关键词： 血管生成素样蛋白8   平滑肌细胞   凋亡   p53信号通路  

摘要： 目的探究血管生成素样蛋白8(ANGPTL8)对血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的作用机制。方法采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)建立体外腹主动脉瘤细胞模型,使用慢病毒感染HASMCs构建ANGPTL8敲低和ANGPTL8过表达稳转细胞株;TUNEL法观察细胞凋亡;Western blot测定HASMCs中ANGPTL8、caspase9、caspase3、Bcl-2、Bax、p53、PUMA的蛋白表达变化;RT-qPCR检测ANGPTL8、Bcl-2、Bax的mRNA表达变化。结果AngⅡ可呈时间-剂量依赖性地显著刺激HASMC中ANGPTL8的蛋白表达(P<0.05);ANGPTL8敲低可显著减轻凋亡相关蛋白caspase9、caspase3及促凋亡蛋白Bax的表达,抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达显著升高(P<0.05);ANGPTL8过表达显著引起HASMC凋亡,使用p53通路抑制剂pifithrin-α(PFT-α)处理后显著抑制由ANGPTL8过表达引起的凋亡反应。结论ANGPTL8可能通过激活p53通路促进平滑肌细胞凋亡。

关键词： 妊娠糖尿病   硫氧还蛋白相互作用蛋白   C肽   胎儿生长受限  

摘要： 目的分析妊娠糖尿病(GDM)患者血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)和C肽(C-P)水平对胎儿生长受限(FGR)的预测价值。方法选取2021年1月—2024年1月西安市人民医院收治的86例GDM患者为研究对象,设为观察组;从同期该院产检健康的孕妇中选取93例作为对照组。收集两组的临床资料,并检测研究对象的血清TXNIP、C-P水平。根据观察组的妊娠结局,将其分为FGR组与非FGR组,比较两组血清TXNIP、C-P水平。采用多因素逐步Logistic回归模型分析血清TXNIP和C-P水平对GDM患者发生FGR的影响,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清TXNIP、C-P水平对FGR的预测价值。结果FGR组血清TXNIP和C-P水平均高于非FGR组(P<0.05);多因素逐步Logistic分析结果显示,血清TXNIP水平高[OR=1.159(95%CI:1.056,1.273)]、C-P水平高[OR=4.957(95%CI:1.633,15.044)]均为发生FGR的危险因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清TXNIP和C-P水平联合检测评估GDM患者发生FGR的敏感性为82.1%(95%CI:0.631,0.939),特异性为81.0%(95%CI:0.686,0.901)。结论GDM患者血清TXNIP和C-P水平升高与FGR风险增加相关,联合检测可提高对FGR的预测价值。

关键词： 梅毒螺旋体   OmpH蛋白   生物信息学分析   蛋白表达与纯化   免疫原性  

摘要： 目的利用生物信息学方法分析预测梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)TpOmpH蛋白的生物学性质,并纯化获得目的蛋白且制备得到多克隆抗体。方法2024年1月至2025年2月湖南中医药高等专科学校附属第一医院(湖南省直中医医院)医学检验科等团队利用生物信息学及动物实验等方法从国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)中获得TpOmpH蛋白的编码序列,使用Protparam、Protscale、SignalP 6.0、NetNGlyc-1.0、TMHMM2.0、NetPhos-3.1、SOPMA、AlphaFold3、IEDB、STRING、C-immsim等生物信息学工具预测TpOmpH的生物学特性。构建重组质粒pET28a-TpOmpH,纯化目的蛋白。将TpOmpH蛋白免疫小鼠,获得抗血清并检测抗体滴度。结果TpOmpH是一个相对分子质量为19.7 kDa的疏水性外膜蛋白,稳定性较强。TpOmpH蛋白定位在细胞膜外,含有11个丝氨酸、4个苏氨酸和1个酪氨酸磷酸化位点,但是无糖基化位点。TpOmpH蛋白二级结构77.91%的氨基酸为α-螺旋,8.72%的氨基酸为β片层结构,10.47%的氨基酸为无规卷曲,2.91%的氨基酸为β转角。AlphaFold3预测得到的三级结构处于最佳状态。TpOmpH蛋白有4个细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位、4个线性表位和5个空间表位。TpOmpH蛋白可能与Tp92、MutS、SurA、TPANIC_0600等蛋白发生相互作用,可能参与了Tp入侵。TpOmpH蛋白能够诱导B细胞数量增加、抗体含量升高、Th细胞数量增加、NK细胞数量上升以及能够诱导各种细胞因子表达。通过Ni 2+亲和层析获得了较高纯度的TpOmpH蛋白,与理论相对分子质量相符合。TpOmpH蛋白能诱导小鼠分泌多克隆抗体,抗体滴度高于1∶10000。结论TpOmpH蛋白是一种定位在Tp外膜的疏水性蛋白,能诱导小鼠分泌高滴度抗体,为Tp的致病机制以及疫苗研发提供了实验基础。

