关键词:
水苏碱
SDF-1/CXCR4信号通路
糖尿病肾脏疾病
大鼠
足细胞
摘要:
目的探究水苏碱(stachydrine,Sta)调节基质细胞衍生因子(stromal cell derived factor,SDF)-1/CXC趋化因子受体4型(chemokine receptor-4,CXCR4)信号通路对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠足细胞损伤的影响。方法将大鼠按照随机数字表法随机分为对照组(Control)、模型组(Model)、Sta低剂量组(sta low-dose group,Sta-L)、Sta高剂量组(sta high-dose group,Sta-H)、Sta-H+AMD3100(SDF-1/CXCR4信号通路抑制剂)组。检测大鼠血糖(fasting blood glucose,FBG)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、24 h尿蛋白定量(24-hour urine protein,24 h UP);酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-4水平;苏木精伊红(hematoxylin eosin stain,HE)染色观察肾组织病理形态;透射电镜观察肾小球足细胞超微结构;蛋白免疫印迹法检测肾组织足盂蛋白(recombinant podocalyxin,PCX)、肾病蛋白(Nephrin)、结蛋白(Desmin)、裂解的半胱氨酸蛋白酶(cleaved cysteine protease,Caspase)-3、SDF-1、CXCR4蛋白表达。结果与Control组相比,Model组大鼠肾脏组织明显受损,足细胞微结构明显被破坏,FBG[(24.93±3.24)mmol/L比(5.16±0.87)mmol/L]、BUN[(16.23±1.81)mmol/L比(5.64±0.92)mmol/L]、Scr[(107.38±12.74)μmol/L比(5.16±0.87)μmol/L]和UP[(37.69±4.72)mg比(6.51±1.18)mg]、血清LDH[(9.48±1.51)U/L比(2.09±0.37)U/L]、TNF-α[(176.43±22.53)ng/L比(43.79±5.84)ng/L]、IL-6[(134.76±17.83)ng/L比(28.63±3.57)ng/L]、肾组织损伤评分[(2.80±0.24)比(0.10±0.02)]、Desmin[(1.28±0.16)比(0.36±0.05)]、Caspase-3[(0.78±0.10)比(0.19±0.03)]蛋白表达水平升高,血清IL-4[(21.37±3.61)ng/L比(107.52±13.94)ng/L]、肾脏组织PCX[(0.31±0.05)比(1.17±0.14)]、Nephrin[(0.26±0.04)比(1.04±0.13)]、SDF-1[(0.31±0.05)比(0.95±0.13)]、CXCR4[(0.24±0.03)比(0.86±0.11)]蛋白表达水平降低(P<0.05);与Model组相比,Sta-L组和Sta-H组大鼠肾脏组织形态有明显改善,足细胞微结构破坏程度明显减轻,FBG、BUN、Scr和24 h UP水平,血清LDH、TNF-α、IL-6水平,肾组织损伤评分、Desmin、Caspase-3蛋白表达水平降低,血清IL-4水平、肾脏组织PCX、Nephrin、SDF-1、CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05);AMD3100可减弱Sta对DKD大鼠足细胞损伤的改善作用(P<0.05)。结论Sta可降低DKD大鼠血糖和炎症,减轻肾脏组织和足细胞损伤,其作用机制可能是通过激活SDF-1/CXCR4信号通路实现的。