关键词： 白背飞虱   翅发育   刺猬基因   RNA干扰   功能分析  

摘要： 白背飞虱是水稻上重要的迁飞性害虫,翅是其能够迁飞、扩大危害的重要器官。因此,解析昆虫翅发育基因可为害虫综合治理提供新的靶标。刺猬基因(Hedgehog,Hh)是能够参与调控昆虫翅发育的重要基因,但其在白背飞虱体内的转录特征和生物学功能尚不清楚。本研究通过克隆获得白背飞虱刺猬基因SfHh,解析其时空表达模式,并借助RNA干扰技术验证其生物学功能。结果表明:(1)白背飞虱SfHh基因在5龄若虫表达量最高,在不同组织中表达量差异较大,其中在肠道与翅中表达量最高;(2)RNA干扰沉默SfHh基因24 h后,SfHh的mRNA相对转录水平降低了62%,且羽化成虫大多数个体的翅褶皱、末端卷曲或弯折等不能正常展开,而对照组成虫的翅均无任何畸形。表明SfHh基因是白背飞虱翅发育不可或缺的基因,其表达缺失可导致白背飞虱的翅不能正常伸展。本研究结果不仅能够为白背飞虱及其他迁飞性害虫的防治研究提供新的作用靶标,还可丰富半翅目昆虫翅发育的分子知识。

关键词： 蒙花苷   糖尿病   内凝集蛋白1   主动脉内皮损伤   氧化应激  

摘要： 利用链脲佐菌素构建糖尿病小鼠模型,研究内凝集蛋白1(intelectin 1,ITLN1)在糖尿病小鼠主动脉内皮细胞中的修复作用,并遴选出食源性ITLN1激动剂蒙花苷,进一步证实蒙花苷对内皮细胞的保护效应。结果表明,在糖尿病小鼠主动脉内皮细胞中ITLN1的表达下降(66.68±9.51)%,并且当在内皮细胞中敲低ITLN1后,活性氧的生成会随着ITLN1表达水平的降低而升高。在使用50 mg/kg剂量的蒙花苷灌胃糖尿病小鼠28 d后,小鼠主动脉内皮细胞ITLN1的表达升高,活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成水平下降,炎症因子肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6均呈一定程度的下调。进一步研究发现蒙花苷可以抑制烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4和核因子κB,从而降低ROS的生成和炎症因子的表达,改善血管内皮损伤。因此,本研究提出蒙花苷可以靶向ITLN1,从而缓解糖尿病血管内皮功能障碍。

关键词： 富马酸二甲酯   人鼻咽癌细胞5-8F   辐射敏感性   细胞周期   细胞凋亡   核因子-κB   上皮间质转换   作用机制  

摘要： 目的探讨富马酸二甲酯(DMF)对人鼻咽癌细胞5-8F(简称5-8F细胞)辐射敏感性的影响及作用机制。方法选取北京市和平里医院耳鼻咽喉科2020年1月至2022年12月收治的62例鼻咽癌患者(之前未接受任何鼻咽癌相关治疗)的组织标本和核磁共振图像,按辐射敏感性的不同分为辐射敏感组(40例)和辐射抵抗组(22例)。通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、流式细胞术评价DMF对5-8F细胞的活性、增殖、细胞周期和细胞凋亡的作用;采用免疫荧光染色法和免疫印迹(Western blot)法检测细胞核和细胞质中核因子-κB亚基p65(NF-κB p65)及上皮间质转换(EMT)标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。将18只小鼠随机分为Control组(不予IR和DMF处理)、电离辐射(IR)组、IR+DMF组,各6只。所有小鼠均复制鼻咽癌皮下移植瘤模型,考察DMF在小鼠体内对鼻咽癌辐射敏感性的影响。结果放疗2个月后,辐射敏感组患者的肿瘤消退明显,且组织中NF-kB p65和p-NF-kB p65均呈低表达;辐射抵抗组患者的肿瘤消退缓慢,NF-kB p65和p-NF-kB p65均呈高表达。DMF以浓度和时间依赖方式抑制5-8F细胞的活性,当DMF浓度为50.0μmol/L时,处理24 h对细胞活性的抑制率小于10%,而处理48,72 h时的细胞活性显著降低(74.21%,54.81%,P<0.05),故选取50.0μmol/L DMF处理24 h用于后续实验。与IR组比较,IR+DMF组5-8F细胞的克隆形成数量及存活分数均显著降低(P<0.05),磷酸化组蛋白(γ-H2AX)灶点数均显著增加(P<0.05),G2/M期细胞分布百分比和细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),细胞核和细胞质中NF-κB p65及N-cadherin,Vimentin的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),E-cadherin的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。在鼻咽癌皮下移植瘤模型小鼠中,与IR组比较,IR+DMF组小鼠给药第1,2,3周后的肿瘤体积和肿瘤质量均显著减少(P<0.05),细胞核和细胞质中NF-κB p65及N-cadherin,Vimentin的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),E-cadherin的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论DMF通过抑制NF-κB信号通路和EMT而延缓DNA双链断裂,诱导G2/M期鼻咽癌细胞停滞和凋亡,从而增强鼻咽癌细胞的辐射敏感性。

