关键词： 银耳多糖   低共熔溶剂   糖尿病   肠道菌群   中药现代化技术  

摘要： 通过单因素实验和正交实验对超声辅助低共熔溶剂(DES)提取银耳多糖的工艺进行了优化。考察了银耳多糖的体内、体外降血糖活性;根据小鼠盲肠内容物高通量测序分析,评价了银耳多糖对肠道菌群的影响。结果表明,以n(氯化胆碱)∶n(尿素)=1∶2制备的DES-1为提取溶剂,10 g银耳粉末在料液比(g∶mL)1∶35、DES-1含水率(质量分数,下同)15%、超声时间40 min、超声温度60℃、超声功率200 W的优化提取条件下,提取液中银耳多糖含量为24.47 mg/g;质量浓度4 g/L的银耳多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率为72.32%;银耳多糖干预能显著降低糖尿病小鼠的血糖含量,改善小鼠的糖代谢状态。与模型组相比,0.1 g/kg银耳多糖剂量组小鼠血清胰岛素水平降低了41.2%;氧化应激测定的谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶的酶活分别提高了31.83%和20.72%,丙二醛含量降低了39.48%;免疫指标α肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、白细胞介素-12水平分别下降了43.87%、28.75%和44.05%,白细胞介素-10水平上升了208.79%。银耳多糖能显著增加小鼠肠道中脱铁杆菌门、疣孢菌门、放线菌门、拟杆菌门和厚壁菌门等有益菌的数量,同时减少菌弯曲菌门和变形菌门等有害菌数量;能提升乳球菌属、链球菌属、乳杆菌属、阿德勒克氏菌属的相对丰度,同时降低毛螺菌属、拟杆菌属、双歧杆菌属、普雷沃氏菌属和别样棒菌属的相对丰度。

关键词： 林氏扇头蜱   RL22蛋白   免疫原性   抗蜱疫苗   生物信息学  

摘要： 目的探究林氏扇头蜱RL22蛋白的基本理化性质,对RL22在蜱不同发育时期和不同组织中的相对表达量进行分析,并通过动物试验评估RL22作为抗蜱候选抗原的潜力。方法通过收集各时期的蜱、组织样本,提取RNA反转录成cDNA进行qPCR和数据分析;合成PET28a-RL22表达质粒,转化至大肠埃希菌BL21中进行原核表达、纯化。将纯化后的蛋白用于对新西兰兔的免疫接种试验,通过ELISA、蛋白免疫印迹法(Western blot)测定rRL22的免疫原性及其免疫反应性,通过对攻毒后蜱的饱血体质量、产卵重量、吸血时长、孵化率的测定,评估RL22作为抗蜱候选疫苗的潜力。结果RL22氨基酸长度为177 aa,具备长度18 aa的信号肽,是亲水稳定酸性的分泌蛋白。RL22在19-36 aa、48-53 aa、61-67 aa、76-86 aa、94-109 aa、112-122 aa、147-148 aa、150-158 aa、170-173 aa处存在B细胞线性表位,同源建模显示其N端、C端具备α螺旋结构,且具有典型的β-桶状保守空间结构。RL22在不同时期的蜱中都有一定表达,在饱血蜱中肠中表达最高;通过免疫接种后,rRL22使得宿主新西兰兔产生了特异性抗体,35 d时抗体的滴度达1∶256000;免疫攻毒试验结果表明rRL22提供了一定的保护效果,在饱血体质量、产卵量、孵化率方面分别比PBS对照组下降7.2%、9.4%、6.4%,但是差异无统计学意义,同时发现rRL22显著延长了蜱吸血的时间。结论RL22为亲水酸性分泌蛋白,存在多个B细胞表位,推测其为脂质运载蛋白家族成员。RL22在试验测定的蜱各个发育时期均有表达,尤其在饱血若蜱中表达量最高。重组表达的rRL22蛋白对免疫的新西兰兔有一定的抗蜱保护效果。本研究对抗蜱候选疫苗的开发具有重要参考价值。

