关键词： 茄二十八星瓢虫   HvPP2A   RNA干扰   存活   生殖  

摘要： 本研究通过饲喂法RNAi技术沉默了丝氨酸蛋白磷酸酶2A（PP2A）基因，探究其对茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata存活和生殖的影响。使用RT-qPCR方法检测HvPP2A基因在茄二十八星瓢虫不同发育阶段（卵、1～4龄幼虫、蛹和成虫）和4龄幼虫不同组织（表皮、脂肪体、中肠和马氏管）中的表达模式。饲喂1龄幼虫不同浓度的dsHvPP2A溶液，研究HvPP2A基因沉默对茄二十八星瓢虫幼虫存活、发育及基因表达的影响。此外，通过饲喂处理3龄幼虫和雌成虫，探究HvPP2A在茄二十八星瓢虫发育、表型特征以及生理机能中的作用。研究结果表明，HvPP2A在茄二十八星瓢虫各发育阶段均有表达，但表达量有差异，其中雌虫期表达量最高；在不同组织中，HvPP2A在中肠的表达最高。dsHvPP2A对1龄幼虫的致死率存在明显的剂量效应。使用50 ng/μL的dsHvPP2A处理时，致死率达到82.5%，而使用100 ng/μL、200 ng/μL和500 ng/μL的dsHvPP2A时，致死率均达到100%。使用100 ng/μL的dsHvPP2A饲喂3龄幼虫可导致其蜕皮失败和死亡。当使用1 000 ng/μL的dsHvPP2A饲喂雌成虫后，与对照组相比，试验组卵巢发育和卵子形成受阻，无法正常产卵。该研究表明，HvPP2A在茄二十八星瓢虫的生长发育和生殖中具有重要作用，有望成为茄二十八星瓢虫RNAi防治的潜在靶标基因。

关键词： 虚拟现实设备   日常生活能力   上肢协调能力   个体差异   系统评价  

摘要： 目的：脑卒中后上肢功能障碍是常见的并发症，严重影响患者的生活质量和日常活动能力。虚拟现实技术作为一种新兴的康复手段，能够有效促进神经重塑和功能恢复。此次研究系统评价不同虚拟现实设备对脑卒中患者上肢运动功能障碍的疗效。方法：对中国知网、万方数据库、维普网、PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library数据库进行检索。筛选所获文献，提取相关数据并进行质量评价工作。纳入研究对照组为常规康复治疗，试验组在对照组基础上进行虚拟现实康复训练。利用RevMan 5.4和Stata18.0软件进行数据分析。结果：(1)最终纳入12篇文献，571例患者；(2)Meta分析结果显示，虚拟现实组上肢Fugl-Meyer量表得分是常规组的7.29倍(MD=7.29,95%CI:5.60-8.98,P <0.05)；虚拟现实组上肢动作研究量表得分是常规组的10.69倍(MD=10.69,95%CI:4.96-16.43,P <0.05)；虚拟现实组改良Barthel指数得分是常规组的8.25倍(MD=8.25,95%CI:3.38-13.12,P <0.05)；(3)亚组分析结果显示，50-59岁的患者在提高上肢FuglMeyer量表评分方面效果更佳；病程为3个月以内的患者在提高上肢Fugl-Meyer量表评分方面更佳；干预周期≥4周时，上肢Fugl-Meyer量表评分提升效果最佳；(4)网状Meta分析显示，智能手套干预[MD=-1.05,95%CI(-1.85,-0.24),P <0.05]对上肢运动功能的改善最有效；Armeo Spring干预[MD=-1.19,95%CI(-1.87,-0.51),P <0.05]对上肢动作能力的改善最有效；Kinect干预[MD=-0.59,95%CI(-1.13,-0.06),P <0.05]对手部灵巧度的改善最有效；VREX干预[MD=-0.76,95%CI(-1.28,-0.23),P <0.05]对日常生活活动能力的改善最有效。结论：改善上肢运动功能时首选智能手套系统；改善上肢协调能力时首选Armeo Spring系统；改善手部灵巧度时首选Kinect系统；改善日常生活活动能力时首选VREX系统。此次研究具有一定局限性，上述结论需理性参考。