关键词： 爱帕琳肽   缺血性卒中   巨噬细胞   生物学   神经保护   细胞凋亡  

摘要： 缺血性脑血管病以高发病率、致残率、致死率、复发率为特点,是全球第二大死亡原因,严重威胁健康^([1])。缺血性脑卒中是由于脑血管病变引起局部脑组织缺血缺氧,进而导致脑组织坏死和功能障碍。尽管溶栓等急性治疗措施取得了良好的进展,但脑卒中患者的病情恢复仍然很复杂,难达到最佳的预后^([2])。

关键词： 亢害承制   胰岛β细胞   去分化与再分化   解毒化浊法   浊毒理论  

摘要： “亢害承制”理论是中医理论体系的重要基石,本文从“亢害承制”理论探析糖、脂毒性与胰岛β细胞去分化之间“亢而失制则成害”及胰岛β细胞再分化之间“制其亢,除其害”的关系,并基于浊毒理论探讨解毒化浊法对胰岛β细胞去分化及再分化的干预作用,提出了运用解毒化浊法以“平其所亢”及“承而制之”的胰岛β细胞保护方法。

关键词： 多发性硬化   PI3K/Akt信号通路   炎症反应   氧化应激   细胞凋亡  

摘要： 多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种自身免疫性炎症性脱髓鞘疾病。神经炎症、氧化应激、髓鞘脱失及细胞凋亡是MS重要的发病机制。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/Protein Kinase B,PI3K/Akt)信号通路与上述病理生理过程密切相关。目前,针对MS的免疫抑制治疗以疾病修饰疗法为主,主要以降低复发率和短期恶化为目的,尚无法治愈该疾病,随着对MS病理机制的深入研究,新的发病机制与治疗靶点也亟待探索。本文以“多发性硬化、PI3K/Akt信号通路、炎症反应、氧化应激、细胞凋亡”为关键词,检索2004~2024年“Pubmed、中国知网、web of science”数据库中的相关文献,对PI3K/Akt信号通路与MS神经炎症,氧化应激,脱髓鞘和细胞凋亡的关系研究进展进行综述,旨在为MS的治疗提供新思路。

关键词： 卵巢早衰   动物模型   细胞衰老   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨不同剂量环磷酰胺(CTX)诱发卵巢早衰(POF)小鼠模型卵巢功能变化、衰老凋亡的机制及选择最佳造模方式。方法选择6~8周龄雌性小鼠共30只,随机分为6组:对照组、POF1组(120 mg/kg)、POF2组(200 mg/kg)、POF3组(50 mg/kg×14 d)、POF4组(400 mg/kg)和POF5组(25 mg/kg×14 d),均采用CTX腹腔注射,比较不同造模剂量及给药频率下POF小鼠模型的卵巢功能及衰老、凋亡的变化。结果与正常组比较,各模型组小鼠均表现为动情周期紊乱,抗缪乐管激素(AMH)表达减少,卵巢组织纤维化加重,卵泡数减少(P<0.05),促卵泡激素受体(FSHR)表达明显降低(P<0.05),且损伤程度与CTX剂量呈正相关(|r|>0.500,P<0.05)。同时,各模型组小鼠均出现细胞衰老及细胞凋亡增加,但在POF1、2、5组中衰老相关分子如细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、细胞衰老相关β-半乳糖苷酶(β-gal)表达显著高于POF3组(P<0.05),而在POF3组中,凋亡相关分子如B细胞淋巴瘤2相关x蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、磷酸化H2A组蛋白家族成员X(γ-H2AX)表达显著高于POF2组、POF5组(P<0.05)。结论不同剂量的CTX均可诱发卵巢早衰小鼠模型,且卵巢损伤程度呈剂量依赖式增加。较低剂量CTX模型组引起的卵巢损伤以细胞衰老为主,而较高剂量的CTX模型组引起的卵巢损伤以细胞凋亡为主。

