(P<0.05);两组不良反应比较无明显差异(P>0.05)。结论:甲磺酸加贝酯联合亚胺培南西司他丁钠治疗SAP的疗效确切,可加快病情康复进程,改善肠黏膜功能、胰腺功能,促进胃肠动力恢复,抑制炎症反应,控制病情进展,且具有一定安全性。

关键词： 吞咽障碍   神经肌肉电刺激   经颅磁刺激   经颅直流电刺激   肌电生物反馈   外周磁刺激   物理治疗   脑卒中   功能恢复   网状Meta分析  

摘要： 目的:采用网状Meta分析评价不同电磁刺激方案治疗脑卒中后吞咽障碍的疗效,探讨最佳电磁刺激方案。方法:全面检索中国知网、维普、万方、中国生物医学文献数据库、PubMed、Web of Science、Embase和The Cochrane Library文献数据库。英文检索词为“Electric Stimulation”“Magnetic Stimulation”“Stroke”“Deglutition Disorders”等,中文检索词为“磁刺激”“电刺激”“脑卒中”和“吞咽障碍”等。收集有关不同电磁刺激方案治疗脑卒中后吞咽障碍的临床随机对照试验,对照组采用常规吞咽训练,实验组在对照组的基础上进行电磁刺激。检索时限为各数据库建库至2024-05-11。运用EndNote X9软件进行文献管理,采用Cochrane风险偏倚评估工具和修订版Jadad量表对纳入文献进行风险偏倚和文献质量评价。使用RevMan 5.4软件Stata 17.0软件的network命令对功能性经口摄食量表评分、渗漏-误吸分级评分和吞咽肌群肌电活动评分指标进行直接Meta分析及网状Meta分析。根据GRADE证据等级及推荐强度分级标准对结局指标进行证据强度等级评价。结果:共纳入59篇文献,其中高质量文献50篇,低质量文献9篇,包括3 801例患者,涉及15种电磁刺激方案。(1)在经口摄食能力评定上,累积排序概率图下面积(SUCRA)排序结果前5位电磁刺激方案为重复经颅磁刺激+重复外周磁刺激+神经肌肉电刺激(99.4%)>重复外周磁刺激+神经肌肉电刺激(80.8%)>重复经颅磁刺激+神经肌肉电刺激(74.2%)>重复经颅磁刺激+肌电生物反馈电刺激(68.4%)>经颅直流电刺激+神经肌肉电刺激(63.2%);(2)在防误吸能力评定上,累积排序概率图下面积(SUCRA)排序结果前5位电磁刺激方案为重复经颅磁刺激+重复外周磁刺激+神经肌肉电刺激(99.25%)>重复经颅磁刺激+肌电生物反馈电刺激(87.5%)>重复经颅磁刺激+神经肌肉电刺激(80.6%)>重复外周磁刺激+神经肌肉电刺激(66.7%)>经颅直流电刺激+神经肌肉电刺激(57.8%);(3)在吞咽肌群表面肌电活动水平评定上,累积排序概率图下面积(SUCRA)排序结果前5位电磁刺激方案为重复经颅磁刺激+神经肌肉电刺激(87.1%)>重复经颅磁刺激+经颅直流电刺激(86.3%)>经颅直流电刺激+神经肌肉电刺激(83.9%)>肌电生物反馈电刺激+神经肌肉电刺激(77.8%)>经颅直流电刺激+肌电生物反馈电刺激(74.4%)。结论:电磁刺激对脑卒中后吞咽障碍患者吞咽功能的改善具有显著疗效,中枢与外周的联合磁刺激在改善脑卒中患者经口摄食能力和防误吸能力效果最佳(中级别证据),其次为中枢磁刺激联合外周电刺激(中级别证据)。