关键词： 糖尿病肾病   血液透析   中医辨证论治  

摘要： 目的 探讨糖尿病肾病患者与其他原发病引起的血液透析患者在中医证型方面的差异,为临床中医辨证治疗提供参考依据。方法 本研究纳入厦门医学院附属第二医院于2023年1月至2024年6月收治的70例血液透析患者,根据不同疾病类型将其分为两组,其中糖尿病肾病组35例,其他原发病组35例。通过中医四诊合参辨证,依据中医理论对两组患者的证型进行分析,以及分析两组临床症状(乏力、口渴、水肿、贫血)、舌脉表现、尿蛋白、血糖、血肌酐等指标的差异。结果 气虚型患者占比,糖尿病肾病组高于其他原发病组,阳虚型患者占比,糖尿病肾病组低于其他原发病组(P<0.05),其他中医证型,两组差异无统计学意义(P > 0.05);乏力、口渴发生率,糖尿病肾病组高于其他原发病组,水肿发生率,糖尿病肾病组低于其他原发病组(P<0.05),贫血发生率,两组差异无统计学意义(P > 0.05);舌质偏淡、舌苔薄患者占比,糖尿病肾病组高于其他原发病组,脉象沉患者占比,糖尿病肾病组低于其他原发病组(P<0.05);尿蛋白、血糖水平,糖尿病肾病组高于其他原发病组(P<0.05),血清肌酐水平,两组差异无统计学意义(P > 0.05)。结论 糖尿病肾病与其他原发病引起的终末期肾病患者在中医证型上存在显著差异,中医辨证论治应根据不同证型进行个性化治疗,以提高治疗效果。

关键词： 干眼   糖尿病相关干眼   环孢素   人工泪液  

摘要： 目的探讨0.05%环孢素A(CsA)滴眼液对糖尿病相关干眼的治疗效果。方法选取2021年10月至2023年8月在北京大学第三医院眼科就诊的2型糖尿病性中重度干眼患者60例(60只眼)作为研究对象。其中,男性19例(19只眼),女性41例(41只眼);年龄53~79岁,平均年龄(65.5±8.7)岁。根据随机数表法将其分为对照组和试验组。对照组患者使用0.1%玻璃酸钠滴眼液,每日3次局部点眼;试验组患者选用0.1%玻璃酸钠滴眼液,每日3次局部点眼,联合0.05%CsA滴眼液,每日2次局部点眼。于治疗前、治疗后1个月及治疗后3个月分别对患者进行裂隙灯显微镜检查、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(CFS)评分、丽丝胺绿染色(LG)评分、角膜知觉、泪液分泌实验(SⅠt)、OSDI问卷评估及泪液炎症因子检测。年龄、OSDI评分及SⅠt以x^-±s表示,治疗前后比较采用配对t检验,组间比较采用独立样本t检验,各时间点组内和组间比较采用两因素重复测量方差分析。BUT、CFS评分、角膜知觉均值及LG评分以M(Q1,Q3)表示,治疗前后和组间比较采用秩和检验,各时间点组内和组间比较采用Scheirer-Ray-Hare检验。结果试验组患者治疗前、治疗后1个月及治疗后3个月OSDI评分、BUT、CFS评分、SⅠt、角膜知觉均值及LG评分分别为(35.05±12.45)分、4.00(2.00,6.50)s、0.50(0.00,3.75)分、(13.70±8.56)mm、5.45(5.20,5.80)分、0.00(0.00,2.00)分、(26.06±10.87)分、4.00(3.00,5.50)s、1.00(0.00,3.25)分、(14.03±9.00)mm、6.00(5.60,6.00)分、0.00(0.00,2.00)分、(10.98±10.61)分、6.50(4.00,9.00)s、0.00(0.00,2.25)分、(13.61±7.32)mm、6.00(5.90,6.00)分及0.00(0.00,1.00)分;对照组分别为(31.43±11.11)分、3.00(2.75,6.00)s、1.00(0.00,3.00)分、(12.30±7.87)mm、5.75(5.38,6.00)分、0.00(0.00,2.00)分、(31.33±14.64)分、3.00(2.00,7.00)s、1.00(0.00,3.00)分、(12.23±8.40)mm、5.75(5.20,6.00)分、0.00(0.00,1.00)分、(12.97±13.69)分、4.00(3.00,6.25)s、0.00(0.00,3.00)分、(11.40±7.97)mm、6.00(5.80,6.00)分及0.00(0.00,2.00)分。经两因素重复测量方差分析,两组患者各时间点OSDI组内比较的差异有统计学意义(F=63.45,P<0.05),组间比较和交互作用的差异无统计学意义(F=0.20,2.59;P>0.05)。BUT组内比较和交互作用的差异有统计学意义(H=6.92,4.09;P<0.05),组间比较的差异无统计学意义(H=1.36,P>0.05)。CFS、SⅠt、角膜知觉均值及LG评分组间比较、组内比较及交互作用的差异无统计学意义(H=0.04,1.96,2.60,2.05,0.10,0.22,1.85,1.19,1.70,0.16,0.52,2.12;P>0.05)。治疗1个月时,两组BUT比较差异无统计学意义(Z=0.68,P>0.05)。治疗3个月时,两组BUT比较差异有统计学意义(Z=2.19,P<0.05)。结论使用0.05%CsA滴眼液治疗糖尿病相关干眼可以改善患者的临床症状,提高泪膜稳定性,促进泪液分泌功能修复,长期治疗可提高其疗效。

