关键词： 藜芦甘草汤   神经细胞凋亡   多巴胺能神经元   帕金森病   实验验证   1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶  

摘要： 目的 探讨藜芦甘草汤对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP）诱导的帕金森病小鼠的脑黑质酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）阳性神经元及行为学和凋亡相关蛋白的影响。方法 将24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、藜芦甘草汤组及美多芭组，每组6只，采用MPTP腹腔注射的方法制备帕金森病小鼠模型，造模成功后的18只小鼠按组别给药。采用爬杆实验和悬挂实验进行行为学评价；末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测脑TH阳性神经元变化；蛋白质免疫印迹法检测黑质区凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X，Bax）、及半胱天冬酶3（Caspase-3）的表达。结果 与空白组比较，模型组小鼠爬杆时间明显延长（P<0.01），悬挂得分明显降低（P<0.01），神经细胞凋亡数量显著增加（P<0.01），纹状体TH阳性神经元荧光强度显著降低（P<0.01），Bax/Bcl-2、Caspase-3/Gapdh蛋白表达比值显著升高（P<0.01，P<0.05）。与模型组比较，美多芭组和藜芦甘草汤组小鼠爬杆时间显著缩短（P<0.05），第14天时悬挂得分明显增加（P<0.05，P<0.01），第21天时仅藜芦甘草汤组的悬挂得分增加（P<0.05）；神经细胞凋亡数量显著减少（P<0.01），脑组织神经元荧光强度均显著增高（P<0.01），Bax/Bcl-2、Caspase-3/Gapdh蛋白表达比值明显下调（P<0.01，P<0.05）。结论 藜芦甘草汤可能通过降低凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2、Caspase-3/Gapdh表达水平，保护黑质区TH阳性神经元，减少神经元凋亡。

关键词： 柯里拉京   内质网应激   凋亡   内质网自噬   巨噬细胞源性泡沫细胞  

摘要： 观察柯里拉京（Cor）对J774A.1巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响，并基于内质网应激（ERS）-内质网自噬（ER-phagy）通路探讨其作用机制。以J774A.1巨噬细胞为研究对象，分别设对照组、氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）组、衣霉素（TM）组和不同浓度Cor处理组。采用MTT法检测细胞增殖活力；油红O染色观察细胞内脂滴聚集情况；酶联免疫吸附测定法检测细胞内总胆固醇（TC）和游离胆固醇（FC）含量，及细胞上清液白细胞介素-6（IL-6）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的水平；流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）含量及细胞凋亡情况；分子对接建模预测Cor与真核翻译起始因子2α（eIF2α）靶点的作用；Western blot实验检测细胞内ERS及自噬相关蛋白表达水平。研究结果显示，相较于模型组，Cor可剂量依赖性减少细胞内脂滴；Cor低、中、高剂量组细胞内胆固醇酯（CE）/TC 显著下降，脂滴沉积减少；Cor高剂量组细胞上清液中炎性因子IL-6和MCP-1的含量明显降低；Cor高剂量组细胞内ROS含量及细胞凋亡率显著下降。Cor与eIF2α靶点蛋白的最佳结合亲和力为-8.4 kcal·mol-1。此外，Cor高剂量组可显著下调磷酸化（p）-eIF2α/eIF2α、激活转录因子 4（ATF4）、葡萄糖调节蛋白78 kDa（GRP78）、EBP同源蛋白（CHOP）、核因子κB（NF-κB）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）关联X 蛋白（Bax）、序列相似性家族134成员B （FAM134B）和睾丸表达 264（Tex264）蛋白表达水平，同时上调Bcl-2的蛋白表达水平。综上，Cor通过调控eIF2α/ATF4/Tex264信号通路相关蛋白表达，抑制巨噬细胞ERS诱导的过度ER-phagy和凋亡，进而抑制巨噬细胞源性泡沫细胞的形成。

