关键词:
糖尿病,1型
B10细胞
Th1细胞
Th17细胞
调节性T细胞
摘要:
目的探究体内回输B10细胞对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠发生糖尿病及免疫稳态的影响。方法流式细胞术(FCM)分选野生型C57BL/6小鼠(每次细胞分选需32只小鼠)脾脏B10细胞及非B10细胞,通过尾静脉注射分别将B10细胞(回输B10细胞组,16只)及非B10细胞(回输非B10细胞组,16只)回输给4周NOD小鼠,每4周重复回输1次,直至NOD小鼠24周龄,并以未干预的NOD小鼠作为空白对照组(16只)。3组小鼠均无菌饲养。分别从3组小鼠各选取12只小鼠,定期监测血糖直至52周龄,统计比较3组小鼠1型糖尿病(T1DM)发病率;剩余小鼠饲养至28周龄,完整分离3组小鼠(每组4只)的胰腺组织作病理切片以评估胰岛炎的严重程度,并采用FCM分析比较3组28周龄NOD小鼠(每组4只)脾脏、肠系膜淋巴结及外周淋巴结B10细胞、CD19^(+)IL-10^(+)B细胞、CD4^(+)IFN-γ^(+)辅助性T细胞(Th)1、CD4^(+)IL-17^(+)Th17细胞及CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)调节性T细胞(Treg)的数量。多组间比较采用单因素方差分析,采用Kaplan-Meier生存分析比较各组间T1DM发病率差异。结果回输B10细胞组NOD小鼠T1DM发病率为25%(3/12),而回输非B10细胞组及空白对照组T1DM发病率均为75%(9/12),体内回输B10细胞可降低NOD小鼠T1DM发病率,但3组NOD小鼠胰岛炎的严重程度差异不明显。与回输非B10细胞及空白对照组比较,体内回输B10细胞可增加NOD小鼠脾脏、肠系膜及外周淋巴结的B10细胞及CD19^(+)IL-10^(+)B细胞数量,减低NOD小鼠脾脏、肠系膜淋巴结及外周淋巴结致病性Th1及Th17细胞的数量,增加NOD小鼠脾脏、肠系膜淋巴结及外周淋巴结Treg细胞数量,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论体内回输B10细胞可降低NOD小鼠糖尿病发病率,这可能与回输B10细胞恢复了NOD小鼠的免疫稳态相关。