关键词： 蠲痹通络口服液   糖尿病   周围神经病变   气阴两虚夹瘀  

摘要： 目的观察蠲痹通络口服液干预气阴两虚夹瘀型糖尿病周围神经病变的临床疗效。方法收集气阴两虚夹瘀型糖尿病周围神经病变患者68例,将其随机分为观察组和对照组,每组34例。2组患者均采用相同的基础治疗(二甲双胍控制血糖联合生活方式干预),在此基础上对照组给予依帕司他片治疗,观察组在对照组基础上给予蠲痹通络口服液治疗,2组均治疗3个月。比较2组患者治疗前后的血糖指标[空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2 h血糖(2 h postprandial plasma glucose,2hPPG)、糖化血红蛋白(glycated hemoglobin A1c,HbA1c)],血脂指标[总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)],中医证候积分,多伦多临床评分系统(Toronto clinical scoring system,TCSS)评分,正中神经及腓总神经传导速度,炎症标志物[白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)]的变化。结果治疗后,2组FPG、2hPPG、HbA1c均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组上述血糖指标均明显低于对照组(P均<0.05)。2组TC、TG、LDL-C水平均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组上述血脂指标均明显低于对照组(P均<0.05);2组HDL-C比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组中医证候积分、TCSS评分均较治疗前降低(P均<0.05),且观察组中医证候积分、TCSS评分低于对照组(P均<0.05)。2组双下肢正中神经感觉传导速度(sensory nerve conduction velocity,SNCV)、正中神经运动传导速度(motor nerve conduction velocity,MNCV)、腓总神经MNCV、腓总神经SNCV均较治疗前明显升高(P均<0.05),且观察组上述神经传导速度均明显高于对照组(P均<0.05)。观察组IL-6、TNF-α、Hcy和CRP水平均较治疗前显著下降(P均<0.05),对照组IL-6、TNF-α、Hcy水平较治疗前显著下降(P均<0.05),CRP水平未见明显变化(P>0.05);且与对照组相比,观察组上述各炎症标志物水平显著降低(P均<0.05)。2组治疗期间均未见明显不良反应。结论蠲痹通络口服液能有效改善气阴两虚夹瘀型糖尿病周围神经病变患者的临床症状,改善双下肢神经功能及传导速度,并有效调节患者的血糖、血脂和炎症标志物水平。