关键词： 柚皮素   胃癌   活性氧   自噬   凋亡  

摘要： 目的探讨柚皮素(Nar)对胃癌细胞HGC-27增殖、细胞周期、自噬和凋亡的影响及诱导凋亡的机制。方法取对数生长期HGC-27细胞分为0、50、100、200μmol·L^(-1)Nar组,分别加入0、50、100、200μmol·L^(-1)的Nar进行干预,采用细胞计数试剂盒-8法检测4组HGC-27细胞干预24、48 h时的生存率,细胞克隆形成实验检测4组HGC-27细胞的增殖能力,流式细胞术检测4组HGC-27细胞周期变化,荧光显微镜观察4组HGC-27细胞活性氧(ROS)水平,Western blot法检测4组HGC-27细胞中凋亡蛋白Cle-PARP、Bcl-2、Bax以及自噬蛋白Beclin、p62的表达。另取HGC-27细胞分为对照组、Nar组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组和Nar+3-MA组,3-MA组、Nar+3-MA组用自噬抑制剂3-MA干预1 h,对照组和3-MA组加入不含Nar的RPMI 1640完全培养基,Nar组和Nar+3-MA组加入含200μmol·L^(-1)Nar的RPMI 1640完全培养基培养24 h,收集各组细胞,加入膜联蛋白V/碘化丙啶染料室温避光孵育30 min,使用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞24 h时的细胞生存率显著低于0、50、100μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05);50、100、200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞48 h时细胞生存率显著低于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05),200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞48 h时细胞生存率显著低于50、100μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05)。0、50、100、200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞的克隆细胞数随干预剂量增高呈剂量依赖性降低,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。100、200μmol·L^(-1)Nar组G_(0)/G_(1)期细胞占比显著高于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05),S期细胞占比显著低于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05);200μmol·L^(-1)Nar组G_(2)/M期细胞占比显著低于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05);与50、100μmol·L^(-1)Nar组比较,200μmol·L^(-1)Nar组G_(0)/G_(1)期细胞占比显著升高(P<0.05),S期和G_(2)/M期细胞占比显著降低(P<0.05)。50、100、200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞的ROS荧光强度显著高于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05);200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞的ROS荧光强度显著高于50、100μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05)。50、100、200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞中Bcl-2蛋白相对表达量显著低于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.01),Bax、Cle-PARP蛋白相对表达量显著高于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.01);100μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞Cle-PARP蛋白相对表达量显著高于50μmol·L^(-1)Nar组(P<0.01);与50μmol·L^(-1)Nar组比较,200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞Bcl-2蛋白相对表达量显著降低(P<0.01),Bax、Cle-PARP蛋白相对表达量显著升高(P<0.01);与100μmol·L^(-1)Nar组比较,200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞中Bcl-2蛋白相对表达量显著降低(P<0.01),Cle-PARP蛋白相对表达量显著升高(P<0.01)。100、200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞中Beclin蛋白相对表达量显著高于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05);200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞中Beclin蛋白相对表达量显著高于50μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05);50、100、200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞中p62蛋白相对表达量显著低于0μmol·L^(-1)Nar组(P<0.01);100、200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞中p62蛋白相对表达量显著低于50μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05);200μmol·L^(-1)Nar组HGC-27细胞中p62蛋白相对表达量显著低于100μmol·L^(-1)Nar组(P<0.05)。3-MA组与对照组HGC-27细胞凋

关键词： 黄酮类化合物   高原   急性低压低氧   氧化应激   炎症反应  

摘要： 快速暴露在以低压低氧为主要特征的高原环境中能够对机体多个脏器造成损伤。黄酮类化合物是一类安全有效的天然抗氧化剂,通过清除自由基、抑制脂质过氧化和炎性反应,在高原缺氧损伤的防治中展现出良好的应用前景。本文系统综述了高原缺氧所致组织器官损伤的病理类型及其分子机制,重点探讨了黄酮类化合物对高原缺氧损伤的保护作用及其多靶点作用机制,以期为黄酮类化合物在高原医学领域的转化应用提供理论依据和研究方向。

关键词： 高危型人乳头瘤病毒   扶正清毒   中药外治   持续感染  

摘要： 目的探讨复方黄柏液涂剂联合人干扰素α2b阴道泡腾片治疗正虚毒瘀型宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染的临床效果。方法选取2023年6月至12月就诊于北京中医药大学东直门医院妇科门诊的60例正虚毒瘀型宫颈HR-HPV持续感染患者,根据随机数字表法分为两组,每组30例。对照组给予人干扰素α2b阴道泡腾片治疗,试验组在对照组的基础上加用复方黄柏液涂剂治疗,治疗周期3个月。比较两组宫颈HR-HPV转阴率、中医证候评分和临床效果。结果治疗后,试验组宫颈HR-HPV转阴率高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组中医证候评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组中医证候评分低于治疗前,且试验组低于对照组(P<0.05)。试验组治疗后综合效果优于对照组(P<0.05)。结论复方黄柏液涂剂联合人干扰素α2b阴道泡腾片治疗宫颈HR-HPV持续感染的效果更好,不仅提高HR-HPV转阴率,还可改善临床症状,且安全性好,值得临床进一步推广使用。

