关键词:
糖尿病肾病
小泛素样修饰体特异性肽酶1
过氧化物酶体增殖物激活受体γ
去SU⁃MO化修饰
核因子⁃κB信号通路
摘要:
目的探讨小泛素样修饰体特异性肽酶1(SENP1)通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)去小泛素样修饰体(SUMO)化修饰调控核因子⁃κB(NF⁃κB)信号通路参与糖尿病肾病(DN)进展的作用和机制。方法取肾小球系膜细胞,分为肾小球系膜细胞(NC)组、高糖诱导的肾小球系膜细胞(HGMC组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+SENP1沉默质粒对照(si⁃NC1组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+SENP1沉默质粒(si⁃SENP1)组、高糖诱导的肾小球系膜细胞+SENP1过表达对照(mimic⁃NC1组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+SENP1过表达质粒(mimic⁃SENP1组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+PPARγ沉默对照(si⁃NC2组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+PPARγ沉默质粒(si⁃PPARγ组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+PPARγ过表达对照(mimic⁃NC2组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+PPARγ过表达质粒(mimic⁃PPARγ组)、高糖诱导的肾小球系膜细胞+SENP1过表达质粒+PPARγ过表达质粒(mimic⁃SENP1+mimic⁃PPARγ)。以qRT⁃PCR法检测各组SENP1、PPARγ表达;采用免疫印迹法检测NF⁃κB信号通路蛋白表达;TUNEL法检测细胞凋亡;免疫共沉淀验证SENP1可对PPARγ去SUMO化修饰。结果与NC组比,HGMC组SENP1及PPARγmRNA表达均显著降低(P<0.05),NF⁃κB1、IKKα1、IκBα蛋白1表达、细胞凋亡率均显著增加(P<0.05),与HGMC组或si⁃NC1组比,si⁃SENP1组的SENP1及PPARγmRNA表达均显著降低(P<0.05),NF⁃κB、IKKα、IκBα蛋白表达、细胞凋亡率均显著增加(P<0.05),与HGMC组或mimic⁃NC1组比,mimic⁃SENP1组的SENP1及PPARγmRNA表达均显著增加(P<0.05),NF⁃κB、IKKα、IκBα蛋白表达、细胞凋亡率均显著降低(P<0.05),与HGMC组或si⁃NC2组比,si⁃PPARγ组的PPARγmRNA达显著降低(P<0.05),NF⁃κB、IKKα、IκBα蛋白表达、细胞凋亡率均显著增加(P<0.05),与HGMC组或mimic⁃NC2组比,mimic⁃PPARγ组的PPARγmRNA表达显著增加(P<0.05),NF⁃κB、IKKα、IκBα蛋白表达、细胞凋亡率均显著降低(P<0.05),与mimic⁃SENP1组或mimic⁃PPARγ组比,mimic⁃SENP1+mimic⁃PPARγ组的SENP1及PPARγmRNA表达均显著增加(P<0.05),NF⁃κB、IKKα、IκBα蛋白表达、细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。结论SENP1可能通过PPARγ去SUMO化修饰抑制NF⁃κB信号通路参与DN进展。