关键词： 糖尿病   焦虑症   双向关系   生物学机制   心理学机制  

摘要： 糖尿病与焦虑症之间存在复杂的双向关系，二者相互作用，显著增加了患者的健康负担。糖尿病可通过慢性炎症、神经内分泌紊乱及心理压力等机制增加焦虑症风险，而焦虑症则可能通过激活应激反应、干扰血糖管理及形成不良生活习惯，反过来加重糖尿病病程。目前，针对糖尿病与焦虑症的综合治疗策略正逐步优化，包括药物治疗、心理干预和生活方式调整等方法。然而，基于个体化特点的干预模式在改善患者心理状态和代谢控制方面仍有进一步讨论和发展空间。这些措施将有助于不断完善糖尿病与焦虑症的联合治疗体系，提高治疗的整体效果，同时也为临床实践和未来研究提供科学依据。

关键词： 2型糖尿病   阻塞性睡眠呼吸暂停   发病机制   生物标志物   治疗  

摘要： 随着肥胖人群的增长及人口老龄化，2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）及阻塞性睡眠呼吸暂停（obstructive sleep apnea,OSA）的发病率不断上升，超过五成的T2DM患者合并OSA。合并OSA的T2DM患者有较高的大血管、微血管并发症的发病风险，严重危害患者的生活质量，尽早识别合并OSA的T2DM患者可改善其预后。本文总结了T2DM合并OSA的病理机制、生物标志物和治疗措施的最新研究进展，为T2DM合并OSA的筛查和诊疗提供思路。

关键词： 芪甲柔肝方   肝纤维化   巨噬细胞M2极化   甘草次酸   小檗碱  

摘要： 目的：基于巨噬细胞M2极化调控探究芪甲柔肝方及其关键效应成分抗纤维化的分子机制和作用靶点，为肝纤维化新药研发提供依据和借鉴。方法：40%CCl4皮下注射构建肝纤维化大鼠模型，芪甲柔肝方颗粒剂灌胃治疗，马松染色法检测肝组织胶原纤维容积，免疫组织化学法检测肝组织纤维化标志物Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平，流式细胞术检测肝组织内M2巨噬细胞比例，免疫荧光双染法检测M2巨噬细胞表型CD163、CD206水平，蛋白免疫印迹法检测细胞因子转化生长因子-β（TGF-β）、PDGFB、白细胞介素（IL）-10水平和通路调控分子磷酸化（p）-JAK1、p-信号转导及转录激活蛋白6（STAT6）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测JAK1、STAT6、Arg1、Fizz1相对表达水平；基于血清药理学理论，采用液质联用技术和韦恩分析获取芪甲柔肝方的药物活性成分；采用分子对接和分子动力学模拟技术分析关键效应成分和靶点；IL-4诱导RAW264.7巨噬细胞M2极化，活性成分体外培养巨噬细胞，蛋白免疫印迹法检测通路调控分析表达水平，体外验证作用靶点。结果：芪甲柔肝方治疗可显著减少纤维化标志物α-SMA、Collagen I和胶原纤维含量（P<0.05），降低M2巨噬细胞比例及相关细胞因子IL-10、TGF-β、PDGFB水平（P<0.05），上调M2极化调控因子p-JAK1、p-STAT6水平（P<0.05）；从芪甲柔肝方颗粒、含药血清、空白血清中共检测到1 214个化合物，经韦恩分析获得29个药物成分，包括15个入血原型成分和14个药物代谢成分；分子对接显示，甘草次酸、小檗碱与JAK1的亲和力较强，结合自由能分别为-9.6 kcal·mol-1和-9.1 kcal·mol-1；分子动力学模拟显示，JAK1-Enoxolone和JAK1-Berberine复合体系在100 ns内模拟轨迹稳定，结合自由能分别为-25.18±0.81 kcal·mol-1和-27.39±0.85 kcal·mol-1，模拟前后构象基本一致，蛋白重叠度高，JAK1-Enoxolone形成的氢键数目在0～5个，多数时间可维持在2～3个；甘草次酸、小檗碱体外干预可显著降低p-JAK1、p-STAT6水平（P<0.05）。结论：芪甲柔肝方可抑制M2巨噬细胞极化改善肝纤维化，甘草次酸和小檗碱是该方调控M2极化的关键效应成分，其可靶向结合JAK1，进而调控JAK1/STAT6信号通路，抑制巨噬细胞M2极化以改善肝纤维化，为进一步处方优化、临床应用及新药研发提供依据，并为单体抗肝纤维化研究提供借鉴。