关键词： 间充质干细胞   肝纤维化   肝星状细胞   信号通路   联合用药   基因修饰   归巢   微RNA  

摘要： 背景:目前大量研究表明,间充质干细胞联合不同治疗策略能更有效地改善肝纤维化,抑制其向终末期肝病发展。目的:探讨间充质干细胞联合不同策略改善肝纤维化疗效优于单独间充质干细胞治疗的相关机制。方法:由第一作者应用计算机在中国知网、万方、维普、PubMed、Web of Science和Nature数据库中检索涉及间充质干细胞联合不同策略改善肝纤维化的研究,中文检索词为“间充质干细胞,肝纤维化,联合治疗,肝星状细胞”,英文检索词为“mesenchymal stem/stromal cells,liver/hepatic fibrosis/cirrhosis,combination therapy,hepatic stellate cells/HSCs”,通过快速浏览文章题目及摘要进行筛选,排除与主题关系不密切的文章,最终筛选出104篇文献进行综述分析。结果与结论:间充质干细胞通过分化为肝样细胞、抑制肝星状细胞活化、免疫调节等机制来改善肝纤维化,但间充质干细胞移植后肝脏定植率低、存活率低、作用时间短等原因限制了其临床应用。间充质干细胞联合药物、基因修饰、细胞因子等多种治疗策略改善肝纤维化的疗效优于间充质干细胞单独治疗,并且间充质干细胞联合不同策略通过促进间充质干细胞归巢、抑制肝星状细胞活化、调节微环境、调控信号通路等机制更有效地改善肝纤维化。间充质干细胞还可以通过预处理、miRNA调控及与其他细胞联合,使间充质干细胞在减轻肝纤维化方面表现出更好的肝源性分化、归巢和存活功能。间充质干细胞联合不同策略并不能规避间充质干细胞单独治疗肝纤维化的潜在风险,而且这些策略(药物、基因修饰和细胞因子等)自身安全性也值得考虑。此外,间充质干细胞移植数量和途径等有待进一步研究。

关键词： 脑卒中   心肺功能   运动干预   Meta分析   随机对照试验   系统评价   最佳运动方案   功能恢复   运动生理   工程化组织构建  

摘要： 目的:临床上脑卒中患者在康复期间会经历显著的心肺功能障碍,这增加了复发性脑卒中的概率,而通过运动干预则可以有效改善脑卒中患者的心肺功能。此文通过Meta分析方法对国内外关于运动干预改善脑卒中患者心肺功能的研究进行综合定量评价,检验不同运动方式对脑卒中患者心肺功能的影响,探索最佳运动方案。方法:检索中国知网、万方、维普、Web of Science、Cochrane图书馆、PubMed、EBSCO数据库建库至2024-05-15发表的相关文章,主要纳入运动干预改善脑卒中患者心肺功能的随机对照试验,采用Review Manager 5.4和Stata 17软件进行统计分析。结果:(1)共纳入符合标准的文献32篇,包括脑卒中患者1 826例;(2)结果显示,运动干预能够显著改善脑卒中患者的摄氧能力[MD=2.10,95%CI(1.57,2.63),P <0.000 01],采用高强度间歇训练的干预方式,每周干预五六次,每次干预41-60 min,持续干预12周以上是改善脑卒中患者摄氧能力的最佳运动方案;(3)运动干预可以明显提高脑卒中患者有氧运动耐力[MD=38.00,95%CI(29.55,46.45),P <0.000 01],采用高强度间歇训练的干预方式,每周干预两三次,每次干预41-60 min,持续干预12周以上是改善脑卒中患者有氧运动耐力的最佳运动方案。结论:运动干预可以显著改善脑卒中患者心肺功能,高强度间歇训练是最具潜力的运动干预方式。所以采用高强度间歇训练,每次干预41-60 min,初始干预频率每周2次,根据耐受情况逐渐增加干预频率,并持续干预12周以上是改善脑卒中患者心肺功能的最佳运动方案;未来应收集更多高质量、多项目的临床研究和证据来验证上述结论,尤其是探索高强度间歇训练改善脑卒中患者心肺功能的最佳运动——间歇比值。