关键词： miR-495-3p   锰超氧化物歧化酶   糖尿病肾病   预后  

摘要： 目的探讨miR-495-3p及锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,Mn-SOD)基因检测在糖尿病肾病患者疾病评估中的应用价值。方法选取2022年1月至2023年12月在黄石市中心医院治疗的糖尿病肾病患者150例,同时纳入糖尿病患者150例、健康体检者150例作为对照,比较各组miR-495-3p表达及Mn-SOD基因型差异,同时分析miR-495-3p表达及Mn-SOD基因型预测糖尿病肾病预后不良的价值。结果糖尿病肾病患者miR-495-3p水平为(0.56±0.14),明显低于糖尿病和健康者(P<0.05)。糖尿病肾病、糖尿病和健康者Mn-SOD基因9位点、5777位点基因型分布比较差异有统计学意义(P<0.05),糖尿病肾病Mn-SOD基因9位点基因型CT+CC型比例为40.00%,Mn-SOD基因5777位点基因型CT+CC型比例为98.00%。T2DM病程≥10年的糖尿病肾病患者miR-495-3p水平为(0.46±0.14),明显低于T2DM病程<10年患者(P<0.05)。预后不良糖尿病肾病患者miR-495-3p水平为(0.47±0.14),明显低于预后良好患者(P<0.05)。预后不良糖尿病肾病患者Mn-SOD基因9位点基因型CT+CC比例为73.33%,明显高于预后良好患者(P<0.05)。预后不良和良好的糖尿病肾病患者Mn-SOD基因5777位点基因型CT+CC比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-495-3p表达、Mn-SOD基因9位点基因型预测预后不良的ROC曲线下面积分别为0.784(95%CI:0.705~0.863)和0.786(95%CI:0.700~0.872)(P<0.05)。结论糖尿病肾病患者miR-495-3p水平降低,miR-495-3p及Mn-SOD基因在预测糖尿病肾病预后方面有一定应用价值。

关键词： 糖尿病心肌疾病   心肌细胞焦亡   中药   进展   机制  

摘要： 糖尿病性心肌病(DCM)是一种由糖尿病引起的心肌特异性微血管疾病,会影响心脏的结构和功能,被认为是糖尿病患者发病和死亡的主要原因。中医药治疗DCM有临床丰富的经验和确切的疗效,其多靶点、多途径、多组分、不良反应小的特点可以延缓DCM发展进程、改善症状,有效应对其病理过程的复杂性和长期性。近来许多研究发现伴随着炎症反应的细胞焦亡是DCM心肌损伤的主要形式之一,促进DCM发生发展,并与DCM过程中氧化应激、心肌纤维化、心肌肥厚及心功能下降等病理变化密切相关。这些研究也为中医药探索DCM的潜在治疗方法和干预机制提供了理论依据。该研究通过对CNKI、PubMed,Web of Science,Excerpt Medica,Science Direct和Springer等多个数据库相关文献的检索和分析,旨在综合分析近年来中药及复方干预DCM心肌细胞焦亡的作用特点,并探讨其潜在的机制,从心肌细胞焦亡的角度揭示了中药有效成分及复方防治DCM的潜力,为中医药治疗DCM的临床应用提供新思路和更多的实验证据。

关键词： 子宫颈癌   容积旋转调强放疗   高频聚焦热疗   化疗   急性放射性直肠炎  

摘要： 目的探讨盆腔高频聚焦热疗联合同步放化疗治疗中晚期子宫颈癌患者的急性放射性直肠炎的发生率和临床疗效。方法选取2020年6月至2021年6月杭州市肿瘤医院热疗中心收治的70例中晚期子宫颈癌患者。采用随机数字表法将患者分为盆腔容积旋转调强放疗(volumetric modulated arc therapy,VMAT)+阴道近距离放疗+含铂同步化疗组34例和盆腔高频聚焦热疗+盆腔VMAT+阴道近距离放疗+含铂同步化疗组36例。盆腔VMAT+阴道近距离放疗+含铂同步化疗组接受VMAT和腔内后装治疗同步顺铂化疗(40 mg/m^(2),每周1次,4~6次)治疗。盆腔高频聚焦热疗+盆腔VMAT+阴道近距离放疗+含铂同步化疗组在前者基础上同时联合盆腔高频聚焦热疗。比较两组临床疗效和急性放射性直肠炎的发生情况。结果与盆腔VMAT+阴道近距离放疗+含铂同步化疗组比较,盆腔高频聚焦热疗+盆腔VMAT+阴道近距离放疗+含铂同步化疗组近期有效率更高(86.1%vs 70.6%,P<0.05),2年无进展生存(progression free survival,PFS)率更高(82.7%vs 71.4%,P<0.05),有症状的急性放射性直肠炎的发生率更低(19.4%vs 44.1%,P<0.05)且严重程度较轻。结论同步放化疗联合盆腔高频聚焦热疗能有效降低中晚期子宫颈癌患者急性放射性直肠炎的发生率,减轻严重程度。其临床近期疗效好,可有效改善患者预后水平。