关键词： 植物乳杆菌   STING   NLRP3炎症小体   Th9细胞   2型糖尿病   甲状腺结节  

摘要： 探讨植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum， LP）对Th9细胞分化的调控作用及其在糖尿病相关甲状腺疾病中的潜在免疫调节作用，并初步探索其可能涉及的STING-NLRP3信号通路。分离小鼠脾脏CD4+初始T细胞，用TGF-β1和IL-4诱导分化为Th9细胞，设立对照组和LP干预组，培养48 h。采用流式细胞术检测Th9细胞比例；通过RT-PCR和Western Blot检测PU.1、IL-9、STING、NLRP3及其下游分子的mRNA和蛋白表达。构建2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）和甲状腺结节（thyroid nodule，TN）小鼠模型，给予LP干预，检测血清炎症因子水平、Th9细胞比例以及STING-NLRP3信号通路相关分子表达变化。LP干预可显著抑制体外诱导的Th9细胞中IL-9的表达（P<0.01），同时降低STING和NLRP3蛋白表达水平（P<0.01）。LP通过下调STING表达，抑制NLRP3炎症小体的活化，进而减少IL-1β的产生，最终影响Th9细胞分化及IL-9的分泌。在T2DM合并TN小鼠模型中，LP干预可降低血清中促炎因子水平，减少脾脏组织中Th9细胞比例（P<0.01），并通过调节STING-NLRP3信号轴减轻甲状腺组织炎症反应。植物乳杆菌可抑制Th9细胞分化及功能，减轻糖尿病相关甲状腺疾病的炎症反应，这一作用可能与STING-NLRP3信号通路的调节有关，为相关疾病的防治提供新的潜在靶点。

关键词： 身体圆度指数   糖尿病   全因死亡率   前瞻性研究  

摘要： 目的 探讨糖尿病患者身体圆度指数与全因死亡之间的关联。方法 使用中国慢性病前瞻性研究浙江省桐乡市基线调查时自报曾被医生诊断为糖尿病及基线调查时新诊断的糖尿病患者数据，剔除自报患有恶性肿瘤、心脏病和脑卒中患者后，纳入分析30～79岁患者2 812例。身体圆度指数分组采用四分位数。采用Cox比例风险回归模型计算全因死亡风险比及95%置信区间（CI）。采用限制性立方样条方法探索身体圆度指数与全因死亡关联的剂量-反应关系。结果 研究对象年龄（56.24±9.30）岁，身体圆度指数（3.59±1.16）。糖尿病患者累计随访30 232人年（平均随访11.28年）。随访期间，185例男性和248例女性患者发生死亡。调整人口社会学因素、行为生活方式和体质量指数等因素后，糖尿病患者全因死亡风险随身体圆度指数的增加而增加，趋势检验有统计学意义(Wald χ2=12.836，P<0.001)。与身体圆度指数最低组（<2.77）相比，中低组（2.77～3.49）、中高组（3.50～4.28）和最高组（≥4.29）糖尿病患者全因死亡的风险比分别为1.16（95%CI：0.85～1.58）、1.37（95%CI：0.96～1.94）和2.26（95%CI：1.47～3.48）。限制性立方样条模型显示，身体圆度指数和全因死亡风险比呈近似J形关联。结论 较高的身体圆度指数水平会增加糖尿病患者全因死亡的风险。