关键词： 中药注射液   冠心病   心力衰竭   网状Meta分析  

摘要： 运用网状Meta分析对不同中药注射液联合常规西医治疗冠心病心力衰竭患者的有效性和安全性进行评估。计算机检索中国知网（CNKI）、万方（Wanfang）、维普（VIP）、中国生物医学文献服务系统（SinoMed）、PubMed、EMbase、Cochrane Library、Web of Science数据库，搜集建库至2024年12月15日收录的有关中药注射液治疗冠心病心力衰竭的随机对照试验（randomized controlled trial，RCT），根据Cochrane偏倚风险评估工具对符合纳入标准的文献进行质量评价，采用RevMan 5.4、Stata 16软件进行网状Meta分析。最终纳入237篇RCTs，总样本量22 730例，涉及17种中药注射液。网状Meta分析结果显示：①改善临床总有效率方面，累计概率排名曲线下面积（SUCRA）排名前3的依次为疏血通注射液+常规西医、丹参酮ⅡA磺酸钠注射液+常规西医、舒血宁注射液+常规西医；②改善左心室射血分数（LVEF）方面，SUCRA排名前3的依次为血塞通注射液+常规西医、参芪扶正注射液+常规西医、银杏达莫注射液+常规西医；③降低脑钠肽（BNP）方面，SUCRA排名前3的依次为大株红景天注射液+常规西医、参麦注射液+常规西医、疏血通注射液+常规西医；④降低N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）方面，SUCRA排名前3的依次为生脉注射液+常规西医、益气复脉注射液+常规西医、心脉隆注射液+常规西医；⑤改善中医证候疗效方面，SUCRA排名前3的依次为参麦注射液+常规西医、心脉隆注射液+常规西医、参附注射液+常规西医；⑥降低左心室舒张末期内径（LVEDD）方面，SUCRA排名前3的依次为注射用丹参多酚酸+常规西医、益气复脉注射液+常规西医、丹参酮ⅡA磺酸钠注射液+常规西医；⑦改善心排血量（CO）方面，SUCRA排名前3的依次为参芪扶正注射液+常规西医、注射用丹参多酚酸+常规西医、生脉注射液+常规西医；⑧改善6 min步行试验（6MWT）方面，SUCRA排名前3的依次为丹红注射液+常规西医、参麦注射液+常规西医、参附注射液+常规西医；⑨降低超敏C反应蛋白（hs-CRP）方面，SUCRA排名前3的依次为参附注射液+常规西医、心脉隆注射液+常规西医、生脉注射液+常规西医。结果表明，中药注射液联合常规西医治疗能够提高冠心病心力衰竭患者的临床疗效，但鉴于纳入文献的质量及研究数量差异较大，上述结论尚需开展更多高质量临床RCT予以验证。

关键词： 当归补血汤   糖尿病肾病   AGEs/RAGE/NF-κB通路   炎症  

摘要： 目的 基于晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products，AGEs）/晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products，RAGE）/核转录因子-κB（nuclear transcription factor，NF-κB）通路探讨当归补血汤对糖尿病肾病（diabetic kidney disease，DKD）大鼠的作用及其机制。方法 采用高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素方法复制DKD大鼠模型；将大鼠随机分为正常组，模型组，恩格列净组（0.01 g/kg），当归补血汤高、中、低剂量（2.88、1.44、0.72 g/kg）组，每组8只；各给药组灌胃相应药物，正常组、模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃，每日灌胃1次，持续20周。检测各组大鼠24 h尿蛋白、血清肌酐（serum creatinine，SCr）水平；ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β（interleukin-1 beta，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）水平；光镜下观察大鼠肾脏组织病理形态变化；Western blot法检测大鼠肾脏组织中AGEs、RAGE、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达水平；RT-qPCR法检测大鼠肾脏组织中RAGE、NF-κB p65 mRNA表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠24h尿蛋白、SCr水平均显著升高（P＜0.05），血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均显著升高（P＜0.05），肾脏组织中AGEs、RAGE、NF-κBp65、p-NF-κB p65蛋白表达水平显著升高（P＜0.05），肾脏组织中RAGE、NF-κBp65 mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）；肾小球体积增大，基底膜增厚，系膜增生。与模型组比较，各给药组大鼠24h尿蛋白、SCr水平均显著降低（P＜0.05），血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平均显著降低（P＜0.05），肾脏组织中AGEs、RAGE、NF-κBp65、p-NF-κB p65蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），肾脏组织中RAGE、NF-κB p65 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）；肾脏组织病理学改变不同程度减轻。结论 当归补血汤可能通过抑制AGEs/RAGE/NF-κB通路的表达，减轻炎症反应，降低肾脏病理损伤，减少蛋白尿，从而有效保护肾脏，缓解DKD进展。

关键词： 肝纤维化   黄精   细胞凋亡   p53/Caspase信号通路  

摘要： 目的 探究黄精（PS）改善肝纤维化的机制，为减轻社会医疗负担、降低患者经济压力、开发新的抗肝纤维化特效药物提供方法与思路。方法 运用细胞计数试剂盒（CCK-8）、细胞单克隆实验、蛋白质印迹技术和免疫荧光等方法探究PS改善肝纤维化的机制。结果 CCK-8、细胞单克隆实验表明，PS能够抑制LX-2细胞的增殖能力；蛋白质印迹技术实验结果及免疫荧光结果表明，PS能够抑制LX-2细胞中α-SMA、COL3A1、COL1A1、MMP9和MMP2蛋白的表达；PS能够调控p53/Caspase信号通路促使LX-2细胞发生凋亡。结论PS能够通过调控p53/Caspase信号通路促进激活的LX-2细胞发生凋亡，抑制肝纤维化的发生发展，改善肝纤维化。