关键词： 大麻二酚   肝星状细胞   肝纤维化   信号转导通路   转化生长因子β1/Smad   HSC-T6细胞  

摘要： 背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。

关键词： 胡椒碱   四氯化碳   NLRP3炎症小体   氧化应激   炎症反应  

摘要： 研究了胡椒碱(piperine,PIP)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导小鼠急性肝损伤的保护作用.将40只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组(normal control,NC)、模型组(CCl_(4))、阳性对照水飞蓟素组(silymarin,SIY)、胡椒碱低剂量组(CCl_(4)+PIP 10 mg/kg)和胡椒碱高剂量组(CCl_(4)+PIP 20 mg/kg)组.观察了小鼠肝脏病理学变化,检测肝脏指数及肝功能指标,同时检测了肝内SOD、GSH-Px、MDA、TNF-α、IL-1β和IL-6的活性或含量.通过实时荧光定量PCR、免疫印迹和免疫组化法检测肝内NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的基因转录水平和蛋白表达的变化情况.结果显示:PIP可以有效改善肝功能的各项指标及肝组织病理变化,并减轻小鼠肝脏的氧化应激状态.进一步研究显示,PIP可以降低小鼠肝脏内NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β编码因子的转录水平和下调这些炎症蛋白的表达.从以上结果可知,PIP可以通过缓解氧化应激、抑制炎症反应来改善CCl_(4)诱导的急性肝损伤.

关键词： 帕金森病   非侵入性脑刺激   经颅直流电刺激   重复经颅磁刺激   高频重复经颅磁刺激   高低频交互重复经颅磁刺激   认知障碍   网状Meta分析  

摘要： 目的:认知功能受损是帕金森病最常见的非运动症状之一。非侵入性脑刺激作为常见的非药物治疗手段改善帕金森病认知功能的效果已经得到证实,但临床对非侵入性脑刺激最佳刺激方式的选择尚不明确。文章通过网状Meta分析的方法,评估非侵入性脑刺激的不同刺激方式对帕金森患病者认知功能的影响,为临床最佳刺激方式的选择提供循证依据。方法:计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、Cochrane Library、中国知网、CBM和万方数据库中关于非侵入性脑刺激对帕金森病患者认知功能干预效果的随机对照试验,检索时限为各数据库建库至2024年8月。对照组采用常规治疗(康复训练、常规药物治疗等)或假刺激,试验组在对照组的基础上加用非侵入性脑刺激。采用Cochrane随机对照试验偏倚风险评价工具RoB 2对纳入的研究进行质量评价。由2名研究者独立进行文献筛选和资料提取,并评价纳入研究的偏倚风险。分别采用RevMan 5.4及Stata 16.0软件对短期认知功能量表评分和长期认知功能量表评分进行传统Meta分析和网状Meta分析,绘制网络关系图、联赛表和累积概率排序表。最后采用GRADE对结局指标进行证据等级评价。结果:(1)共纳入31项随机对照试验,其中8项研究被评为低风险,23项研究被评为有一定风险,无高风险研究,共计纳入1 670例受试者,涉及14种非侵入性脑刺激的不同刺激方式。(2)网状Meta分析结果显示:与常规治疗相比,高频重复经颅磁刺激第一运动皮质(SMD=0.73,95%CI:0.14-1.32,P<0.05;SUCRA=66.2%)在改善帕金森病患者短期认知功能方面疗效最佳,其次是经颅直流电刺激背外侧前额叶皮质(SMD=0.56,95%CI:0.14-0.98,P<0.05,SUCRA=54.4%)和高频重复经颅磁刺激背外侧前额叶皮质(SMD=0.52,95%CI:0.11-0.93,P<0.05;SUCRA=51.4%);在改善帕金森病患者长期认知功能方面,高频重复经颅磁刺激第一运动皮质(SMD=1.17,95%CI:0.48-1.85;P<0.05;SUCRA=91.2%)效果最佳。结论:现有的低等强度临床证据表明,高频重复经颅磁刺激第一运动皮质在改善帕金森病患者短期认知功能方面效果最佳,其次是经颅直流电刺激背外侧前额叶皮质和高频重复经颅磁刺激背外侧前额叶皮质。同时,高频重复经颅磁刺激第一运动皮质在改善帕金森病患者长期认知功能方面也是最佳刺激方式。