关键词： 1-脱氧野尻霉素   提取   检测   功效   糖尿病  

摘要： 1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，DNJ）是一种存在于桑叶中的天然生物碱，其作为有效的糖苷酶抑制剂，在降糖方面具有显著功效，并且具备降血脂、抗病毒、抗癌等多种生物活性。目前DNJ可以通过热提取、超声提取、微波提取及回流提取等多种方法进行提取。对于DNJ的测定方法主要采用高效液相色谱进行。然而，目前现有的研究对DNJ生物活性的系统性总结尚显不足。该文通对DNJ的功效及其作用机制进行全面梳理，深入探讨其提取方法，测定方法以及生物活性研究的最新进展，以期为DNJ的后续的研究提供一定的参考。

关键词： 恩格列净   达格列净   糖尿病肾病   疗效  

摘要： 目的 探讨恩格列净与达格列净在不同进展期糖尿病肾病（diabetic kidney disease，DKD）行序贯治疗的疗效差异。方法 选取2022年6月—2023年6月的369例DN患者，随机数字表法将患者分为对照A组、对照B组、序贯组各123例。对照A组(口服达格列净10 mg·d-1，持续6个月)、对照B组(口服恩格列净10 mg·d-1，持续6个月)，序贯组患者初始阶段口服恩格列净10 mg·d-1，持续3个月，之后序贯口服达格列净10 mg·d-1，持续3个月。比较3组患者在治疗前、治疗3、6个月时的肾功能指标、血糖控制、氧化应激及炎症指标情况及用药期间不良反应。并分析序贯治疗对于不同白蛋白尿分期患者的效果差异。结果 序贯组患者治疗后3个月时血肌酐、尿素氮、估算肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate，eGFR）、尿白蛋白与肌酐比值（urine albumin-to-creatinine ratio，UACR）均与对照A组水平相似，且血肌酐、尿素氮低于对照B组，（P＜0.05）；序贯组患者治疗后3个月时FBG、HbA1c、甘油三酯葡萄糖乘积指数（triglyceride - glucose Index，TyG）、SOD均与对照A组水平相似，且FBG、TyG低于对照B组，Klotho高于对照A组、对照B组，AOPP低于对照A组、对照B组，MDA与对照B组相似，（P＜0.05）；治疗6个月时，序贯组血肌酐、尿素氮、HbA1c、eGFR、AOPP、MDA均低于其余两组，Klotho、SOD高于其余两组（P＜0.05），UACR低于对照B组，TyG仅低于对照A组（P＜0.05）。三组不良反应无显著差异（P＞0.05）。序贯治疗在A3期患者在3个月时尿素氮、FBG高于A1期，A3期患者在6个月时血肌酐、尿素氮、eGFR、FBG、HbA1c、TyG均高于A1、A2期组，（P＜0.05）。序贯组与在A2期患者的UACR较其余2组有所下降，在A3期患者的UACR有所升高，均有显著差异（P＜0.05）。结论 恩格列净序贯达格列净较单药持续治疗具有更好的肾功能保护作用，且疗效与CKD分期密切相关，安全性与单独持续应用相当，能够为CKD患者白蛋白尿分层治疗提供新的依据。

关键词： 骨关节炎,膝   补肾痹通方   间质干细胞   骨髓   软骨细胞   细胞凋亡   类Toll受体   髓系分化初级反应蛋白质88   NF-κB   动物实验  