关键词： GNE-7883   食管鳞癌   增殖能力   迁移能力   细胞凋亡  

摘要： 目的:探讨Yes相关蛋白-转录增强相关结构域小分子抑制剂GNE-7883对食管鳞癌(ESCC)细胞恶性表型的影响及其分子机制。方法:以DMSO为对照,使用不同浓度(8、16、50和100μmol/L)的GNE-7883处理ESCC KYSE410和KYSE510细胞24或48 h,检测细胞增殖活力、集落形成能力、迁移能力及凋亡率变化,并用逆转录实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blot法检测相关分子及信号通路活性蛋白的表达变化。结果:与对照组相比,50和100μmol/L的GNE-7883可显著抑制KYSE410和KYSE510细胞的增殖活力和集落形成能力(均为P<0.01),并可在血清饥饿条件下诱导KYSE410和KYSE510细胞发生显著凋亡(P<0.05)。同时,在血清饥饿条件下,8和16μmol/L的GNE-7883可显著抑制KYSE410和KYSE510细胞的迁移能力(P<0.01)。分子水平检测结果显示,与对照组相比,常规培养条件下,50和100μmol/L GNE-7883处理后,ESCC细胞中与增殖相关的CTGF、CYR61、c-Myc、p-ERK和p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.05);在血清饥饿条件下,50和100μmol/L GNE-7883处理后,ESCC细胞中凋亡标志分子cleaved PARP、cleaved Caspase-3的表达水平明显升高(P<0.05),同时伴随CTGF、CYR61、Bcl-2、Bcl-xL、c-Myc、p-ERK和p-AKT蛋白表达水平的降低(P<0.05)。另外,在血清饥饿条件下,8和16μmol/L GNE-7883处理后,ESCC细胞中CTGF、CYR61、MMP14及p-ERK蛋白表达水平亦较对照组明显下调(P<0.05)。结论:GNE-7883显著抑制ESCC细胞的增殖、迁移及存活能力,并可明显抑制MAPK/ERK和AKT/m TOR信号通路的活性,GNE-7883有可能成为ESCC治疗的候选药物。

关键词： 膀胱肿瘤   肾盂积水   外科手术  

摘要： 目的:采用Meta分析探讨术前合并肾积水与膀胱癌根治术患者的生存预后及临床病理特征的相关性。方法:检索PubMed、Embase、Web of Science、中国知网、维普和万方数据库中关于术前肾积水与膀胱癌根治术患者生存预后和(或)临床病理特征关系的相关文献,并采用Meta分析术前合并肾积水与膀胱癌根治术患者的生存预后及临床病理特征的相关性。检索时限为自建库起至2022年10月1日。由两名研究者根据纳入与排除标准对文献进行筛选并提取相关数据,采用纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)对纳入文献进行质量评价,运用RevMan 5.3和Stata 16.0软件进行统计学分析。结果:最终纳入25篇相关文献,共涉及10416例患者。术前肾积水与膀胱癌患者较短的总生存期(OS)有相关性(HR=1.56,95%CI:1.40~1.73,P<0.001);术前合并肾积水的膀胱癌患者的癌症特异性生存期(CSS)较短(HR=1.41,95%CI:1.26~1.58,P<0.001);术前合并肾积水同样也与膀胱癌患者较短的无复发生存期(RFS)有相关性(HR=1.61,95%CI:1.29~2.01,P<0.001)。临床病理特征分析结果显示:膀胱癌术前合并肾积水的患者病理分级更高(OR=2.82,95%CI:1.60~4.05,P<0.001)、病理分期更差(OR=2.83,95%CI:2.30~3.36,P<0.001)、淋巴结转移(OR=2.03,95%CI:1.32~2.73,P<0.001)和手术切缘阳性(OR=2.20,95%CI:0.78~3.61,P=0.002)的风险更高。结论:术前合并肾积水是影响膀胱癌根治术患者生存预后的不利因素,且与不良的病理特征相关。

关键词： 糖尿病   α-葡萄糖苷酶   中药   天然产物   抑制剂  

摘要： 糖尿病可引起心血管疾病、糖尿病肾病、神经系统疾病等多种并发症,给患者生活和社会经济带来沉重负担。α-葡萄糖苷酶(又称葡萄糖基转移酶)负责将食物中的碳水化合物分解为葡萄糖,是防治糖尿病的一个关键靶点。临床上已有α-葡萄糖苷酶抑制剂,如阿卡波糖,但其长期使用常伴有胃肠道不良反应和肝功能损伤。因此,迫切需要研发高效、低毒的新型α-葡萄糖苷酶抑制剂。中草药在长期的临床实践中具有良好的安全性。近年来国内外研究发现部分中草药提取物及其成分可显著抑制α-葡萄糖苷酶的活性,从而达到调节血糖和防治糖尿病的效果。基于上述背景,本研究聚焦于α-葡萄糖苷酶这一关键靶点,从α-葡萄糖苷酶的结构功能出发,系统归纳总结了中药及其化学成分对α-葡萄糖苷酶的抑制效应和机制,还对该领域面临的挑战和未来降糖药物研发进行了展望。本文为源于中药的α-葡萄糖苷酶抑制剂及降糖药物的研发提供新思路。

