关键词:
右美托咪啶
吗啡依赖
腹侧被盖区
多巴胺能神经元
摘要:
目的评价右美托咪定对吗啡成瘾小鼠腹侧被盖区(VTA)多巴胺能神经元活力的影响。方法实验一:SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠30只,8周龄,体质量20~25 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):生理盐水组(NS组)、右美托咪定50μg/kg组(DEX50组)和右美托咪定100μg/kg组(DEX100组)。采用连续6 d腹腔注射递增剂量吗啡(10、20、30、40、50、50 mg/kg)制备小鼠吗啡成瘾模型。造模成功后,C组腹腔注射生理盐水,DEX50组和DEX100组分别腹腔注射右美托咪定50和100μg/kg,连续14 d。每间隔1 d行条件性位置偏爱(CPP)实验。实验二:SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠30只,8周龄,体质量20~25 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):对照组(C组)、吗啡组(Mor组)和右美托咪定50μg/kg组(DEX50组)。C组小鼠连续10 d腹腔注射生理盐水,Mor组腹腔注射递增剂量吗啡6 d后连续4 d注射生理盐水,DEX50组腹腔注射递增剂量吗啡6 d后连续4 d注射右美托咪定50μg/kg。3组均在最后1次腹腔注射药物后90 min时麻醉小鼠取脑组织,选择小鼠VTA相应脑片进行c-Fos免疫荧光染色。实验三:多巴胺转运蛋白-Cre重组酶小鼠采用随机数字表法分为2组(n=5):吗啡组(Mor组)和吗啡+右美托咪定50μg/kg组(Mor+DEX组),进行脑立体定位病毒注射,于VTA注射rAAV-EF1α-DIO-GCaMP6s并埋置光纤。3周后按实验一建立吗啡成瘾模型并进行CPP实验,Mor组腹腔注射吗啡,Mor+DEX组腹腔注射吗啡和右美托咪定。分别记录3组小鼠给药前5 min及给药后20 min时病毒荧光信号,使用MATLAB软件获取钙信号数据。结果实验一:3组小鼠吗啡成瘾造模后CPP评分差异无统计学意义(P>0.05);与NS组相比,DEX50组和DEX100组在连续给药4~14 d时CPP评分降低(P<0.05)。实验二:与C组相比,Mor组小鼠VTA c-Fos阳性细胞数增多(P<0.05);与Mor组相比,DEX组小鼠VTA c-Fos阳性细胞数减少(P<0.05)。实验三:与给药前相比,Mor组VTA多巴胺能神经元钙信号增强(P<0.05),Mor+DEX组VTA多巴胺能神经元钙信号差异无统计学意义(P>0.05);与Mor组相比,Mor+DEX组给药前VTA多巴胺能神经元钙信号差异无统计学意义(P>0.05),给药后VTA多巴胺能神经元钙信号减弱(P<0.05)。结论右美托咪定促进吗啡成瘾消退的机制与抑制VTA多巴胺能神经元活力有关。