关键词： 芒柄花素   髓核间充质干细胞   炎症   椎间盘退变   核因子κB  

摘要： 背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞表面标志;②CCK-8法检测脂多糖、芒柄花素对髓核间充质干细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的芒柄花素浓度;③在DMEM/F-12完全培养基中添加5μg/mL脂多糖模拟炎症微环境,然后用不同浓度芒柄花素处理髓核间充质干细胞24 h,通过Western blot、实时荧光定量PCR、免疫荧光检测炎症标志物表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①贴壁培养的髓核间充质干细胞呈梭形,生长状态良好,流式细胞术结果显示间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD90呈阳性,造血干细胞表面标志物CD34、CD45呈阴性。②12.5,25,50,100,200μmol/L芒柄花素处理24 h对髓核间充质干细胞无明显增殖抑制效果。与脂多糖组相比,12.5,25,50μmol/L芒柄花素处理24 h后髓核间充质干细胞活力显著提高,因此后续选用12.5,25,50μmol/L为芒柄花素低、中、高浓度处理髓核间充质干细胞。③与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、肿瘤坏死因子α蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。④与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中磷酸化核因子κB和磷酸化核因子κB抑制蛋白的表达显著降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。上述结果说明芒柄花素可能通过抑制核因子κB信号通路减轻脂多糖诱导的大鼠髓核间充质干细胞炎症。

关键词： 推拿   2型糖尿病   肌少症   细胞外基质   胶原沉积   Ⅰ型胶原   Ⅲ型胶原   工程化组织构建  

摘要： 背景:研究发现,推拿能降低血糖、促进成肌因子的表达及提高骨骼肌含量。细胞外基质是骨骼肌的重要成分,推拿与细胞外基质的关联及作用机制尚不明确。目的:探究推拿对2型糖尿病肌少症大鼠细胞外基质胶原沉积的影响。方法:将24只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组和推拿组,采用高脂饲料结合链脲佐菌素方法建立2型糖尿病肌少症模型,造模成功后推拿组给予腹部结合后肢部推拿治疗。治疗8周后,检测大鼠空腹血糖、血清胰岛素水平,双能X射线检测骨骼肌质量,小动物跑步机检测力竭时间,斜板实验检测滑落角度,苏木精-伊红染色观察骨骼肌组织的病理改变,Masson染色观察骨骼肌胶原沉积情况,qPCR和Westernblot检测骨骼肌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达。结果与结论:①与模型组比较,推拿组大鼠血糖(P<0.05)、血清胰岛素(P<0.01)降低;②与模型组比较,推拿组大鼠骨骼肌质量、跑步力竭时间、斜板实验角度均增加(P<0.05);③与模型组比较,推拿组大鼠骨骼肌排列整齐,肌萎缩改善,胶原纤维沉积减少;④与模型组比较,推拿组大鼠骨骼肌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);⑤结果表明,推拿可以提高胰岛素敏感性,降低2型糖尿病大鼠血糖水平,改善骨骼肌质量、力量和功能,减少胶原沉积,可能是推拿发挥治疗作用的潜在靶点。