关键词： 糖尿病,2型   糖尿病肾病   补体C1q   补体激活途径,甘露糖结合凝集素   补体C5a   肾小管  

摘要： 目的探讨补体1q(C1q)、甘露糖结合凝集素(MBL)、补体5a(C5a)在糖尿病肾脏病(DKD)早期诊断和病情监测中的临床价值,以及与肾小管损伤的关系。方法选取2型糖尿病患者232例。按尿白蛋白/肌酐比值(UACR)和估算肾小球滤过率(eGFR)将患者分为单纯糖尿病(SDM)组50例和DKD组182例,其中DKD组又分为低进展风险DKD(LDKD)组90例、中进展风险DKD(MDKD)组55例和高进展风险DKD(HDKD)组37例。选取同期体检健康者40例为健康对照组(NC组)。根据N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶/尿肌酐(NAG/Ucr)四分位水平将DKD组按肾小管损伤程度从轻到重分为Q1—Q4组。检测各组一般生化指标及C1q、MBL、C5a水平。Spearman法分析C1q、MBL、C5a与肾小球、肾小管损伤指标的相关性。多因素有序Logistic回归分析DKD进展风险及肾小管损伤程度的影响因素。结果DKD组收缩压、舒张压、甘油三酯、血肌酐(Scr)、尿酸、UACR、NAG/Ucr、C1q、MBL、C5a水平均高于SDM组和NC组,总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(ApoB)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平高于NC组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于NC组;SDM组TC、LDL-C、HbA1c、NAG/Ucr水平高于NC组,HDL-C水平低于NC组(P<0.05)。HDKD组C1q水平高于SDM组、LDKD组、MDKD组,MBL和C5a水平高于SDM组、LDKD组;MDKD组MBL、C5a水平高于SDM组、LDKD组;LDKD组MBL水平高于SDM组(P<0.05)。Q4组TC、ApoB、HbA1c、Scr、UACR、C1q、C5a水平高于Q1组,TC、ApoB、Scr、UACR、C1q、C5a水平高于Q2组,UACR、C5a水平高于Q3组;Q3组HbA1c、Scr、UACR、C1q、C5a水平高于Q1组;Q2组UACR水平高于Q1组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,C1q、MBL、C5a与UACR、NAG/Ucr呈正相关,与eGFR呈负相关(P<0.05)。有序Logistic回归分析显示,MBL、C5a、NAG/Ucr、Scr、收缩压水平升高是DKD患者进展的危险因素(P<0.05);C5a、HbA1c、UACR水平升高是DKD患者肾小管损伤的危险因素(P<0.01)。结论C1q、C5a可用于中晚期DKD及肾小管损伤的监测,且C5a是DKD进展和肾小管损伤的独立危险因素。MBL可用于筛查早期DKD,也是其进展的独立危险因素。

关键词： 宫颈病变   液基薄层细胞学检测   人乳头状瘤病毒   诊断价值  

摘要： 目的:探讨液基薄层细胞学检测(TCT)联合人乳头状瘤病毒(HPV)-DNA分型及p16/Ki-67检测在筛查早期宫颈病变中的价值。方法:选取2022年1月至2023年12月在烟台市蓬莱人民医院进行宫颈病变筛查的女性182例,对所有研究对象进行TCT、HPV-DNA分型及p16/Ki-67检测,并以病理检查为金标准,统计TCT、HPV-DNA分型检测、p16/Ki-67检测单独及联合应用对宫颈病变的诊断结果、效能及与病理检查结果的一致性。结果:TCT、HPV-DNA分型检测、p16/Ki-67检测、联合检测分别检出52例、56例、57例、63例阳性患者。联合检测诊断宫颈病变的灵敏度、准确度、阴性预测值高于单一检测(P<0.05);Kappa检验显示,联合检测结果与病理组织学检查结果的一致性最高(Kappa=0.964)。结论:TCT联合HPV-DNA分型及p16/Ki-67检测可提高宫颈癌病变早期诊断价值,减少漏诊、误诊风险。