摘要： Non-small cell lung cancer (NSCLC) is highly malignant with limited treatment options, largely due to the inherent tumoral heterogeneity and acquired resistance towards chemotherapy and immunotherapy. RG7388, a known MDM2 inhibitor, exhibited anticancer activity in TP53-wild-type (TP53WT) NSCLC by triggering the p53/PUMA axis-dependent apoptosis. However, our study uncovered previously unrecognized p53-independent anticancer effects of RG7388 in TP53-mutant (TP53mutant) NSCLC, although the underlying mechanisms remained elusive. Here, we demonstrated that RG7388 specifically induced the NOXA/caspase-3 axis-dependent apoptosis and gasdermin E (GSDME)-mediated secondary pyroptosis in TP53mutant NSCLC, as validated through in silico analyses and multiple biological assays. Mechanically, we identified reactive oxygen species (ROS) as the critical mediator in NOXA upregulation and p38 MAPK pathway activation in RG7388 treated TP53mutant NSCLC. This was further supported by the use of ROS scavengers, N-acetylcysteine (NAC), and Ferrostatin-1 (Fer-1), which attenuated these effects. Pharmacologic inhibition of p38 MAPK signaling by SB203580 rescued RG7388-induced ROS-dependent NOXA accumulation and subsequent apoptosis and pyroptosis, highlighting the central role of the ROS/phosphorylated p38 MAPK (p-p38)/NOXA/caspase-3 axis in RG7388-induced TP53mutant NSCLC cell death. Our findings revealed a novel mechanism for selectively targeting mutant p53-derived cancer through ROS/p-p38-mediated NOXA accumulation, offering potential therapeutic implications given the current lack of direct mutant p53 targeting strategies in cancer. Furthermore, immunohistochemical (IHC) analysis of an NSCLC tissue microarray confirmed a strong positive correlation between p-p38 and NOXA expression. Clinical data analysis further suggested that the p-p38/NOXA axis might be a potential prognostic biomarker for overall survival (OS) in NSCLC patients.

关键词： 缺血性脑卒中   内质网应激   凋亡   中医药   机制   药物调控  

摘要： 缺血性脑卒中(Ischemic stroke,IS)具有高发生率、高死亡率的特点,是世界医疗界面对的严峻难题。内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)是细胞的一种应激反应,在细胞分子炎症反应、自噬反应与凋亡中发挥着巨大作用。研究发现ERS参与IS发生的全过程,而内质网作为对缺血最敏感的细胞器,在缺血条件下,引发内质网应激从而诱导细胞自我保护反应,特别是引起神经细胞凋亡,引起广泛的关注。因此调节内质网应激、维持内质网的稳态可能成为减少细胞凋亡、防治IS的新靶点。ERS介导IS相关的多种病理过程、涉及多条信号传导通路,研究发现多种中药可作用于ERS靶点,文章在系统阐述ERS与IS发生关系的基础上,对近几年中医通过ERS相关凋亡信号通路治疗IS的研究成果进行汇总,以期为今后研究提供参考。

关键词： 有氧运动   2型糖尿病   miR-126a-5p   外泌体   炎症   海马组织  

摘要： 2型糖尿病相关认知功能障碍(Diabetes-related cognitive impairment， DCI)是糖尿病的重要并发症，而运动在缓解DCI中起重要作用，但其作用机制尚不清晰。本研究旨在探讨外泌体miR-126a-5p在运动改善DCI中的作用及其机制。将24只16周龄雄性db/db小鼠按照随机数字表法分为糖尿病组(n = 12; DM)和运动干预组(n = 12; DE)。对照组为同周龄雄性m/m小鼠(n = 12; CON)。DE组进行为期8周中等强度跑台训练(10 m/min， 每周5天)。MWM实验发现，与CON组相比，DM组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01)，游泳速度和目标象限时间下降(P<0.001)，海马组织及其外泌体miR-126a-5p表达水平下降(P<0.001)。运动干预后，DE组小鼠逃避潜伏期减少(P<0.05)，游泳速度和目标象限时间均显著提高(P<0.05)，同时海马组织及其外泌体miR-126a-5p表达升高(P<0.001)。形态学染色发现DM组小鼠较于CON组，在CA1、CA3区海马神经元的数量和NeuN荧光强度表达下降以及胶质细胞的表达上升(P<0.05)，而DE组小鼠则提高神经元的数量和NeuN荧光强度(P<0.05)。Western印迹结果显示，与CON组相比，DM组海马组织中β淀粉样蛋白(Amyloid β， Aβ)、靶蛋白高迁移率族蛋白B1(Protein high-mobility group box 1， Hmgb1)、蛋白核因子κB(Nuclear factor kappa-B， NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(Tumour necrosis factor-alpha， TNF-α)和白细胞介素-1β(Interleukin-1 beta， IL-1β)的表达均显著上调(P<0.05)，运动干预后DM组表达水平均下降(P<0.05)。在体外细胞实验中，过表达miR-126a-5p的外泌体可显著降低HG诱导的HT22细胞表达淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein， APP)、NF-κB、Hmgb1和上清液TNF-α、IL-1β的含量 (P<0.05)。相反，抑制外泌体中miR-126a-5p表达则增加APP、Hmgb1、NF-κB、TNF-α、IL-1β水平(P<0.05)。综上所述，8周跑台改善db/db小鼠的认知功能，其机制可能与EXs-miR-126/HMGB1/NF-κB通路减轻海马组织炎症反应有关。