关键词： 跌倒风险   老年人   运动干预   Meta分析   平衡能力   下肢肌力   心理效能   量效关系  

摘要： 目的:探究不同运动方案组成要素对降低老年人跌倒风险的干预效果。方法:检索PubMed、Embase、Web of Science、The Cochrane Library、万方、中国知网等数据库中关于运动干预对60岁以上健康老年人跌倒风险影响的研究,检索时限为各数据库建库至2023年7月。采用Cochrane风险偏倚评估工具对纳入文献进行方法学质量评价,通过Review Manager 5.3和Stata 16.0软件对文献进行Meta分析、敏感性分析、亚组分析和发表偏倚检验。结果:共纳入45篇文献,包含54项研究,总样本量为3074名。研究表明运动干预可以有效提高老年人平衡能力(睁眼单脚站立、功能性前伸、起立-行走测试、Berg平衡量表测试)、下肢肌力(30 s坐立测试、5次坐立测试、简易体能状况量表)、心理效能(国际版跌倒效能量表),降低跌倒风险(P<0.05)。Meta分析结果显示不同运动方案对降低老年人跌倒风险存在剂量效应,身心运动有利于改善老年人单脚站立(睁眼)能力[MD=6.81,95%CI(2.17,11.44),P<0.01];抗阻运动更有利于提高起立-行走测试成绩[MD=-3.12,95%CI(-5.72,-0.52),P<0.05]和30 s坐立能力[MD=1.22,95%CI(0.37,2.08),P<0.01];多成分运动更有利于改善功能性前伸能力[MD=4.50,95%CI(2.58,6.42),P<0.01]、Berg量表测试成绩[MD=1.05,95%CI(0.39,1.71),P<0.01]、5次坐立能力[MD=-3.15,95%CI(-4.80,-1.50),P<0.01]、简易体能状况量表测试成绩[MD=0.55,95%CI(0.37,0.74),P<0.01]和国际版跌倒效能量表测试成绩[MD=-0.41,95%CI(-0.69,-0.13),P<0.01]。结论:运动干预能有效提高老年人平衡能力、下肢肌力和活动能力,减少对跌倒的恐惧,降低老年人跌倒风险。不同方案组成要素(运动方式、周期、频率和单次运动时间)对老年人跌倒风险相关筛查测试结果有着不同量效关系。

关键词： 慢性并发症   痛性糖尿病周围神经病变  

摘要： 糖尿病周围神经病变(DPN)是糖尿病常见的慢性并发症之一,也是导致糖尿病足的关键风险因素之一。据调查,有接近一半的糖尿病患者存在不同程度的DPN。DPN可分为多种类型,其中临床最常见、处理最棘手的当数痛性糖尿病周围神经病变(PDPN),有1/4~1/3的糖尿病患者存在PDPN。

关键词： 帕金森病   卷曲螺旋结构域蛋白2   PINK1   Parkin   线粒体自噬   线粒体功能   细胞凋亡   6-羟基多巴胺   SH-SY5Y细胞  

摘要： 背景:卷曲螺旋结构域蛋白2(coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing 2,CHCHD2)能否调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在帕金森病中发挥神经保护作用尚未可知。目的:探讨CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中对PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬发挥的作用及机制。方法:利用重组质粒转染技术过表达或敲低CHCHD2,用6-羟基多巴胺构建SH-SY5Y细胞帕金森病模型后分对照组、模型组、过表达阴性对照+6-羟基多巴胺组、敲低阴性对照+6-羟基多巴胺组、过表达CHCHD2+6-羟基多巴胺组和敲低CHCHD2+6-羟基多巴胺组。Western blot及RT-qPCR检测CHCHD2的表达;Western blot检测LC3Ⅰ/Ⅱ、p62、MFN1、COXⅣ、DRP1、PINK1、Parkin、TIM23、Bax、Bcl-2及cleavedcaspase3蛋白表达;CCK-8、JC-1和活性氧试剂盒检测细胞活性、线粒体膜电位和活性氧水平,单丹磺酰尸胺染色观察细胞自噬情况,透射电镜观察自噬溶酶体。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞活性、线粒体膜电位及CHCHD2、PINK1、Parkin蛋白表达降低,活性氧水平、凋亡水平及LC3Ⅰ/Ⅱ、p62蛋白表达升高(P<0.05),并观察到自噬溶酶体的存在;②与模型组相比,过表达CHCHD2能降低细胞活性氧水平,升高线粒体膜电位及PINK1、Parkin和MFN1蛋白表达水平,并观察到线粒体自噬溶酶体增多,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用,并伴有COXⅣ、TIM23和p-DRP1蛋白表达的升高(P<0.05);③与模型组相比,过表达CHCHD2能减少细胞凋亡,上调Bcl-2并下调Bax及cleavedcaspase3蛋白的表达,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用(P<0.05);④结果提示,CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中可以通过促进PINK1/Parkin介导的线粒体自噬改善线粒体功能从而减轻细胞凋亡发挥神经保护作用。