摘要： 目的:探讨补肾痹通方联合骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC）干预膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）的效果及其作用机制。方法:（1）细胞实验。将软骨细胞接种于96孔Transwell小室的下室中,分为空白对照组、模型组、补肾痹通方含药血清组、BMMSC组和联合干预组,除空白对照组外,其余4组均加入终浓度为10 ng·mL-1的白细胞介素-1β,诱导KOA细胞模型。诱导结束后,在Transwell小室的上室中,补肾痹通方含药血清组加入含15%补肾痹通方含药血清的培养基,BMMSC组加入等量的BMMSC悬液,联合干预组加入含15%补肾痹通方含药血清的培养基及等量的BMMSC悬液,空白对照组和模型组加入等量的空白培养基。继续培养24 h后,取出Transwell小室的上室,统计各组软骨细胞数量,计算各组软骨细胞相对迁移率。将软骨细胞接种于96孔细胞培养板中,采用相同的分组、造模与干预方式,继续培养24 h后,采用流式细胞术检测各组软骨细胞的凋亡率,采用Western Blot法检测各组软骨细胞B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（B-cell lymphoma-2 associated X protein,BAX）、B淋巴细胞瘤（B-cell lymphoma,Bcl）-2、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved-cysteine aspartic acid specific protease-3,cleaved-Caspase-3）等细胞凋亡相关基因的蛋白表达量。（2）动物实验。将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、BMMSC组和联合干预组,每组10只。模型组、BMMSC组、联合干预组采用改良Hulth法建立大鼠右侧KOA模型,假手术组大鼠切开右侧膝关节皮肤及皮下组织、暴露膝关节腔后缝合。造模4周后,向BMMSC组、联合干预组大鼠右侧膝关节腔内注射100μL BMMSC悬液(细胞数量约为200个·μL-1),向假手术组、模型组大鼠右侧膝关节腔内注射100μL生理盐水,各组大鼠每周注射1次,连续注射4周。联合干预组按照生药16.35 g·kg-1·d-1给予补肾痹通方药液灌胃,分2次早晚灌服,连续灌胃4周。干预结束后,每组随机选取4只大鼠,分离右侧膝关节,观察大鼠膝关节软骨组织病理变化;其余6只大鼠,分离大鼠右侧膝关节软骨组织,检测大鼠膝关节软骨组织中Toll样受体（Toll-like receptor,TLR） 4、髓系分化初级反应蛋白质88（myeloid differentiation primary response protein 88,MyD88）、核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB） p65的mRNA表达量以及TLR4、MyD88、NF-κB p65、磷酸化核因子-κB（phosphorylated nuclear factor-κB,p-NF-κB） p65的蛋白表达量。结果:（1）补肾痹通方含药血清联合BMMSC对软骨细胞迁移活性影响的分析结果。模型组软骨细胞相对迁移率低于空白对照组（P=0.000）,补肾痹通方含药血清组、BMMSC组、联合干预组软骨细胞相对迁移率均高于模型组（P=0.000,P=0.010,P=0.016）,联合干预组软骨细胞相对迁移率高于补肾痹通方含药血清组和BMMSC组（P=0.000,P=0.012）。（2）补肾痹通方含药血清联合BMMSC对软骨细胞凋亡影响的分析结果。模型组软骨细胞凋亡率高于空白对照组（P=0.000）,补肾痹通方含药血清组、BMMSC组、联合干预组软骨细胞凋亡率均低于模型组（P=0.000,P=0.010,P=0.016）,联合干预组软骨细胞凋亡率低于补肾痹通方含药血清组和BMMSC组（P=0.000,P=0.000）。模型组软骨细胞BAX、cleaved-Caspase-3的蛋白相对表达量及BAX与Bcl-2蛋白相对表达量的比值均高于空白对照组（P=0.000,P=0.000,P=0.000）,Bcl-2蛋白相对表达量低于空白对照组（P=0.000）;补肾痹通方含药血清组、BMMSC组、联合干预组软骨细胞BAX、cleaved-Caspase-3的蛋白相对表达量及BAX与Bcl-2蛋白相对表达量的比值均低于模型组（BAX:P=0.000,P=0.010,P=0.016;cleaved-Caspase-3:P=0.000,P=0.010,P=0.000;BAX与Bcl-2的比值:P=0.000,P=0.010,P=0.000）,Bcl-2蛋白相对表达量高于模型组（P=0.000,P=0.000,P=0.001）;联合干预组软骨细胞BAX、cleaved-Cas