关键词:
糖尿病心肌病
仙茅苷
第10号染色体缺失的磷酸酶/蛋白激酶B
血管生成
心肌重构
摘要:
目的 探究仙茅苷(curculigoside A,CA)通过人第10号染色体缺失的磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)通路调控糖尿病心肌病患者心肌重构和血管生成的机制。方法 使用35 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建大鼠糖尿病心肌病模型,造模成功后,将60只大鼠随机分为对照组、模型组、仙茅苷治疗组,每组20只。仙茅苷治疗组采用500μmol·kg^(-1)仙茅苷灌胃治疗,每3 d 1次,连续治疗4周。采用超声心动仪检测大鼠心脏功能,Masson染色检查大鼠心肌细胞胶原纤维沉积情况,免疫组织化学检测大鼠心肌细胞血管生成能力。将人脐静脉内皮细胞系(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)分为正常组、高糖组(30μmol·L^(-1)葡萄糖培养细胞)、高糖+CA组(30μmol·L^(-1)葡萄糖和100μmol·L^(-1) CA培养细胞)、高糖+AKT组(30μmol·L^(-1)葡萄糖和5μmol·L^(-1) AKT激活剂SC79培养细胞),AKT组(5μmol·L^(-1)AKT激活剂SC79培养细胞),AKT+CA组(5μmol·L^(-1) AKT激活剂SC79和100μmol·L^(-1) CA培养细胞)。采用流式细胞术检测HUVEC细胞的凋亡情况,管形成实验检测细胞生成血管能力。Western blotting检测PTEN/AKT通路、血管生成因子以及凋亡相关蛋白[PTEN、p-PTEN-Ser380、AKT、p-AKT-S473、BCL-2、BCL-2相关X蛋白(BCL-2associated X protein,BAX)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)]的表达情况。结果 与对照组比较,模型组大鼠的左心室舒张末期直径、左心室收缩末期直径均显著增加,左心室射血分数、左心室收缩功能以及心率均显著降低(P<0.001);心肌细胞胶原纤维沉积,血管生成因子VEGF表达均显著降低,血管生成能力显著减弱(P<0.001)。与模型组比较,仙茅苷治疗组上述指标均改善(P<0.001)。AKT激活剂SC79培养下的HUVEC细胞VEGF因子分泌降低,管形成能力降低,细胞凋亡增加,PTEN、AKT蛋白磷酸化增加,BCL-2因子表达降低,BAX因子表达升高。与AKT激活剂处理组相比,仙茅苷组大鼠的心肌细胞PTEN、AKT磷酸化均降低,BCL-2因子表达升高,BAX因子表达降低。结论 仙茅苷通过抑制PTEN/AKT通路磷酸化并增强心肌细胞重构与血管生成能力而改善糖尿病心肌病。