关键词： 骨关节炎   内质网应激   WGCNA   机器学习   人滑膜细胞   免疫浸润分析   生物标志物   实验验证   细胞实验   差异基因  

摘要： 背景:内质网应激和骨关节炎的发生、发展密切相关,但其关键基因及调控机制尚不明确。目的:基于生物信息学筛选骨关节炎内质网应激关键基因,并加以细胞模型实验验证,以期从内质网应激角度为防治骨关节炎提供新策略。方法:从GEO数据库下载骨关节炎相关数据集GSE55235,运用生物信息学分析方法筛选获取骨关节炎滑膜差异基因,与GeneCard数据库中内质网应激基因取交集得到骨关节炎内质网应激差异基因,随后对其进行GO/KEGG富集分析;构建蛋白-蛋白互作网络;在外部数据集验证其疾病预测效能。构建人原代关节滑膜成纤维细胞骨关节炎模型,对照组不作处理,实验组接受20 ng/mL脂多糖模拟骨关节炎滑膜细胞造模后进行实时荧光定量PCR实验验证各差异基因表达水平并进行免疫浸润分析。结果与结论:①共获得骨关节炎内质网应激关键基因27个。②GO富集分析结果显示其主要富集在胶原蛋白代谢过程、趋化因子、抗原结合及免疫球蛋白受体结合等过程中。③KEGG分析表明其主要富集在类风湿性关节炎、松弛肽信号通路等通路中。④构建蛋白-蛋白互作网络,使用Cytoscape软件中Degree算法筛选得分最高的5个基因,包括基质金属蛋白酶1、肿瘤坏死因子配体超家族成员11(tumor necrosis factor ligand superfamily member 11,TNFSF11)、基质金属蛋白酶9、Ⅰ型胶原α1重组蛋白(collagen type Ⅰ alpha 1,COL1A1)和趋化因子配体12(chemokine C-X-C motif ligand 12,CXCL12)。⑤免疫浸润分析结果显示,免疫细胞主要分布于M2型巨噬细胞,CXCL12与静息的肥大细胞呈显著正相关(r=0.70,P<0.001),与静息的记忆CD4^(+)T细胞呈显著负相关(r=-0.72,P<0.001);基质金属蛋白酶9与M0巨噬细胞呈显著正相关(r=0.94,P<0.001);COL1A1与静息的NK细胞(r=0.77,P<0.001)和M0巨噬细胞(r=0.76,P<0.001)呈显著正相关。⑥外部数据集GSE77298和GSE1919中进行受试者工作曲线分析表明5个关键基因具有较好的疾病预测价值。⑦体外细胞实验证明,骨关节炎细胞模型组中基质金属蛋白酶1,TNFSF11,CXCL12及基质金属蛋白酶9表达水平相比于对照组有显著差异。⑧结果显示,骨关节炎内质网应激关键基因基质金属蛋白酶1,TNFSF11,CXCL12及基质金属蛋白酶9通过胶原蛋白降解和免疫调控等环节影响着骨关节炎的发生发展,有望为骨关节炎的靶向治疗提供新见解。

摘要： Calmodulin-binding transcriptional activator (CAMTA) is a calmodulin-binding transcription factor, which plays an important role in calcium/calmodulin transduction signaling pathway. Foxtail millet ( Setaria italica L.) is an economically important C4 model crop, but the genome-wide identification and molecular evolution of the CAMTA family is not yet available. In this study, seven CAMTA genes were identified from the foxtail millet genome via bioinformatics methods. They were overall similar in structure but differed, and all showed tissue expression specificity. Regarding molecular evolution, codon bias contributed to the evolution of the CAMTA family, and interestingly, base mutation was not the main factor affecting their codon bias, and may also be affected by factors such as natural selection and other factors. Multiple traces indicated that polyploidization events primarily led to the expansion of the plant CAMTA family, with overall similar but differentiated expansion histories in different species, and that Selaginella moellendorfii possesses the most paralogous genes being the most distinctive. More intriguingly, we found the opposite quantitative evolutionary history of terrestrial plants to that of the algal CAMTA family. Therefore, we firstly analyzed the molecular properties of the CAMTA transcription factor family in foxtail millet and explored its molecular evolutionary trajectory, and constructed a flow of evolutionary trajectories from monospecies transition to the plant kingdom for reference.