关键词： 免疫细胞   动脉粥样硬化   炎症反应   中医辨证   气血津液   治未病  

摘要： 动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性炎性血管疾病,其发病机制复杂,目前更多研究指向免疫反应,危险因素使免疫细胞如巨噬细胞、T细胞、B细胞等异常活化,成为促本病发生的病因;中医从“虚-痰瘀毒”出发,认为其病机属本虚标实,虚包括气、血、津液亏虚,实乃病理产物应虚而生又阻碍脉络。临床多以补虚泻实为治则,此外,还重视情志因素对免疫功能的影响,认为情志内伤可致肝气郁滞,影响气血运行,进而引发或加重动脉粥样硬化。免疫因素在动脉粥样硬化的发病机制中发挥重要作用,现从中西医两种体系分别梳理免疫对动脉硬化的影响,以期为制定中医药诊治策略提供更多可能。

关键词： 归脾汤   心房颤动   心房纤维化   炎症反应   氧化应激  

摘要： 目的：研究归脾汤对心房颤动（atrial fibrillation，AF）模型大鼠的心电图变化以及炎症反应、氧化应激等相关指标的影响，进而深入探究归脾汤对AF模型大鼠的治疗作用及其机制。方法：选取SD大鼠进行连续7d尾静脉注射氯化钙-乙酰胆碱(CaCl2-Ach)混合液建立AF模型。使造模成功的大鼠被随机分成模型组、西药组、归脾汤高、中、低剂量组，SD大鼠作为正常对照组，连续14d给予相应药物灌胃，期间仍进行尾静脉注射。用生物机能实验系统监测房颤大鼠的诱发及持续时间，酶联免疫吸附法（ELISA）观测每组大鼠血清中Hs-CRP、TNF-α、cTnT、ROS、SOD，心肌中CAMK-Ⅱ和TGF-β的水平变化；HE染色和Masson染色探究出房颤大鼠左心房的病理改变。结果：（1）与空白组大鼠相比，造模组大鼠精神不佳，呼吸频率、心率加快，眼睛充血甚至渗血，爪甲青紫；药物干预后，西药组和归脾汤各剂量组大鼠一般情况均有所改善。（2）药物干预后，与模型组相比，中药组和西药组均有效的延长大鼠房颤的诱发时间，并显著缩短房颤的持续时间（P<0.01），归脾汤高剂量组和西药组对AF大鼠房颤诱发及持续时间的影响无明显差异，其效果优于归脾汤中、低剂量组。（3）模型组大鼠血清TNF-α、Hs-CRP、cTnT、ROS水平和心肌TGF-β、CAMK-Ⅱ水平较空白组显著升高（P<0.01），SOD水平显著降低（P<0.01）；药物干预后，与模型组比较，归脾汤各剂量组和西药组大鼠血清TNF-α、Hs-CRP、cTnT、ROS水平和心肌TGF-β、CAMK-Ⅱ水平均显著降低（P<0.01），SOD水平显著升高（P<0.01）；西药组与归脾汤高剂量组相比，Hs-CRP、TNF-α、ROS、TGF-β水平无明显差异（P>0.05），归脾汤高剂量组可明显降低血清cTnT水平（P<0.05），西药组可明显升高SOD水平（P<0.01）。（4）HE染色和Masson染色结果显示，模型组心肌细胞排列杂乱，胞质疏松，心肌细胞坏死，可见大量胶原纤维沉积；药物干预后，归脾汤中剂量组间质水肿程度减轻，心肌胶原含量减少；西药组和归脾汤高剂量组心肌细胞走向一致，横纹明晰，细胞间质仅有少量的胶原纤维沉积。结论：归脾汤各剂量组均能显著改善AF大鼠的一般情况，有效延长大鼠房颤诱发时间，缩短房颤持续时间。改善大鼠血清TNF-α、Hs-CRP、cTnT、ROS、SOD及心房肌中CAMK-Ⅱ、TGF-β的水平，HE染色和Masson染色显示归脾汤对于大鼠心肌细胞具有一定的保护作用，可改善心房纤维化。