关键词： PRISMA   NMA   报告规范   解读  

摘要： 为提升系统评价的透明度和报告质量,2009年PRISMA工作组发布了系统评价/meta分析报告规范(PRISMA2009),聚焦两种干预措施的直接比较。随着临床研究对多种干预措施综合评价需求的增加,网状meta分析(NMA)被广泛应用,于是PRISMA工作组在2015年基于PRISMA 2009推出针对NMA的报告规范(PRISMA-NMA)。PRISMA 2020对PRISMA 2009进行了更新和修订。目前尚无针对NMA报告规范的更新,本文将结合PRISMA 2020和PRISMA-NMA,以实际研究为例,对NMA报告规范进行分析,旨在支持NMA研究的规范化撰写、审阅和发表,提升相关研究的质量和可信度。

关键词： 富血小板血浆   斑秃   系统评价   Meta分析   毛发镜  

摘要： 目的:评价富血小板血浆治疗轻中度斑秃的有效性和安全性。方法:计算机检索截至2024年6月The Cochrane Library、PubMed、Web of Science、EMbase、中国知网(CNKI)、万方数据知识服务平台、维普中文期刊服务平台、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)中关于富血小板血浆治疗斑秃的随机对照试验(RCT),手工检索补全可能的研究。经2名独立研究人员筛选出纳入的研究并进行文献质量评价,最后对纳入研究采用RevMan 5.3软件进行Meta分析,不能Meta分析的资料采用描述性分析。结果:共纳入9项RCT研究,413例患者。Meta分析结果显示:(1)富血小板血浆组与曲安奈德组治疗斑秃有效率的差异无统计学意义(OR=1.22,95%CI=0.43~3.50,n=247,P>0.05);(2)富血小板血浆组斑秃复发风险低于曲安奈德组(OR=0.18,95%CI=0.08~0.39,n=125,P<0.05);(3)富血小板血浆组主要不良反应是疼痛,其发生率与曲安奈德组比较差异无统计学意义(OR=1.80,95%CI=0.28~11.72,n=202,P>0.05),2组均无严重不良反应发生。结论:目前证据显示富血小板血浆可有效促进轻中度斑秃患者的毛发生长,可能出现疼痛等不良反应,但总体较安全。

关键词： 肺结核   糖尿病   T细胞亚群   免疫机制   病程管理   共病演变  

摘要： 肺结核(PTB)和糖尿病(DM)临床常见且发病率高,二者存在双向关联。DM患者葡萄糖代谢异常,免疫系统改变,增加PTB发病风险;PTB感染又加重机体代谢紊乱,形成恶性循环,这增加了治疗和管理难度,也提升了病死率。T淋巴细胞亚群在PTB和DM患者免疫反应中至关重要,其数量和功能变化影响疾病发展与治疗效果。DM状态下,机体先天性和适应性免疫受损,辅助性T细胞(Th)1型细胞因子产生减少,T细胞介导的适应性免疫反应启动延迟,机体对结核分枝杆菌感染防御能力下降,PTB易感性增加。PTB-DM共病患者中,Th1、Th17细胞与调节T细胞(Treg)细胞平衡被打破,引发过度促炎反应,破坏免疫平衡稳态。高血糖促使Treg细胞增多、效应T细胞减少,降低机体免疫力,加速病情恶化。检测T淋巴细胞亚群对评估PTB-DM共病患者免疫状态意义重大,在抗结核治疗效果评估、感染风险预测、预后判断及长期健康管理等方面不可或缺。深入研究其作用机制,可为优化临床治疗方案、开发新疗法提供理论依据,改善患者预后。

关键词： 妊娠期糖尿病   ANGPTL8   GLP-1R   HbA1c   妊娠结局  

摘要： 目的:探讨血管生成素样蛋白8(ANGPTL8)、胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)、糖化血红蛋白(HbA1c)对妊娠期糖尿病(GDM)妊娠结局的预测价值。方法:选取大连市美琳达妇儿医院2023年3月到2024年10月收治的102例GDM患者为研究对象,根据妊娠结局分为不良组(n=25)、良好组(n=77)。对比两组临床资料、ANGPTL8、GLP-1R、HbA1c水平;多因素Logistic回归分析GDM患者不良妊娠结局的影响因素;ROC分析ANGPTL8、GLP-1R、HbA1c预测GDM发生不良妊娠结局价值。结果:两组年龄、产次、孕周、产前体质量、糖尿病家族史对比无统计差异(P>0.05)。不良组GLP-1R低于良好组,ANGPTL8、HbA1c高于良好组(P<0.05)。Logistic回归结果显示,ANGPTL8、GLP-1R、HbA1c均为GDM患者不良妊娠结局影响因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,ANGPTL8、GLP-1R、HbA1c联合预测GDM患者不良妊娠结局的敏感度及特异度分别是89.47%、81.24%,AUC达0.856,高于单独诊断。结论:ANGPTL8、GLP-1R、HbA1c与GDM不良妊娠结局存在密切关系,且联合应用可进一步提高妊娠不良结局预测价值。