关键词： 糖尿病   骨密度检查   胶原蛋白损伤   钙质流失  

摘要： 有一项检查,不属于常规体检项目,对于糖尿病患者却很重要,那就是骨密度检查。骨密度检查为什么重要?又该如何进行这项检查呢?糖尿病患者要特别关注骨密度糖尿病不仅影响血糖代谢,还会悄然侵蚀骨骼健康,长期高血糖会导致很多骨骼相关问题。1.钙质流失。在高血糖状态下,肾脏排尿增多,钙、磷、镁等矿物质会随尿液流失,骨骼的新陈代谢缺乏原料,骨量就会逐渐减少。2.胶原蛋白损伤。高血糖促使胶原蛋白糖化,骨骼弹性下降,脆性增加,骨折风险显著升高。

关键词： 高糖   血脑屏障   紧密连接   通透性   细胞凋亡   组蛋白去乙酰化酶4   工程化组织构建  

摘要： 背景:血脑屏障是保护中枢神经系统的重要结构,研究高糖对血脑屏障的影响对预防高糖导致的中枢神经系统损伤有重要意义。目的:探讨高糖对hCMEC/D3人脑微血管内皮细胞血脑屏障功能的潜在影响。方法:hCMEC/D3细胞分别以常规糖培养基(葡萄糖浓度25 mmol/L)和高糖培养基(葡萄糖浓度55 mmol/L)培养,光学显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力变化。采用Transwell小室将hCMEC/D3细胞系建立单层细胞血脑屏障模型,每日监测细胞跨膜电阻值变化,通过苯酚红透过率检测单层细胞的通透性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3、ZO-1、Occludin、Claudin-1、组蛋白去乙酰化酶蛋白4的表达,ELISA检测细胞上清液中组蛋白去乙酰化酶水平,免疫荧光检测细胞中组蛋白去乙酰化酶4的表达。结果与结论:①高糖组细胞活力显著低于对照组(P<0.0001);②对照组细胞生长状态良好,交织成致密网状,突触间相互连接;高糖组细胞生长受抑,细胞间突触连接减少;③与对照组相比,高糖组跨膜电阻值降低(P<0.05),单层细胞膜苯酚红通透性增加(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.01),Bax蛋白表达增加(P<0.0001),Caspase-3蛋白表达无明显变化(P>0.05),Bcl-2、ZO-1、Occludin、Claudin-1、组蛋白去乙酰化酶4蛋白表达降低(P<0.01,P<0.001,P<0.01,P<0.0001,P<0.01),组蛋白去乙酰化酶4荧光表达降低(P<0.001);④高糖组细胞上清液中组蛋白去乙酰化酶4水平低于对照组(P<0.05)。结果表明,高糖诱导hCEMCE/D3细胞凋亡增加,通透性增强,其机制可能与组蛋白去乙酰化酶4表达水平降低有关。

关键词： 糖尿病   椎间盘退变   软骨终板变性   细胞凋亡   晚期糖基化产物   渗透压应激  

摘要： 背景:糖尿病通过多种途径加剧椎间盘退变,良好的血糖控制有利于预防椎间盘退变。目的:回顾糖尿病与椎间盘退变的关系,为临床治疗糖尿病患者的椎间盘退变性疾病提供参考。方法:在中国知网、PubMed数据库进行文献检索,检索时限为1980-2023年,以“糖尿病,椎间盘退变,软骨终板变性,细胞凋亡,晚期糖基化产物,渗透压应激”为中文检索词,以“diabetes,intervertebral disc degeneration,cartilage endplate degeneration,apoptosis,advanced glycation end products,osmotic stress”为英文检索词,最终纳入73篇文献进行归纳分析。结果与结论:①糖尿病诱导的椎间盘退变与生理性退变的病理生理过程不同,糖尿病诱导椎间盘退变的主要机制包括:细胞内高血糖状态,微血管病变导致椎间盘血供受损,细胞衰老、凋亡及自噬,晚期糖基化产物堆积,渗透压应激,其他途径导致的细胞外基质成分破坏;②姜黄素、白藜芦醇、羽扇豆醇等药物具有治疗椎间盘退变的作用,但需进一步在临床治疗中证明其安全性及有效性。